鄂西北地区疏花蛇菰的生药学研究

目的:对鄂西北地区疏花蛇菰进行系统的生药学鉴定研究,分析其潜在的活性成分。方法:采用基源鉴定、性状鉴定、显微鉴定、薄层色谱鉴定、紫外吸收光谱鉴定及DNA条形码鉴定方法,对本课题组采集的19份蛇菰样品进行鉴定,采用化学反应鉴别方法对其含有的化学成分进行初步研究和分析。结果:经系统鉴定,19份蛇菰样品均为疏花蛇菰(Balanophora laxiflora Hemsl.),主要含有糖、多糖及苷类、氨基酸、多肽及蛋白质、鞣质、生物碱类、强心苷、蒽醌类、黄酮类、挥发油及油脂、植物甾醇及三萜类等化学成分。结论:本研究首次对鄂西北地区疏花蛇菰进行了系统的生药学鉴定,可为疏花蛇菰的质量标准制定提供参考依据,为疏花蛇菰的进一步开发利用提供基础。

UV－DNA和抗UV－DNA血清的研制及初步应用

本文用短波紫外线（ＵＶＣ）照射人胎盘和小牛胸腺ＤＮＡ取得ＵＶ－ＤＮＡ（紫外线导致变性的ＤＮＡ），并分别对新西兰家兔进行长达９周的免疫。结果表明：人胎盘ＵＶ－ＤＮＡ未能引起免疫应答，其抗ＵＶ－ＤＮＡ未能检出。而小牛胸腺的抗ＵＶ－ＤＮＡ的效价为１：８。用兔抗小牛胸腺ＵＶ－ＤＮＡ检测３２例红斑狼疮（ＳＬＥ）病人和２１例正常人的血清，发现ＳＬＥ病人血清中ＵＶ－ＤＮＡ的阳性率为６５．６％，正常人为５％。两者的差异有非常显著性意义（Ｐ＜０．０１）。提示血清中ＵＶ－ＤＮＡ可望成为ＳＬＥ诊断和疗效观察及人群接触紫外线时健康监测的特异和敏感指标之一。

三种氨基甲酸酯类农药化合物对DNA的潜在损伤作用

应用紫外光谱法研究了3种氨基甲酸酯类农药对DNA的损伤作用。结果显示,这3种氨基甲酸酯类农药能够引起ctDNA的紫外吸收光谱发生发射波长以及吸收强度的变化,从而说明3种氨基甲酸酯类农药能够与ctDNA进行作用。即意味着3种氨基甲酸酯类农药进入生物有机体后有可能通过形成DNA加合物的形式而进一步导致基因突变,最终对生物体的DNA产生化学损伤。

虫草素与DNA作用的光谱研究

利用紫外光谱及以溴化乙锭 (EthidiumBromide ,EB)为荧光探针 ,研究了虫草素与小牛胸腺DNA的作用机理。讨论了不同浓度虫草素与DNA作用的紫外光谱 ,荧光光谱及磷酸盐对荧光的猝灭作用。从紫外光谱图上可看出DNA发生了明显的增减色效应并有轻微的红移现象 ,说明虫草素可能以其腺嘌呤碱基嵌入到DNA双螺旋碱基对间。DNA的荧光光谱先是增强然后减弱 ,最终伴随轻微的蓝移进一步表明了虫草素可能插入DNA双螺旋碱基对间。同时磷酸盐的猝灭作用说明虫草素与DNA的磷酸集团也能发生作用。最后通过Scatchard方程作图证明 :虫草素与DNA可能存在两种作用方式即插入方式和与DNA的磷酸基团结合。

三苯基锡化合物与DNA作用的光谱研究

研究了船体防污漆中主要防污成分———三苯基一氯化锡(TPTCl)与DNA作用的光谱性质。结果表明,TPT Cl对DNA的作用是双重的,也就是既可作用于DNA的碱基,对DNA双螺旋结构有一定影响;也可作用于DNA的磷酸基团,使DNA构象发生变化。主要表现在作用时间不同,则作用位点也不同。短时间内,作用位点是DNA的碱基,紫外光谱表现为增色效应;长时间时,作用位点转到了DNA的磷酸基团,紫外光谱表现为减色效应。另外,考察了不同缓冲溶液体系对TPTCl与DNA作用光谱的影响。紫外光谱表明,Tris-HCl和KH2PO4-NaOH体系减弱了TPTCl与DNA的作用,而HAc-NaAc体系则增强了TPTCl与DNA的作用。

芦荟大黄素与DNA相互作用的紫外光谱和电化学研究

用紫外光谱法和循环伏安法研究了溶液pH值对芦荟大黄素(AE)与DNA之间相互作用方式的影响。电化学测量结果表明,在pH4.4的磷酸盐缓冲液中,AE与DNA之间以静电作用为主,而在pH6.5和7.4的磷酸盐缓冲液中,则以嵌入结合为主,紫外-可见吸收光谱也证明了这一结论。当pH为7.4时,动力学参数(α和ks)的计算结果表明,二者之间形成了一种具有电活性的超分子化合物。

钴-60伽玛射线诱导淋巴细胞γH2AX表达的研究

采用流式细胞术检测60Coγ-射线照射后γH2AX表达的量效和时程关系,同时探讨紫外线联合60Coγ-射线照射后γH2AX的表达情况。结果表明,不同剂量60Coγ-射线照射后γH2AX表达量与照射剂量之间呈现明显的剂量效应关系。4 Gy 60Coγ-射线照射后,γH2AX的表达在1 h达到峰值,随后逐渐减少。与假照组相比,单纯紫外线照射组γH2AX表达增加,一直稳定维持约6 h左右,随后开始减少。紫外线联合60Coγ-射线照射组与单纯60Coγ-射线照射比较,γH2AX的表达无显著性差异。结果提示采用流式细胞术检测γH2AX的表达估算受照剂量具有可行性,该法有望成为估算辐射剂量的新方法。

UV-B诱导水稻叶片DNA形成CPD的研究

采用单克隆抗ELISA检测了UV B对水稻叶片CPD的诱导形成及温度的影响。水稻叶片中CPD的积累随UV B处理时间的延长而增加 ;UV B诱导的CPD形成具有温度依赖性 ,在 0 - 30℃的温度范围内 ,较低温度下UV B诱导的CPD较少。

N-(茄呢基哌嗪烷基)蒽甲胺的合成及其与DNA作用的研究

以茄呢醇为原料合成了两个新的N-(茄呢基哌嗪烷基)蒽甲胺类三胺化合物,其结构均经1H NMR,IR,MS,元素分析等方法确证,初步的体外生理活性测试表明两个化合物对L1210(淋巴性白血病细胞)的IC50(抑制浓度)分别为4.3和3.1μmol。用紫外光谱、荧光光谱研究了N-(茄呢基哌嗪丁基)-9-蒽甲胺(4b)与DNA的相互作用方式,并与N1-(4-丁胺基)-N4-(9-蒽甲基)-1,4-丁二胺(5)与DNA相互作用的光谱进行了对比。实验结果表明,化合物4b对DNA-EB体系产生荧光增色作用而5对DNA-EB体系则产生荧光猝灭作用,但DNA对两种化合物作用的荧光光谱均表现出荧光猝灭现象。推测结构中含有茄呢基长链及两个叔氮原子的化合物4b与DNA可能仅是静电结合或分子部分嵌入DNA,而化合物5与DNA的作用表现为典型的嵌入式作用。

克百威与DNA之间作用的光谱学研究

利用吸收光谱法和荧光光谱法研究了克百威与ctDNA之间的相互作用。结果表明,ctDNA可使克百威的吸收光谱发生减色以及红移现象;ctDNA对克百威的荧光存在静态的荧光猝灭。两种光谱都支持克百威是以嵌插方式与ctDNA形成两者的加合物。溶剂以及离子强度对于两者加合作用存在不同的影响。

石斛总DNA的提取及鉴定

目的 :探讨不同DNA提取方法对石斛属DNA质量及分子标记结果的影响。方法 :对提取的DNA进行紫外光谱分析、总DNA电泳及RAPD分析。结果 :不同方法提取的DNA质量及产率存在显著差异 ,对RAPD结果影响很大。结论 :石斛属植物在DNA提取前加入无CTAB缓冲液抽提多糖等杂质 ,可获得较高质量的DNA。

紫外辐射诱导牡蛎细胞DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测

以牡蛎为研究对象,建立了水产动物DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测方法.分别以20W紫外灯距离30 cm照射牡蛎血液细胞30、60和120 s,然后用单细胞凝胶电泳技术检测细胞DNA的损伤.结果表明:未照射的细胞未受损伤,在电场中核DNA几乎不泳动,染色后呈圆形的荧光团,无拖尾现象.紫外照射后细胞核DNA均不同程度受损,且拖尾率、尾长、尾矩、Olive尾矩等指标值均随着照射时间加长而增加,DNA损伤程度与紫外照射时间之间存在明显的时间效应关系.研究结果为我国海洋环境中辐射防护研究和辐射毒理学检测提供新的研究方法和思路.

两种水溶性卟啉与DNA相互作用的研究

The interactions of two kinds of water-soluble porphyrins, Cu (NEAE) andH2PPS, with DNA have been investigated by microcajorimetry and UV spectroscopy.The experimental results show that Cu (NEAE) interact with dsDNA in the outside-boundmode, its binding number is 9～10 base pairs and its binding enthalpy △H＝-24．4kJ．mol-1.There are large enthalpy changes when Cu (NEAE) react with ssDNA. H2PPS can notreact with both dsDNA and ssDAN, which demonstrats that the coulombic force is one ofthe important factors affecting the interactions of porphyrins with DNA.

新型Schiff碱双核铜配合物与DNA相互作用的光谱研究

研究了在pH5.3的醋酸-醋酸钠缓冲体系中,四甘醇醛缩苯丙氨酸Schiff碱与铜的双核配合物([Cu2L(NO3)]NO3)与DNA作用的情况。结果表明[Cu2L(NO3)]NO3在此体系下具有较强的荧光,DNA加入后对其荧光有一定的敏化作用。探讨了造成此种现象的可能原因,并推导了该二元体系的结合常数。

紫外光谱在研究金属配合物与DNA相互作用中的应用

概述了紫外光谱法在研究金属配合物与DNA相互作用中的应用。紫外光谱法是一种研究配合物与DNA相互作用最简便、常用而有效的方法,不仅能够判断配合物与DNA间的作用模式,还能够准确表征两者间的作用强度,在化合物与DNA相互作用研究中发挥着重要作用。

增强UV-B辐射对大豆胚轴DNA损伤、修复和蛋白质含量的影响

大气平流层臭氧层减薄引起到达地表的 UV- B辐射增强。为探讨在增强 UV- B辐射下植物细胞 DNA的损伤修复和蛋白质含量的关系 ,利用 3H- Td R掺入法 ,研究了在 8.2 2 k J/(m2 d)和 12 .4 2 k J/(m2 d) U V- B辐射 (相当于兰州地区大气平流层臭氧减薄约 12 %和 2 0 % )胁迫下 ,大豆胚轴细胞 DNA合成和非按期合成 (UDS)变化 ,并测定了胚轴蛋白质含量变化 ,结果显示 ,UV- B辐射导致 DNA损伤 ,并诱导了 DNA损伤的修复 ,胚轴细胞 UDS效应增强 ,U DS指数增大。低 UV- B辐射强度下 ,胚轴蛋白质含量增加 ,可能是 U V- B诱导了一些与抗性有关的基因表达 ,导致一些新的与抗性有关的蛋白质合成 ;在高强度 UV- B辐射下 ,U DS指数与低强度辐射下无显著差异 (P=0 .0 5 ) ,但蛋白含量较低强度辐射下显著下降 (P=0 .0 5 ) ,说明高强度 UV- B辐射加重了 DNA损伤 ,而修复并未加强 ,并且高强度辐射抑制基因的正常表达和蛋白质合成。这些蛋白质的合成可能与大豆对 UV- B辐射的抗性有关。

UV反应不一定等同于DNA损伤反应

哺乳类细胞遭受紫外线（ＵＶ）和其他ＤＮＡ损伤剂作用后短时间内出现的基因转录诱导称为ＵＶ反应过去认为这种反应是ＤＮＡ损伤的结果．但是近年来的一些研究对这一观点提出了不少质疑，因而有必要在此讨论几个产生争议的主要问题。

紫外线消毒对大肠杆菌的损伤及复苏的研究

调查了紫外线消毒后大肠杆菌的光复活和暗修复能力,分析了紫外线消毒对细胞膜、三磷酸腺苷以及核酸(DNA、RNA)的损伤,结合rec A的SOS损伤修复机制,阐述大肠杆菌对紫外线的响应机制.结果表明:20m J/cm2紫外线剂量下,大肠杆菌去除率为5.63-log,且经光复活和暗修复24h后,光复活和暗修复百分比分别达到0.018%和0.00042%,光复活能力明显大于暗修复能力.紫外线消毒过程DNA的损伤取决于片段长度,长片段16s rRNA的基因损伤更明显,水处理常规的紫外线消毒剂量对总ATP含量和膜的完整性影响较小,为紫外线消毒过程的复苏提供了基本保障.然而紫外线消毒对大肠杆菌的RNA损伤较严重,紫外剂量达到50mJ/cm2时,大肠杆菌失去了SOS损伤修复的能力,因此培养法检测80mJ/cm2时大肠杆菌的复苏能力极弱,recA相关的RNA的消失可用于指示微生物发生了不可逆损伤.

拉曼和紫外光谱法研究阿司匹林及其与DNA的相互作用

检测了阿司匹林对照品与肠溶片的常规拉曼光谱和表面增强拉曼光谱,归属了各个振动峰位和增强峰位;研究了阿司匹林溶液与DNA相互作用的表面增强拉曼光谱与紫外光谱。结果表明:阿司匹林对照品与肠溶片的NRS及SERS图谱基本一致,药品的辅料对阿司匹林的检测几乎没有影响;在SERS中,阿司匹林分子是通过羧基和苯环垂直吸附在纳米银表面;阿司匹林分子与DNA相互作用的主要键合模式是插入作用,阿司匹林中的苯环和CO插入到DNA双螺旋结构的碱基对之间,为深入了解此类药物的作用机理提供了十分重要的信息和有益的参考。

UV-B辐射和蒽对三角褐指藻DNA伤害的相互作用

运用生态毒理学和生物化学的方法研究了紫外线和多环芳烃——蒽对三角褐指藻 DNA的伤害作用。结果表明 ,蒽对三角褐指藻的生长有抑制作用 ;随着蒽浓度的增加 ,三角褐指藻 DNA损伤程度增加 ;在蒽浓度固定不变时 ,随着处理时间的延长 ,DNA的损伤程度同样提高 ;在蒽的处理过程中同时伴有紫外线的辐射处理 ,DNA的损伤程度加剧 ;蒽处理解除一段时间后 ,DNA损伤程度未明显减轻 ,而 UV-B处理解除后 ,DNA的损伤可明显恢复。说明 DNA的损伤可在一定程度上指示海洋微藻受蒽伤害的的程度。