抗人CD3单抗轻、重链可变区基因的克隆及序列分析

根据抗体基因可变区两端保守序列ＦＲ１和ＦＲ４，设计并化学合成轻重链ＰＣＲ扩增引物。从体外培养细胞ＵＣＨＴ１中提取总ＲＮＡ，反转录成ｃＤＮＡ，以ｃＤＮＡ为模板经ＰＣＲ扩增轻，重链可变区基因片段。将扩增片段克隆至ｐＵＣ１９质粒，筛选阳性克隆并测序，序列分析结果为重链３６６ｐｂ，编码１２２个氨基酸，轻链３２７ｂｐ。