基于UPLC-Q/Orbitrap/MS/MS对白虎加人参汤的全成分分析及化学成分鉴定

目的采用超高效液相串联-四极杆静电场轨道阱质谱(UPLC-Q/Orbitrap/MS/MS)技术,建立了一种高效的检测方法,对白虎加人参汤的化学成分进行了分析鉴定。方法采用Waters UPLC BEH C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,在0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液中以0.4 mL·min^(-1)的速度进行梯度洗脱,正负离子模式同时进行检测;根据一级高分辨质谱准确的质荷比数据、二级高分辨质谱碎片离子、色谱保留时间,结合文献报道,对检出的化合物成分进行鉴定。结果检测到74个化合物成分,包含黄酮类、生物碱类、查耳酮类、山酮类、酚类、苯丙素类、萜类、三萜类、环烯醚萜类、氨基酸类、芳香族化合物等。结论利用UPLC–Q/Orbitrap/MS/MS技术对中药复方鉴定,为其物效机制、药理作用及其质量控制的进一步研究提供了初步的理论依据。

基于UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS、网络药理学和实验验证探讨裸花紫珠抗H1N1活性成分及其作用机制

本实验首先对裸花紫珠的提取物进行萃取,得到不同的萃取部位,然后对各部位进行抗甲型流感病毒H1N1型(H1N1)活性筛选,确定裸花紫珠乙酸乙酯萃取部位(EACN)具有较好的体外抗H1N1的活性。采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱联用(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)技术对EACN进行定性分析。基于定性分析的结果,进一步使用数据挖掘和网络药理学,评估药物的活性成分、关键靶点和关键通路,最后使用H1N1感染BALB/c小鼠模型对预测结果进行验证。结果显示,在各个萃取部位中,乙酸乙酯部位体外抗H1N1效果最佳,半数抑制浓度(IC_(50))为51μg/mL,半数细胞毒浓度(CC_(50))为859.4μg/mL,选择指数(SI,CC_(50)/IC_(50))为16.85。从EACN中鉴定出34种化合物,在此基础上,利用网络药理学,筛选出和EACN抗H1N1相关的药物靶点67个,靶点共涉及生物过程491个,与抗H1N1相关的通路147个。H1N1感染BALB/c小鼠实验结果发现,EACN能改善H1N1感染引起的体重降低和肺指数的增加,降低小鼠肺组织的病毒载量,减轻小鼠肺组织的病理损伤,降低外周血血清中TNF-α、IFN-γ、IL-1β水平。实验结果提示EACN可能从直接抑制病毒、抗炎作用和免疫调节作用等多个途径发挥抗H1N1的作用。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS及GC-MS结合网络药理学和分子对接的彝药黑根抗类风湿性关节炎的药效物质研究

目的:探讨彝药黑根治疗类风湿性关节炎潜在的作用机制以及主要活性成分。方法:运用UPLC-Q-Orbitrap HRMS及GC-MS技术分析黑根的化学成分,利用Swiss Target进行活性成分的靶点筛选和预测,同时在Genecard、OMIM、Dis Ge NET等数据库中筛选类风湿性关节炎相关靶点,利用Cytoscape3.9.0软件构建“活性成分-靶点”网络模型,运用String数据分析平台进行蛋白互作网络分析,并且利用基因富集分析在线工具对核心靶点进行GO富集分析和KEGG通路分析,最后使用分子对接对网络药理学内容进行初步验证。结果:共鉴定出黑根化学成分78个,筛选后活性成分50个,237个潜在作用靶点与类风湿性关节炎相关,包括STAT3、AKT1、EGFR等关键靶点。通路富集分析PI3K-Akt通路、JAK-STAT等信号通路可能是黑根发挥抗类风湿性关节炎的主要途径。通过分子对接技术得出主要活性成分(异绿原酸B、异绿原酸C)与关键靶点有较好结合力。结论:研究初步表明黑根通过多成分、多靶点、多途径治疗类风湿性关节炎的作用,为后续黑根物质基础研究提供了理论依据。

UPLC-Q-Orbitrap-MS快速分析水红花子的化学成分

目的建立水红花子化学成分的快速鉴定方法。方法利用超高效液相串联四极杆静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Orbitrap-MS)技术,正、负离子模式下分别采集一级、二级质谱信息。通过推导质谱裂解规律,与质谱数据库(MassBank、mzCloud)、文献数据、对照品比对等方式,对化合物进行指认。结果从水红花子中共鉴定出54种化学成分,主要包括黄酮类、酚酸类、生物碱类等,其中有15种成分为首次从水红花子中发现,也是首次从药用植物红蓼中发现。结论该研究可为水红花子的深入质量评价及药效物质基础研究提供依据。

基于UPLC-Q-Orbitrap MS技术的沙棘黄酮类成分分析

利用UPLC-Q-Orbitrap MS技术对沙棘(Hippophae rhamnoides L.)果实中黄酮类物质进行系统剖析,并对不同产地沙棘果实中黄酮类化合物进行比较分析,为中药沙棘的化学物质基础和资源利用研究奠定基础。根据保留时间比对,精确分子量匹配和MS/MS碎片信息分析,共鉴定出58个化合物,包括34个黄酮醇、4个黄酮、14个花色素、1个二氢黄烷酮、2个二氢黄烷醇、2个黄烷醇和1个二氢查尔酮,其中14个花色素类化合物为首次在沙棘果实中鉴定。最终筛选得到38种差异积累的黄酮类化合物,其中大部分在青海和西藏产地的沙棘果中呈显著积累。研究丰富了沙棘果中黄酮类化合物化学物质基础研究,揭示了不同产地沙棘果中黄酮类化合物的组成及差异。

基于UPLC-Q-Orbitrap-HRMS技术的葛根-丹参药对化学成分分析

目的采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap-HRMS)技术分别对以水和50%甲醇溶液为溶剂提取的葛根-丹参药对样品进行化学成分分析。方法采用Thermo Scientific Hypersil GOLD C_(18)色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.9μm),以0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^(-1),柱温为30℃。采用加热电喷雾离子源(H-ESI),正负离子检测模式。结果从水提和50%甲醇醇提样品溶液中均鉴定出104个化合物,其中103个化合物为共有成分,各有1个差异性成分,分别为水提样品中的刺槐苷与50%甲醇醇提样品中的降丹参酮(或其同分异构体)。共鉴定出的105个化合物,包括黄酮类成分36个、苯丙素类成分20个、萜类成分24个和其他类成分25个。结论本研究首次采用UPLC-Q-Orbitrap-HRMS技术对葛根-丹参药对的主要成分进行鉴定,可为葛根-丹参药对的药效成分研究提供科学依据。

基于UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS的胃康灵胶囊化学成分分析

目的 建立超高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive-OrbitrapMS)法准确、快速定性鉴别胃康灵胶囊中的化学成分。方法 采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C18色谱柱(1.7μm,2.1 mm×150 mm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^(-1),柱温40℃,进样量2μL,电喷雾电离源(ESI)在正、负离子两种模式下采集数据,扫描方式为全扫描/数据依赖二级扫描(Full MS/dd-MS~2)。结果 在胃康灵胶囊水提液中共鉴定出142个化学成分,包括三萜类58个、生物碱类32个、单萜类17个、黄酮类12个、多酚类10个、有机酸类6个,菲类3个、香豆素类1个、木脂素类1个、苯并吡喃类1个和氮苷类1个。结论 UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS技术能够快速有效地对胃康灵胶囊中化学成分进行鉴定,为进一步明确其药效物质提供参考。

基于UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS分析马齿苋炒炭前后化学成分变化

目的:分析马齿苋炒炭前后化学成分变化,筛选差异性止血成分。方法:采用UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS技术检测,选择Waters BEH C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱;流速为0.2 mL/min;进样量为1μL;柱温为35℃;流动相为水-乙腈,梯度洗脱;采用电喷雾离子源,正、负离子扫描模式,质量扫描范围m/z 50~1500,根据相对分子质量和碎片信息,结合文献及数据库鉴定化学成分。应用SIMCA 14.1软件对质谱数据进行主成分分析和正交偏最小二乘判别分析,通过查阅相关文献筛选马齿苋炒炭前后差异性止血活性成分。结果:在正、负离子模式下,马齿苋及其炭品共鉴定出41个成分,含黄酮9个、苷类6个、有机酸12个、脂肪酸4个、氨基酸3个、生物碱4个、萜类1个、其他成分2个,通过VIP值结合文献筛选出6个差异性止血成分,其中没食子酸、5,7,4′-三羟基黄酮、大豆苷元含量增加。结论:马齿苋炭主要含黄酮类和有机酸类等成分,上述研究结果可为马齿苋炒炭后止血作用增强提供物质基础依据。

UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS法同时测定牛黄上清片中18种胆汁酸的含量

目的 建立超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)法同时测定牛黄上清片中牛磺胆酸、7-酮-3α,12-α-羟基胆烷酸、甘氨猪去氧胆酸、12-脱氢胆酸、甘氨胆酸、3-酮-7α,12α-二羟基-5β-胆烷酸、牛磺鹅去氧胆酸、3α-羟基-7-氧代-5β-胆烷酸、猪胆酸、牛磺脱氧胆酸钠、猪去氧胆酸、胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、牛磺石胆酸钠、鹅去氧胆酸、去氧胆酸、石胆酸的含量。方法 分析采用Thermo Fisher Scientfic Bremen HYPERSIL GOLD色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.9μm);流动相0.1%甲酸-甲醇,梯度洗脱;体积流量0.2 mL/min;柱温40℃;加热电喷雾离子源;负离子扫描;平行反应监测模式。再进行化学模式识别。结果 18种胆汁酸在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 5),平均加样回收率96.73%~104.07%,RSD 2.10%~4.07%。不同厂家样品中各胆汁酸在种类和含量上存在一定差异。结论 该方法灵敏可靠,专属性好,可用于牛黄上清片的质量控制。

基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS和网络药理学研究银甲片治疗盆腔炎的有效成分及作用机制

目的:研究银甲片治疗盆腔炎的有效成分及作用机制。方法:利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-ExactiveOrbitrapMS),结合文献与对照品比对鉴定银甲片的化学成分。将化学成分和盆腔炎疾病的交集靶点导入String数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络;通过DAVID数据库进行基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;采用Cytoscape3.9.1软件构建药材-成分-靶点-通路可视化图;利用Maestro11.9软件进行分子对接。结果:从银甲片中共鉴定58个化学成分,包含黄酮类、有机酸类、萜类、生物碱类。PPI分析得到类固醇受体辅激活因子(SRC)、热休克蛋白90α家族A类成员1(HSP90AA1)、磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基1(PIK3R1)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)5个核心靶点;KEGG结果显示银甲片主要通过磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)、MAPK等通路发挥作用。分子对接结果表明,木犀草苷、山柰酚、木犀草素、香叶木素等成分与SRC、HSP90AA1、PIK3R1等5个核心靶点的对接构象稳定。结论:银甲片可能通过木犀草苷、山柰酚、木犀草素、香叶木素、芹菜素等活性成分调控PI3K-Akt、MAPK等通路发挥治疗盆腔炎作用。

基于UPLC-QE-Orbitrap-MS/MS技术分析新疆鼠尾草乙酸乙酯提取物化学成分及入血成分

目的采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-QE-Orbitrap-MS/MS)技术分析新疆鼠尾草乙酸乙酯提取物(Ethyl acetate extraction of Salvia deserta Schang,SDS-EE)的化学成分及入血成分。方法新疆鼠尾草根加20倍量95%乙醇,85℃回流提取3次,每次2.5 h,浓缩得醇提浸膏,加水混悬后,再加等比例的乙酸乙酯萃取5次即得SDS-EE。取SD大鼠12只,随机分成空白组和给药组,每组6只。给药组灌胃给予SDS-EE溶液160 mg·kg^(-1)·d^(-1),空白组灌胃给予相同体积0.5%CMC-Na溶液,连续给药20 d。采用三氯化铁诱导建立SD大鼠血栓模型,腹主动脉取血并收集血清样品。采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.1%甲酸乙腈溶液(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.5 mL/min,进样量5μL,采用UPLC-QE-Orbitrap-MS/MS技术,利用Orbitrap Exploris 120质谱,在正、负离子两种模式下获取SDS-EE和血清样品中化合物的相对分子质量、二级质谱裂解碎片离子信息和保留时间,结合相关文献、对照品比对和数据库信息,分析鉴定SDS-EE和吸收入血的化学成分。结果从SDS-EE中共鉴定出52个化合物,包括7个苯丙素类、3个香豆素类、12个萜类、7个酚酸类、3个醌类、5个醛类、5个黄酮类、9个有机酸类和1个其它类。鉴定出入血成分11个,其中9个为原型成分,2个是代谢产物,其主要代谢途径为氧化反应。结论通过UPLC-QE-Orbitrap-MS/MS技术快速分析了新疆鼠尾草SES-EE的化学成分及入血成分。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS代谢组学和16S rRNA基因测序探讨骨疏丹补肾机制

目的 整合代谢组学和肠道微生物组学的研究策略探讨骨疏丹(Gushudan, GSD)预防氢化可的松诱导的肾阳虚证(kidney-yang deficiency syndrome, KYDS)大鼠的补肾作用机制。方法 分别采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)的非靶向代谢组学和16S rRNA基因测序分析的肠道微生物组学方法,分析正常对照组、肾阳虚证模型组、骨疏丹给药组和阳性对照组大鼠粪便代谢物谱与肠道菌群组成,采用Pearson相关分析探讨内源性差异代谢物与差异菌群之间的相关性。结果 基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS的代谢组学方法在正负离子模式下共发现骨疏丹参与调控肾阳虚症的22种差异代谢物,如色氨酸、鹅去氧胆酸、肌酐和油酸酰胺等,主要涉及氨基酸代谢、胆汁酸代谢、能量代谢和脂质代谢。基于16S rRNA测序分析发现骨疏丹在属水平显著上调普雷沃氏菌(Prevotellaceae)的相对丰度(P<0.05),显著下调颤杆菌(Oscillibacter)的相对丰度(P<0.05)。相关性分析结果表明甘胆酸和鹅去氧胆酸与在属水平显著改变的普雷沃氏菌(Prevotellaceae)显著正相关(P<0.05),而与考拉杆菌(Phascolarctobacterium)显著负相关(P<0.05)。二十二碳六烯酸与毛螺菌(Lachnospiraceae)显著负相关(P<0.05)。结论 骨疏丹通过良性调节内源性代谢和肠道菌群结构发挥补肾作用,为中药通过肠-肾轴治疗疾病提供新的思路和方法。

基于UPLC-QE-Orbitrap-MS技术的复方四物汤化学成分表征与鉴定

目的建立超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-QE-OrbitrapMS),系统开展中药复方四物汤化学成分的表征与鉴定。方法采用BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为0.1%甲酸水-乙腈,流速为0.5 mL/min,柱温为30℃,在正、负离子模式下采用Auto MS/MS进行数据采集。结果通过二级质谱裂解碎片解析以及文献分析等,从复方四物汤中共鉴定或初步推导了47种化合物,包括5种有机酸、3种酚类、12种黄酮类、6种苯丙素类、15种萜类、2种倍半萜和4种生物碱。结论建立的UPLC-QE-Orbitrap-MS能快速、准确、较全面地鉴定复方四物汤的化学成分,为其药效物质基础研究提供参考依据。

基于UPLC-Q-Orbitrap-MS法分析舒心解郁颗粒化学成分

目的 采用UPLC-Q-Orbitrap-MS法分析舒心解郁颗粒化学成分。方法 采用 Waters ACQUITY BEH C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.7 μm),以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,柱温为30℃,流速为0.3 mL/min,进样量为2 μL。在正、负离子模式采集舒心解郁颗粒的质谱数据,根据一级质谱的精确相对分子质量、二级质谱特征碎片结合文献考察对舒心解郁颗粒成分进行分析并对各化学成分进行药材归属。结果 从舒心解郁颗粒中共鉴定出71个化合物,包括23个黄酮类、7个氨基酸类、3个生物碱类、20个有机酸类、3个糖类、5个萜类、1个蒽醌类、1个苯丙素类和8个其他类化合物。结论 建立的方法能快速、准确、可靠、较全面地鉴定舒心解郁颗粒的化学成分,为其药效物质基础研究提供参考依据。

基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS的经典名方温胆汤化学成分分析

[目的]采用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)对温胆汤的化学成分进行快速识别和鉴定。[方法]采用Waters Acquity BEH C18(2.1×100 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)作为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 mL/min、柱温30℃;采用加热电喷雾离子源(HESI),正、负离子模式同时检测,扫描模式为Full MS/dd-MS2,扫描范围m/z 100~1500。[结果]通过与对照品比对、精确相对分子质量、多级质谱碎片信息并结合文献报道、质谱数据库信息等对化合物进行鉴别。从温胆汤中共鉴别了121个成分,包括70个黄酮类成分,18个香豆素类成分,9个皂苷类成分,10个生物碱成分,3个苯丙素类成分及其他类化合物11个。其中15个成分通过与对照品比对后确认。[结论]利用UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术较为系统地阐明了温胆汤的物质基础,可为该复方药效物质基础的深入研究和质量标准的合理制定奠定基础。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术的炒山楂、焦山楂小鼠血清药物化学比较研究

目的 利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)分析技术,鉴定炒山楂、焦山楂组小鼠血清中药物化学的差异。方法 选取2023年12月—2024年2月成都中医药大学药学院共9只KM小鼠作为研究对象,根据随机数字表法分为空白组(n=3),炒山楂组(n=3),焦山楂组(n=3),其中炒山楂组、焦山楂组分别给予3 g/kg的炒山楂、焦山楂浸膏水溶液灌胃。使用Thermo Scientific AccucoreTM C18色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)和0.1%甲酸乙腈溶液(B)作为流动相,梯度洗脱;质谱采用ESI源,+/-离子模式扫描,扫描模式为Full MS/dd-MS2。利用Compound Discoverer 3.3软件分析数据,根据一级质谱质荷比、二级质谱碎片等信息,鉴定样品化学成分,以及血清中的化学成分;同时利用SIMCA14.1,通过主成分分析法(principal component analysis, PCA)、正交偏最小二乘判别分析法(orthogonal partial least-squares discrimination analysis, OPLS-DA)进行模式识别筛选出其中差异性化学成分,结合统计学知识分析出炒山楂、焦山楂入血后的血液中相关化合物的变化差异。结果 经过对药品醇提物中化学成分的筛选,结合相关文献,在炒山楂、焦山楂中分别鉴定出了34、45个化学成分,包括有机酸类、氨基酸类、三萜类、酰胺类、黄酮类、苯丙素类、及其他类成分等。此外,通过SIMCA软件统计分析,在两组小鼠血清中共鉴定出14个显著差异性成分。结论 炒山楂、焦山楂中化学成分、对应含量差异,可能是两种炮制品功效差异性的影响因素之一。不同给药组小鼠的血清中鉴别出的差异性化学成分,为揭示两种炮制品功效性差异提供了参考依据。

基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术分析穿虎祛痛颗粒化学成分

目的 对穿虎祛痛颗粒的化学成分进行鉴定。方法 采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)技术,利用Xcalibur 4.2分析软件,并结合对照品、质荷比及二级质谱裂解碎片信息进行成分鉴定。结果 从穿虎祛痛颗粒中,共鉴定出151个化合物,包括有机酸类19个、黄酮及其苷类57个、色原酮类10个、二苯乙烯类4个、蒽醌类8个、苯酞类11个、苯丙素类18个、三萜及其苷类7个,含氮类3个和其他类14个,其中有15个化合物经与对照品进行比对得以确证。结论 UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术可实现对穿虎祛痛颗粒化学成分的快速鉴定,能够为中药药效物质基础解析及制剂质量标准提升提供科学参考。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS结合网络药理学探讨半夏泻心汤入血成分及治疗脾虚型溃疡性结肠炎的作用机制

研究通过建立脾虚型溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型,采用液相芯片对大鼠血清中炎性细胞因子进行高通量检测,同时以HE染色对结肠组织进行炎症分级评分,验证半夏泻心汤(Banxia Xiexin Tang,BXT)对脾虚型UC的药理作用。随后利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)对BXT入血成分进行分析,并结合网络药理学,探究BXT治疗脾虚型UC的作用机制。结果显示,UC能够增加大鼠血清中细胞因子白细胞介素-1α(interleukin-1α,IL-1α)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达水平;BXT可降低血清炎性细胞因子含量,且BXT高剂量组(20 g/kg)下降最明显,无明显炎细胞浸润,表明BXT对脾虚型UC具有一定的治疗作用。大鼠血清中发现入血成分共20个;网络药理学筛选出BXT治疗UC相关靶点87个,涉及炎症反应、炎症反应调节、微生物反应等生物过程,参与了IL-17、脂质与动脉粥样硬化、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、TNF等信号通路。综上可知,BXT治疗脾虚型UC可能与抑制肠道炎症、调节肠道微生物及保护肠道屏障等多个途径相关,从而达到治疗UC效果。

基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS和UPLC-QQQ-MS的玫瑰花化学成分定性与定量分析

采用UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS联合UPLC-QQQ-MS/MS对5种玫瑰花中非发挥性成分进行定性定量分析。分别采用Thermo Hypersil GOLD色谱柱(100 mm×2.1 mm,3μm)、甲酸水-甲酸乙腈为流动相和Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.7μm)、甲醇-水为流动相梯度洗脱,均采用正负离子模式采集数据。通过对照品比对及高分辨质谱解析,鉴定了其中73种化合物结构并解析了其裂解规律。7种黄酮类成分在考察的浓度范围内线性关系良好(R>0.990),回收率为96.62%~107.13%,RSD为1.06%~1.87%,在5种玫瑰花含量有显著性差异(P<0.05)。该方法快速、可靠、高效,能较全面反映并比较5种玫瑰花中非挥发性成分及7种主要黄酮类成分含量,可为深入阐明玫瑰花药效物质基础及其质量标准研究提供参考。

UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS联合网络药理学分析清肺汤抗肺炎活性作用机制

目的采用UPLC-Q-Excative Orbitrap-MS和网络药理学探讨清肺汤抗肺炎的作用机制。方法通过UPLC-Q-Excative Orbitrap-MS法进行分析,鉴定清肺汤的主要化学成分,结合Swisstarget收集清肺汤主要化学成分的作用靶点;利用OMIM、DrugBank及GeneCards等数据库获取“肺炎”的相关靶点,并与清肺汤化学成分靶点取交集筛选出共同靶点,通过蛋白质相互作用网络构建及GO、WikiPathways通路富集分析确定清肺汤治疗肺炎的重要信号通路。结果通过UPLC-Q-Excative Orbitrap-MS从清肺汤中鉴别出142种活性成分,获得200个清肺汤成分与肺炎交集靶点,构建网络后获取了44个潜在有效成分和131个肺炎关键靶点。KEGG通路富集分析表明,清肺汤通过MAPK3信号通路、EGFR信号通路、LCK信号通路等多种信号通路以及白细胞介素-5(interleukin-5,IL-5)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)和胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)等多靶点发挥抗肺炎的作用。结论清肺汤中的活性成分可通过多通路、多靶点发挥调节免疫、抗炎、调节细胞凋亡、抗病毒感染和改善肺纤维化的作用,从而起到治疗肺炎的作用。