皮肤创伤修复中uPA/uPAR的表达及作用的研究

目的 探讨皮肤创伤修复中uPA/uPAR的表达规律及意义。方法 应用免疫组化、WesternBlot、细胞培养、ELISA等方法检测小鼠皮肤伤缘和培养的单层角质形成细胞创伤模型的uPA/uPAR的表达。结果 创伤后uPA/uPAR的表达增高 ,伤后 1 2～ 2 4h为uPA/uPAR的表达高峰。结论 创伤促进了uPA/uPAR的表达 。

Saposin C stimulates growth and invasion,activates p42/44 and SAPK/JNK signaling pathways of MAPK and upregulates uPA/uPAR expression in prostate cancer and stromal cells

Aim:To determine the effect of saposin C (a known trophic domain of prosaposin) on proliferation,migration and invasion,as well as its effect on the expression of urokinase plasmonogen activator (uPA),its receptor (uPAR) and matrix metalloproteinases (MMP)-2 and -9 in normal and malignant prostate cells.In addition,we tested whether saposin C can activate p42/44 and stress-activated protein kinase/c-Jun NH_2-terminal kinase (SAPK/JNK) signal transduction pathways of the mitogen-activated protein kinase (MAPK) superfamily.Methods:We employed West- ern blot analysis,phospho-specific antibodies,cell proliferation assay,reverse transcriptase-polymerase chain reaction, in vitro kinase assays and migration and invasion to determine the effect of saposin C on various biological behaviors of prostate stromal and cancer cells.Results:Saposin C,in a cell type-specific manner,upregulates uPA/uPAR and immediate early gene c-Jun expression,stimulates cell proliferation,migration and invasion and activates p42/44 and SAPK/JNK MAPK pathways in prostate stromal and cancer cells.Normal prostate epithelial cells were not responsive to saposin C treatment in the above studies.Conclusion:Saposin C functions as a multipotential modulator of diverse biological activities in prostate cancer and stromal cells.These results strongly suggest that saposin C functions as a potent growth factor for prostatic cells and may contribute to prostate carcinogenesis and/or the development of hormone-refractory prostate cancer.

uPA/uPAR在人胚胎毛囊隆突区中表达的研究

目的研究人胚胎毛囊干细胞所在部位隆突区形态及uPA/uPAR表达。方法通过HE染色,确定毛囊隆突区的部位及大小;采用免疫细胞化学和原位杂交技术研究毛囊干细胞的隆突区部位uPA/uPAR的表达。结果在球形毛钉期,毛囊隆突区最为明显;位于毛囊隆突区的干细胞有uPA/uPAR的表达。结论球形毛钉期是研究人毛囊干细胞的较佳期;uPA/uPAR的表达与毛囊干细胞的增殖、迁移和细胞间信号传递有关。

DADS负调控uPAR/uPA信号抑制人结肠癌SW480细胞侵袭和EMT

目的探讨二烯丙基二硫(DADS)抑制人结肠癌SW480细胞侵袭和上皮间质转化(EMT)的可能机制。方法免疫组化检测结肠癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)受体(uPAR)的表达。基因转染技术构建uPAR过表达细胞。实验分为SW480组、SW480+DADS组、uPAR组、uPAR+DADS组。迁移、侵袭实检测各组细胞迁移与侵袭能力。RT-PCR、Western blotting分别检测相关信号通路分子mRAN及其蛋白的表达。裸鼠实验验证DADS对uPAR过表达SW480细胞移植瘤的影响。结果结肠癌组织中uPAR表达显著高于癌旁正常黏膜组织(P<0.05)。成功构建稳定uPAR过表达SW480细胞。uPAR过表达上调uPA、uPAR表达,而DADS下调uPA、uPAR表达。uPAR过表达增强细胞迁移、侵袭能力,DADS抑制uPAR过表达细胞的迁移、侵袭能力。DADS通过下调Vimentin、基质金属蛋白酶(MMP-9)表达,上调E-cadherin、组织金属蛋白酶抑制物(TIMP)-3表达抑制SW480细胞EMT。裸鼠实验结果显示,DADS可体内抑制uPAR过表达SW480细胞EMT。结论DADS通过负调控uPAR/uPA信号体内外抑制人结肠癌SW480细胞侵袭和EMT。

靶向uPA-uPAR系统在肿瘤治疗中的研究进展

uPA-uPAR系统在多种肿瘤组织中表达增高,该系统不但可促进细胞外基质蛋白降解,而且可以与玻连蛋白、整合素等结合参与细胞内信号转导,从而介导肿瘤的发生与发展。近年来,一系列靶向uPA-uPAR系统的方案在肿瘤治疗中取得了显著效果,并且其中部分药物已经进入临床试验阶段,为肿瘤的靶向治疗提供了新思路。本文拟从靶向uPA-uPAR系统的基因治疗、药物治疗和免疫治疗等方面的研究进展进行综述。

小鼠触须毛囊外根鞘细胞的体外培养及uPA和uPAR表达研究

目的 建立小鼠毛囊外根鞘细胞的体外培养方法及研究尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体 (uPA uPAR)的表达。方法 建立以毛囊真皮鞘细胞为滋养层 ,培养外根鞘细胞并对uPA uPAR的表达进行免疫细胞化学鉴定。结果 外根鞘细胞在此滋养层上生长较好 ,并有uPA uPAR的表达。结论 毛囊真皮鞘细胞是外根鞘细胞较好的滋养层 。

uPA／uPAR系统与恶性肿瘤侵袭转移的关系

肿瘤细胞的侵袭和转移是一个多步骤、多环节过程，涉及瘤细胞穿越细胞外基质屏障、血管壁的基底膜及穿出血管壁进入宿主微循环的过程。大量事实证明，癌细胞侵袭转移能力与其诱导产生蛋白溶解酶降解细胞外基质、基底膜的能力密切相关。细胞外基质可分成基底膜和间质组织，它们都是由基底物（糖蛋白、蛋白多糖）、弹性蛋白和胶原构成的致密网络，在肿瘤的浸润转移中它们起到屏障作用。肿瘤组织中一些蛋白水解酶的高表达，尤其是uPA／uPAR系统被认为在肿瘤的侵袭转移过程中具有重要作用。

骨关节炎滑膜uPA,uPAR,tPA表达及意义

目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)和组织型纤溶酶原激活物(tPA)在OA的发生发展中的意义。方法采用免疫组化方法检测滑膜组织中uPA,uPAR,tPA的表达。结果40例OA滑膜中阳性表达uPA31例(775%)、uPAR22例(55%)、tPA37例(925%)。10例对照滑膜中阳性表达uPA2例(20%)、uPAR1例(10%)、tPA8例(80%)。阳性表达主要分布在滑膜衬里层细胞。结论uPA系统可能参与介导软骨降解。促进OA的发生发展;而tPA可能与OA关系不密切。

uPA、uPAR、nm23-H1在大肠癌中的表达及其与肿瘤侵袭和转移的关系

目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)、尿激酶型纤溶酶原激活剂受体(uPAR)和nm23H1基因蛋白在大肠癌中的表达及其与肿瘤侵袭和淋巴结转移的关系。方法应用免疫组化SABC法,对121例大肠癌手术根治标本进行uPA、uPAR和nm23H1基因蛋白测定。结果uPA、uPAR和nm23H1阳性表达率分别为62%、74%和48%。uPA和uPAR高表达与大肠癌侵袭和淋巴结转移关系密切(P<0.05)。nm23H1基因蛋白的低表达与大肠癌分化程度和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。大肠癌中uPA和nm23H1蛋白表达呈负相关(P<0.05)。结论uPA、uPAR和nm23H1基因蛋白表达与大肠癌侵袭和转移有显著相关性;同时检测uPA和nm23H1表达状况,可作为预测大肠癌淋巴结转移及预后的有用指标。

食管癌中uPA、uPAR蛋白表达及其临床意义

目的探讨食管癌中uPA、uPAR蛋白表达与临床病理因素间的关系及其对单纯放疗预后的影响。方法应用免疫组化SP法检测59例食管癌和41例食管癌旁组织中uPA、uPAR蛋白表达情况,分析蛋白表达与临床病理因素间的关系及其对食管癌放疗预后的影响。结果59例食管癌组织中uPA、uPAR蛋白阳性表达率分别为76.27%、77.97%,41例食管癌旁组织中阳性表达率分别为48.78%、43.90%,癌组织和癌旁组织中两种蛋白的阳性表达率比较差异均有统计学意义(P<0.01)。胸部CT扫描显示食管病变层面椎前三角形间隙消失者uPA蛋白强阳性表达率为70.37%,明显高于三角形间隙存在者的43.75%,两者比较差异有统计学意义(P=0.040)。发生远处转移者uPA蛋白阳性表达率比无远处转移者也显著升高,分别为100%和68.89%,两者比较差异有统计学意义(P=0.042)。进一步分析发现uPA、uPAR蛋白表达与食管癌预后未见明显相关性,而uPA、uPAR两种蛋白的表达呈显著性正相关。结论食管癌中uPA蛋白高表达可能与肿瘤局部浸润及远处转移的发生有关。

抗骨增生片对兔骨关节炎滑膜病理形态及uPA、uPAR表达的影响

目的探讨抗骨增生片治疗骨关节炎是否与改变滑膜组织形态以及下调尿激酶型纤溶蛋白酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)的表达有关。方法 30只健康雄性日本大耳白兔随机分成正常对照组、模型对照组,抗骨增生片组。用1.6%木瓜蛋白酶膝关节腔内注射,建立兔膝骨关节炎模型。灌胃4周后,观察滑膜组织病理形态学变化,免疫组织化学法测定uPA、uPAR的表达情况。结果抗骨增生片组滑膜组织病理总积分明显低于模型对照组;抗骨增生片组uPA、uPAR的表达低于模型对照组。结论抗骨增生片治疗膝骨关节炎可能与抑制uPA、uPAR的表达,抑制滑膜炎症的进一步发展,修复滑膜损害有关。

骨关节炎滑膜uPA、uPAR、PAI-1表达及意义

探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)和其抑制剂(PAI-1)在OA的发生发展中的意义。方法:采用免疫组化方法检测OA滑膜组织中uPA,uPAR,PAI-1的表达。结果显示:36例OA滑膜中阳性表达uPA 29例(80.56%)、uPAR 25例(69.44%)P、AI-1 27例(75.00%)。21例对照滑膜中阳性表达uPA 6例(28.57%)、uPAR 6例(28.57%)、PAI-1 3例(14.29%)。实验组与对照组间3种蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.05);再将实验组按年龄及软骨破坏程度分组,按年龄分组3种蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05);按软骨破坏程度分组3种蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.05)。阳性表达主要分布在滑膜衬里层细胞。结论:uPA系统可能参与介导软骨降解、促进OA的发生发展;而PAI-1则通过抑制uPA活性延缓OA的发生发展。

乳腺癌组织中uPA、uPAR及nm23-H1的表达

目的 观察乳腺癌组织中uPA、uPAR、nm2 3 H1的表达并探讨与腋窝淋巴结转移的关系。方法 用免疫组化EnVi sion两步法检测 6 9例乳腺癌组织中uPA、uPAR和nm2 3 H1表达的分布情况 ,观察其与肿瘤的分化程度以及与腋窝淋巴结转移的关系。结果 (1)uPA阳性表达定位于癌细胞胞质 ;uPAR和nm2 3 H1阳性表达定位于癌细胞胞膜及胞质 ,多数癌旁乳腺上皮细胞呈nm2 3 H1阳性表达 ;高分化乳腺癌 (Ⅰ级 )uPA和uPAR表达阳性率 (30 0 %和 2 5 0 %)低于中低分化乳腺癌 (Ⅱ、Ⅲ级 ) (分别为 6 8 1%、72 7%和 70 0 %、74 1%) (P <0 0 5 ) ;nm2 3 H1表达阳性率在乳腺癌组织不同分化程度间差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;(2 )腋窝淋巴结有转移者uPA和uPAR的表达阳性率 (73 2 %和 75 6 %)高于无淋巴结转移者 (35 7%和35 7%) (P <0 0 5 ) ;有腋窝淋巴结转移者nm2 3 H1的表达阳性率 (2 4 4 %)显著低于无淋巴结转移者 (5 0 0 %) (P <0 0 5 ) ;uPA、uPAR和nm2 3 H1的表达与淋巴结转移的个数均无关 ;(3)uPA阳性表达的癌组织其nm2 3 H1表达阳性率 (15 0 %)低于uPA阴性表达的癌组织 (6 2 1%) (P <0 0 5 )。结论 uPA和uPAR的高表达与乳腺癌腋窝淋巴结转移密切相关 ;uPA、uPAR和nm2 3 H1可以作为乳腺癌侵袭与淋巴结转移的?

AP-1及其相关基因uPA、uPAR在肺癌中的表达及其意义

研究AP-1及其相关基因uPA、uPAR在人肺癌中的表达及其与肺癌临床病理特征的关系.通过免疫组织化学方法检测101例肺癌组织及7例正常肺组织中AP-1、uPA、uPAR的表达情况,利用CMIAS2000型多功能真彩病理图像分析系统测量计算各病例中c-jun、c-fos、uPA、uPAR蛋白阳性细胞的平均光密度(DAO)和积分光密度(DIO).c-jun、c-fos在肺癌组织中表达的阳性率及其共表达率均显著高于正常肺组织;二者在NSCLC的表达显著强于SCLC;不同组织学类型肺癌中二者表达具有显著性差异,腺癌中表达最强,小细胞肺癌中表达最弱;c-jun、c-fos与肺癌分级、合并分期、淋巴结转移均呈显著正相关.uPA、uPAR与肺癌淋巴结转移密切相关,与合并分期呈显著正相关;uPAR与肺癌分级呈显著正相关;各指标之间均存在显著正相关关系.研究结果表明uPA、uPAR参与了肺癌侵袭转移,AP-1信号传导通路在该过程中起了重要调节作用.

超负荷血糖对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响及其uPA、uPAR的表达

目的 观察超负荷血糖对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响,并探讨其机制。方法 用Wistar大鼠腹腔内注射链脲佐菌素,建立超负荷糖尿病大鼠模型,之后做大脑中动脉脑缺血再灌注模型。然后对大鼠进行神经功能评分,进行脑梗死体积计算并且采用免疫组织化学和RT- PCR的方法检测超负荷血糖大鼠和正常大鼠脑缺血3h再灌注2 4 h u PA(尿激酶型纤溶酶原激活物)、u PAR(尿激酶型纤溶酶原激活物受体)的表达,并与假手术正常对照组比较。结果 超负荷血糖组大鼠神经功能评分明显高于非超负荷血糖组,超负荷血糖组梗死面积明显大于非超负荷血糖组;同时,前者u PA、u PAR的表达明显高于后者。结论 超负荷血糖加重了大鼠脑缺血再灌注损伤,超负荷血糖诱发的u PA、u PAR的表达增高可能是其加重脑缺血再灌注损伤的机制之一。

uPA、uPAR在尿路移行细胞癌中的表达及意义

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活物 (urokinase- type plasminogen activator,u PA)及其受体 (u PAreceptor,u PAR)在尿路移行细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学 Pic Ture TM通用型二步法检测 5 0例肾盂输尿管癌、4 0例膀胱癌组织中 u PA和 u PAR的表达及分布。结果 随着肿瘤分级、分期的增高 ,u PA和 u PAR的表达水平明显增高 (P均 <0 .0 5 ) ;肾盂输尿管和膀胱癌组织中 u PA、u PAR阳性表达明显高于癌周组织 (P<0 .0 5 ) ,且 u PA阳性表达与 u PAR阳性表达有高度正相关性 (r=0 .979,P<0 .0 1)。结论 u PA、u PAR的共同表达是尿路移行细胞癌的特征之一 ,与其浸润和转移情况密切相关 ,可作为预后重要指标。

乳腺癌患者血浆uPA、uPAR检测的临床意义

目的探讨血浆uPA、uPAR水平在乳腺癌侵袭和转移评定的临床意义。方法采用ELISA方法,测定经组织病理学确诊的女性乳腺癌初治患者50例和健康女性体检者20例的血浆uPA、uPAR水平。结果乳腺癌患者血浆uPA、uPAR水平明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.001);血浆uPA、uPAR水平随原发肿瘤的增大、腋淋巴结的转移以及分期而增高(P<0.05)。结论乳腺癌患者血浆uPA和uPAR的水平增高,与分期、腋淋巴结转移及原发肿瘤的大小密切相关,是乳腺癌侵袭和转移判定的有意义的指标。

Cathepsin B、uPA和uPAR基因在肝细胞肝癌中的表达、相互关系及作用

目的:探讨肝细胞肝癌(HCC)组织中组织蛋白酶B(CB)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)基因的表达、相互关系及作用,并分析其机制。方法:应用RT-PCR方法测定71例肝组织标本,包括对照组(C)12例,HCC组34例和癌旁组织(PTT)组25例的CB mRNA、uPA mRNA、uPAR mRNA表达,分析其间的相关性。结果:HCC组CB mRNA、uPA mRNA、uPAR mRNA表达均明显高于C组和PTT组,差异有显著性(P<0.01),PTT组与C组间差异均无显著性(P>0.05)。CB mRNA与uPA mRNA(r=0.805),CB mRNA与uPAR mRNA(r=0.786),uPA mRNA与uPAR mRNA(r=0.874)之间均存在显著的正相关关系(均P<0.01)。结论:肝癌组织CB mRNA、uPA mRNA、uPAR mRNA均呈现高表达,它们之间可能相互诱导,协同促使肝癌的侵袭和转移。

急性髓系白血病中uPA和uPAR的表达及意义

目的观察急性髓系白血病人骨髓单个核细胞uPAR(CD87)的表达及血浆uPA的水平,并探讨其临床意义。方法用ELISA法测定22例急性髓系白血病患者(观察组)及34例良性血液病患者(对照组)血浆中uPA表达水平,用流式细胞学技术测定骨髓单个核细胞uPAR水平,比较两组之间的表达差异。结果血浆中uPA水平和骨髓单个核细胞uPAR水平急性髓系白血病组均高于良性血液病组,差异具有显著性(P<0.05);pearson相关分析显示uPA表达水平及uPAR水平之间存在正相关性(观察组r1=0.614,对照组r2=0.921;P<0.05)。结论急性髓系白血病患者血浆uPA水平及骨髓单个核细胞uPAR表达均升高,二者具有协同表达关系,联合检测对于急性髓系白血病的病情监控和预后分析有临床指导意义。