黄连-黄芩药对化学成分的UPLC-PDA-MS分析

本文建立了黄连-黄芩药对化学成分的UPLC-PDA-MS分析方法。实验采用ACQUITY UPLC BEH C18柱,流动相为0.05%甲酸水和甲醇梯度洗脱;检测波长280 nm;MS一级全扫描模式。综合分析标准品及不同样品的色谱峰保留时间、紫外光谱及MS一级全扫描质谱图,归属了黄连-黄芩提取液中的12个主要色谱峰,鉴别出8种成分,推断出2种成分,同时对鉴别出的8种成分进行了定量,被测成分在线性范围内均具有良好的线性关系(r≥0.9991),精密度、重复性的RSD均小于5.0%,加样回收率基本在95%～105%内。本方法快捷、准确,重复性好,能同时测定8个主要化学成分,可较全面地控制黄连-黄芩药对化学成分的含量。

UPLC-PDA-MS鉴定经大孔树脂纯化美藤果壳酚类物质

以经大孔树脂纯化的美藤果壳酚类物质为原料,用预制硅胶板薄层层析法将其粗分为4个条带,富集各个条带中的物质后使用UPLC-PDA-MS检测,确定其中的酚类物质为:1号条带中有香草酸己糖苷,1,2-芥子酰阿魏酸酰龙胆二糖(待定),矢车菊素3-(6″-阿魏酰槐糖苷)-5-葡糖苷,锦葵花色素3-葡萄糖苷,锦葵花色素3-葡萄糖苷二倍体; 2号条带中有香草酸己糖苷,香草酸己糖苷三倍体以及香草酸己糖苷二倍体; 3号条带中有对羟基苯甲酸,羟基苯甲酸己糖苷,对香豆酸己糖苷以及对香豆酸四倍体; 4号条带中有对羟基苯甲酸以及对香豆酸。

UPLC-PDA-MS/MS测定红瓤核桃中花青苷类物质

采用超高效液相色谱-二极管阵列检测器串联质谱定性和定量检测方法对不同时期的红瓤核桃树叶片及果皮提取物进行初步分析。样品选取于河南农业大学园艺学院果树试验站,从发芽初期开始定期采红瓤核桃的叶片,采样分为3个时期(发芽初期、生长期、结果期),绿皮普通核桃叶片为对照,在果实成熟期分别取红瓤核桃和普通核桃果皮。液相色谱与质谱的检测结果表明:8种目标化合物的定量限为0.60~0.90μg/m L,在0~300μg/L范围内呈现良好的线性关系,相关系数(R^2)为0.999 0~0.999 6。采用该方法对不同时期的红瓤核桃叶片和果皮与普通核桃叶片和果皮进行分析,发现核桃果皮和叶片中的主要花青苷类物质的成分和含量的差异有统计学意义。该方法具有易操作、灵敏度高、重复性好、花青苷类物质的分析覆盖面广的特点,可用于核桃中花青苷类成分快速鉴定及含量测定。

淫羊藿炮制前后UPLC-PDA-MS的指纹图谱研究

建立了朝鲜淫羊藿和柔毛淫羊藿药材的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱分析方法,实验结果表明,两个品种的指纹图谱差别较大,朝鲜淫羊藿标出35个共有峰,质谱鉴定了26个峰,柔毛淫羊藿标出13个共有峰,质谱鉴定了9个峰;研究了朝鲜淫羊藿和柔毛淫羊藿炮制前后UPLC指纹图谱的变化规律,指纹图谱发生了五处变化.该法快速、简便,重现性好,从整体上显示淫羊藿药材和炮制品的特征,为淫羊藿的生品和炮制品的质量控制提供了有效手段.

基于UPLC-PDA-MS/MS技术的四逆散水煎液体内外物质基础研究

目的:采用液质联用技术,分析四逆散水煎液体外化学成分及血中移行成分,对其体内外物质基础进行研究。方法:采用ACQUITY UPLCTMBEH C18柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以乙腈-2 mmol.L-1醋酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.2 mL.min-1,柱温35℃;质谱采用ESI源,正负离子同时检测,在m/z 100～1 000进行扫描,并对特征离子进行2次裂解,获得二级质谱数据。结果:在四逆散水煎液中,检测到芍药苷、甘草酸、柴胡皂苷a及柚皮苷等20种化学成分。在体内样品中,发现芍药苷、柚皮苷、橙皮苷等8种成分以原型入血;同时还检测到6种代谢物,包括葡萄糖醛酸结合物、硫酸酯结合物及葡萄糖醛酸硫酸酯结合物等。结论:采用UPLC-PDA-MS/MS技术分析四逆散水煎液的体内外化学成分,能比较全面、快速地反映四逆散水煎液的体内外物质基础,为进一步研究四逆散的药效物质基础提供依据。

超高效液相色谱-二极管阵列检测-串联质谱法测定茶叶中15种黄酮醇糖苷类化合物

采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱,以含0.1%(v/v)甲酸的乙腈-水为流动相,梯度洗脱,建立了超高效液相色谱-二极管阵列检测-串联质谱(UPLC-PDA-MS/MS)联用技术测定茶叶中黄酮醇糖苷类化合物的方法。结合色谱保留时间、紫外光谱、一级和二级质谱参数等信息,在绿茶和红茶中共识别了15种黄酮醇糖苷类化合物,包括3种杨梅素糖苷、6种槲皮素糖苷和6种山柰素糖苷类化合物。定量分析中采用串联四极杆质谱检测,以槲皮素-3-葡萄糖-鼠李糖二糖糖苷(Q-GRh)为标准品,其他黄酮醇糖苷进行相对定量。结果表明,绿茶和红茶中黄酮醇糖苷类化合物的含量和分布差异显著,绿茶中的黄酮醇糖苷总量是红茶的1.7倍,绿茶中的黄酮醇糖苷主要以杨梅素-3-半乳糖糖苷(M-Ga)、杨梅素-3-葡萄糖糖苷(M-G)、槲皮素-3-葡萄糖-鼠李糖-葡萄糖三糖糖苷(Q-GaRhG)、槲皮素-3-半乳糖-鼠李糖-葡萄糖三糖糖苷(Q-GRhG)、山柰素-3-半乳糖-鼠李糖-葡萄糖三糖糖苷(K-GaRhG)和山柰素-3-葡萄糖-鼠李糖-葡萄糖三糖糖苷(K-GRhG)为主,而红茶中主要以Q-GRh、槲皮素-3-葡萄糖糖苷(Q-G)、山柰素-3-葡萄糖-鼠李糖二糖糖苷(K-GRh)和山柰素-3-半乳糖糖苷(K-Ga)为主。本方法简单快速,准确性好,可用于茶叶中黄酮醇糖苷类化合物的分析。

UPLC-PDA-QTOF/MS分析肌注胆木注射液后大鼠血浆中的分布

目的分析并鉴定大鼠肌肉注射胆木注射液后的主要入血的成分,初步探究其药效物质。方法采用UPLCPDA-QTOF/MS分析空白血浆、含胆木注射液血浆、胆木注射液和对照品,对比图谱中色谱峰保留时间以及离子碎片信息,解析成分的归属。结果以胆木注射液11个化学成分为参照,从大鼠血浆中鉴定了8个原形入血成分,分别是naucleamide A-10-O-β-D-glucopyranoside、短小蛇根草苷、3-表短小蛇根草苷、3α,5α-tetrahydrodeoxycordifoline lactam、naucleoxoside A、naucleoxoside B、异长春花苷内酰胺、喜果苷。结论 8个入血成分均为生物碱类成分,提示生物碱是胆木注射液可能的活性物质。

LC-MS/PAD法测定非法染色的中药蒲黄和黄芩饮片中金胺O

目的:建立快速、准确、高灵敏度的中药饮片中非法用金胺O染色的专属性检测方法。方法:采用LC-MS/PAD法,离子源为ESI源,正离子检测,通过相对分子质量、二级质谱碎片信息、液相色谱保留时间和PAD图谱4方面信息,对蒲黄、黄芩片中金胺O进行定性检测。结果:10批受试中药饮片中均检测到金胺O。结论:该方法选择性强、灵敏度高,可作为判断中药饮片是否经金胺O进行染色处理的有效检测方法。

“天麻胶囊”质量标准中补充检验吲哚美辛的方法

目的:建立天麻胶囊中非法添加吲哚美辛的检测方法。方法:采用TLC快速筛选、HPLC-PDA法进行定量检验以及UPLC-MS法进行结构确认。结果:建立的方法能鉴别并确认添加的吲哚美辛,灵敏度高,专属性好。结论:该方法简便、快速,结果准确,可用于检测天麻胶囊中非法加入的吲哚美辛成分。

聚多巴胺纳米纤维膜固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱检测淡水鱼中四环素类和氟喹诺酮类药物残留

制备聚多巴胺(PDA)修饰的聚苯乙烯纳米纤维膜(PS NFsM)作为固相萃取吸附介质,可快速提取淡水鱼中3种四环素类(四环素、金霉素、土霉素)和3种氟喹诺酮类(恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星)药物残留,结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS),建立了药物残留检测的新方法。利用静电纺丝法制备了聚苯乙烯纳米纤维膜,将其作为模板,通过自聚合作用,进行聚多巴胺功能化修饰,得到PDA-PS NFsM材料。对制得的PS NFsM和PDA-PS NFsM材料进行傅里叶红外光谱和场发射扫描电镜表征,证明PDA的成功修饰,修饰后的纳米纤维表面粗糙,呈现核-壳形貌,纤维内部为蜂窝状多孔结构。以空白加标样品的回收率为指标,对PDA-PS NFsM材料的用量、离子强度、样品溶液的流速、洗脱液和突破体积等影响SPE的因素进行考察及条件优化,确定了最佳的SPE条件。该方法对6种目标物的检出限为0.3~1.5μg/kg,定量限为1.0~5.0μg/kg,低于国家标准和行业标准;在各目标物的线性范围内均有良好的线性关系,决定系数(R2)大于0.999,方法的回收率为94.37%~102.82%,日间和日内的相对标准偏差(RSD)均小于10%,与国家标准和行业标准相当。通过固相萃取前后的基质效应对比,表明PDA-PS NFsM具有优秀的净化能力。最后,通过实际样品分析验证了方法的实际应用可行性。该文建立的基于PDA-PS NFsM材料的SPE方法是一种高效环保的方法,可为淡水鱼中药物残留的常规监测提供技术支持。

胃康灵胶囊中金胺O染色物的检测方法研究

目的:建立胃康灵胶囊中金胺O染色物的检测方法,并对其进行筛查,同时建立阳性样品中金胺O的含量测定方法。方法:采用UPLC-PDA法对胃康灵胶囊中的金胺O进行筛查,并采用UPLC-MS/MS二级质谱对阳性样品进行确证。结果:对来自37家企业的123批次样品进行筛查和确认发现:有6家企业的23批次样品中检出金胺O;金胺O进样在0.42~208.72 ng的范围内有良好的线性关系。胃康灵胶囊阳性样品中金胺O的含量在1.0~28.7μg·粒^(-1)。结论:本方法准确可靠,可作为胃康灵胶囊中金胺O染色物的检测方法。

基于UPLC-ABTS-PDA-Triple TOF/MS的辣木叶中抗氧化活性成分在线筛选

目的:采用在线活性分析方法研究辣木叶中的抗氧化活性成分。方法:针对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基,采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱和柱后衍生系统的方法,对辣木叶中化学成分及抗氧化活性成分进行检测。结果:从辣木叶水提物中共鉴定出化合物21个,其中有10个经对照品比对,发现主要的ABTS自由基清除活性化合物有6个,包括3个苯丙素类化合物(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸)和3个黄酮类化合物[芦丁、异槲皮苷和槲皮素3-O-(6?-丙二酰葡萄糖苷)]。线下ABTS自由基清除活性验证结果发现,芦丁和异槲皮苷的ABTS自由基清除活性优于阳性对照Trolox。结论:成功鉴定并验证了辣木叶中的抗氧化活性成分,为辣木叶的相关研究提供了物质基础。

UPLC-PDA-ESI/MS分析荭草中化学成分

目的：建立荭草药材中化学成分的超高效液相色谱-电喷雾质谱（UPLC-PDA-ESI/MS）分析方法。方法：采用ACQUITY UPLC系统,BEH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7μm）,乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,流速为0.3 mL.min^-1,梯度洗脱,检测波长190400 nm,柱温45℃。W aters电喷雾三重四级质谱仪,负离子检测模式,ESI喷雾电压3 kV,去溶剂气温度350℃,去溶剂气流量750 L.h^-1（N2）,锥孔气流量50 L.h^-1（N2）,扫描范围m/z1001 000。结果：荭草中化学成分获得了较好的分离和检测,共鉴定出1个酚酸类成分和11个黄酮类成分。结论：方法灵敏度高、分离度好,适用于荭草药材中化学成分的快速定性鉴定。

UPLC-PDA-ESI-MS分析杜仲中化学成分

目的：建立杜仲药材中化学成分的超高效液相色谱-电喷雾质谱（UPLC—PDA—ESI—MS）分析方法。方法：采用ACQUITYUPLC系统，BEHC18色谱柱（2．1mm×100mm，1．7μm），0．1％甲酸乙腈-0．1％甲酸水溶液为流动相，流速0．3mL·min-1，梯度洗脱，检测波长190～400nm，柱温45℃。Waters电喷雾三重四级杆质谱仪（TQD），负离子模式检测，ESI喷雾电压3kV，去溶剂气温度350℃，去溶剂气（N：）流量650L·h-1，锥孔气（N：）流量50L·h-1，扫描范围m／z100～1000。结果：杜仲中化学成分获得了较好的分离和检测，共鉴定出3个木脂素类、4个环烯醚萜类和4个苯丙素类成分。结论：所建方法灵敏度高、分离度好，适用于杜仲药材中化学成分的快速定性鉴定。

UPLC-MS/PDA检测中药制剂中醋酸泼尼松和醋酸地塞米松的研究

目的建立快速、准确、高灵敏度的测定中药平喘制剂中醋酸泼尼松和醋酸地塞米松检测的方法。方法采用UPLC-MS/PDA法,以甲醇-0.01mol·L-1醋酸铵(0.1%甲酸)缓冲溶液梯度洗脱,流速0.2mL·min-1,离子源为ESI源,正离子检测,对中药制剂中非法添加醋酸泼尼松和醋酸地塞米松进行定性定量分析,并对其裂解途径进行解析。结果6批受试制剂中有2批分别检测到有醋酸泼尼松和醋酸地塞米松。结论此方法选择性强、灵敏度高,可作为分析中药制剂中醋酸泼尼松和醋酸地塞米松的有效检测方法。

天麻胶囊质量标准中补充检验对乙酰氨基酚的方法

目的:建立检查"天麻胶囊中添加对乙酰氨基酚"的补充检验方法。方法:采用TLC法进行快速筛查;采用HPLC-PDA法进行定量检验,色谱柱为Polaris C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.6%醋酸(10∶90),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为243 nm,柱温为30℃;采用IR法进行快速鉴别;采用UPLC-MS法进行结构确认,色谱柱为Acquity UPLCBEHC18(50 mm×2.1 mm×1.7μm),流动相为0.1%甲酸-乙腈(5∶95),流速为0.4 mL.min-1。质谱条件采用正离子检测,电喷雾电离源(ESI),源电压为3.1 kV,毛细管温度为400℃,锥孔电压为30 V,鞘气流速为600 L.h-1,采用一级全扫描及二级全扫描方式,质量范围50～1000。结果:TLC法简便快速,专属性强,可作为非法添加的快速初筛;HPLC-PDA法可准确检验所添加对乙酰氨基酚的含量,所测5批样品中有3批检出,2批未检出;UPLC-MS法进行结构确认,特征性强,准确度高。结论:该方法适用于中成药中检测非法加入的对乙酰氨基酚成分,确证性强,灵敏度高。

中药及保健食品中PDE_5抑制剂检测的再研究

目的：尝试优化和建立可同时快速检测多种PDE5抑制剂类非法添加化学成分的方法。方法：分别采用TLC法、HPLC-PDA-MS联用及UPLC技术。TLC法：使用硅胶GF254薄层板，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（40：40：15：12）下层溶液为展开剂，254 nm和366 nm下观察。HPLC-PDA-MS法：采用Inertsil ODS-3（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，以0.01 mol·L^-1乙酸铵（A）-乙腈（B）为流动相，梯度洗脱（0～17 min，36%B；17～18 min，36%B→42%B；18～27 min，42%B；27～28 min，42%B→52%B；28～43 min，52%B；43～44 min，52%B→80%B），流速1 mL·min^-1，检测波长229 nm，UV光谱扫描（200～400 nm）;正离子模式，氮气为雾化和干燥气体，毛细管电压3 kV，锥孔电压60 V，气体流量80 L·h-1，离子源温度120℃，去溶剂温度200℃，去溶剂气体流量350 L·h-1。UPLC法：采用Waters BEH柱（2.1 mm×100 mm，1.8 μm）色谱柱，以甲醇（A）-水（B）为流动相，梯度洗脱（0～3 min，90%B→65%B；3～10 min，65%B→50%B；10～13 min，50%B→25%B；13～16 min，25%B；16～20 min，25%B→90%B），流速0.4 mL·min^-1，检测波长229 nm，UV光谱扫描（200～400 nm）。结果：在TLC检测中添加了366 nm作为检测波长，提高了检测的灵敏度与准确度;优化HPLC-PDA-MS法，获得了更好的8个PDE5抑制剂色谱峰的分离度;建立了快速准确的UPLC法，可在13 min内实现6个PDE5抑制剂的快速分离与检测。结论：该法可用于中药及保健食品中非法添加PDE5抑制剂类化合物的检测，具有高效、简便、专属性强等特点。

液质联用法测定七宝美髯丸中5种成分的含量

目的:建立UPLC-PDA-MS/MS法同时测定七宝美髯丸中二苯乙烯苷、阿魏酸、金丝桃苷、补骨脂素、异补骨脂素的含量。方法:采用InertSustain~C_(18)(3.0mm×100 mm,3.0μm)色谱柱,甲醇-0.05%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(-1),进样量10μL;PDA扫描范围:200~400 nm;质谱采用电喷雾离子源(ESI源),正负离子扫描切换,多重反应监测模式进行定量分析。结果:七宝美髯丸中5种成分在线性范围内峰面积与质量浓度均呈良好的线性关系,加样回收率为99.06%~102.24%,精密度RSD值小于2%。在所设定的色谱条件下,七宝美髯丸中5个成分(二苯乙烯苷、阿魏酸、金丝桃苷、补骨脂素和异补骨脂素)于10 min内完全分离。结论:建立的UPLC-PDA-MS/MS方法快速简便、精密度好、灵敏度高,可用于七宝美髯丸中多种成分的含量测定和质量控制。

治咳川贝枇杷滴丸的质量控制及其挥发性成分的测定

采用超高效液相色谱-光电二极管阵列法检测了治咳川贝枇杷滴丸及其相似处方制剂产品的指纹图谱,再用偏最小二乘法进行聚类分析评价研究。结果显示治咳川贝枇杷滴丸过期样品与市售产品间差异最大。继而采用全二维气相色谱-飞行时间质谱(GC×GC/TOF-MS)对治咳川贝枇杷滴丸中的挥发性成分进行定性定量分析。共确定了其中的74个成分,所鉴定的组分占挥发油色谱总馏出峰面积的90.19%。