骨碎补UPLC指纹图谱与人骨肉瘤细胞MG63中碱性磷酸酶活性的谱效关系研究

建立骨碎补生品和砂烫品提取物的UPLC指纹图谱,并研究骨碎补提取物与人骨肉瘤细胞MG63中碱性磷酸酶(ALP)活性之间的谱效关系。采用UPLC法建立骨碎补生品和烫品的指纹图谱并通过UPLC-Q-TOF MS法对其化学成分进行鉴别;通过测定MG63细胞中ALP活性检测骨碎补提取物对MG63细胞成骨分化的影响;采用灰色关联度分析、双变量相关性分析以及偏最小二乘回归分析法分析骨碎补生品和烫品的UPLC特征指纹峰与其促ALP活性之间的谱效关系。在标定的12个共有峰中,确定了4、5、12号峰与ALP活性呈正相关,其对应的物质依次是咖啡酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、儿茶素7-葡糖苷、柚皮苷,为深入研究骨碎补的促成骨分化活性物质基础提供依据。

不同产地石吊兰药材UPLC指纹图谱及化学计量学分析

目的:建立不同产地石吊兰药材UPLC指纹图谱,结合相似度评价、聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘回归分析等化学计量手段评价不同产地石吊兰药材品质,为其质量控制研究提供方法参考和基础数据。方法:通过UPLC梯度洗脱建立65批次石吊兰药材的指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A版)对石吊兰UPLC指纹图谱进行相似度评价,并采用聚类分析、主成分分析以及正交偏最小二乘判别分析对石吊兰品质进行综合评价。结果:标定了15个共有峰,并指认了10个共有峰;65批样品与对照指纹图谱的相似度在0.316~0.954之间;聚类分析将65批样品分为两大类;主成分分析筛选出累积方差达79.202%贡献率的5个主成分,并通过各主成分载荷得到每个批次的综合得分,以反映综合质量;正交偏最小二乘判别分析筛选出黔产、滇产、桂产石吊兰的差异性成分为苯乙醇苷类和黄酮类成分。结论:建立的石吊兰UPLC指纹图谱结合化学计量学评价方法,简便可行,可为综合评价不同产地石吊兰药材的质量提供参考。

续断及其配方颗粒的UPLC指纹图谱研究

目的:建立续断药材及配方颗粒的UPLC指纹图谱,为续断配方颗粒质量控制提供有效方法。方法:采用UPLC同时测定10批续断药材和10批配方颗粒,制定指纹图谱。色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 (2.1 mm × 100 mm, 1.8 μm);流速0.2 mL·min−1;检测波长212 nm;柱温30℃;进样量1 μL;流动相:0.1%磷酸水(A)-乙腈(C)二元梯度洗脱。结果:10批续断药材有25个共有色谱峰,10批续断配方颗粒有32个共有色谱峰,10批续断药材与10批配方颗粒确定25个共有峰,各峰之间分离度较高。10批续断药材和10批配方颗粒的相似度均大于0.8,10批配方颗粒的相似度大于0.9。结论:建立的续断药材和配方颗粒指纹图谱稳定可靠,药材与配方颗粒的色谱峰个数有较大的差异,说明药材经提取、浓缩、制粒等制备工艺后,化学成分有所变化,存在差异。

防城金花茶叶片的生药学及UPLC指纹图谱

采用性状鉴别和显微鉴别方法,观察防城金花茶(Camellia nitidissima var.phaeopubisperma)的原植物形态、组织结构、粉末特征;采用超高效液相色谱(UPLC)并运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统建立防城金花茶液相指纹图谱,运用SIMCA-P14.1软件对其化学成分进行主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析。性状鉴别结果显示,防城金花茶叶展开后呈椭圆形、长椭圆形、矩圆形或卵圆形,薄革质、两面均无毛,叶脉网状,边缘有细锯齿或锯齿。叶肉组织散有大型分枝状不规则石细胞和草酸钙簇晶;导管有环纹导管及螺纹导管,气孔不定式。超高液相指纹图谱显示,供试防城金花茶样本化学成分谱存在差异;基于化学成分差异,采用主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析可将防城金花茶样本分成2大类,维生素B6、去氧肾上腺素、芦丁、咖啡碱、金丝桃苷是区分2种指纹类型的主要标志性成分。

基于UPLC指纹图谱和化学计量学的不同熏硫程度白芷质量评价

目的建立白芷UPLC指纹图谱,结合化学计量学方法寻找不同熏硫程度白芷质量差异的标志物。方法该药物的分析采用月旭Xtime UPLC C 18色谱柱(4.6 mm×150 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1%乙酸,梯度洗脱;体积流量0.35 mL/min;柱温35℃;检测波长305 nm。采用中药指纹图谱相似度评价软件进行相似度评价,结合聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析对白芷样品进行全面的质量评价。结果共得到11个共有峰,并通过对照品比对出其中7个(白当归素、氧化前胡素、异欧前胡素、欧前胡素、珊瑚菜素、佛手柑内酯、水合氧化前胡素);33批样品指纹图谱的相似度为0.735~0.997。聚类分析仅将白芷样品聚为3类;主成分分析将样品分为3类,与4种熏硫程度分类一致。正交偏最小二乘法-判别分析筛选出5种差异性成分,经对照品比对,确定了其中2种差异性成分,分别为氧化前胡素、水合氧化前胡素。3种主成分含量测定结果为欧前胡素0.444~3.725 mg/g,珊瑚菜素0.241~0.631 mg/g,异欧前胡素0.179~0.508 mg/g。结论该方法稳定可靠可用于不同熏硫程度白芷的质量控制。

基于化学计量学的通草水提物三氯甲烷部位 UPLC指纹图谱研究

目的:建立通草水提物三氯甲烷部位UPLC指纹图谱,并结合化学计量学进行分析。方法:采用Waters CORTECS T3(150 mm×2.1 mm,1.6μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱;流速为0.2 mL/min;检测波长为320 nm;柱温为35℃;进样量为3μL。通过聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘判别分析对16批通草进行质量评价和差异性分析。结果:建立的通草水提物三氯甲烷部位UPLC指纹图谱共标定17个共有峰;聚类分析和主成分分析结果一致;利用正交偏最小二乘判别分析筛选出7个差异性成分,可作为通草药材质量控制的标志物。结论:该研究建立的通草水提物三氯甲烷部位UPLC指纹图谱可较全面的表征其化学质量特征,指纹图谱的化学计量学分析可为通草质量标准的制定提供依据。

马鞭草药材UPLC指纹图谱建立及指标性成分的测定

建立马鞭草药材指纹图谱,并对4种有效成分的含量进行测定,为马鞭草药材质量控制提供参考。采用超高效液相色谱(UPLC)法建立马鞭草药材指纹图谱,并利用高分辨质谱对共有峰进行指认,以15批马鞭草药材指纹图谱共有峰的相对峰面积为变量,进行化学计量学分析,并对15批马鞭草药材有效成分戟叶马鞭草苷、马鞭草苷、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的含量进行测定。结果显示,马鞭草药材指纹图谱有16个共有峰,并指认出其中6个成分,聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA)将15批药材分为3类,正交偏最小二乘法-判别式分析(OPLS-DA)共筛选出7个VIP>1.0的差异性成分。含量测定结果显示,不同产区的马鞭草药材戟叶马鞭草苷、马鞭草苷、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的含量存在较大的差异。该方法能有效分析不同产地马鞭草药材的质量差异,为不同产地马鞭草药材质量的评价提供参考。

舒血宁注射液中15种黄酮醇苷测定及其UPLC指纹图谱建立

目的测定舒血宁注射液中槲皮素3-O-(2″,6″-α-L-二鼠李糖)-β-D-葡萄糖、杨梅素3-O-芸香糖苷、槲皮素3-O-α-L-鼠李糖-2″-(6-对香豆酰基)-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷、山柰酚3-O-(2″,6″-α-L-二鼠李糖)-β-D-葡萄糖、异鼠李素3-O-(2″,6″-α-L-二鼠李糖)-β-D-葡萄糖、芦丁、3′-甲基杨梅素-3-O-芸香糖苷、异槲皮苷、槲皮素3-O-(2″-β-D-葡萄糖)-α-L-鼠李糖苷、山柰酚3-O-芸香糖苷、水仙苷、丁香亭3-O-芸香糖苷、山柰酚3-O-(2″-β-D-葡萄糖)-α-L-鼠李糖苷、槲皮素3-O-[2′-O-(6″-O-对羟基-反式-香豆酰基)-D-葡萄糖基]-α-L-鼠李糖苷、山柰酚3-O-[2′-O-(6″-O-对羟基-反式-香豆酰基)-D-葡萄糖基]-α-L-鼠李糖苷的含量,并建立其UPLC指纹图谱。方法该药物70%甲醇溶液的分析采用Agilent Zorbax SB-C_(18)色谱柱(3.0 mm×150 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.35 mL/min;柱温40℃;检测波长360 nm。结果15种黄酮醇苷在各自范围内线性关系良好(R^(2)>0.9990),平均加样回收率97.00%~102.80%,RSD 0.46%~3.22%。10批样品指纹图谱中有23个共有峰,相似度均大于0.990。结论该方法简便准确,重复性好,可为舒血宁注射液的全面质量评价提供依据。

广藿香不同部位UPLC指纹图谱及化学模式识别研究

目的建立广藿香药材不同部位的UPLC指纹图谱,研究广藿香不同部位的质量差异。方法采用UPLC法建立广藿香不同部位化学指纹图谱,结合相似度评价、热图聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对18批广藿香药材、茎、叶的UPLC指纹图谱进行分析,并测定广藿香酮含量。结果18批广藿香药材及不同部位的UPLC指纹图谱均确定了9个相同的共有峰,并通过对照品指认4、6、9号峰分别为毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷和广藿香酮。CA和PCA结果表明广藿香叶和茎的质量差异大,叶和药材的质量较接近。OPLS-DA发现5种成分是造成不同批次样品质量差异的主要标志物。含量测定结果表明同一批广藿香中的广藿香酮含量均为茎>药材>叶。结论广藿香不同部位的化学成分相似,但含量存在显著性差异,本研究可为广藿香药材的质量控制及资源开发利用提供参考。

基于UPLC指纹图谱结合色度值的槐花炮制前后变化规律研究

目的分析槐花炮制前后UPLC指纹图谱与色度值的差异及动态变化规律,为槐花生品、炒槐花、槐花炭的鉴别及炮制工艺研究提供参考。方法建立槐花炮制前后样品的UPLC指纹图谱,采用分光测色仪测定色度值,结合相似度评价、单因素方差分析、聚类分析、主成分分析以及正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)等方法,研究槐花生品、炒槐花、槐花炭的差异性,同时分析槐花炮制过程中指纹图谱与色度值的动态变化规律。结果槐花炮制前后指纹图谱和色度值差异明显。槐花生品、炒槐花、槐花炭分别标定了15、16、14个共有峰,指认了峰2、峰3、峰8、峰9、峰10、峰11、峰14、峰15分别为5-羟甲基糠醛、原儿茶酸、芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、水仙苷、槲皮素、山柰素,其中峰1和峰2(5-羟甲基糠醛)为炮制后新增的特征峰,峰17则在炮制后缺失;槐花炮制前后色度值发生明显变化,其中槐花炭的色度值L^(*)、b^(*)、E^(*)远低于槐花生品和炒槐花,炒槐花的色度值a^(*)稍高于槐花生品和槐花炭,依据色度值可区分槐花生品、炒槐花和槐花炭样品;聚类分析和主成分分析均可将槐花生品、炒槐花和槐花炭进行区分;OPLS-DA结果表明,芦丁和槲皮素是槐花生品、炒槐花、槐花炭主要的差异成分(VIP值>1)。槐花生品在炮制46 min内,峰1~峰16的峰面积/称样量/1000比值均呈现先增大后减小的规律,峰17则呈现一直减小的规律。以饮片色泽为评价指标,炒制温度为160℃时,炒槐花、槐花炭的炒制时间应分别以4~6、14~18 min为宜。结论建立的UPLC指纹图谱和色度值的测定方法可为槐花生品、炒槐花、槐花炭的鉴别以及炮制工艺研究提供参考。

姜黄标准汤剂UPLC指纹图谱的建立和4种成分定量分析研究

采用超高效液相色谱法(ultra-high performance liquid chromatography, UPLC)建立姜黄标准汤剂指纹图谱并同时测定4种有效成分的含量,为姜黄标准汤剂质量标准的制定提供依据。建立姜黄标准汤剂指纹图谱,采用质谱分析和对照品比对,对共有指纹峰进行指认,借助化学计量学方法对16批样品指纹图谱进一步处理和分析。同时,对姜黄标准汤剂中姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素和阿魏酸的含量进行测定。结果显示,姜黄标准汤剂具有10个共有峰,指认出其中8个成分;聚类分析(hierarchical cluster analysis, HCA)和主成分分析(principal component analysis, PCA)将16批样品归为两类,正交偏最小二乘法-判别式分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis, OPLS-DA)共找到6个差异性标志物。含量测定结果显示,云南大理的姜黄原料制备的标准汤剂姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素及阿魏酸的含量要高于四川宜宾和乐山的样品。该方法准确可靠,能够为姜黄标准汤剂的质量评价提供参考。

基于多模式识别结合UPLC指纹图谱和色度值的槐花质量评价研究

目的:分析不同产地槐花UPLC指纹图谱的差异性以及与外观颜色的相关性。方法:测定16批不同产地槐花的指纹图谱和色度值,并进行相似度评价、聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别分析以及皮尔逊相关性分析。结果:建立了槐花UPLC指纹图谱,标定了15个共有峰,指认了其中6个成分。样品与对照图谱的相似度均大于0.990。16批样品聚为2类,河北、河南、云南产地的样品聚为第1类,安徽、山东产地的样品聚为第2类。主成分综合得分结果表明河北唐山产的槐花质量最优,经筛选得出色谱峰6(芦丁)、12(槲皮素)是引起不同产地槐花的分类差异的主要成分。皮尔逊相关性分析表明色谱峰6(芦丁)与L^(*)、E^(*)值呈极显著正相关。结论:该研究建立的UPLC指纹图谱和色度值测定方法可为槐花质量评价提供参考。

基于UPLC指纹图谱结合多成分定量的玉竹药材产地差异性评价

目的:基于UPLC指纹图谱,结合化学模式识别技术与多成分定量的方法寻找玉竹化学成分的变化规律,对湘玉竹、东玉竹、关玉竹药材质量进行综合评价。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱;以乙腈-0.25%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为0.3 mL/min;检测波长为280 nm;柱温为30℃;进样量为2μL。对34批玉竹UPLC指纹图谱进行相似度评价、主成分分析和偏最小二乘判别分析,对部分成分进行指认,并进行含量测定。结果:玉竹UPLC指纹图谱共标定16个共有峰,主成分分析结果显示不同产地玉竹的化学质量特征存在差异,大部分有明显的分开趋势,进一步采用偏最小二乘判别分析筛选出2、4~7、10号色谱峰所代表的化学成分是造成玉竹样品差异性的主要物质,并指认4、10号色谱峰分别为芦丁和山柰素。含量测定结果显示,湘玉竹中芦丁和山柰素的含量高于东玉竹和关玉竹。结论:该研究建立的玉竹UPLC指纹图谱结合多成分定量的方法可为建立系统完善的玉竹药材质量评价体系提供参考。

基于UPLC指纹图谱的穿心莲不同部位化学成分差异研究

目的建立UPLC指纹图谱比较穿心莲主茎、侧茎、叶3个部位化学成分的差异性,为穿心莲药材质量评价提供依据。方法采用CORTECS UPLC T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.6μm);以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱。运用相似度评价、热图聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法判别分析对14批(S1~S14)穿心莲主茎、侧茎、叶的UPLC指纹图谱进行研究。结果建立的UPLC指纹图谱中,穿心莲主茎、侧茎、叶均确定了13个共有峰,并指认出木犀草素-7-O-β-D葡萄糖醛酸苷、穿心莲内酯、新穿心莲内酯、14-去氧穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯5个特征峰;除S3、S7、S9外,穿心莲主茎、侧茎、叶UPLC指纹图谱与相应对照指纹图谱的相似度均>0.900;热图聚类分析和主成分分析结果均可区分主茎、侧茎和叶;正交偏最小二乘法判别分析筛选出了4个VIP值>1、P<0.05的差异性成分。结论本研究较为整体、全面、真实地反映了穿心莲不同部位化学成分的差异性,对穿心莲药材的质量控制及评价具有重要意义。

基于UPLC指纹图谱和含量测定法评价不同干燥温度对羌活药渣质量的影响

目的:建立UPLC指纹图谱和含量测定方法,评价不同干燥温度下羌活水提药渣的质量。方法:测定羌活药渣UPLC图谱以计算各共有峰的残存量,并结合聚类分析(CA)和主成分分析(PCA)优选最佳处理温度。建立含量测定方法以同时测得不同样品中羌活醇和异欧前胡素的含量。结果:CA和PCA得到相似的结论,将样品划分为三类。PCA综合评分表明60℃为样品的最适烘干条件,与含量测定结果一致。结论:本研究提供了稳定且具有专属性的指纹图谱和含量测定方法,并作为羌活药渣质量评价和后续开发的参考基础。

白芍药材及其配方颗粒的UPLC指纹图谱研究

目的:建立白芍药材及其配方颗粒的UPLC指纹图谱。方法:色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18 (2.1 mm × 100 mm, 1.7 μm),以0.05%磷酸水溶液–乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为0.1 mL/min;检测波长为254 nm;柱温为30℃;采用中药色谱指纹图谱评价系统进行相似度分析。结果:20批白芍药材及其配方颗粒的UPLC指纹图谱共确认11个共有峰,并指认出芍药苷和没食子酸两种化学成分。结论:该方法准确、可行、重现性好,反映白芍药材及配方颗粒多成分的整体面貌,可为白芍药材及其配方颗粒质量评价提供参考。

UPLC指纹图谱结合化学计量学的白花蛇舌草真伪鉴别研究

目的:建立白花蛇舌草及其伪品水线草的UPLC指纹图谱,结合化学计量学,进行真伪鉴别。方法:建立白花蛇舌草和水线草的UPLC指纹图谱,对主要色谱峰进行化学指认及快速检识,利用两者化学成分差异结合化学计量学分析,开展真伪鉴别。结果:分别建立了两者UPLC指纹图谱方法并评价了多批次的相似度;白花蛇舌草22个共有峰中的10个、水线草16个共有峰中的5个及4个非共有峰得到了指认或检识;主成分分析(PCA)可将真品、伪品分为两组;而偏最小二乘法分析(OPLS-DA)显示车叶草酸甲酯等5个色谱峰是分组的主要原因;白花蛇舌草中的(E)-6-O-阿魏酰鸡屎藤次苷甲酯、(Z)-6-O-香豆酰鸡屎藤次苷甲酯,水线草中的槲皮素-3-O-桑布双糖苷可作为两者的3个特征差异峰用于白花蛇舌草真伪鉴别。结论:将UPLC指纹图谱与化学计量学方法相结合,可用于白花蛇舌草真伪鉴别,从而为提高白花蛇舌草整体质量控制方法提供参考。

不同产地山楂与野山楂果实UPLC指纹图谱的建立及模式识别

目的建立不同产地山楂与野山楂果实的指纹图谱,并对其进行模式识别。方法山楂与野山楂果实70%乙醇提取物的分析采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);乙腈-0.1%磷酸为流动相;体积流量0.3 m L/min;检测波长350 nm;柱温35℃。以主成分分析(PCA)、正交偏最小方差判别分析(OPLS-DA)、相似度分析3种方法对实验数据进行分析。结果 20批样品UPLC指纹图谱中有18个共有峰,相似度除S9样品较低外,其他样品均在0.85左右;并对其中5个共有峰进行了化学成分指认,通过化学计量学分析方法将山楂和野山楂果实分成两类;且黄酮与酚酸类是其主要的差异标记物。结论该方法简便、快速、可靠,为山楂果实的的质量控制提供依据。

夏桑菊颗粒UPLC指纹图谱研究

目的:建立不同批次夏桑菊颗粒的指纹图谱。方法:采用UPLC,建立12批夏桑菊颗粒的指纹图谱。ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.5%醋酸溶液,梯度洗脱,柱温30℃,流速0.4 mL/min,检测波长320 nm,标定了16个色谱峰,分别采用相似度软件、聚类分析和主成分分析等方法,对12批样品进行系统的比较与归类。结果:建立了夏桑菊颗粒专属性的UPLC指纹图谱,将不同批次的样品分为6大类。结论:该方法重复性好,简便可靠,可用于夏桑菊颗粒的快速鉴别,可为夏桑菊颗粒的质量控制提供依据。

黄管秦艽UPLC指纹图谱研究

目的：建立黄管秦艽和大叶秦艽的UPLC指纹图谱,对两者指纹图谱进行相似度评价,为其质量控制提供有力依据。方法：超高效液相色谱法建立指纹图谱,色谱柱ACQUITY UPLCBEH C18柱（50 mm×2.1 mm,1.7μm）,流动相甲醇-0.04%磷酸溶液梯度洗脱,流速0.3 m L/min,检测波长242 nm,柱温30℃。采用＂中药色谱指纹图谱相似度评价系统＂（2004 A版）分析指纹区和特征峰。结果：标定了黄管秦艽13个共有峰,13批黄管秦艽药材都有较高的相似度（0.976~0.997）,用于指纹图谱适用性检验的大叶秦艽与黄管秦艽也有较高的相似度（0.998）。结论：该方法准确可靠,可用于黄管秦艽药材的质量控制。