重组小鼠干细胞逆转录病毒载体高效基因转染CD41^+、UT7、U937和MDA-MB-435细胞

目的 :研究重组小鼠干细胞逆转录病毒载体介导基因转染 ,探索一条高效基因转染的途径 ,为重组小鼠干细胞逆转录病毒载体在基因转染中的应用提供理论依据和奠定实验基础。方法 :①逆转录病毒载体的构建 :EC1- 4 (repeats 1- 4ofcadherin - 5extracellulardomains)基因克隆产物和mutant(Ser2 2 2A)MEK 1基因克隆产物 ,Bg1Ⅱ和EcoRⅠ限制性内切核酸酶切割后 ,克隆进入逆转录病毒表达载体pMSCV。②CD4 1+ 细胞的获取和细胞培养 :从脐带血分离的CD34+ 细胞通过TPO诱导表达CD4 1,FACS分离CD4 1+ 细胞。高糖DMEM培养液培养NIH 3T3和MDA -MB - 4 35细胞 ,U937细胞培养在RPMI- 16 4 0培养液 ,UT7细胞是细胞因子依赖性细胞株 ,Iscove’smodifiedDulbeco’s培养液中加入GM -CSF。③测定病毒滴度 :逆转录病毒载体转入包装细胞 2 93,36h后收集病毒上清液 ,感染NIH3T3细胞 ,流式细胞仪测定病毒滴度。④Westernblot:基因转染CD4 1+ 、UT7、U937和MDA -MB - 4 35细胞 ,Westernblot检测基因产物的表达。结果 :2 93细胞产生高滴度MEK1pMSCV病毒 :3 1× 10 7,高滴度EC1- 4pMSCV病毒 :1 0×10 8。用稀释 8倍的病毒转染基因 ,重组逆转录病毒MEK1pMSCV转染白血病细胞株UT7和U973,GFP阳性细胞 (转染阳性细胞 )分别是 6 0 73%、

促分裂原活化蛋白激酶信号阻断剂在TPO促进UT7细胞增殖和分化中的作用

目的探索促分裂原活化蛋白激酶(mitogenactivatedproteinkinase,MAPK)信号阻断剂对巨核细胞生长分化因子(TPO)促进UT7细胞增殖和分化作用,阐明TPO对UT7细胞作用的机制。方法将EGFPpMSCV和MEK1pMSCV质粒转染UT7细胞;转染细胞与TPO共培养,Westernblot法检测UT7细胞MEK1(MAPK/Erkkinase1)磷酸化;观察转染突变(Ser222A)的MEK1和MAPK阻断剂PD98059对UT7细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测转染突变(Ser222A)的MEK1和MAPK阻断剂PD98059对UT7细胞表达CD41的影响。结果①重组逆转录病毒载体MEK1pMSCV和EGFPpMSCV转染UT7细胞,EGFP阳性率为60.73%。②TPO不同的作用时间(1h,3h),实验组磷酸化MEK1均低于对照组(P值均<0.05)。③MAPK阻断剂PD98059和外源突变MEK基因阻断了TPO对UT7细胞的增殖作用,DMSO对照组的细胞增殖率为98.58%,PD98059组的细胞增殖率为39.00%(P<0.05);转染EGFPpMSCV组细胞增殖率为102.12%,转染MEK1pMSCV组细胞增殖率为48.93%(P<0.05)。④MAPK阻断剂PD98059组UT7细胞CD41表达(10.27%)明显低于对照组(36.43%),转染MEK1pMSCV组UT7细胞CD41表达(24.03%)明显低于转染EGFPpMSCV组(40.16%)。结论TPO诱导UT7细胞MEK1磷酸化,TPO作用时间与UT7细胞MEK1的磷酸化有明显的关系。

西门子7UT513变压器差动保护中零序电流的处理

针对济南电网110KV西郊变电站#2主变一次差动保护动作情况,对变压器差动保护中零序电流的处理办法进行分析,并着重对西门子7UT513的各种处理方法进行分析,并对其不同处理方法的灵敏度进行了评价。

天生桥换流站换流变本体差动保护7UT513的整定计算方法

本文详细的介绍了天生桥换流站的换流变的差动保护7UT513的整定计算方法和定检方法，特别说明了天生桥换流站的换流变的差动保护7UT513的特殊性，以及在整定和定检时应该注意的问题。说明了在保护整定时要输入哪些量、为什么要输入这些量，在保护定检时加入的二次实验电流的计算，以及为什么在各种故障和是否去零序时不一样。希望对微机型的差动保护的整定和定检提供参考，对实际的运行维护工作有所裨益，对其它的工程起到一定的参考作用。

西门子7UT51系列差动保护的原理分析及整定

根据西门子7UT51系列差动保护在绍兴电力局的应用情况 ,文中着重分析其电流相位调整、零序电流处理、二次谐波交叉制动以及TA饱和附加制动的原理和方法 ,并推导出西门子没有给出的Y(N)

7UT512型数字式差动保护继电器在电动机差动保护中的应用

介绍了 7UT5 12型数字式差动保护继电器的功能、特点及在电动机差动保护中的应用。

西门子7UT6差动保护的校验方法探析

文章阐述了西门子7UT6差动保护工作原理,以其在变压器保护中的应用为例,计算校验差动启动值、速断值及比率制动特性,并着重介绍了以一组三相电流校验比率制动特性的方法。

SIEMENS 7UT51型数字式差动保护继电器中差动保护的整定计算

介绍SIEMENS 7UT5 1型数字式差动保护继电器中的差动保护部分的特性 ,详细分析该保护的整定计算原则 。

西门子7UT512型综合保护继电器对变压器不平衡电流的处理

介绍了西门子7UT512综合保护继电器消除不平衡电流影响的处理方法,并与传统的电磁型继电保护的处理方法作了比较。

变压器差动保护单相校验方法浅析

目前多使用六电流输出端子校验仪采用三相法校验变压器差动保护,当某些单位由于条件限制只有三相电流输出端子的校验装置时,同样也可以具备校验条件。本文以西门子有限公司7UT612数字式变压器保护装置为例,用单相法来分析变压器差动保护中差流计算问题。

浅谈贵广直流换流变保护7UT612的整定计算方法

差动保护作为换流变压器内部故障的主保护是换流变保护的重中之重。概述了贵广直流输电工程换流变差动保护7UT612的设备特点及保护功能,介绍了西门子7UT612保护装置应用于换流变差动保护中的原理及特性,着重介绍了其整定计算原理、计算方法及工程实际设置值,并介绍了7UT612保护装置的基本定检方法。

西门子7UT513微机型综合保护继电器的应用

介绍了7UT513微机型综合保护继电器的功能、优点及在具体应用中应注意的问题。

新型重组人促红细胞生成素抗体中和活性检测方法的建立及其在毒理研究中的应用

目的建立新型重组人促红细胞生成素(Novel recombinant human erythropoietin,HuEPO)抗体中和活性的检测方法,并应用于毒理研究中样品的分析。方法通过考察新型rHuEPO对人UT7/EPO细胞增殖的促进作用及抗新型rHuEPO抗体(兔抗阳性血清)对该细胞增殖的抑制作用,建立抗新型rHuEPO抗体中和活性检测方法,并应用于毒理实验中对相关抗体血清中和活性的检测。结果新型rHuEPO对人UT7/EPO细胞的增殖具有促进作用,在0.125～128 ng/ml浓度范围内作用显著;抗新型rHuEPO抗体在10-1～10-4范围内对人UT7/EPO细胞的增殖具有明显的抑制作用,抑制曲线呈中和抗体性质。毒理实验中,抗新型rHuEPO抗体(SD大鼠血清)显著抑制人UT7/EPO细胞的增殖,且具有特异性;抗新型rHuEPO抗体(Beagle犬血清)对人UT7/EPO细胞的增殖无影响。结论成功建立了一种新型rHuEPO抗体中和活性检测方法,并成功应用于毒理实验样品分析,为新型rHuEPO在长期毒性实验中的免疫原性评价提供了一种有效的检测手段。

浅析7UT51型差动继电器的相位平衡

依据西门子公司提供的 Ynd5的相量平衡矩阵 ,经过相量矩阵转换后 ,得出 7UT51型继电器对于变压器不同钟点组别接线的 Y侧相量经相量平衡矩阵转换后 ,相位是固定不变的 ,关键在于 Δ侧相量矩阵的变化。分别对区外单相接地故障、区内单相接地故障及区内两相短路故障做了应用比较。