土壤侵蚀/沉积潜力与地形因子的相关性分析——以USPED模型模拟为例

为了分析土壤侵蚀/沉积潜力与地形因子的相关性,以元谋干热河谷典型冲沟为研究样区,基于实测高程点数据构建DEM,采用USPED模型对样区土壤侵蚀/沉积潜力进行模拟,并结合地形因子(坡度、LS因子、曲率)探讨其与土壤侵蚀/沉积潜力模型模拟结果的相关性。研究结果表明,在三种地形因子与土壤侵蚀/沉积潜力模拟结果的对比分析中,总体趋势为土壤侵蚀能力均大于沉积能力,侵蚀面积比均大于沉积面积比,但在不同分级的地形因子对应的土壤侵蚀/沉积潜力模拟结果中揭示了不同的相关性。

DEM空间插值方法对土壤侵蚀模拟的影响研究——以USPED分析干热河谷典型冲沟为例

为探索不同空间插值方法得到的DEM如何影响土壤侵蚀模拟效果,本文选择金沙江干热河谷区典型冲沟为研究对象,利用野外测量高程数据,采用反距离加权(IDW)、析取克里格(DK)、局部多项式(LPI)和张力样条函数(ST)4种方法构建高精度DEM。基于USPED模型模拟冲沟的土壤侵蚀,对比不同空间插值方法的精度、土壤侵蚀的空间分布,采用相对差系数对比不同插值在土壤侵蚀研究中的相似性。结果表明:DEM空间插值的精度排序为ST<IDW<LPI<DK。基于USPED模拟的土壤侵蚀结果显示,DK模拟了主要的侵蚀、沉积分布,IDW突出了局部细节,LPI和ST则介于其间。相对差系数结果显示,IDW得到的DEM侵蚀模拟结果与其他插值方法有较高的相似性。在实测数据布局合理、密度较高的前提下,IDW更适合应用于土壤侵蚀模拟研究。

USP5表达水平在急性髓系白血病中的意义及其对AKT/mTOR/4EBP1信号通路的调控作用研究

目的:探讨USP5在急性髓系白血病(AML)中的临床意义、功能作用和潜在下游机制。方法:基于TCGA数据库分析USP5在AML和正常组织中的表达及其与患者生存的相关性。利用慢病毒在Jurkat和HL-60细胞中敲低和过表达USP5,分别通过RT-qPCR和Western blot检测USP5 mRNA和蛋白的表达。通过CCK-8和甲基纤维素集落形成实验进行细胞增殖和生长检测,流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡。结果:与正常组织相比,USP5在AML中高表达,USP5的上调与AML患者的生存呈负相关。敲减和过表达USP5分别会抑制和促进AML细胞的增殖和集落生长。敲减USP5的Jurkat和HL-60细胞可导致细胞周期停滞和细胞凋亡,此外,敲除USP5可以抑制AKT、mTOR和4EBP1的磷酸化。结论:过表达USP5与AML患者的不良预后相关。靶向调控USP5可抑制AKT/mTOR/4EBP1信号传导,抑制AML细胞的增殖和生长。

USP25影响高原缺氧小鼠学习记忆功能的机制研究

泛素特异性蛋白酶25(ubiquttin specific protease 25,USP25)能够通过水解靶蛋白上的泛素维持蛋白质稳态。有研究表明,唐氏综合征患者可能由于USP25过表达而影响学习记忆功能。高原环境由于缺氧对机体学习记忆有明显损伤,但是USP25是否参与该过程尚不清楚。本研究通过低压氧舱模拟高原缺氧环境,发现和平原环境相比,高原环境中Usp25基因敲除小鼠和野生型小鼠的学习记忆均减弱,但高原Usp25基因敲除小鼠在行为学和免疫组化实验中的表现优于高原野生型小鼠。表明Usp25基因敲除在一定程度上逆转了高原缺氧性学习记忆的减退,本研究为高原缺氧性疾病中学习与记忆减退的预防和治疗提供了新的思路。

马铃薯通用应激蛋白StUSP基因家族的鉴定及逆境表达模式分析

在全基因组和转录组水平系统鉴定马铃薯USP通用应激蛋白基因家族,并对该家族成员的基本特征及其在不同逆境胁迫下的表达模式进行分析。同时以马铃薯干旱耐受型品种‘陇薯10号’(L)和干旱敏感型品种‘大西洋’(D)为试验材料,利用高通量测序全面分析StUSP家族成员在干旱胁迫下的表达特性,筛选干旱胁迫关键差异表达基因。结果表明:马铃薯基因组中共有42个基因编码含有USP结构域的蛋白质,在11条染色体上不对称分布,且主要分布在1~6号染色体上。绝大多数StUSPs含有多个内含子。胁迫表达分析显示StUSPs能够响应多种非生物胁迫,且在干旱耐受性不同的马铃薯品种中差异表达。同时,利用qRT-PCR分析了12个成员干旱胁迫下表达模式,除StUSP12、StUSP22下调表达外,其余10个基因均正响应干旱胁迫。

华蟾素通过调控MYH9/USP7/c-MYC通路抑制急性髓系白血病细胞免疫逃逸

【目的】探讨华蟾素调控肌球蛋白重链9(MYH9)/泛素特异性蛋白酶7(USP7)/骨髓细胞瘤病毒癌基因(c-MYC)通路对急性髓系白血病(AML)细胞免疫逃逸的影响。【方法】(1)体内实验:建立裸鼠异种移植瘤模型,评估华蟾素对AML细胞在体内生长和免疫逃逸的影响。(2)体外实验:使用不同浓度的华蟾素处理人AML细胞株HL-60,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞活力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。将HL-60细胞与活化的CD8^(+)T细胞共培养,流式细胞术检测CD8^(+)T细胞表面标志物CD25的表达,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测共培养上清液中细胞因子[白细胞介素2(IL-2)和干扰素(IFN-γ)]的水平,CytoTox96非放射性细胞毒性分析评估CD8^(+)T细胞对HL-60细胞的毒性。Western Blot法检测MYH9、USP7和c-MYC的蛋白表达,免疫共沉淀(Co-IP)法检测MYH9、USP7和泛素化之间的相互作用。转染MYH9过表质粒,验证华蟾素在AML中的作用机制。【结果】华蟾素抑制裸鼠移植瘤生长,增强CD8^(+)T细胞抗肿瘤的能力。华蟾素浓度依赖性地抑制HL-60细胞活力、侵袭。华蟾素处理后上调CD8^(+)T细胞表面标志物CD25的表达,同时还上调IL-2和IFN-γ水平。华蟾素增强CD8^(+)T细胞对HL-60细胞的毒性。华蟾素抑制HL-60细胞MYH9、USP7和c-MYC的蛋白表达,MYH9通过募集USP7促进c-MYC去泛素化,华蟾素抑制MYH9介导的c-MYC去泛素化。【结论】华蟾素可通过抑制MYH9的表达进而减少去泛素化酶USP7对c-MYC的募集,促进c-MYC泛素化降解,从而抑制AML细胞免疫逃逸。

泛素特异性蛋白酶4在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义研究

目的 本研究旨在探讨USP4在非小细胞肺癌中的表达,并分析其与PET-CT SUVmax值、Ki67、及临床病理特征的相关性。方法 收集50例均确诊为非小细胞肺癌患者的癌组织与正常组织,用免疫组化的方法检测出USP4的表达情况,通过SPSS 20.0软件分析。结果(1)USP4在癌组织中呈低表达,在肺正常组织中呈高表达,差异具有统计学意义(P<0.05);(2)肺癌患者中USP4的表达与年龄、性别、肿瘤位置及肿瘤直径均无相关性(P>0.05),与肿瘤的分化程度以及有无淋巴结转移呈正相关(P<0.05);(3)USP4在肺癌组织中的表达与对应的PET-CT SUVmax值、Ki67呈负相关,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论 非小细胞肺癌患者USP4表达与致癌、肿瘤生长、恶性程度有关,USP4是NSCLC的肿瘤抑制因子,也有可能成为NSCLC患者新型的预后标志物。

CircAGFG1通过miR-375/USP22轴调节食管鳞癌细胞的放射敏感性研究

目的研究环状带有FG重复序列1(CircAGFG1)通过miR-375/泛素特异性蛋白酶22(USP22)轴对食管鳞癌(ESCC)细胞放射敏感性的影响。方法采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测人ESCC细胞株KYSE150及人ESCC放射性抵抗细胞KYSE150-R中CircAGFG1、miR-375、USP22表达。将体外培养的KYSE150-R细胞随机分为对照组、辐照组、辐照+阴性对照组、辐照+CircAGFG1敲低组、辐照+CircAGFG1敲低+miR-375 inhibitor组,分组转染后,4Gy 6MV-X线辐照后24 h采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测各组KYSE150-R细胞中CircAGFG1、miR-375、USP22表达;采用CCK-8法和平板集落形成实验检测各组KYSE150-R细胞增殖;采用流式细胞术检测各组KYSE150-R细胞凋亡;采用免疫荧光染色检测各组KYSE150-R细胞凋亡相关蛋白Bax与Bcl-2比值(Bax/Bcl-2)。将各组细胞接种在裸鼠右后肢腋下来构建ESCC移植瘤模型,饲养3周后检测各组裸鼠肿瘤体积及重量。采用双荧光素酶报告基因实验检测KYSE150-R中CircAGFG1对miR-375的靶向调节与miR-375对USP22的靶向调节。结果与KYSE150细胞相比,KYSE150-R细胞中CircAGFG1 mRNA表达、USP22 mRNA与蛋白表达升高(P<0.05),miR-375 mRNA表达降低(P<0.05)。与对照组相比,辐照+CircAGFG1敲低组CircAGFG1 mRNA表达、USP22 mRNA及蛋白表达、细胞增殖率、集落生成率、裸鼠肿瘤体积与肿瘤重量降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax/Bcl-2、miR-375 mRNA表达升高(P<0.05);辐照组、辐照+阴性对照组细胞各指标比较无明显差异(P>0.05)。与辐照组相比,辐照+CircAGFG1敲低组CircAGFG1 mRNA、USP22 mRNA及蛋白表达、细胞增殖率、集落生成率、裸鼠肿瘤体积与肿瘤重量降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax/Bcl-2、miR-375 mRNA表达升高(P<0.05)。与辐照+CircAGFG1敲低组相比,辐照+CircAGFG1敲低+miR-375 inhibitor组USP22 mRNA及蛋白表达、细胞增殖率、集落生成率、裸鼠肿瘤体积与肿瘤重量升高(P<0.05),细胞凋亡率、Bax/Bcl-2、miR-375 mRNA表达降低(P<0.05);辐照+阴性对照组与对照组细胞各指标无明显变化(P>0.05)。CircAGFG1可靶向下调KYSE150-R细胞miR-375表达,而miR-375可靶向下调KYSE150-R细胞USP22表达。结论敲低CircAGFG1可通过上调miR-375来减弱USP22表达,从而增强ESCC细胞的放射敏感性,提升放射性对ESCC细胞的杀伤力,并促使其凋亡。

去泛素化酶USP22在多囊卵巢综合征发病过程中的作用研究

目的 探索去泛素化酶USP22在多囊卵巢综合征(PCOS)发病过程中的作用及机制。方法 利用脱氢表雄酮(DHEA)诱导建立小鼠PCOS模型,免疫组化及Western blot检测USP22在PCOS模型小鼠及对照小鼠卵巢组织中的表达变化;在卵巢颗粒细胞系(KGN)细胞中加入500 nmol/L双氢睾酮(DHT)模拟PCOS颗粒细胞中的高雄状态,并构建靶向USP22的siRNA,敲低KGN细胞中USP22的表达,对照组加入空白siRNA,CCK-8检测各组细胞的增殖变化,RT-PCR检测细胞周期相关分子的mRNA表达水平,Western blot检测细胞周期相关蛋白及信号通路相关蛋白表达情况。结果 USP22蛋白主要定位于卵巢颗粒细胞的细胞核,且在PCOS小鼠卵巢组织中USP22表达显著低于正常小鼠(P<0.05)。细胞实验结果表明:敲低USP22后,KGN细胞的增殖能力显著下降(P<0.05),RT-PCR及Western Blot结果显示细胞周期相关蛋白Cyclin B1、Cyclin D1、Cyclin E1的mRNA及蛋白表达水平均显著下降(P<0.05);而在KGN细胞中敲低USP22的同时加入DHT,KGN细胞增殖能力及相关分子表达下降更为显著(P<0.05);另外,敲低USP22后,KGN细胞中信号通路相关蛋白p-PI3K和p-AKT的表达水平显著下降(P<0.05)。结论 去泛素化酶USP22可通过PI3K/AKT信号通路调控KGN细胞的增殖,从而影响PCOS的发病。

基于RUSLE、InVEST和USPED的土壤侵蚀量估算对比研究--以陕北延河流域为例

黄土高原是我国水土流失的重灾区,准确地估算土壤侵蚀量对于当地的退耕还林、水土保持以及土地管理等措施的实行具有重要的指导意义。本研究选取黄土高原延河流域为研究区,以2000年、2005年、2010年和2015年共4期的Landsat TM遥感影像及日降雨量、土地利用、数字高程模型和土壤属性等为源数据,比较RUSLE、InVEST和USPED三个模型对土壤侵蚀的估算在该研究区的适用性,并分析不同地形和植被条件下土壤侵蚀的分布及变化规律。研究发现:1)2000年后延河流域土壤侵蚀量先增加后减少,2005年后减少幅度逐渐增加,表明退耕还林工程效果显著;2)与实测产沙量数据相比,RUSLE模型估算的侵蚀量偏大,USPED模型和InVEST模型的误差相对较低,建议在延河流域使用InVEST和USPED模型计算土壤侵蚀;3)土壤侵蚀量随坡度的增加而增加,RUSLE模型增加幅度最大;4)当NDVI>0时,土壤侵蚀量随NDVI的增加而减少,并且当NDVI在0~0.1时,土壤侵蚀量最大。

基于mTORC1/USP20/HMGCR通路探讨消木丹颗粒治疗非酒精性脂肪性肝病作用机制

目的观察消木丹颗粒对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠胆固醇合成的影响,基于mTORC1/USP20/HMGCR通路探讨其治疗NAFLD作用机制。方法60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、西药组(多烯磷脂酰胆碱)和中药低、中、高剂量组(消木丹颗粒)。空白组予普通饲料喂养,其余组均予高脂饲料喂养12周建立NAFLD大鼠模型。造模成功后,各给药组予相应药物灌胃,空白组和模型组予无菌蒸馏水灌胃,连续4周。记录大鼠体质量、肝质量,计算肝指数,全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,HE染色、油红O染色观察肝组织形态,实时荧光定量PCR和Western blot检测大鼠肝组织核糖体S6激酶(S6K)、泛素特异性蛋白酶20(USP20)、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)mRNA及p-S6K、S6K、USP20、HMGCR蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠体质量、肝质量、肝指数显著升高(P<0.01,P<0.05),肝叶体积增大,边缘变钝;血清ALT、AST、TC、TG、LDL-C含量显著升高,HDL-C含量显著降低(P<0.01);大部分肝细胞脂肪变性、有明显空泡和炎性浸润,脂滴增多,肝组织USP20、HMGCR mRNA表达显著升高(P<0.01),p-S6K、USP20、HMGCR蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,中药高剂量组和西药组大鼠体质量、肝质量、肝指数显著降低(P<0.01,P<0.05),肝脏外观改善;血清ALT、AST、TC、LDL-C含量降低,HDL-C含量升高(P<0.01,P<0.05);肝细胞脂肪变性和气球样变减轻,脂滴沉积减少,肝组织USP20、HMGCRmRNA及p-S6K、USP20、HMGCR蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05)。结论消木丹颗粒可能通过mTORC1/USP20/HMGCR通路调节胆固醇合成,进而发挥治疗NAFLD作用。

下调USP18经mTOR通路促进HepG2肝癌细胞的恶性行为

目的:研究下调泛素特异性肽酶18(USP18)对HepG2肝癌细胞生长和迁移的影响,并探讨其影响HepG2细胞恶性行为作用机制。方法:通过基因转染的方法构建低表达USP18的HepG2细胞株(Si-USP18)及其对照细胞株(Si-NC),分别利用细胞计数试剂-8(CCK-8)实验及细胞迁移(Transwell)实验来研究敲低USP18对HepG2细胞增殖和迁移的影响,并应用蛋白印记(WB)实验来研究敲低USP18对HepG2细胞mTOR通路相关蛋白表达的影响。结果:CCK-8实验表明,细胞培养24、48、72h后,与Si-NC组细胞比较,Si-USP18组细胞的增殖能力显著增强(P<0.05);Transwell实验表明,细胞培养24h和48h后,与Si-NC组细胞比较,Si-USP18组细胞的迁移能力显著增强(P<0.05);WB实验表明,与Si-NC组细胞比较,Si-USP18组细胞的磷酸化-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:下调USP18可通过mTOR信号通路促进肝癌细胞的恶性行为。

USP18与自噬和细胞凋亡联系的研究进展

去泛素化酶18(USP18)通过编码去泛素化酶在细菌感染、癌症、神经系统疾病等中发挥了重要作用。自噬是细胞内发生的清除代谢物质的过程;细胞凋亡是机体内发生的维持内环境稳态的过程。研究表明,在不同组织器官中USP18参与自噬和细胞凋亡过程,因此本综述将探讨近几年USP18与自噬和细胞凋亡联系的研究进展。

USP37稳定SREBP1a促进胆固醇摄取和脂质沉积

目的筛选影响胆固醇调节元件结合蛋白1a(cholesterol regulatory element binding protein,SREBP1a)蛋白稳定性的去泛素化酶,并探索其调控机制。方法通过去泛素化酶库筛选显著影响SREBP1a表达的去泛素化酶,免疫蛋白印记实验和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)评估去泛素化酶对SREBP1a以及升脂基因表达的影响;通过红色荧光蛋白标记人源低密度脂蛋白(human Dil-low density lipoprotein,Human Dil-LDL)摄取和油红O染色等实验技术检测细胞摄取低密度脂蛋白(LDL)和脂质沉积情况。结果去泛素化酶库筛选发现泛素特异肽酶37(ubiquitin specific peptidase 37,USP37)可显著增加肝细胞SREBP1a蛋白表达水平,促进胆固醇摄取及脂质沉积。USP37基因敲除可显著降低SREBP1a蛋白表达水平,抑制升脂基因表达及脂质沉积。结论去泛素化酶USP37通过稳定SREBP1a蛋白表达,促进胆固醇摄取及脂质沉积,揭示了SREBP1a翻译后调控的新模式。

USP11调节IGF2BP3介导口腔鳞状细胞癌细胞增殖和侵袭机制研究

目的:探究去泛素化酶(USP11)通过调节胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)表达影响口腔鳞状细胞癌(OSCC)恶性表型的分子机制。方法:免疫组化和Western blot检测OSCC患者(n=50)癌组织和癌旁组织中USP11蛋白表达,Western blot检测USP11蛋白在正常人口腔上皮角质细胞(HOK)和人OSCC细胞SCC-25和CAL-27中表达;Kaplan-Meier生存模型分析USP11高低表达对OSCC患者生存率的影响;siRNA USP11(si-USP11)转染SCC-25和CAL-27细胞敲低内源性USP11表达;CCK-8、划痕实验和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭;Western blot检测敲低USP11后的IGF2BP3蛋白表达;敲低USP11和过表达IGF2BP3,检测OSCC细胞增殖、迁移和侵袭的变化;过表达USP11同时敲低IGF2BP3,检测敲低IGF2BP3对USP11过表达OSCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响;裸鼠接种SCC-25细胞构建皮下移植瘤模型,考察敲低USP11对SCC-25细胞成瘤抑制作用。结果:与癌旁组织相比,OSCC患者癌组织中USP11蛋白免疫组化评分显著升高(P<0.01);与HOK细胞相比,SCC-25和CAL-27细胞USP11蛋白表达显著增加(P<0.01)。敲低USP11降低OSCC细胞增殖、迁移和侵袭能力(P<0.01),下调IGF2BP3蛋白表达。过表达IGF2BP3逆转USP11敲低对OSCC细胞增殖、迁移和侵袭能的抑制作用;敲低IGF2BP3逆转USP11过表达对OSCC细胞增殖、迁移和侵袭的促进作用。裸鼠致瘤性实验显示敲低USP11抑制移植瘤模型中SCC-25细胞体内生长。结论:USP11在OSCC患者癌组织中表达升高且高表达患者预后更差,USP11通过上调IGF2BP3蛋白表达促进OSCC细胞增殖、迁移和侵袭。

USP11调控VEGF表达及血管形成促进肝癌细胞的侵袭和转移

目的:探究去泛素化酶11(USP11)调控VEGF和血管形成促进肝癌细胞侵袭和转移能力的机制。方法:运用Real-time PCR实验检测USP11对肝癌细胞中VEGF基因表达水平的影响;应用Elisa实验检测USP11对肝癌细胞分泌VEGF蛋白的影响;利用对照组和USP11敲低组肝癌细胞分泌上清分别处理血管内皮细胞HUVECs,运用Transwell基质胶实验检测血管内皮细胞的迁移能力;运用CCK-8实验检测血管内皮细胞的增殖能力;运用小管形成实验检测血管内皮细胞的成管能力。结果:敲低USP11可降低肝癌细胞中VEGF的基因表达水平(P<0.01),并抑制肝癌细胞分泌VEGF蛋白(P<0.001);与对照组相比,敲低USP11的肝癌细胞分泌上清处理血管内皮细胞,血管内皮细胞的增殖能力减弱(P<0.01),成管能力也远低于对照组;两组肝癌细胞和血管内皮细胞共培养,基质胶实验表明,敲低USP11组,血管内皮细胞的迁移能力降低(P<0.01)。结论:USP11可以增加VEGF的基因转录和蛋白表达水平,增强血管内皮细胞的增殖、迁移和成管能力,进而促进肝癌细胞的侵袭和转移。

血清USP10和SIRT6水平与急性肺损伤患者预后的关系研究

目的探讨血清泛素特异性蛋白酶10(USP10)和沉默调节蛋白6(SIRT6)水平与急性肺损伤(ALI)患者预后的关系。方法前瞻性选取2023年1月至2023年11月就诊于康复大学青岛中心医院(青岛市中心医院)重症医学科确诊筛选的ALI患者78例为研究对象,设为ALI组;另外选取同期在同医院体检中心体检肺功能正常的患者70例设为对照组。实时荧光定量PCR检测两组研究对象血清中USP10 mRNA相对表达量,采用酶联免疫吸附试验检测血清SIRT6表达水平。比较两组研究对象以及不同病情ALI患者的血清中USP10 mRNA和SIRT6的表达水平;采用多因素Logistic回归分析ALI患者预后危险因素;采用Pearson相关性分析USP10 mRNA与SIRT6表达的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析USP10 mRNA和SIRT6预测ALI患者预后的价值。结果ALI组患者血清USP10 mRNA和SIRT6的表达水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。重度患者血清USP10 mRNA和SIRT6的表达水平明显低于中度患者,中度患者血清中USP10 mRNA和SIRT6表达水平明显低于轻度患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。死亡患者血清中USP10 mRNA和SIRT6表达水平明显低于存活患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。USP10 mRNA和SIRT6低表达为ALI患者预后的独立危险因素(P<0.05)。USP10 mRNA与SIRT6表达呈正相关性(r=0.373,P<0.05);USP10 mRNA最佳截断值为0.69,预测ALI患者预后的曲线下面积(AUC)为0.805,95%CI:0.738~0.871,敏感度为78.21%,特异度为67.43%;SIRT6最佳截断值为18.69 ng/mL,预测ALI患者预后的AUC为0.871,95%CI:0.817~0.925,敏感度为84.62%,特异度为73.08%;USP10 mRNA与SIRT6联合检测预测ALI患者预后的AUC为0.930,95%CI:0.894~0.967,敏感度为93.59%,特异度为76.92%,优于两者单独检测。结论ALI患者血清中USP10和SIRT6明显降低,与ALI的不良预后密切相关,联合测定血清中USP10和SIRT6可能提升对ALI患者预后的预测价值。

USP9X对Akt磷酸化水平及血小板活化的影响

目的 探讨血小板中去泛素化酶USP9X的表达及其对血小板功能的影响。方法 通过聚合酶链式反应和免疫印记方法检测人和小鼠血小板中USP9X的表达情况;分离制备年轻小鼠和老年小鼠的血小板,检测USP9X的表达变化;采用USP9X特异性抑制剂检测USP9X对血小板聚集释放及铺展功能的影响;收集激活不同时间点的血小板蛋白裂解液,并进行免疫印记检测磷酸化Akt的变化。结果 人血小板与小鼠血小板在mRNA水平和蛋白水平均表达USP9X。相对于年轻小鼠,老年小鼠血小板中USP9X的表达明显升高(0.87±0.099 vs 1.05±0.980,P<0.05)。使用USP9X的特异性抑制剂提前30 min孵育血小板,之后检测血小板的聚集、释放及铺展功能,结果显示,相比于对照组,USP9X抑制剂处理组的血小板的聚集和释放水平明显下降(P<0.05);相比于对照组,抑制剂处理组45 min的铺展面积显著降低。最后,免疫印记结果显示,USP9X抑制剂处理组的血小板的Akt磷酸化水平明显下降。结论 人和小鼠的血小板表达USP9X,USP9X可促进血小板的聚集释放及铺展,并可影响Akt的磷酸化水平,USP9X的抑制剂或可成为潜在的临床血栓干预靶点。

超高效液相色谱-串联质谱法测定原花青素

本文建立了以超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS)测定低聚原花青素(OPCs)的方法。样品中原花青素在含高铁离子的酸性乙醇溶液中经密闭高温反应后生成氰定离子,通过含1%甲酸,28%水甲醇组成的流动相(72∶28,v/v)经Zorbax Eclipse Plus C18反相色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm)分离,采用大气压电喷雾离子源(ESI)在选择离子监测(SIM)模式下以质荷比为287(m/z)的氰定正离子进行检测,并以美国药典(USP)低聚原花青素标准品进行定量。结果显示原花青素在0.2×10^(-6)~2×10^(-6) g/mL的浓度范围内呈良好线性关系,相关系数大于0.999,三个不同浓度水平的平均加标回收率在98%~104%之间,相对标准偏差(RSD)小于5%,此方法具有较高的精密度和准确度。该液质联用方法同时对比了不同标准品之间的差异,当采用低聚原花青素标准品时将有助于保证产品中原花青素测定结果的一致性。

USP改性剂对沥青混合料路用性能的影响

为探究USP改性剂对沥青混合料路用性能的影响,分别采用沥青质量分数为4%和4.5%USP改性剂制备USP改性沥青和USP/SBS复合改性沥青。通过对USP改性沥青混合料以及USP/SBS复合改性沥青混合料路用性能研究,评价了USP改性剂对沥青混合料高温稳定性、低温抗裂性能和水稳定性的影响。结果表明,USP改性沥青与USP/SBS复合改性沥青混合料的高温性能均有较大提升,水稳定性以及低温性能满足要求,但低温性能略有下降。