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人巨细胞病毒UL55编码蛋白结合蛋白的筛选与鉴定 被引量:1
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作者 吉耀华 刘畅 +4 位作者 齐莹 马艳萍 黄郁静 柳中洋 阮强 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2016年第5期68-73,共6页
从人胎脑c DNA文库中筛选和鉴定出与人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)UL55编码蛋白结合的蛋白。将UL55基因编码区克隆到诱饵载体p GBKT7中,在证实UL55蛋白不具有自激活作用的前提下,采用Match-maker GAL酵母双杂交系统筛选人胎... 从人胎脑c DNA文库中筛选和鉴定出与人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)UL55编码蛋白结合的蛋白。将UL55基因编码区克隆到诱饵载体p GBKT7中,在证实UL55蛋白不具有自激活作用的前提下,采用Match-maker GAL酵母双杂交系统筛选人胎脑c DNA文库中与UL55蛋白结合的宿主蛋白,用酵母双杂交回转实验验证UL55蛋白与获得的蛋白结合的可靠性。将酵母双杂交筛选出的文库蛋白烯醇化酶1(enolase1,ENO 1)构建到p GEX-4T-2载体上,利用GST pull-down技术体外验证ENO 1与HCMV UL55蛋白的结合。并依据所筛选出蛋白的生物学功能分析UL55蛋白可能的生物学功能。结果显示有10种蛋白与HCMV UL55编码蛋白结合。应用GST pull-down技术检测到ENO 1与HCMV UL55相互结合的蛋白条带。成功地筛选出10种与UL55蛋白相互结合的宿主蛋白,GST pull-down实验进一步表明ENO 1可以与HCMV UL55蛋白直接结合,为进一步研究UL55蛋白的功能提供了新的线索。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 ul55编码蛋白 人胎脑c DNA文库 ENO 1 相互结合
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胃癌组织中人巨细胞病毒感染及其临床意义 被引量:5
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作者 金劲激 涂建欣 +3 位作者 吴明 马海广 沈贤 薛向阳 《温州医学院学报》 CAS 2014年第10期703-707,共5页
目的:初步探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染与胃癌的关系。方法:采用化学发光(CLIA)法对胃癌组(n=80)及健康对照组(n=80)的外周血清进行HCMV Ig G、Ig M抗体检测;巢式PCR技术检测22例胃癌患者的肿瘤及癌旁正常胃黏膜组织标本中的HCMV UL55基... 目的:初步探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染与胃癌的关系。方法:采用化学发光(CLIA)法对胃癌组(n=80)及健康对照组(n=80)的外周血清进行HCMV Ig G、Ig M抗体检测;巢式PCR技术检测22例胃癌患者的肿瘤及癌旁正常胃黏膜组织标本中的HCMV UL55基因;统计分析HCMV感染与胃癌临床特征的关系。结果:胃癌组血清HCMV-Ig G阳性率为95%(76/80),HCMV-Ig M阳性率为6.25%(5/80);在健康对照组血清中,HCMV-Ig G阳性率为97.5%(78/80),HCMV-Ig M阳性率为3.75%(3/80),HCMV Ig G、Ig M在胃癌组与健康对照组血清中差异无统计学意义(P>0.05)。HCMV UL55阳性检出率在22例胃癌组织中为50%(11/22),在相应正常胃黏膜组织中为9.09%(2/22),胃癌组织HCMV阳性检出率较癌旁正常组织显著升高(P<0.01)。此外,未发现HCMV感染与胃癌的TMN分期、组织病理分化及肿块大小有显著性关联。结论:胃癌组织中存在HCMV感染,且HCMV相较于癌旁正常组织更倾向感染癌灶,提示HCMV感染可能参与胃癌的发生发展过程。 展开更多
关键词 胃肿瘤 人巨细胞病毒 ul55
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人巨细胞病毒感染与系统性红斑狼疮的相关性 被引量:4
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作者 陈静 章慧娣 +4 位作者 楼威洋 邵蓉蓉 张丽芳 薛向阳 朱小春 《温州医学院学报》 CAS 2014年第5期318-323,共6页
目的:分析人巨细胞病毒(HCMV)在系统性红斑狼疮(SLE)患者中的感染状况及与SLE临床指标的相关性。方法:采集并分离60例SLE患者和111例健康体检者的外周血白细胞及血清标本,建立细胞内HCMV UL55及UL138基因高度敏感特异的PCR方法,并检测SL... 目的:分析人巨细胞病毒(HCMV)在系统性红斑狼疮(SLE)患者中的感染状况及与SLE临床指标的相关性。方法:采集并分离60例SLE患者和111例健康体检者的外周血白细胞及血清标本,建立细胞内HCMV UL55及UL138基因高度敏感特异的PCR方法,并检测SLE患者及健康体检者外周血白细胞内HCMV UL55及UL138基因,以确定HCMV感染情况,利用罗氏公司电化学发光法试剂盒检测血清HCMV IgG和IgM,比较SLE患者与健康体检者外周血白细胞内HCMV UL55、UL138检测及血清IgG、IgM检测的阳性率和相关性,统计分析外周血白细胞内HCMV感染与SLE常见临床指标的关系。结果:琼脂糖凝胶电泳及测序结果显示,建立的PCR方法能特异地检测外周血白细胞内HCMV UL55及UL138基因;血清HCMV IgG及细胞内HCMV UL138基因检测几乎全部呈阳性,SLE患者与健康体检者之间差异无统计学意义(P>0.05);血清HCMV IgM检测阳性率低,SLE患者血清HCMV IgM检测阳性率(为6.67%)略高于健康体检者(为0.90%)(P=0.052);SLE患者外周血白细胞内HCMV UL55基因检测的阳性率明显高于健康体检者(P<0.01)。HCMV感染4种检测方法的相关分析显示,细胞内HCMV UL138检测结果与血清HCMV IgG检测有较好的一致性。分析SLE患者外周血白细胞内HCMV感染状况与临床指标的相关性显示,与UL138基因不同,细胞内HCMV UL55检测呈阳性的SLE患者与检测呈阴性的SLE患者比较,存在多项明显差异的临床指标。结论:HCMV感染与SLE存在一定的相关性,但不同检测方法结果差异显著。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 系统性红斑狼疮 聚合酶链式反应 ul55 UL138
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Polymorphism of human cytomegalovirus(HCMV) UL144 gene in low passage clinical isolates 被引量:3
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作者 Xingxing Fu Liping Li +4 位作者 Chaoyang Huang Xiaoman Li Huadong Wang Zhenyuan Xie Ze Chen 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2014年第25期3120-3126,共7页
To explore the impact of gene polymorphism of human cytomegalovirus(HCMV)on virus virulence,the full-length UL144 gene and partial sequence of glycoprotein B(UL55)gene were sequenced and analyzed for 23clinical strain... To explore the impact of gene polymorphism of human cytomegalovirus(HCMV)on virus virulence,the full-length UL144 gene and partial sequence of glycoprotein B(UL55)gene were sequenced and analyzed for 23clinical strains of HCMV isolated from urine samples of pediatric patients with congenital or postnatal HCMV infection.Among the 23 isolates,13(57%)were UL144genotype 1A,3(13%)were UL144 genotypes 2 and 7(30%)were UL144 genotype 3;geographic differences in genotype distribution were found for both UL144 and gB gene.No UL144 genotypes 1B and 1C were found in this study while these two genotypes were common in HCMV strains isolated in the US.Our results also demonstrated that for all clinical strains of gB genotypes I,III and UL144genotypes 1A,2,and 3 found in this study,mother-to-fetus vertical transmission was possible. 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 基因多态性 HCMV 分离株 临床 GB基因 基因型 糖蛋白B
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