UROC1在肝细胞癌中的表达及对肿瘤发生的影响

目的 探究尿刊酸酶(UROC1)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其对HCC发生发展的影响。方法 分析蛋白质质谱和TCGA数据库中UROC1在癌和癌旁组织中的表达及预后数据。利用免疫组织化学染色、实时定量PCR(qPCR)和Western blot实验验证HCC中UROC1表达情况。利用HE染色判断肿瘤分化水平,分析UROC1表达水平与其相关性。构建稳定过表达UROC1和其突变体的Hep3B、LM3细胞系,开展体外细胞表型实验。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)、平板克隆实验、EdU实验、划痕实验和Transwell实验探究UROC1对HCC细胞增殖和迁移的影响。结果 TCGA数据库分析结果显示,与癌旁组织相比,UROC1在HCC组织中普遍下调(P<0.000 1),UROC1低表达组较高表达组的患者预后更差(P<0.05)。免疫组织化学染色及评分、qPCR和Western blot实验验证了UROC1在HCC中低表达。不同分化水平癌组织的免疫组织化学染色结果提示分化越差的HCC组织中UROC1表达水平越低(P<0.05)。平板克隆实验结果显示,过表达UROC1的细胞克隆形成数目较对照组明显减少。CCK-8和EdU染色实验结果显示,UROC1过表达的细胞增殖速度显著低于对照组(P<0.001)。划痕实验结果显示,UROC1过表达的HCC细胞迁移距离明显小于对照组细胞(P<0.000 1)。Transwell实验显示,过表达UROC1后细胞穿过小室的数目显著减少(P<0.000 1)。但是UROC1的活性位点突变后上述实验表型的结果和对照组趋于一致。结论 UROC1在HCC组织中低表达,在HCC细胞中过表达UROC1可能对细胞增殖和迁移能力有抑制作用。

UROC1基因突变致尿刊酸酶缺乏症1例报告并文献复习

目的探讨UROC1基因突变致尿刊酸酶缺乏症的临床特征。方法报告1例UROC1基因突变致尿刊酸酶缺乏症患儿的临床资料和基因检测结果,并进行文献复习。结果男,1岁1个月,因"独坐不稳,不会主动抓物"就诊。4.5个月抬头稳、6.5个月翻身,8个月可主动找人。查体:反应迟钝;双眼内斜视,追物欠佳;上肢肌张力偏高,腱反射活跃;有皮层拇指征。叶酸>25.2(参考值3.0~17.0)ng·m L^(-1)。头颅MRI平扫显示,双脑外间隙增宽,双侧额顶颞枕叶脑髓鞘发育落后。血串联质谱显示,组氨酸116.1(6月至1岁参考值为0~79.3)μmol·L^(-1),增加倍率为1.5。尿代谢分析结果正常。基因测序发现患儿UROC1基因存在2个碱基突变,c.74G>A(p.G25E)为错义突变,来自患儿母亲;c.854G>A(p.W285X)为无意义突变(终止突变),来自患儿父亲;分析显示p.G25E和p.W285X均可能为致病突变。检索中国知网、万方和Pub Med数据库,共检索到3篇英文病例报告,报告了4例尿刊酸酶缺乏症患儿,与本文病例合并后共5例。本文病例确诊年龄最小,余4例分别为16、9、11和19岁;男2例,女3例;均表现为发育迟缓及智力发育障碍,IQ值均<60。1篇报告UROC1基因突变导致的尿刊酸酶缺乏症,为c.209T>C和c.1348C>T复合杂合突变。结论本文报告的UROC1基因的c.74G>A和c.854G>A可能为首次发现的致病突变,可能会引起尿刊酸酶的结构功能异常,从而导致尿刊酸酶缺乏症。

一例尿刊酸酶缺乏症的临床特点及基因突变分析

目的探讨尿刊酸酶缺乏症的临床特征及基因突变特点,为临床诊治提供思路。方法报道1例UROC1基因突变致尿刊酸酶缺乏症患者的临床资料和基因检测结果,并进行文献复习。结果全外显子测序结果显示患者携带UROC1基因c.1291C>G(p.P431A)与c.1803C>G(p.1601M)复合杂合突变,父亲携带c.1291C>G(p.P431A)突变,母亲携带c.1803C>G(p.1601M)突变。经检索ExAC、gnomAD数据库及千人基因组数据库,c.1803C>G(p.1601M)突变为未报道过的新突变,c.1291C>G(p.P431A)突变在人群中频率为0.000012。生物学信息分析软件预测蛋白功能,提示能产生有害影响。结论随着精准医学的推广,全外显子组测序技术帮助明确了许多遗传病的致病原因,增加了罕见病的临床症状类型。本文报道的UROC1基因的c.1291C>G(p.P431A)与c.1803C>G(p.1601M)均为首次发现的突变,可能会引起尿刊酸酶的结构功能异常,从而导致尿刊酸酶缺乏症。