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人巨细胞病毒UL141A和B片段在黄疸和先天性巨结肠分离株中的序列分析
1
作者
马艳萍
阮强
+3 位作者
何蓉
齐莹
孙峥嵘
吉耀华
《世界华人消化杂志》
CAS
北大核心
2008年第13期1471-1475,共5页
目的:分析来自黄疸和先天性巨结肠(hirschsprung's disease,HD)患儿的人巨细胞病毒临床分离株UL141片段的序列变化,以及这种变化与人巨细胞病毒感染导致不同消化系疾病之间的关系.方法:对荧光定量PCR方法检测HCMV-DNA阳性的临床低...
目的:分析来自黄疸和先天性巨结肠(hirschsprung's disease,HD)患儿的人巨细胞病毒临床分离株UL141片段的序列变化,以及这种变化与人巨细胞病毒感染导致不同消化系疾病之间的关系.方法:对荧光定量PCR方法检测HCMV-DNA阳性的临床低传代分离株进行UL141基因全序列PCR扩增,对扩增阳性的标本进行测序及分析.结果:15株临床低传代分离株在Toledo株UL141基因227位均缺失一个碱基T,因此产生两个新的ORF(UL141A和UL141B).与Toledo株相应片段比较,UL141A预测蛋白质第75位氨基酸后序列和翻译后修饰位点产生大量变异.UL141B的核苷酸和氨基酸序列均高度保守.结论:来自黄疸和先天性巨结肠患儿的人巨细胞病毒临床分离株的UL141片段产生两个新的ORF。
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关键词
黄疸
先天性巨结肠
人巨细胞病毒
ul141
聚合酶链式反应
下载PDF
职称材料
人巨细胞病毒UL141编码蛋白相互作用蛋白的筛选和分析
被引量:
1
2
作者
卢志涛
王桂丽
+5 位作者
马艳萍
崔鑫
任高伟
齐莹
阮强
孙峥嵘
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第10期865-868,872,共5页
目的应用酵母双杂交技术筛选人胎脑cDNA文库中与人巨细胞病毒(HCMV)UL141编码蛋白相互作用的蛋白,以进一步研究HCMV UL141的生物学功能,为揭示HCMV先天感染机制奠定基础。方法采用PCR技术扩增HCMV-UL141基因片段,将其插入到pGBKT7载体中...
目的应用酵母双杂交技术筛选人胎脑cDNA文库中与人巨细胞病毒(HCMV)UL141编码蛋白相互作用的蛋白,以进一步研究HCMV UL141的生物学功能,为揭示HCMV先天感染机制奠定基础。方法采用PCR技术扩增HCMV-UL141基因片段,将其插入到pGBKT7载体中,构建成诱饵质粒pGBKT7-UL141。然后将pGBKT7 UL141转化到酵母感受态细胞AH109中,于一缺培养基(SD/Trp)上筛选生长。再将人胎脑cDNA文库质粒转化到含有pGBKT7-UL141质粒的AH109菌株中,在四缺培养基(SD/Trp/Leu/His/Ade)中筛选相互作用的人胎脑cDNA文库蛋白。通过显色反应挑选显蓝色的阳性克隆,提取相应质粒将其转化到大肠杆菌中,并进行回转验证。最后对筛选得到的阳性克隆进行测序及生物信息学分析。结果诱饵质粒pGBKT7UL141构建成功。筛选获得6个克隆与HCMV-UL141编码蛋白相互作用,其中1个基因编码人类染色质解旋酶DNA结合蛋白3(CHD3)。结论成功应用酵母双杂交系统筛选出与HCMV-UL141编码蛋白相互作用的人体组织蛋白——CHD3,提示UL141蛋白可能与病毒的免疫逃避,干扰正常细胞的生长、分化相关。
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关键词
人巨细胞病毒
ul141
蛋白
酵母双杂交系统
人胎脑cDNA文库
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职称材料
广州地区人巨细胞病毒临床低传代株UL141基因的序列特征
3
作者
谭琪琪
王波
+3 位作者
胡兢晶
苏海浩
伍苑宾
郭梦杰
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2017年第10期1048-1052,共5页
目的 UL141基因的结构特征及多态性对发现人巨细胞病毒(HCMV)感染致病性机制具有指导意义。文中旨在研究广州地区HCMV临床低传代株UL141基因的序列特征。方法选取2016年3月至2017年3月在广州医科大学附属广东省妇儿医院儿科就诊的10例H...
目的 UL141基因的结构特征及多态性对发现人巨细胞病毒(HCMV)感染致病性机制具有指导意义。文中旨在研究广州地区HCMV临床低传代株UL141基因的序列特征。方法选取2016年3月至2017年3月在广州医科大学附属广东省妇儿医院儿科就诊的10例HCMV患儿,收集患儿尿液标本,从中分离低传代临床病毒株,应用多重PCR方法鉴定,对其进行HCMV UL141基因全序列扩增、克隆、鉴定、测序,并在Gen Bank搜索HCMV UL141同源序列,行序列分析。结果UL141基因存在UL141a及UL141b 2处开放阅读框架(ORF),分别由315及1017个核苷酸构成,Gen Bank登记号分别为DQl80372和DQl80371。UL141基因全长1277 bp,编码蛋白由338个氨基酸残基组成,UL141a及UL141b开放阅读框架ORF分别为315、1017 bp,其DNA序列比较保守,存在46处位点变异,变异皆为碱基替换,无插入或缺失。HCMV UL141编码蛋白翻译后修饰位点在所有分离株中均比较保守,所有分离株UL141蛋白的等电点均在8.36~8.68之间。结论广州地区HCMV临床低传代分离株UL141基因及其编码的氨基酸序列比较保守,但仍存在一定的多态性,为进一步揭示ULl41蛋白的功能及HCMV感染的致病机制奠定了基础。
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关键词
人巨细胞病毒
生物信息学
ul141
基因序列
多态性
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职称材料
题名
人巨细胞病毒UL141A和B片段在黄疸和先天性巨结肠分离株中的序列分析
1
作者
马艳萍
阮强
何蓉
齐莹
孙峥嵘
吉耀华
机构
中国医科大学附属盛京医院病毒研究室
出处
《世界华人消化杂志》
CAS
北大核心
2008年第13期1471-1475,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目
No.30170986~~
文摘
目的:分析来自黄疸和先天性巨结肠(hirschsprung's disease,HD)患儿的人巨细胞病毒临床分离株UL141片段的序列变化,以及这种变化与人巨细胞病毒感染导致不同消化系疾病之间的关系.方法:对荧光定量PCR方法检测HCMV-DNA阳性的临床低传代分离株进行UL141基因全序列PCR扩增,对扩增阳性的标本进行测序及分析.结果:15株临床低传代分离株在Toledo株UL141基因227位均缺失一个碱基T,因此产生两个新的ORF(UL141A和UL141B).与Toledo株相应片段比较,UL141A预测蛋白质第75位氨基酸后序列和翻译后修饰位点产生大量变异.UL141B的核苷酸和氨基酸序列均高度保守.结论:来自黄疸和先天性巨结肠患儿的人巨细胞病毒临床分离株的UL141片段产生两个新的ORF。
关键词
黄疸
先天性巨结肠
人巨细胞病毒
ul141
聚合酶链式反应
Keywords
Jaundice
Hirschsprung's disease
Human cytomeglovirus
ul141
Polymerase chain reaction
分类号
R726.5 [医药卫生—儿科]
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职称材料
题名
人巨细胞病毒UL141编码蛋白相互作用蛋白的筛选和分析
被引量:
1
2
作者
卢志涛
王桂丽
马艳萍
崔鑫
任高伟
齐莹
阮强
孙峥嵘
机构
中国医科大学附属盛京医院病毒研究室
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第10期865-868,872,共5页
基金
国家自然科学基金(81171581)
文摘
目的应用酵母双杂交技术筛选人胎脑cDNA文库中与人巨细胞病毒(HCMV)UL141编码蛋白相互作用的蛋白,以进一步研究HCMV UL141的生物学功能,为揭示HCMV先天感染机制奠定基础。方法采用PCR技术扩增HCMV-UL141基因片段,将其插入到pGBKT7载体中,构建成诱饵质粒pGBKT7-UL141。然后将pGBKT7 UL141转化到酵母感受态细胞AH109中,于一缺培养基(SD/Trp)上筛选生长。再将人胎脑cDNA文库质粒转化到含有pGBKT7-UL141质粒的AH109菌株中,在四缺培养基(SD/Trp/Leu/His/Ade)中筛选相互作用的人胎脑cDNA文库蛋白。通过显色反应挑选显蓝色的阳性克隆,提取相应质粒将其转化到大肠杆菌中,并进行回转验证。最后对筛选得到的阳性克隆进行测序及生物信息学分析。结果诱饵质粒pGBKT7UL141构建成功。筛选获得6个克隆与HCMV-UL141编码蛋白相互作用,其中1个基因编码人类染色质解旋酶DNA结合蛋白3(CHD3)。结论成功应用酵母双杂交系统筛选出与HCMV-UL141编码蛋白相互作用的人体组织蛋白——CHD3,提示UL141蛋白可能与病毒的免疫逃避,干扰正常细胞的生长、分化相关。
关键词
人巨细胞病毒
ul141
蛋白
酵母双杂交系统
人胎脑cDNA文库
Keywords
human cytomegalovirus
ul141
protein
yeast two-hybrid system
human fetus brain cDNA library
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
下载PDF
职称材料
题名
广州地区人巨细胞病毒临床低传代株UL141基因的序列特征
3
作者
谭琪琪
王波
胡兢晶
苏海浩
伍苑宾
郭梦杰
机构
广州医科大学附属广东省妇儿医院/广东省妇幼保健院儿科
出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2017年第10期1048-1052,共5页
基金
国家自然科学基金(81070516)
广东省自然科学基金(9151008901000085
+2 种基金
2015A030313726
2016A030313788)
广东省医学科研基金(A2015133)
文摘
目的 UL141基因的结构特征及多态性对发现人巨细胞病毒(HCMV)感染致病性机制具有指导意义。文中旨在研究广州地区HCMV临床低传代株UL141基因的序列特征。方法选取2016年3月至2017年3月在广州医科大学附属广东省妇儿医院儿科就诊的10例HCMV患儿,收集患儿尿液标本,从中分离低传代临床病毒株,应用多重PCR方法鉴定,对其进行HCMV UL141基因全序列扩增、克隆、鉴定、测序,并在Gen Bank搜索HCMV UL141同源序列,行序列分析。结果UL141基因存在UL141a及UL141b 2处开放阅读框架(ORF),分别由315及1017个核苷酸构成,Gen Bank登记号分别为DQl80372和DQl80371。UL141基因全长1277 bp,编码蛋白由338个氨基酸残基组成,UL141a及UL141b开放阅读框架ORF分别为315、1017 bp,其DNA序列比较保守,存在46处位点变异,变异皆为碱基替换,无插入或缺失。HCMV UL141编码蛋白翻译后修饰位点在所有分离株中均比较保守,所有分离株UL141蛋白的等电点均在8.36~8.68之间。结论广州地区HCMV临床低传代分离株UL141基因及其编码的氨基酸序列比较保守,但仍存在一定的多态性,为进一步揭示ULl41蛋白的功能及HCMV感染的致病机制奠定了基础。
关键词
人巨细胞病毒
生物信息学
ul141
基因序列
多态性
Keywords
Human cytomegalovirus
Biological information science
Gene sequence
Polymorphism
分类号
R394 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人巨细胞病毒UL141A和B片段在黄疸和先天性巨结肠分离株中的序列分析
马艳萍
阮强
何蓉
齐莹
孙峥嵘
吉耀华
《世界华人消化杂志》
CAS
北大核心
2008
0
下载PDF
职称材料
2
人巨细胞病毒UL141编码蛋白相互作用蛋白的筛选和分析
卢志涛
王桂丽
马艳萍
崔鑫
任高伟
齐莹
阮强
孙峥嵘
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
下载PDF
职称材料
3
广州地区人巨细胞病毒临床低传代株UL141基因的序列特征
谭琪琪
王波
胡兢晶
苏海浩
伍苑宾
郭梦杰
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2017
0
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