UGCG通过调控MDR1/P-gp参与人结肠癌奥沙利铂耐药的初步研究

目的建立人结肠癌耐奥沙利铂(L-OHP)细胞株,检测该细胞株的多药耐药性并初步探讨其可能的耐药机制。方法以人结肠癌细胞HCT116为对象,采用药物浓度梯度递增诱导法建立人结肠癌耐奥沙利铂细胞株HCT-116/L-OHP。CCK-8法检测L-OHP、顺铂(DDP)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)对亲本细胞和耐药细胞株的半数抑制浓度(IC50)。使用UDP-葡萄糖神经酰胺糖基转移酶(UGCG)si RNA转染HCT-116/L-OHP细胞,实时荧光定量PCR和Western blot检测干扰前后UGCG基因和多药耐药基因1(MDR1)mRNA及其编码的蛋白表达水平。结果 HCT-116/L-OHP对L-OHP的耐药指数为10.5,与DDP有一定程度的交叉耐药,耐药指数为4.61,但对5-Fu无交叉耐药。耐药细胞HCT-116/L-OHP中UGCG、MDR1 mRNA和UGCG、P-糖蛋白(P-gp,MDR1编码的蛋白)表达均增加,相比HCT-116细胞,差异具有统计学意义(P<0.05)。UGCG si RNA成功抑制HCT-116/L-OHP细胞中UGCG的表达,各干扰组MDR1 mRNA、P-gp表达减少,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了人结肠癌耐药细胞株;UGCG基因通过调控MDR1/P-gp的表达参与人结肠癌奥沙利铂的耐药机制的形成。

rhFSH干预对玻璃化冻融小鼠卵巢中葡萄糖神经酰胺转移酶表达及卵泡凋亡的影响

目的通过观察重组人卵泡刺激素(rh FSH)干预对玻璃化冻融小鼠卵巢中葡萄糖神经酰胺转移酶(UGCG)表达以及卵泡凋亡的影响,提供rh FSH降调神经酰胺的含量从而达到抗凋亡作用的实验室依据。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢随机分为三组:新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、300 IU·L^(-1)rh FSH干预玻璃化冻存组(rh FSH-VG)。通过对冻融卵巢内各级卵泡计数、免疫组织化学技术及Western blot技术,观察并分析各组卵巢内葡萄糖神经酰胺转移酶(UGCG)、抗凋亡蛋白Bcl2和促凋亡蛋白Bax在卵巢不同细胞中的定位和蛋白表达量。结果与FCG组相比,两个冻融组卵巢结构较疏松,但rh FSH-VG组卵泡基质结构较VCG组整齐且较致密。原始卵泡、初级卵泡、正常卵泡和卵泡总数的计数及UGCG和Bcl2的表达显示,rh FSH-VG组高于VCG组(P<0.05),但这两个冻融组均低于FCG组(P<0.05)。闭锁卵泡计数和Bax的表达显示rh FSH-VG组低于VCG组(P<0.05),但这两个冻融组均高于FCG组(P<0.05)。结论玻璃化冻融过程中添加rh FSH可以上调UGCG和Bcl2的表达,下调Bax表达,提示其可能通过降调神经酰胺的含量从而达到抗凋亡目的。

散发性静脉畸形发病机制分子研究进展

静脉畸形(venous malformation,VM)是一种儿童常见的先天性脉管疾病,其中95%的病例表现为散发性。大多数临床症状表现为蓝色、柔软、可被压缩的低流速或中流速血流的血管性病灶。目前,介入硬化术是常见的治疗方法,而手术切除仅在少数病例中被采用。介入硬化术的疗效与病灶内血流速度,以及病灶范围等密切相关。范围较大、弥漫性病灶的治疗次数会增多,且疗效显著的比例低于孤立性小病灶,术后复发率也较高。对于病灶累及周围正常组织严重的病例,强烈的硬化剂注射治疗可能会对受累组织造成极大的损伤。截至目前,静脉畸形的发病机制尚未完全阐明。为了探索更有效的治疗方式,如分子靶向药物治疗,以取得更好的临床疗效,探索静脉畸形的发病机制具有十分重要的意义。文章将就散发性静脉畸形分子研究的进展进行综述。