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EZH1/2抑制剂UNC1999对肝癌细胞的影响
1
作者
唐秀鑫
邓小红
+3 位作者
辛晓萍
李劼
何晓顺
黄俊琪
《中山大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期821-832,共12页
【目的】探讨EZH1/2抑制剂UNC1999对肝癌细胞SMMC-7721的影响及其作用机制。【方法】实验设2个组:DMSO(对照组)、UNC1999组,分别加入不同浓度的DMSO、UNC1999并作用不同时间,用CCK-8法检测细胞OD值,筛选药物较佳的作用浓度及时间;EdU细...
【目的】探讨EZH1/2抑制剂UNC1999对肝癌细胞SMMC-7721的影响及其作用机制。【方法】实验设2个组:DMSO(对照组)、UNC1999组,分别加入不同浓度的DMSO、UNC1999并作用不同时间,用CCK-8法检测细胞OD值,筛选药物较佳的作用浓度及时间;EdU细胞增殖实验及克隆形成实验分别检测细胞增殖和克隆形成能力;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell侵袭、迁移实验检测细胞侵袭及迁移的能力;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;流式细胞术检测的细胞周期。RNA-seq检测UNC1999对细胞转录组的影响;qRT-PCR法检测药物作用相关基因(EZH1、EZH2)以及转录水平显著差异基因(NECTIN4)的相对表达量;Western Blot法检测EZH1、EZH2、H3K27me3表达情况。【结果】与对照组相比,UNC1999组的肝癌细胞增殖、迁移、侵袭能力均降低(P<0.05);细胞周期发生G0/1阻滞(P<0.05);细胞凋亡数量无明显改变(P>0.05)。UNC1999可促进包括多个基因转录水平的改变,首位显著上调的基因为NECTIN4(ENSG00000143217)。在基因的转录表达水平上,UNC1999组的EZH1、EZH2无明显降低(P>0.05);而在蛋白表达水平上,两者表达降低(P<0.05),同时H3K27me3也表达下降(P<0.05)。【结论】UNC1999能通过在蛋白水平上抑制表观遗传子EZH1、EZH2的表达及其催化组蛋白甲基化的功能,发挥抑制肝癌的作用;表观遗传子EZH1、EZH2与肝癌之间具有密切关系,是肝癌治疗具有潜力的靶标;UNC1999处理后NECTIN4表达显著升高,该基因异构体与抗癌药物治疗反应性相关,提示表观遗传抑制剂联合抗癌药物可能发挥更佳的治疗作用,这为临床肝癌药物治疗提供了新的思路。
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关键词
EZH1/2
unc1999
转录组学
NECTIN4
肝癌
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职称材料
EZH1/2抑制剂UNC1999对外周血免疫细胞表型的影响
2
作者
刘丹平
池沛冬
+2 位作者
梅美华
游莹
黄俊琪
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期494-503,共10页
【目的】探讨EZH1/2抑制剂UNC1999对外周血免疫细胞表型的影响。【方法】用CCK-8法检测UNC1999作用于外周血单个核细胞(PBMC)后的细胞存活率;多色流式细胞术分析免疫细胞表型。【结果】相比对照组,UNC1999组经典型单核细胞(CD14^(++)CD1...
【目的】探讨EZH1/2抑制剂UNC1999对外周血免疫细胞表型的影响。【方法】用CCK-8法检测UNC1999作用于外周血单个核细胞(PBMC)后的细胞存活率;多色流式细胞术分析免疫细胞表型。【结果】相比对照组,UNC1999组经典型单核细胞(CD14^(++)CD16^(−))比例上调[(19.53±1.79)%vs.(66.60±5.02)%,t=13.31,P=0.006],中间型单核细胞(CD14^(++)CD16^(+))和非经典型单核细胞(CD14^(+)CD16^(+))比例下调[(35.08±3.97)%vs.(15.42±2.89)%,t=6.130,P=0.026;(35.50±3.53)%vs.(8.40±3.12)%,t=25.740,P=0.002];CD56^(dim)CD16^(+)、CD56^(dom)CD16^(+)NK细胞亚群比例下调[(3.39±0.86)%vs.(0.27±0.06)%,t=4.882,P=0.040;(80.50±0.64)%vs.(0.63±0.23)%,t=133.100,P<0.0001];初始B细胞比例上调[(10.67±1.76)%vs.(37.99±3.76)%,t=17.690,P=0.003],记忆B细胞、过渡B细胞、浆细胞比例下调[(23.39±4.20)%vs.(11.82±1.90)%,t=7.059,P=0.020;(3.58±0.47)%vs.(1.52±0.56)%,t=26.970,P=0.001;(0.18±0.03)%vs.(0.00±0.00)%,t=8.647,P=0.013];DC比例上调[(0.20±0.05)%vs.(1.38±0.13)%,t=16.500,P=0.004],其中pDC/DC下调[(24.90±1.95)%vs.(12.70±2.11)%,t=7.566,P=0.017],mDC/DC上调[(32.41±13.14)%vs.(60.87±8.43)%,t=8.252,P=0.014];CD8^(+)T细胞亚群中CD8^(+)中枢记忆T细胞、CD8^(+)PD-1^(+)比例上调[(5.62±1.24)%vs.(18.38±2.34)%,t=15.600,P=0.004;(2.50±1.02)%vs.(18.34±2.69)%,t=8.822,P=0.013],CD8^(+)效应记忆T细胞比例下调[(28.27±10.15)%vs.(15.62±9.48)%,t=19.480,P=0.003];CD4^(+)T细胞亚群中CD4^(+)CD27^(+)比例下调[(82.77±2.66)%vs.(56.00±9.01)%,t=5.715,P=0.029]。其余细胞亚群差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】UNC1999可以改变PBMC免疫细胞表型。
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关键词
Zeste增强子同源物1/2
unc1999
多色流式细胞术
免疫表型
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职称材料
组蛋白甲基转移酶EZH2抑制剂联合抗癌药物对膀胱癌细胞功能影响的研究
3
作者
孟旭英
李珍瑾
郭剑超
《天津医科大学学报》
2018年第1期25-28,共4页
目的:探究组蛋白甲基化酶EZH2特异性抑制剂UNC1999与针对DNA的化疗药物丝裂霉素C(MMC)对膀胱癌T24细胞的抑制效应。方法:组蛋白甲基化酶EZH2特异性抑制剂UNC1999和化疗药物MMC单独使用或者联和使用处理T24细胞,Q-PCR法检测EZH2基因的表...
目的:探究组蛋白甲基化酶EZH2特异性抑制剂UNC1999与针对DNA的化疗药物丝裂霉素C(MMC)对膀胱癌T24细胞的抑制效应。方法:组蛋白甲基化酶EZH2特异性抑制剂UNC1999和化疗药物MMC单独使用或者联和使用处理T24细胞,Q-PCR法检测EZH2基因的表达水平,用Western blot法检测EZH2以及下游H3K27me3蛋白的表达水平,MTT法测定T24细胞的增殖,划痕实验检测细胞的迁移,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:UNC1999与MMC单独使用以及联合用药都能引起EZH2表达水平的下调,同时引起T24细胞增殖能力降低,迁移能力下降,凋亡水平上调,两者联合使用效果更加明显。结论:UNC1999以及MMC均可引起膀胱癌细胞EZH2表达水平的下调,同时联合使用效果最大,可明显降低细胞的增殖侵袭能力,上调凋亡水平,为膀胱癌的化疗治疗、用药方法以及后续的机制研究提供了参考。
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关键词
组蛋白甲基化
unc1999
丝裂霉素C
表观遗传
膀胱癌
下载PDF
职称材料
题名
EZH1/2抑制剂UNC1999对肝癌细胞的影响
1
作者
唐秀鑫
邓小红
辛晓萍
李劼
何晓顺
黄俊琪
机构
中山大学附属第一医院器官移植科//广东省器官捐献与移植免疫重点科实验室//广东省器官移植国际科技合作基地
出处
《中山大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期821-832,共12页
基金
国家自然科学基金(31370870,81871238)
广东省自然科学基金(S2013020013000)
+3 种基金
广东省科技计划(2013A020229003)
广州市科技计划项目(201604020083)
广东省器官捐献与移植免疫重点实验室建设项目(2013A061401007,2017B030314018)
广东省器官移植国际合作基地建设项目(2015B050501002)
文摘
【目的】探讨EZH1/2抑制剂UNC1999对肝癌细胞SMMC-7721的影响及其作用机制。【方法】实验设2个组:DMSO(对照组)、UNC1999组,分别加入不同浓度的DMSO、UNC1999并作用不同时间,用CCK-8法检测细胞OD值,筛选药物较佳的作用浓度及时间;EdU细胞增殖实验及克隆形成实验分别检测细胞增殖和克隆形成能力;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell侵袭、迁移实验检测细胞侵袭及迁移的能力;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;流式细胞术检测的细胞周期。RNA-seq检测UNC1999对细胞转录组的影响;qRT-PCR法检测药物作用相关基因(EZH1、EZH2)以及转录水平显著差异基因(NECTIN4)的相对表达量;Western Blot法检测EZH1、EZH2、H3K27me3表达情况。【结果】与对照组相比,UNC1999组的肝癌细胞增殖、迁移、侵袭能力均降低(P<0.05);细胞周期发生G0/1阻滞(P<0.05);细胞凋亡数量无明显改变(P>0.05)。UNC1999可促进包括多个基因转录水平的改变,首位显著上调的基因为NECTIN4(ENSG00000143217)。在基因的转录表达水平上,UNC1999组的EZH1、EZH2无明显降低(P>0.05);而在蛋白表达水平上,两者表达降低(P<0.05),同时H3K27me3也表达下降(P<0.05)。【结论】UNC1999能通过在蛋白水平上抑制表观遗传子EZH1、EZH2的表达及其催化组蛋白甲基化的功能,发挥抑制肝癌的作用;表观遗传子EZH1、EZH2与肝癌之间具有密切关系,是肝癌治疗具有潜力的靶标;UNC1999处理后NECTIN4表达显著升高,该基因异构体与抗癌药物治疗反应性相关,提示表观遗传抑制剂联合抗癌药物可能发挥更佳的治疗作用,这为临床肝癌药物治疗提供了新的思路。
关键词
EZH1/2
unc1999
转录组学
NECTIN4
肝癌
Keywords
EZH1/2
unc1999
transcriptomics
NECTIN4
HCC
分类号
R392.4 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
EZH1/2抑制剂UNC1999对外周血免疫细胞表型的影响
2
作者
刘丹平
池沛冬
梅美华
游莹
黄俊琪
机构
中山大学附属第一医院器官移植科//广东省器官捐献与移植免疫重点实验室//广东省器官移植国际科技合作基地
中山大学肿瘤防治中心检验科
出处
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期494-503,共10页
基金
国家自然科学基金(81871238)
广东省器官捐献与移植免疫重点实验室建设项目(2013A061401007,2017B030314018,2020B1212060026)
广东省器官移植国际合作基地建设项目(2015B050501002)。
文摘
【目的】探讨EZH1/2抑制剂UNC1999对外周血免疫细胞表型的影响。【方法】用CCK-8法检测UNC1999作用于外周血单个核细胞(PBMC)后的细胞存活率;多色流式细胞术分析免疫细胞表型。【结果】相比对照组,UNC1999组经典型单核细胞(CD14^(++)CD16^(−))比例上调[(19.53±1.79)%vs.(66.60±5.02)%,t=13.31,P=0.006],中间型单核细胞(CD14^(++)CD16^(+))和非经典型单核细胞(CD14^(+)CD16^(+))比例下调[(35.08±3.97)%vs.(15.42±2.89)%,t=6.130,P=0.026;(35.50±3.53)%vs.(8.40±3.12)%,t=25.740,P=0.002];CD56^(dim)CD16^(+)、CD56^(dom)CD16^(+)NK细胞亚群比例下调[(3.39±0.86)%vs.(0.27±0.06)%,t=4.882,P=0.040;(80.50±0.64)%vs.(0.63±0.23)%,t=133.100,P<0.0001];初始B细胞比例上调[(10.67±1.76)%vs.(37.99±3.76)%,t=17.690,P=0.003],记忆B细胞、过渡B细胞、浆细胞比例下调[(23.39±4.20)%vs.(11.82±1.90)%,t=7.059,P=0.020;(3.58±0.47)%vs.(1.52±0.56)%,t=26.970,P=0.001;(0.18±0.03)%vs.(0.00±0.00)%,t=8.647,P=0.013];DC比例上调[(0.20±0.05)%vs.(1.38±0.13)%,t=16.500,P=0.004],其中pDC/DC下调[(24.90±1.95)%vs.(12.70±2.11)%,t=7.566,P=0.017],mDC/DC上调[(32.41±13.14)%vs.(60.87±8.43)%,t=8.252,P=0.014];CD8^(+)T细胞亚群中CD8^(+)中枢记忆T细胞、CD8^(+)PD-1^(+)比例上调[(5.62±1.24)%vs.(18.38±2.34)%,t=15.600,P=0.004;(2.50±1.02)%vs.(18.34±2.69)%,t=8.822,P=0.013],CD8^(+)效应记忆T细胞比例下调[(28.27±10.15)%vs.(15.62±9.48)%,t=19.480,P=0.003];CD4^(+)T细胞亚群中CD4^(+)CD27^(+)比例下调[(82.77±2.66)%vs.(56.00±9.01)%,t=5.715,P=0.029]。其余细胞亚群差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】UNC1999可以改变PBMC免疫细胞表型。
关键词
Zeste增强子同源物1/2
unc1999
多色流式细胞术
免疫表型
Keywords
EZH1/2
unc1999
multicolor flow cytometry
immunophenotype
分类号
R392.9 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
组蛋白甲基转移酶EZH2抑制剂联合抗癌药物对膀胱癌细胞功能影响的研究
3
作者
孟旭英
李珍瑾
郭剑超
机构
天津医科大学第二医院内分泌科
出处
《天津医科大学学报》
2018年第1期25-28,共4页
文摘
目的:探究组蛋白甲基化酶EZH2特异性抑制剂UNC1999与针对DNA的化疗药物丝裂霉素C(MMC)对膀胱癌T24细胞的抑制效应。方法:组蛋白甲基化酶EZH2特异性抑制剂UNC1999和化疗药物MMC单独使用或者联和使用处理T24细胞,Q-PCR法检测EZH2基因的表达水平,用Western blot法检测EZH2以及下游H3K27me3蛋白的表达水平,MTT法测定T24细胞的增殖,划痕实验检测细胞的迁移,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:UNC1999与MMC单独使用以及联合用药都能引起EZH2表达水平的下调,同时引起T24细胞增殖能力降低,迁移能力下降,凋亡水平上调,两者联合使用效果更加明显。结论:UNC1999以及MMC均可引起膀胱癌细胞EZH2表达水平的下调,同时联合使用效果最大,可明显降低细胞的增殖侵袭能力,上调凋亡水平,为膀胱癌的化疗治疗、用药方法以及后续的机制研究提供了参考。
关键词
组蛋白甲基化
unc1999
丝裂霉素C
表观遗传
膀胱癌
Keywords
histone methylation
unc1999
mitomycin C
epigenetics
bladder cancer
分类号
R737.14 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
EZH1/2抑制剂UNC1999对肝癌细胞的影响
唐秀鑫
邓小红
辛晓萍
李劼
何晓顺
黄俊琪
《中山大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2019
0
下载PDF
职称材料
2
EZH1/2抑制剂UNC1999对外周血免疫细胞表型的影响
刘丹平
池沛冬
梅美华
游莹
黄俊琪
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2021
0
下载PDF
职称材料
3
组蛋白甲基转移酶EZH2抑制剂联合抗癌药物对膀胱癌细胞功能影响的研究
孟旭英
李珍瑾
郭剑超
《天津医科大学学报》
2018
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