基于大型仪器设备共享平台的UPLC-QDA实验室管理

UPLC-QDA作为一种能快速分离、准确对物质进行定性和定量分析的仪器,在教学和科研中发挥着重要的支撑作用。以UPLC-QDA联用实验室为例,重点阐述了实验室体制建设、大型仪器设备共享平台的使用、UPLC-QDA的维护保养,以及利用实验室综合信息化管理平台,确保UPLC-QDA的安全运行和高效利用。

UPLC-QDa联用技术在快速检测领域中的应用进展

UPLC-QDa联用技术是一种适用于复杂混合物快速分离,并能准确定性和定量的分析方法,具有快速、简便、高灵敏度、高选择性等特点,在农兽药残留痕量检测、药物分析和天然产物研究等领域得到了广泛的应用.简要综述了2013~2020年UPLC-QDa技术在快速检测领域中的应用进展.

UPLC-QDa测定乳果糖口服溶液中乳果糖及其有关物质含量

目的采用UPLC-QDa测定乳果糖口服溶液中乳果糖的含量及其有关物质塔格糖、果糖、半乳糖、依匹乳糖、乳糖的含量。方法采用ACQUITY UPLC BEH Amide(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以水(含0.1%二乙胺,500 ng·mL^(−1)盐酸胍)和乙腈(含0.1%二乙胺,500 ng·mL^(−1)盐酸胍)为流动相,梯度洗脱,流速0.6 mL·min^(−1),电喷雾离子化(ESI),负极性下SIR模式采集。结果塔格糖、果糖、依匹乳糖、乳果糖的定量限分别为0.5,0.5,0.2,0.2μg·mL^(−1),乳糖和半乳糖的检测限分别为0.2,2μg·mL^(−1);塔格糖、果糖、半乳糖、依匹乳糖、乳果糖、乳糖分别在5.1~123.2,4.9~117.8,5.4~129.8,5.2~125.0,5.0~119.9和5.0~121.2μg·mL^(−1)内呈良好的线性关系,r均≥0.995;平均加样回收率均为90%~107%(n=6);方法仪器精密度良好,峰面积RSD均<2.8%(n=5)。2个不同厂家生产的乳果糖口服溶液中乳果糖的含量和有关物质塔格糖、果糖、半乳糖、依匹乳糖、乳糖的含量均符合中国药典2015年版规定,并与中国药典方法结果基本一致。结论该方法可用于乳果糖口服溶液中乳果糖和有关物质含量的检测分析。

UPLC-QDa质谱检测器法检测米拉贝隆中硝基苯类带基因毒警示结构杂质的含量

目的:建立可监控米拉贝隆原料中残留风险最大的4个硝基苯类带基因毒警示结构杂质(MLB-1、MLB-2、MLB-1-IM01、MLB-2-IM01)含量的方法。方法:采用UPLC-QDa质谱检测器系统,XBridge C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),以乙腈-水-三氟乙酸(400∶600∶0.5)为流动相,流速0.8 mL·min^(-1),柱温35℃,进样体积2μL;QDa检测器的参数设置:电喷雾离子化-正电离模式(ESI~+),多反应监测模式(MRM),探头温度为600℃,采集速率10点·s^(-1),气流量20 L·min^(-1);采集时间15 min。结果:4个目标硝基苯类杂质在0.03~0.6μg·mL^(-1)浓度范围内(相当于主成分的0.0003%~0.006%水平;4个目标杂质限度为0.003%,总量限度为0.01%)线性关系均良好(r≥0.9973),回收率介于91.8%~119.1%,检测限和定量限分别低于0.1和0.25μg·mL^(-1)(相当于0.0025%水平),能较好地满足目标杂质的检测灵敏度要求。采用拟定工艺生产的多批米拉贝隆样品中均未检出上述4个目标杂质(总量<0.001%,远低于限度规定的0.01%)。结论:该方法灵敏度高,准确性好,在拟定限度范围内呈线性响应,可用于检测米拉贝隆原料中潜在硝基苯类基因毒杂质的残留量监控。

超高效液相色谱-单四极杆质谱检测器快速定量血浆游离氨基酸谱的方法

建立了一种基于超高效液相色谱-单四极杆质谱检测器(UPLC-QDA)定量血浆游离氨基酸谱的方法。血浆样本经甲醇去除蛋白后,所得到的上清液挥干后用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)进行衍生。反应液在Cortecs C18色谱柱上进行6 min梯度洗脱达到色谱分离,采用正离子模式下的选择离子扫描模式测定。结果表明,34种氨基酸的检出限与定量限分别在0.1~5.0μmol/L和0.2~10.0μmol/L之间,并具有较好的线性关系(R 2>0.991)和良好的准确度(80.4%~121.8%),较高的精密度(相对标准偏差<15%)以及较好的稳定性,低、中、高3个浓度加标回收率在78.1%~127.6%之间,基质效应在-21.9%~29.7%之间。本方法简单快速,稳定可靠,并成功地应用于正常人和小鼠血浆样本中氨基酸谱的定量。

基于抵当汤减毒的钩吻生物碱体内外含量变化研究

目的建立体内、体外钩吻生物碱成分测定方法,并测定抵当汤减毒前后钩吻生物碱成分含量,探讨抵当汤减缓钩吻毒性的可能作用机制。方法采用UPLC-QDa体外检测钩吻与抵当汤混合前后6种生物碱成分变化,采用UPLC-MS/MS检测抵当汤联合钩吻灌胃对小鼠血浆中钩吻生物碱成分含量的影响。结果与抵当汤混合后,钩吻中钩吻素子、钩吻素甲、钩吻绿碱、胡蔓藤碱乙含量明显降低(P<0.01);抵当汤+钩吻组小鼠血清钩吻素子、钩吻素甲、钩吻素己、钩吻绿碱、胡蔓藤碱乙、胡蔓藤碱丙含量均较钩吻组明显降低(P<0.01)。结论降低钩吻素子、钩吻素甲、钩吻素己、钩吻绿碱及胡蔓藤碱乙含量可能是抵当汤减缓钩吻毒性的作用机制之一。

UPLC-UV-QDa联用系统快速分析野生樱桃李叶化学成分

采用UPLC-UV-QDa联用系统测定了4种不同野生樱桃李叶中黄酮苷元的含量,并对醇提物成分进行快速分析。结果表明,槲皮素和山奈酚为野生樱桃李叶主要黄酮苷元。UPLC测定2种苷元可在7.0min内达到基线分离,线性关系良好,平均回收率分别为98.65%(RSD=1.08%,n=3),102.02%(RSD=1.17%,n=3),表明该方法快速、准确、重复性好。不同品种和生长环境的野生樱桃李叶中黄酮苷元含量有差异,但均以山奈酚为主。阳坡紫果叶山奈酚含量最高为(7.68±0.45)mg/g,沟谷红果叶最低为(4.59±0.32)mg/g,总黄酮含量变化幅度为16.21～33.25 mg/g。通过UPLC-UV-QDa联用系统快速鉴别,阳坡紫果叶醇提物主成分为1种单咖啡酰奎宁酸、4种槲皮素苷、7种山奈酚苷。

超高效液相串联单四极杆质谱检测器同时测定牛奶中三类六种抗菌药兽药残留研究

为了对牛奶中痕量多种抗菌药物兽药残留做快速检测分析,试验建立并优化了一种快速分析方法,采用中性乙腈-0.05 mol/L磷酸氢二钾缓冲溶液(PBS)超声条件下对样品中目标化合物进行提取,HLB固相萃取小柱净化,通过超高效液相串联单四极杆质谱检测器(UPLC-QDa)测定,外标法定量。结果表明:牛奶中三类六种抗菌药物的平均回收率范围为72.1%~95.0%,相对标准偏差为1.31%~13.80%,方法检出限为1.5~6.0μg/kg。说明该方法灵敏度高,重现性好,可用于日常牛奶的分析检测。

超高效液相色谱质谱联用法测定重组人乳头瘤病毒中3-(N-吗啡啉)丙磺酸含量

目的:建立超高效液相色谱质谱联用法(UPLC-MS)测定重组人乳头瘤病毒中3-(N-吗啡啉)丙磺酸(MOPS)含量。方法:采用Waters ACQUITY UPLC BEH HILIC色谱柱,流动相为20 mmol·L^-1乙酸铵(pH5.0)-乙腈,梯度洗脱;流速0.5 mL·min^-1,柱温40℃,进样量为1.0μL;Qda检测器采用质量数208的SIR负离子扫描模式,锥孔电压为15 V,时间为3 min。结果:UPLC-MS测定重组人乳头瘤病毒原液和九价疫苗成品分离度分别为3.86和2.76,MOPS在浓度为20~0.0097656μg·g-1时线性关系良好(r^2=0.9979),定量下限为0.0097656μg·g-1,检测下限为0.0048828μg·g-1,精密度试验的RSD均不大于2.0%。HPV原液和HPV九价疫苗平均加样回收率分别为99.4%和100.6%。样品中未检测到MOPS。结论:该方法简单快速、准确、灵敏,重复性好,适用于重组人乳头瘤病毒原液和疫苗成品中的MOPS含量检测。