UPLC波长切换法快速检测市售饮料中的12种添加剂

建立超高压液相色谱(UPLC)配备二极管阵列检测器(DAD)快速测定市售饮料中的安赛蜜、苯甲酸等12种添加剂残留量的检测方法。12种添加剂在0.1~20μg·mL^(-1)浓度范围内线性良好;相关系数均大于0.999;检测限在0.009~0.026μg·mL^(-1)之间;回收率(三水平)范围为95.4%~102.4%;精密度(n=6)在5.0%以内。方法具备简便、快速等特点,可以用于常见市售饮料中防腐剂、甜味剂和人工色素的检测。

人毛发中14种常见毒品及其主要代谢物的UPLC-MS/MS分段离子切换法测定

目的建立同时测定人毛发中14种常见毒品及其主要代谢物的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。方法毛发样品经冷冻研磨成粉后甲醇超声提取。色谱柱为ACQUITY UPLC HSS C18柱,流动相为含20 mmol/L乙酸铵的0.1%甲酸水溶液-甲醇溶液,流速为0.3 ml/min,电喷雾离子源,采用多反应监测,结合正、负离子切换分段扫描分析。四氢大麻酸采用负离子模式检测,其余化合物采用正离子模式检测。结果毛发中吗啡、6-单乙酰吗啡、可待因、海洛因、氯胺酮、3,4-亚甲二氧基甲基苯丙胺、3,4-甲二氧基苯异丙胺、苯丙胺、甲基苯丙胺、可卡因、苯甲酰芽子碱、度冷丁、四氢大麻酚、四氢大麻酸的浓度分别在0.05~10.00(r=0.9964),0.05~10.00(r=0.9912),0.05~10.00(r=0.9967),0.05~10.00(r=0.9933),0.02~10.00(r=0.9961),0.02~10.00(r=0.9938),0.05~10.00(r=0.9782),0.05~10.00(r=0.9900),0.02~10.00(r=0.9974),0.02~10.00(r=0.9949),0.02~10.00(r=0.9959),0.02~10.00(r=0.9957),0.10~20.00(r=0.9887),0.10~20.00 ng/mg(r=0.9911)内,线性关系均良好;最低检测限分别为0.01、0.01、0.01、0.02、5.00×10^-3、5.00×10^-3、0.02、0.02、5.00×10^-3、5.00×10^-3、5.00×10^-3、5.00×10^-3、0.05和0.05 ng/mg。日内、日间精密度(RSD)均<20%;提取回收率均>55%,RSD均<15%。结论该方法灵敏、快速、准确、专属性强,可用于毛发中14种常见毒品及其主要代谢物的定性筛查和含量测定。

UPLC波长切换法同时测定桑叶中6种指标成分的含量

目的采用超高效液相色谱(UPLC)波长切换法同时测定桑叶中新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷的含量。方法以Waters BEH shield RP18为色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸(B)为流动相,梯度洗脱;柱温40℃,全波长扫描(190~400 nm),波长切换(0~3 min,325 nm,检测新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸;3~8 min,358 nm,检测芦丁、异槲皮苷、紫云英苷)。结果桑叶中新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷6种活性成分在8 min内分离效果理想,质量浓度分别在17.24~33.91μg/ml(r=0.999),23.01~45.68μg/ml(r=0.999),50.93~121.93μg/ml(r=0.999),11.91~54.11μg/ml(r=0.999),13.99~60.00μg/ml(r=0.999),4.83~24.67μg/ml(r=0.999)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率(n=6)为99.28%~103.75%,RSD≤3.3%,供试品溶液在室温条件下24 h内稳定,RSD<2.4%。11个不同产地桑叶中新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷6个成分的含量分别为0.86~1.7,1.15~2.28,2.55~6.10,0.60~2.71,0.70~3.00,6.1~16.97 mg/g。结论该方法操作简单,结果准确,专属性强,可为桑叶药材的质量控制标准提高提供参考。

蜘蛛香UPLC指纹图谱研究

目的:建立蜘蛛香UPLC指纹图谱,为其质量控制提供科学依据。方法:采用Ultimate~? UHPLC Polar-RP色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长为327 nm(0~11 min)和256 nm(11~30 min);流速为0.21 mL/min;柱温为30℃。通过相似度评价、聚类分析、主成分分析、偏最小二乘判别分析法对21批蜘蛛香指纹图谱进行分析。结果:建立了蜘蛛香的UPLC指纹图谱,确定了25个共有峰,指认了9个成分,其中16批样品相似度大于0.900,所有样品可分成2类,并发现缬草三酯、绿原酸、异绿原酸A、乙酰缬草三酯、异绿原酸C是样品间差异较大的5个成分。结论:UPLC指纹图谱结合化学模式识别能较好地反映蜘蛛香的整体质量,可为蜘蛛香质量控制和评价提供参考。

UPLC同时测定蜘蛛香中9种成分

目的建立UPLC法同时测定蜘蛛香Valeriana jatamansi Jones中新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、橙皮苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、乙酰缬草三酯、缬草三酯的含有量。方法蜘蛛香70%甲醇提取液的分析采用Ultimate^■UHPLC Polar-RP色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱;检测波长327 nm(0~11 min)、256 nm(11~30 min);体积流量0.21 mL/min;柱温30℃。结果9种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9999),平均加样回收率103.54%~108.28%,RSD 0.70%~2.20%。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于蜘蛛香的质量控制。

UPLC波长切换法同时测定小陷胸汤中4种指标性成分的含量

目的基于超高效液相色谱(UPLC)波长切换法构建小陷胸汤中腺苷、巴马汀、小檗碱、葫芦素B等4种指标性成分的含量测定方法。方法固定相为Poroshell 120 EC-C_(18)(3.0 mm×150 mm,2.7μm)色谱柱;流动相为A相为0.1%甲酸-水,B相为0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱(0~6 min,B:5%→8%;6~9 min,B:8%→35%;9~12 min,B:35%→50%),检测波长0~10 min,262 nm;10~12 min,234 nm,柱温46℃,流速0.6 mL·min^(-1)。结果小陷胸汤中4个成分腺苷、巴马汀、小檗碱、葫芦素B分别在0.017~0.17、0.073~0.73、0.15~1.50、0.01~0.10 mg·mL^(-1)范围内呈良好线性关系;平均加样回收率分别为100.0%、100.6%、101.2%、99.1%,RSD均小于3.0%(n=6);4种成分的含量分别为0.052~0.061、0.24~0.30、0.49~0.59、0.033~0.045 mg·g^(-1)。结论该方法精密度高、重复性好、稳定性好、简便高效,可用于小陷胸汤的质量控制。

UPLC双波长切换法测定银黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷的含量

目的：建立UPLC双波长切换法同时测定银黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷三个组分含量的方法。方法：采用Agilent Eclipse Plus-C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.8μm）,流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液,梯度洗脱,流速：0.2 ml·min^-1,波长切换,0-5 min在324 nm波长测定绿原酸含量,5-12 min在277 nm波长测定黄芩苷、连翘苷的含量。结果：绿原酸、黄芩苷、连翘苷分别在浓度39.4-355.0μg·ml^-1（r=0.999 7）、90.0-810.0μg·ml^-1（r=0.999 9）、9.4-84.6μg·ml^-1（r=0.999 5）范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为99.44%、98.82%、98.64%。结论：该法简便,可靠,准确,可作为测定银黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷含量的方法。

UPLC波长切换法同时测定桂龙咳喘宁片中5种成分的含量

目的:建立超高效液相色谱(UPLC)波长切换法同时测定桂龙咳喘宁片中芍药苷、盐酸小檗碱、药根碱、肉桂酸、桂皮醛5种成分的含量。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~10 min,85%A;10~13 min,10%A;13~15 min,85%A);波长:0~1.8 min,230 nm;1.8~6.0 min,345 nm;6.0~9.0 min,285 nm;9.0~12.0 min,345 nm;流速:0.4 ml·min^(-1);柱温:30℃;进样量:5μl。结果:芍药苷、盐酸小檗碱、药根碱、肉桂酸、桂皮醛的线性范围分别是0.060~1.202μg(r=0.999 9)、0.100~2.010μg(r=0.999 9)、0.040~0.794μg(r=0.999 4)、0.015~0.302μg(r=0.999 9)、0.042~0.850μg(r=0.999 9);平均加样回收率分别为99.63%、99.26%、100.17%、98.80%、100.26%,RSD分别为0.39%、0.97%、0.73%、1.00%、0.71%(n=6)。结论:该方法操作简单,重复性好,可用于桂龙咳喘宁片的质量控制。

UPLC波长切换法同时测定山茱萸中7个成分的含量

目的:建立UPLC波长切换法同时测定山茱萸中没食子酸、齐墩果酸、熊果酸、莫诺苷、当药苷、马钱苷和山茱萸新苷的含量。方法:采用Waters Acquituplc BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以乙腈-0.3%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.5 ml·min-1,检测波长为273 nm(没食子酸)、240 nm(当药苷、马钱苷、山茱萸新苷)、360 nm(齐墩果酸、熊果酸),柱温30℃,进样量2μl。结果:没食子酸、齐墩果酸、熊果酸、莫诺苷、当药苷、马钱苷和山茱萸新苷检测质量浓度的线性范围分别为3.484~48.771,7.514~105.191,3.078~43.087,26.687~373.623,1.497~20.953,16.816~235.424,2.669~37.366μg·ml^-1(r为0.9993~0.9999);平均加样回收率分别为99.4%,100.4%,98.8%,99.5%,101.5%,100.2%,100.1%(RSD<2.0%,n=6);精密度、重复性、稳定性(24 h)试验的RSD<2.0%(n=6)。结论:该方法简单、有效、结果准确,可用于山茱萸中7个成分含量的同时测定。

UPLC波长切换法同时测定银花感冒颗粒中5种成分的含量

目的:建立超高效液相色谱波长切换法同时测定银花感冒颗粒中绿原酸、连翘苷、连翘酯苷A、甘草酸铵、5-O-甲基维斯阿米醇苷5种成分的含量。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,波长为327 nm(0~3.0 min)、330 nm(3.0~7.0 min)、254 nm(7.0~8.5 min)、277 nm(8.5~10.0 min)、237 nm(10.0~13.0 min),流速为0.4 ml·min^-1,柱温为25℃。结果:绿原酸、连翘苷、连翘酯苷A、甘草酸铵、5-O-甲基维斯阿米醇苷分别在0.009~0.452,0.005~0.234,0.005~0.228,0.013~0.645,0.005~0.276μg(r≥0.9994)范围内线性关系良好,平均加样回收率为99.9%~102.4%,RSD≤1.5(n=6)。结论:建立的UPLC方法操作简单,重复性好,可用于银花感冒颗粒的质量控制。

UPLC-DAD波长切换法同时测定复方红衣补血口服液中6种多酚类化合物的含量

目的:建立超高效液相色谱-DAD波长切换法同时测定复方红衣补血口服液中咖啡酸、没食子酸、对羟基肉桂酸、阿魏酸、儿茶素、表儿茶素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Waters Symmetry C_(18)(4.6 mm×150 mm, 3.5μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液(梯度洗脱),流速为0.5 mL·min^(-1),检测波长为250 nm(咖啡酸、没食子酸、对羟基肉桂酸、阿魏酸)、280 nm(儿茶素、表儿茶素),柱温为30℃,进样量为5μL。结果:咖啡酸、没食子酸、对羟基肉桂酸、阿魏酸、儿茶素、表儿茶素线性范围分别为2.35~235.00μg·mL^(-1)(r=1.000 0)、0.20~20.00μg·mL^(-1)(r=0.999 8)、0.27~27.00μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、0.63~63.00μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、1.80~180.00μg·mL^(-1)(r=1.000 0)、0.26~260.00μg·mL^(-1)(r=0.999 9);定量限分别为105、100、135、315、90、130 ng·mL^(-1),检测限分别为36、33、45、105、30、43 ng·mL^(-1);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2.0%;平均加样回收率分别为98.56%(RSD=2.26%,n=9)、97.94%(RSD=1.54%,n=9)、97.23%(RSD=2.19%,n=9)、98.54%(RSD=1.08%,n=9)、98.26%(RSD=1.22%,n=9)、98.06%(RSD=2.00%,n=9)。结论:该方法简单、准确、重复性好,可用于复方红衣补血口服液中咖啡酸、没食子酸、对羟基肉桂酸、阿魏酸、儿茶素、表儿茶素含量的同时测定。

UPLC波长切换法同时测定西红花中西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ和苦番红花素含量

目的:建立UPLC波长切换法同时测定西红花中西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ和苦番红花素的含量。方法:采用超高效液相色谱法,选用Waters ACQUITY UPLC~HSS T3(2.1mm×100mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈(B)-水溶液(A)为流动相进行梯度洗脱,流速0.4mL/min,柱温25℃,进样量2μL;采用波长切换法检测:0～6min,254nm,苦番红花素;6～20min,440nm,西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ。结果:苦番红花素、西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ分别在1.91～61.00μg/mL,1.48～47.36μg/mL和0.89～28.70μg/mL浓度范围内与峰面积积分线性关系良好,相关系数均为0.999 8;平均加样回收率(n=6)及相应的RSD分别为99.07%(2.30%)、102.74%(2.32%)和96.52%(1.39%)。结论:建立的UPLC波长切换法同时测定西红花各指标性成分的含量简便可靠、专属性良好、重复性好、精密度高,可为西红花的等级评价及质量控制提供一定的科学依据。

UPLC-PDA波长切换法同时测定红参和黑参中麦芽酚及17种皂苷的含量

建立了UPLC-PDA波长切换法同时测定红参和黑参中麦芽酚及17种皂苷含量的方法,并比较红参和黑参2种不同人参加工品之间的质量差异。采用Waters HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 m L·min^(-1),柱温30℃,进样量2μL,波长切换方式0~11 min为273 nm,11~60 min为203 nm。对多批次红参和黑参样品含量测定结果进行聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA),评价其质量差异性。结果显示,18种目标成分在一定质量浓度范围内均呈良好的线性关系,相关系数(r)均大于0.999 1;精密度、重复性和稳定性的相对标准偏差(RSD)均小于5.0%;平均加样回收率为95.93%~104.2%,RSD为1.8%~4.2%。定量测定结果显示红参和黑参样品间存在一定差异,并且HCA和PCA这2种分析方式均可直观区分红参和黑参2类人参加工品。该方法准确、可靠、重复性好,可用于红参和黑参中麦芽酚及17种皂苷成分的含量测定,同时为红参和黑参的质量评价和综合利用提供基础资料。

An UPLC-MS/MS method for simultaneous determination of multiple constituents in Guizhi Fuling capsule with ultrafast positive/negative ionization switching

Guizhi Fuling capsule(GFC), a traditional Chinese medicine(TCM) with effects of promoting blood circulation and dissipating blood stasis, has been widely used in the clinic. Because of the complex matrix and various chemical structure types, quality control of GFC remains great challenge. In the present study, an ultra performance liquid chromatography hybrid triple-quadrupole mass spectrometry(UPLC-QQQ MS) method with ultrafast positive/negative ionization switching was developed for simultaneous determination of 18 bioactive components in GFC, including methyl gallate, ethyl gallate, oxypaeoniflorin, benzoic acid, albiflorin, paeonolide, paeoniflorin, 1, 2, 3, 4, 6-pentagalloylglucose, mudanpioside C, benzoyloxypaeoniflorin, benzoylpaeoniflorin, pachymic acid, amygdalin, cinnamaldehyde, paeonol, cinnamic acid, 4-hydroxybenzoic acid, and gallic acid. Separation was performed on an Agilent Zorbax Extend–C18 column(2.1 mm × 50 mm, 1.8 μm), using a gradient elution with acetonitrile and water containing 0.1% formic acid. Cholic acid was selected as the internal standard. This newly developed method was fully validated for linearity, precision, accuracy, and stability, and then applied to quality assessment of GFC. Finally, the batch-to-batch reproducibility of GFC samples was evaluated by the cosine ration and Euclidean distance method, which showed high quality consistency. The results demonstrated that the developed method provided a reasonable and powerful manner for quality control of GFC.

波长切换-超高效液相色谱法检测女珍颗粒中特女贞苷、蟛蜞菊内酯和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量

目的建立检测女珍颗粒中特女贞苷、蟛蜞菊内酯和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的波长切换-超高效液相色谱法(UPLC)。方法色谱柱:Agilent Eclipe SB C_(18)液相色谱柱;检测波长:225 nm(特女贞苷)、352 nm(蟛蜞菊内酯)、276 nm(β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁);柱温:30℃;流速:1.0 mL·min^(-1);进样量:10μL;流动相:5mL·L^(-1)冰醋酸溶液(A)-乙腈(B);梯度洗脱。用外标法定量检测。结果特女贞苷、蟛蜞菊内酯和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁质量浓度分别在0.475~47.5、0.0972~9.72、0.196~19.6μg·mL^(-1)范围内与其峰面积线性关系良好;加标回收率分别为98.8%、99.3%、100.4%;重复性RSD值(n=6)分别为1.2%、0.91%、1.3%。结论建立的方法具有快速、准确等特点,可用于女珍颗粒中成药的质量控制,为其测定标准的提高提供技术参考。

液相色谱-串联质谱法测定复方罗布麻片Ⅰ中9种成分含量

目的建立液相色谱-串联质谱法同时测定复方罗布麻片Ⅰ中9种成分的方法。方法采用ACQUITY UPLC BEH C 18色谱柱,以水:甲醇(均含0.05%甲酸)50∶50进行梯度洗脱。采用多反应监测,正负离子自动切换模式,流速:0.3 mL·min^(-1),进样量2μL。结果硫酸双肼屈嗪、防己诺林碱、粉防己碱、绿原酸、盐酸异丙嗪、蒙花苷、芦丁、金丝桃苷、氢氯噻嗪的线性范围分别为1.26~17.61μg·mL^(-1)、0.139~5.55μg·mL^(-1)、0.285~8.55μg·mL^(-1)、0.161~6.45μg·mL^(-1)、1.57~21.95μg·mL^(-1)、0.183~5.50μg·mL^(-1)、0.252~7.57μg·mL^(-1)、0.135~5.40μg·mL^(-1)、1.67~23.45μg·mL^(-1)(r为0.9975~0.9998);平均加样回收率为87.1%~98.7%,RSD为2.0%~4.1%(n=6)。结论该方法可简化提取步骤,操作简单、有效,结果准确,可实现多组分同时测定。

UPLC法同时测定丹参中11种成分的含量

目的:建立同时测定丹参中丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸A、二氢丹参酮、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA11种化学成分含量的方法。方法:采用超高效液相色谱(UPLC)法。色谱柱为BEH C18(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为0.5%甲酸溶液-乙腈(梯度洗脱),流速为0.4 ml/min,检测波长为265 nm和280 nm。结果:该方法可在14 min内完成一次色谱分析,11种成分色谱峰之间有良好的分离度,各成分的质量浓度与各自峰面积积分值之间呈良好的线性关系,精密度、重复性、稳定性及加样回收率试验的RSD<2.0%。结论:该方法快捷、准确、重复性好,能同时测定丹参药材与饮片中11种成分的含量,可用于更全面地控制丹参的质量和丹参的相关研究。

复方甘草口服溶液中7种成分的UPLC-MS/MS分段离子切换法测定

建立了超高效液相色谱-串联质谱泫同时测定复方甘草口服溶液中的7种化学成分。采用AcquityUPLCHSSC18色谱柱，以5mmol／L乙酸铵水溶液（含0．08％甲酸）：0．1％甲酸乙腈溶液为流动相，梯度沈脱。采用多反应监测，结合正负离子分6段进行扫描。甘草酸和甘草苷采用负离子模式检测，吗啡、可待因、带巴冈、邡可丁和罂粟铖采用正离子模式检测。上述7种化学成分的峰面积和浓度在测定浓度范围内线性关系良好，平均加样回收率为93．8％～109．5％，RSD为2．4％～4．8％。

复方罗布麻片Ⅰ中7种成分的UPLC-MS/MS分段离子切换法测定

建立了超高效液相色谱．串联质谱法同时测定复方罗布麻片I中的氢氯噻嗪（1）、防己诺林碱（2）、粉防己碱（3）、芦丁（4）、金丝桃苷（5）、氯氮革（6）和异丙嗪（7）。采用Acquity UPLC HSSC18色谱柱，以水：甲醇（均含0．01％甲酸）为流动相，梯度洗脱。采用多反应监测，结合正负离子分段扫描。2、3、6、7采用正离子模式，1、4、5采用负离子模式。1～7分别在0．770～48．650、0．090～5．360、0．110～6．560、0．009～0．534、0．020～1．248、0．391～25．000和0．800～50．800μg／ml范围内线性关系良好。平均加样回收率为93．6％～105．3％，RSD为2．6％～4．3％。

替吉奥胶囊中3种成分的UPLC-DAD波长切换法测定

建立了超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UPLC-DAD)波长切换法同时测定替吉奥胶囊中的替加氟(1)、吉美嘧啶(2)和奥替拉西钾(3)3种主要成分。采用Accucore-C_(18)色谱柱,以0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液(pH 4.0)∶甲醇(90∶10)为流动相,切换波长检测,检测波长分别为240 nm(0～3 min,3),214 nm(3～6 min,2),272 nm(6～10 min,1)。结果 1～3分别在10～100、2.9～29和9.8～98μg/ml范围内线性关系良好,1～3的平均回收率(n=9)分别为97.8%、99.1%和99.5%,RSD分别为2.77%、1.56%和1.72%。