正交试验优化烟草中高级脂肪酸的皂化条件及UPLC/ELSD分析

建立了超高效液相色谱/蒸发光散射检测器(UPLC/ELSD)测定烟草中6种高级脂肪酸的方法,其最佳条件为:Waters UPLC BEH C18柱,乙腈-乙酸水溶液(体积比80∶20)梯度洗脱,流速0.3 mL/min,漂移管温度为50℃,气体流速为2.89 L/min。对温度、时间、pH值、萃取剂体积等影响因素进行了研究,并通过正交试验系统地分析了各因素的影响,获得了最佳皂化条件,即:皂化温度60℃,氢氧化钾浓度3 mol/L,二氯甲烷15 mL,反应时间为60 min。方法的线性范围为42.4～520.0 mg/L,检出限为3.64～11.98 mg/L,相对标准偏差为4.9%～13.5%,烟草样品的回收率为83%～104%。

HPLC-ELSD法和UPLC-MS/MS法评价石斛夜光丸中人参投料掺伪情况

目的建立石斛夜光丸中人参混淆品(西洋参)掺伪的检测方法,考察样品中人参的投料情况。方法分别采用HPLC-ELSD和UPLC-MS/MS法进行分析测定。HPLC-ELSD法:采用CAPCELL PAK C18 MGⅢ(S-5)(4.6 mm×250 mm,5μm)柱,以乙腈-水为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),柱温30℃,ELSD漂移管温度为105℃,气体流速为3.0 L·min^(-1);UPLC-MS/MS法:采用电喷雾离子源(ESI-),多反应监测(MRM)模式。结果91批石斛夜光丸中有35批样品检出西洋参。结论所建立方法专属性、重复性、稳定性、耐用性良好,可为石斛夜光丸中人参的质量控制与评价提供可靠方法。

UPLC-ELSD法测定黄芪中的黄芪甲苷含量

采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1mm×100mm,1.7μm),流动相为乙腈-水(30∶70),流速为0.2mL·min-1,柱温30℃,用UPLC-ELSD法测定黄芪中黄芪甲苷的含量。黄芪甲苷在0.10-0.50mg·mL-1范围内有良好的线性关系(r=0.9990),平均回收率(n=6)为98.9%。该方法快速、准确、重复性好,为黄芪的质量控制提供了一种快速准确的检测方法。

UPLC-ELSD法测定芪白平肺胶囊中黄芪甲苷

目的建立芪白平肺胶囊（黄芪、人参、川芎、地龙、五味子、葶苈子和薤白）中黄芪甲苷的UPLC—ELSD测定方法，并以黄芪甲苷为指标，评价该制剂的提取工艺。方法应用半仿生（SBE）与水提（WE）法对芪白平肺胶囊进行提取，采用超高效液相色谱法一蒸发光散射检测器（UPLC—ELSD）测定不同提取方法中黄芪甲苷的量，以此为指标，评价两种提取方法的优劣；色谱条件AcquityUPLCBEHC18（2．1mm×500mm，1．7μm）色谱柱；乙腈一水（33：67）为流动相；体积流量为0．3mL／min；柱温30℃；ELSD参数：漂移管温度为80℃。结果黄芪甲苷在1．08—2．43μg范围内呈良好的线性关系（r=0．9999，n=6），平均加样回收率为99．05％，RSD为0．58％，应用UPLC—ELSD法测定两种不同提取方法的黄芪甲苷含量分别为0．2848mg／mL，0．2360mg／mL。结论该方法中流动相乙腈-水的比例适合于芪白平肺胶囊中黄芪甲苷的测定。

UPLC-ELSD同时测定白酒中六种甜味剂方法初探

采用超高效液相色谱-蒸发光散射检测器建立了一种可同时测定6种甜味剂的方法。针对白酒中甜味剂的检测,样品前处理简单,测定一个样品仅需4min,方法快速、准确,同时可以避免测定结果中假阳性的干扰。该检测方法的回收率达到89%～105%。除甜菊糖苷线性相关系数稍差,r>0.9891外,其他5种甜味剂的线性相关系数均r>0.9917;标准偏差(RSD)为4.6%。安赛蜜检出限为6mg/L,阿斯巴甜和甜蜜素检出限为7.5mg/L,纽甜、糖精检出限为6.5mg/L,甜菊糖苷检出限为10mg/L。

玉米种子中4种可溶性糖含量UPLC-ELSD测定方法的优化及其应用

对比了HPLC-RID法和UPLC-ELSD法对果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖4种可溶性糖的检测。结果表明:UPLC-ELSD法的分离效果、重复性、灵敏度等比HPLC-RID法好,确定了UPLC-ELSD法测定4种糖含量的技术参数,即流动相为0.2%(w/v)三乙胺溶于75%(v/v)乙腈,流速为0.2 m L/min,柱温为35℃,上样量为2μL,在6 min内可以灵敏、快速地检测出果糖等4种可溶性糖。利用UPLC-ELSD法测定玉米种子吸胀过程中蔗糖、麦芽糖、葡萄糖和果糖4种可溶性糖的含量,结果表明:胚乳在吸胀之前,仅检出蔗糖、葡萄糖和果糖,其中蔗糖含量最高,随着种子吸胀,蔗糖含量先下降后上升,而葡萄糖和果糖逐渐增加,吸胀48 h时检出麦芽糖。胚在吸胀之前,4种可溶性糖均可以检测到,且含量均显著高于胚乳,在吸胀过程中4种糖的变化规律与胚乳相似。因此,在玉米种子吸胀过程中,可能先动员蔗糖分解成葡萄糖和果糖,再动员贮藏物质合成蔗糖、麦芽糖、葡萄糖和果糖,为种子萌发生长提供能量和中间物质。

UPLC-ELSD法测定人参中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量

建立超高效液相色谱-蒸发光散射法,同时测定人参中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的含量。色谱柱:ACQUITYUPLCBEHAmide(2.1mm 100mm,1.7 m);流动相:0.2%三乙胺乙腈溶液和水梯度洗脱;流速:0.2m L/min;检测器:ELSD;漂移管温度:75℃;氮气压:30psi。果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖在0.1mg/m L^0.8mg/m L内有良好的线性关系,精密度RSD<5.0%,回收率>96.0%。本方法在7min内完成了4种糖的分离,结果比较理想,可作为人参中小分子糖的质量控制和安全评价的测定方法。

HPLC-DAD/ELSD、UPLC-MS/MS分析复方五仁醇胶囊中皂苷类成分

目的:分析复方五仁醇胶囊中皂苷类成分。方法:分别采用HPLC-DAD/ELSD、U-PLC-MS/MS检测,通过与对照品色谱图比对及比较制剂和对照品提取离子流色谱图(EIC),并通过质谱图相关离子峰分析,鉴别制剂中的皂苷类成分。结果:HPLC-DAD/ELSD检测出三七皂苷R1、人参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1,未检测到柴胡皂苷A和D;UPLC-MS/MS除检测到上述3种三七皂苷类成分外,还检测到柴胡皂苷D,但柴胡皂苷A仍未检测到。结论:复方五仁醇胶囊中存在三七和柴胡所含皂苷类成分。

HPLC-ELSD法联合UPLC-MS/MS法检测鱼腥草注射液中非法添加的庆大霉素

为检测鱼腥草注射液中非法添加的庆大霉素,建立了以HPLC-ELSD进行初筛,UPLCMS/MS进行确证并定量的系统方法。十八烷基键合硅胶为填充剂,0.2mol/L三氟醋酸-甲醇(92∶8)流动相作为HPLC-ELSD初筛条件。以0.1%甲酸乙腈溶液-0.1%甲酸水溶液(10∶90)为流动相,流速0.3mL/min,在电喷雾离子化电离源上以多反应监测方式进行正离子检测,建立UPLC-MS/MS检测方法,用于定量分析的离子对为m/z478.6→157.1(庆大霉素C_1)。结果表明,庆大霉素C_1在0.15~1.35μg/mL浓度范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,线性方程为y=5519.3x+879.24,R=0.9965。庆大霉素C_1在鱼腥草注射液中检测限为0.15g/L。

UPLC-ELSD与UPLC-PDA测定山银花中绿原酸的含量对比

目的:比较两种检测方法优劣,为丰富山银花药材质量控制方法提供参考。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C18(2.1×100mm,1.7μm)色谱柱,流动相乙腈(A)-0.4%醋酸(B),梯度洗脱(0~2 min,7%A;2~2.3 min,7%A^28%A;2.3~10 min,28%A;10~10.5 min,28%A^7%A),梯度流速(0~2~2.3~2.6~2.8~4~4.3~4.5~10.5min,0.35~0.35~0.25~0.15~0.1~0.2~0.3~0.35~0.35ml/min),PDA(二极管阵列检测器)λ=330 nm;ELSD检测器,漂移管温度60℃,喷雾器48℃,增益值100,气体流速20psi,柱温50℃。结果:PDA检测绿原酸在0.3045~1.5225μg(R2=0.9994)质量范围内线性关系良好,ELSD检测绿原酸在0.3045~1.5225μg(R2=0.9993)质量范围内线性关系良好。结论:PDA检测器检测时受噪音影响较小,基线较平稳,测得的数据比ELSD检测器更准确。

不同海拔芭蕉根药材UPLC-ELSD的指纹图谱分析

为更好地开发、利用芭蕉根药材,对不同海拔芭蕉根药材的UPLC-ELSD指纹图谱进行分析,采用Agilent ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18（2.1 mm×100mm,1.8μm）色谱柱,0.1％乙酸水-乙腈洗脱系统,梯度洗脱,流速0.2 mL/min,蒸发光散射检测器（ELSD）检测,雾化温度为45℃,载气氮气流速1.5 L/min测定15批不同海拔的芭蕉根药材,对其进行聚类分析和相似度评价.结果表明：在不同海拔（298.52～1 357.82m）采集的芭蕉根药材的UPLC-ELSD指纹图谱有较好的相似度,芭蕉根中弱紫外吸收和缺少发色基团的化学成分的种类较统一；系统聚类分析可将芭蕉根药材归为4类,提示不同海拔的芭蕉根药材的质量存在较大差异.结论：建立的指纹图谱测定方法稳定、重复性好,可为芭蕉根药材的开发、利用及质量控制提供参考.

UPLC-ELSD法测定芪白平肺胶囊中人参皂苷Rb_1的含量

目的建立超高效液相色谱—蒸发光散射检测器法（UPLC-ELSD法）检测芪白平肺胶囊中人参皂苷Rb1含量的方法。方法 UPLC-ELSD法;色谱柱：Waters Acquity UPLC BEH C18柱（2.1 mm×50 mm,1.7μm）;检测器：Acquity ELSD检测器;流动相：乙腈—水梯度洗脱;流速：0.3 m L·min^-1;进样量：2μL;漂移管温度：80℃;柱温：30℃。结果人参皂苷Rb1在0.24-1.20μg范围线性关系较好（r=0.998 4,n=5）;平均回收率为96.88%（RSD=1.28%）。结论该方法准确、快速,适用于芪白平肺胶囊中人参皂苷Rb1含量测定。

SPE-UPLC-ELSD法测定柴胡中柴胡皂苷a、d的含量

目的:应用超高效液相色谱-蒸发光散射(UPLC-ELSD)检测柴胡中柴胡皂苷a、d的含量。方法:采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);以乙腈(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0～3 min,43%A;3～9 min,43%A→63%A);流速:0.2 mL·min-1;柱温:30℃;ELSD检测器漂移管温度为40℃,气体压力为40 psi,测定柴胡中柴胡皂苷a、d的含量。结果:柴胡中柴胡皂苷a在浓度为64.2～385.2μg·mL-1(r=0.9994)内线性范围良好;柴胡皂苷d在浓度为67.3～403.8μg·mL-1(r=0.9992)内线性范围良好。结论:该方法简便、灵敏、可靠、准确、重现性好,可作为柴胡的质量控制方法。

UPLC-ELSD法同时测定鸦胆子中两种脂溶性成分的含量

目的 建立同时测定鸦胆子药材中1,2-油酸-3-亚油酸甘油酯和甘油三油酸酯两种脂溶性成分含量的方法。方法 采用UPLC-ELSD法,色谱柱为Thermo Accucore XL C18柱（250 mm×2.1 mm,4μm）;流动相为乙腈-二氯甲烷（体积比70∶30）;流速为0.4 m L·min-1;柱温为30℃;进样量为4μL;漂移管温度为45℃;雾化器载气压为0.276 MPa。结果 1,2-油酸-3-亚油酸甘油酯和甘油三油酸酯进样量分别在0.509～2.55μg（r=0.999 6）和0.685～3.42μg（r=0.999 1）内线性关系良好,平均加样回收率分别为97.5%和99.5%,RSD分别为1.7%和2.3%（n=9）。结论 建立的方法可用于同时测定鸦胆子中1,2-油酸-3-亚油酸甘油酯和甘油三油酸酯的含量,为控制鸦胆子药材质量提供试验依据。

UPLC-ELSD法测定疏肝健脾颗粒中黄芪甲苷的含量

目的建立疏肝健脾颗粒中黄芪甲苷的含量测定标准。方法采用UPLC-ELSD法,Agilent proshell C 18 色谱柱(2.1×100mm,2.7μm),乙腈-0.1%甲酸水溶液(40∶ 60)为流动相,流速0.2mL·min^-1 ,进样量2μL,柱温35℃,漂移管温度100℃,氮气2.0mL·min^-1 ,增益1;共测定10批疏肝健脾颗粒中黄芪甲苷的含量。结果 10批样品中,黄芪甲苷的含量在1.236~2.576mg·g ^-1 范围内;结论本研究所用方法快速、准确、高效,能够科学、有针对性地评价疏肝健脾颗粒的含量。

HPLC-ELSD和UPLC-MS/MS法考察复方金银花颗粒中金银花投料规范性

目的:建立高效液相-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)和超高效液相-质谱联用法(UPLC-MS/MS)对复方金银花颗粒中山银花成分灰毡毛忍冬皂苷乙进行检查,对制剂中金银花投料的规范性进行研究。方法:以山银花的特征组分灰毡毛忍冬皂苷乙为检测指标,采用HPLC-ELSD法进行限度检查,色谱柱:Agilent Zorbax Eclipse Plus C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.4%乙酸溶液,梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;蒸发光散射检测器。采用UPLCMS/MS法对结果进行验证,以m/z 1399.8→633.2和m/z 1399.8→795.2作为检测离子对,电喷雾正离子模式(ESI+),多反应监测(MRM)。结果:30批次样品中,有15批次检出灰毡毛忍冬皂苷乙特征组分,说明市售的该制剂品种中存在以山银花替代金银花投料的情况。结论:建立的该方法可以很好地控制复方金银花颗粒中金银花投料的规范性。

基于UPLC-ELSD测定法优选扶正消瘤饮提取工艺的研究

目的优选扶正消瘤饮最佳提取工艺。方法采用正交设计法,以加水量、提取时间、提取次数为考察因素,以干膏量和黄芪甲苷含量为指标因素,运用UPLC-ELSD法进行含量测定。结果扶正消瘤饮的最佳提取工艺为:药材加8倍量水,提取两次,每次1.5 h。结论经过三批验证,该工艺稳定可行,为该制剂进一步生产和质量标准的制定奠定了基础。

UPLC-ELSD法测定参芪茯苓片中黄芪甲苷的含量

目的:建立参芪茯苓片中黄芪甲苷的含量测定标准。方法:采用超高效液相-蒸发光散射法,Agilent proshell C18色谱柱(2.1×100 mm,2.7μm),流动相:乙腈-水,流速:0.2 mL·min^(-1),进样量:2μL,柱温:30℃,漂移管温度:40℃,气体压力:30 psi,氮气:0.2 mL·min^(-1),增益:30;测定参芪茯苓片中黄芪甲苷的含量。结果:黄芪甲苷在0.2003~1.0015μg范围内呈良好线性关系,线性回归方程:Y=1.9225x+4.6687,R^(2)=0.9998,平均回收率为103.18%,RSD为0.57%,平均含量为0.2435 mg·g^(-1)。结论:所采用的方法准确、重复性好,为参芪茯苓片中黄芪甲苷的含量测定奠定实验基础。

皖贝母与贝母类药材生物碱含量测定与分析

目的分析皖贝母与5种贝母类药材的总生物碱及贝母辛等6个生物碱成分,为皖贝母药用提供依据。方法采用紫外分光光度法测定总生物碱含量,并建立超高效液相色谱-蒸发光散射检测器(UPLCELSD)同时测定皖贝母与5种贝母类药材中贝母辛、西贝母碱苷、西贝母碱、贝母甲素、贝母乙素、异浙贝甲素6个生物碱成分含量的方法,采用聚类分析和主成分分析对18批贝母类药材进行分类。结果皖贝母的总生物碱含量显著高于其他贝母,聚类分析及主成分分析将皖贝母与浙贝母和湖北贝母分为一类。结论皖贝母生物碱成分与浙贝母和湖北贝母相似,可作为药用栽培品种。

HPLC和UPLC-MS/MS法考察清热解毒口服液中金银花投料规范性

目的:建立HPLC-ELSD和UPLC-MS/MS法,对清热解毒口服液中金银花投料的规范性进行考察。方法:以山银花的特征成分灰毡毛忍冬皂苷乙为检测指标,采用HPLC-ELSD法进行限度检查,色谱柱:SUPELCO DISCOVER C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水,梯度洗脱;流速:1.0 ml·min^(-1);柱温:30℃;进样量:10μl;采用UPLC-MS/MS法对结果进行验证,以m/z 1397.5→1073.4、m/z 1397.5→911.3作为检测离子对,离子化模式为ESI-,进行多反应监测。结果:19批次样品中,有7批次检出灰毡毛忍冬皂苷乙,说明市售该制剂品种中存在以山银花替代金银花投料的情况。结论:所建立的方法可以有效地控制清热解毒口服液中金银花投料的规范性。