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耻垢分枝杆菌MurB蛋白的可溶性表达、纯化和多克隆抗血清制备
1
作者
徐立铭
郑琦
+3 位作者
康健
步云
钱磊
马郁芳
《中国科技论文》
CAS
北大核心
2015年第18期2157-2160,共4页
获得耻垢分枝杆菌MurB纯化蛋白,制备小鼠源性MurB多克隆抗血清。首先,利用PCR技术扩增耻垢分枝杆菌murB基因,连接至pColdII载体并转化至E.coli BL21(DE3)菌株;然后,低温下以IPTG诱导MurB蛋白的表达,并利用Ni-His亲和层析技术纯化MurB蛋...
获得耻垢分枝杆菌MurB纯化蛋白,制备小鼠源性MurB多克隆抗血清。首先,利用PCR技术扩增耻垢分枝杆菌murB基因,连接至pColdII载体并转化至E.coli BL21(DE3)菌株;然后,低温下以IPTG诱导MurB蛋白的表达,并利用Ni-His亲和层析技术纯化MurB蛋白;最后,将MurB纯化蛋白联合免疫佐剂注射BalB/c小鼠,经过初次免疫和2次加强免疫后分离抗血清,并分别利用ELISA和Western blot技术检测制备的抗血清对MurB蛋白的效价和特异性。结果显示:已获得具有理想浓度和纯度的MurB纯化蛋白;已制备具有较高效价的小鼠源性MurB多克隆抗血清,该抗血清能够特异性识别耻垢分枝杆菌可溶性蛋白组分中的MurB蛋白。因此,制备的MurB多克隆抗血清能够应用于分枝杆菌MurB蛋白的检测分析,为MurB功能研究奠定了基础。
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关键词
微生物学
耻垢分枝杆菌
udp-n-乙酰葡糖胺烯醇丙酮酸还原酶
MurB
多克隆抗血清
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职称材料
题名
耻垢分枝杆菌MurB蛋白的可溶性表达、纯化和多克隆抗血清制备
1
作者
徐立铭
郑琦
康健
步云
钱磊
马郁芳
机构
大连医科大学生物化学与分子生物学教研室
大连医科大学附属第二医院科研中心
出处
《中国科技论文》
CAS
北大核心
2015年第18期2157-2160,共4页
基金
高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20112105110002)
文摘
获得耻垢分枝杆菌MurB纯化蛋白,制备小鼠源性MurB多克隆抗血清。首先,利用PCR技术扩增耻垢分枝杆菌murB基因,连接至pColdII载体并转化至E.coli BL21(DE3)菌株;然后,低温下以IPTG诱导MurB蛋白的表达,并利用Ni-His亲和层析技术纯化MurB蛋白;最后,将MurB纯化蛋白联合免疫佐剂注射BalB/c小鼠,经过初次免疫和2次加强免疫后分离抗血清,并分别利用ELISA和Western blot技术检测制备的抗血清对MurB蛋白的效价和特异性。结果显示:已获得具有理想浓度和纯度的MurB纯化蛋白;已制备具有较高效价的小鼠源性MurB多克隆抗血清,该抗血清能够特异性识别耻垢分枝杆菌可溶性蛋白组分中的MurB蛋白。因此,制备的MurB多克隆抗血清能够应用于分枝杆菌MurB蛋白的检测分析,为MurB功能研究奠定了基础。
关键词
微生物学
耻垢分枝杆菌
udp-n-乙酰葡糖胺烯醇丙酮酸还原酶
MurB
多克隆抗血清
Keywords
microbiology
Mycobacterium smegmatis
udp-n-
acetylenolpyruvylglucosamine reductase
MurB
polyclonal antiserum
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
耻垢分枝杆菌MurB蛋白的可溶性表达、纯化和多克隆抗血清制备
徐立铭
郑琦
康健
步云
钱磊
马郁芳
《中国科技论文》
CAS
北大核心
2015
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