目的:通过短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰UHRF1(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 1)基因表达,探讨沉默UHRF1基因对食管癌TE-1细胞生物学行为的影响。方法:采用免疫组织化学法检测食管癌组织及正常食管组织中U...目的:通过短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰UHRF1(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 1)基因表达,探讨沉默UHRF1基因对食管癌TE-1细胞生物学行为的影响。方法:采用免疫组织化学法检测食管癌组织及正常食管组织中UHRF1蛋白的表达水平,以证实UHRF1在食管癌组织中过表达;以慢病毒感染的方法将UHRF1基因的shRNA转入食管癌TE-1细胞株,采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测转染UHRF1-shRNA重组表达载体后TE-1细胞中UHRF1mRNA和蛋白的表达水平;并分别以MTT法、FCM法和体外侵袭实验检测UHRF1基因沉默对TE-1细胞增殖、周期、凋亡和侵袭能力的影响。结果:UHRF1在正常食管组织中不表达或低表达,在食管癌组织中过表达(P<0.01);UHRF1-shRNA转染后,TE-1细胞中UHRF1mRNA和蛋白表达水平显著降低;UHRF1基因沉默可使TE-1细胞增殖及体外侵袭能力明显下降,G0/G1期细胞增多,凋亡增加(P<0.05)。结论:沉默UHRF1基因可降低食管癌细胞的增殖和侵袭能力,促进细胞凋亡,提示UHRF1在食管癌发生和发展过程中发挥重要作用。展开更多
近年来大量研究证实泛素样含植物同源结构域和环指结构域1(ubiquitin-like with PHD and RING finger domains 1,UHRFl)是一种与肿瘤发生相关的核蛋白基因,在表观遗传修饰过程中具有重要的调控作用,尤其是在DNA甲基化与组蛋白甲基化的...近年来大量研究证实泛素样含植物同源结构域和环指结构域1(ubiquitin-like with PHD and RING finger domains 1,UHRFl)是一种与肿瘤发生相关的核蛋白基因,在表观遗传修饰过程中具有重要的调控作用,尤其是在DNA甲基化与组蛋白甲基化的调控方面。UHRF1由于其特有的结构域,在细胞生物学功能调控中起到非常重要的作用,如细胞增殖、周期和凋亡等。另外,在多种肿瘤组织和细胞中异常高表达的UHRF1可能与肿瘤血管新生密切相关。本文主要综述UHRF1对DNA甲基化及组蛋白甲基化的调控作用,并探讨了UHRF1在血管新生过程中可能发挥的表观遗传学调控作用。展开更多
为了了解基因UHRF1(ubiquitin-like,containing PHD and RING finger domains,1)基因对乳癌细胞的生长、增殖和辐射敏感性的影响,将全长UHRF1基因的cDNA克隆至真核表达载体pcDNA3中,通过脂质体介导转染入乳癌细胞MDA-MB-231,筛选出UHRF...为了了解基因UHRF1(ubiquitin-like,containing PHD and RING finger domains,1)基因对乳癌细胞的生长、增殖和辐射敏感性的影响,将全长UHRF1基因的cDNA克隆至真核表达载体pcDNA3中,通过脂质体介导转染入乳癌细胞MDA-MB-231,筛选出UHRF1高表达的细胞株。借助生长曲线、集落形成实验,研究基因转染细胞的生长、增殖能力;通过γ射线辐照后的集落形成实验,观察基因转染对细胞辐射敏感性的影响。实验结果显示,与MDA-MB-231母细胞和转染了pcDNA3"空"质粒的MDA-MB-231/pcDNA3细胞相比,转染有UHRF1基因的MDA-MB-231/UHRF1细胞的生长率和克隆形成率都未有明显改变,但细胞的辐射敏感性明显降低,这些结果首次揭示人类UHRF1基因的表达水平并不影响乳癌细胞MDA-MB-231的生长和增殖能力,但可以调节其辐射敏感性,具体机制有待进一步深入研究。展开更多
文摘目的:通过短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰UHRF1(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 1)基因表达,探讨沉默UHRF1基因对食管癌TE-1细胞生物学行为的影响。方法:采用免疫组织化学法检测食管癌组织及正常食管组织中UHRF1蛋白的表达水平,以证实UHRF1在食管癌组织中过表达;以慢病毒感染的方法将UHRF1基因的shRNA转入食管癌TE-1细胞株,采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测转染UHRF1-shRNA重组表达载体后TE-1细胞中UHRF1mRNA和蛋白的表达水平;并分别以MTT法、FCM法和体外侵袭实验检测UHRF1基因沉默对TE-1细胞增殖、周期、凋亡和侵袭能力的影响。结果:UHRF1在正常食管组织中不表达或低表达,在食管癌组织中过表达(P<0.01);UHRF1-shRNA转染后,TE-1细胞中UHRF1mRNA和蛋白表达水平显著降低;UHRF1基因沉默可使TE-1细胞增殖及体外侵袭能力明显下降,G0/G1期细胞增多,凋亡增加(P<0.05)。结论:沉默UHRF1基因可降低食管癌细胞的增殖和侵袭能力,促进细胞凋亡,提示UHRF1在食管癌发生和发展过程中发挥重要作用。
文摘近年来大量研究证实泛素样含植物同源结构域和环指结构域1(ubiquitin-like with PHD and RING finger domains 1,UHRFl)是一种与肿瘤发生相关的核蛋白基因,在表观遗传修饰过程中具有重要的调控作用,尤其是在DNA甲基化与组蛋白甲基化的调控方面。UHRF1由于其特有的结构域,在细胞生物学功能调控中起到非常重要的作用,如细胞增殖、周期和凋亡等。另外,在多种肿瘤组织和细胞中异常高表达的UHRF1可能与肿瘤血管新生密切相关。本文主要综述UHRF1对DNA甲基化及组蛋白甲基化的调控作用,并探讨了UHRF1在血管新生过程中可能发挥的表观遗传学调控作用。
文摘为了了解基因UHRF1(ubiquitin-like,containing PHD and RING finger domains,1)基因对乳癌细胞的生长、增殖和辐射敏感性的影响,将全长UHRF1基因的cDNA克隆至真核表达载体pcDNA3中,通过脂质体介导转染入乳癌细胞MDA-MB-231,筛选出UHRF1高表达的细胞株。借助生长曲线、集落形成实验,研究基因转染细胞的生长、增殖能力;通过γ射线辐照后的集落形成实验,观察基因转染对细胞辐射敏感性的影响。实验结果显示,与MDA-MB-231母细胞和转染了pcDNA3"空"质粒的MDA-MB-231/pcDNA3细胞相比,转染有UHRF1基因的MDA-MB-231/UHRF1细胞的生长率和克隆形成率都未有明显改变,但细胞的辐射敏感性明显降低,这些结果首次揭示人类UHRF1基因的表达水平并不影响乳癌细胞MDA-MB-231的生长和增殖能力,但可以调节其辐射敏感性,具体机制有待进一步深入研究。
