不同种类细胞株对UVB紫外线的耐受性初探

目的:探索几种细胞株对UVB紫外线的耐受性。方法:0、20和50 mJ/cm紫外线照射后,利用MTT、荧光素酶报告基因检测和克隆形成率实验,检测人表皮细胞HaCaT、人黑色素细胞A875、人肺腺癌细胞A549和H322、人肝癌细胞HepG2的存活及2增殖能力。结果:MTT实验结果表明HaCaT、A875、A549、H322和HepG2细胞在受到20和50 mJ/cm紫外线照射后第1天,细胞活力均显著降低(P<0.05),到照射后第3天,细胞活力仍显著低于未照射组(<0.05)。克隆形成率实验结果表明,HaCaT、A875和2HepG2细胞在照射后,细胞增殖能力受到显著抑制。荧光素酶活性检测实验结果表明,A549细胞在受到20和50 mJ/cm紫外线照射后第5和第10天,细胞活力显著低于未照射组(P<0.05)。结论:UVB紫外线对表皮细胞、肺腺癌细胞和肝癌细胞的存活和增殖能力均产生影响,其中正常表皮细胞HaCaT细胞对UVB紫外线的耐受性大于肿瘤来源的A875、A549、H322和HepG2细胞。

窄波UVB紫外线治疗玫瑰糠疹疗效分析

目的研究窄波UVB紫外线对玫瑰糠疹的疗效。方法 72例玫瑰糠疹患者,随机分为治疗组(38例)和对照组(34例)。对照组给予抗组胺、抗病毒及外用药治疗,治疗组在对照组治疗基础上予窄波UVB紫外线治疗。比较两组患者的治疗效果。结果治疗组总有效率为86.6%,高于对照组的44.1%,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗过程,两组未出现严重不良反应。结论窄波UVB紫外线治疗玫瑰糠疹疗效高,能缩短病程,安全性好,值得推广使用。

他克莫司软膏联合UVB紫外线治疗头面部稳定期节段型白癜风的临床效果

目的分析他克莫司软膏联合UVB紫外线治疗头面部稳定期节段型白癜风的治疗效果。方法选取我院初次确诊的头面部稳定期节段型白癜风患者80例为研究对象。按照入组顺序编号,单号为对照组(40例)行他克莫司软膏治疗,双号为观察组(40例)行他克莫司软膏联合UVB紫外线治疗。比较两组患者治疗前后炎症因子IL-17、IL-22,比较两组患者治疗前后白斑面积,比较两组患者临床疗效。结果治疗前,两组患者炎症因子IL-17、IL-22,比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,观察组炎症因子明显低于对照组(P<0.05);治疗后,观察组白斑面积明显小于对照组(P<0.05);观察组总显效率明显优于对照组(P<0.05)。结论他克莫司软膏联合UVB紫外线治疗头面部稳定期节段型白癜风患者,炎症因子减少,黑素增殖效果明显,白斑面积减少,有效提高了患者的生活质量,是面部稳定期节段型白癜风患者首选治疗方案。

扇贝(Chlamys farreri)多肽通过EGFR抑制受紫外线B(UVB)诱导的HaCaT细胞凋亡

利用Hoechst 33258荧光染色法检测紫外线B(UVB)辐射诱导HaCaT细胞凋亡率。结果表明,扇贝多肽(Polypeptide from Chlamys farreri,PCF)可以剂量依赖性抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡;表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂AG1478能明显抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡。采用3’-RACE法构建EGFR的cDNA片段,克隆测序检测突变位点。结果表明,UVB照射后EGFR发生碱基突变A→G,A→G,T→C,G→A,G→A;预加入5.69mmol/L的PCF,产生部分抗突变作用,1,2,3突变位点处未发生碱基的突变。

308nm准分子光对比UVB紫外线治疗斑秃的临床疗效

目的:针对308nm准分子光对比UVB紫外线治疗斑秃的临床疗效进行深入分析。方法:选取本院收治的60例斑秃患者作为本次研究的对象,将所选患者分成观察组和对照组,每组患者30例,观察组给予复方甘草酸苷联合308nm准分子光照射进行治疗,对照组患者采用复方甘草酸苷联合UVB紫外线照射进行治疗,然后对比两组患者的临床治疗效果以及用药不良反应发生率。结果:两组患者给予不同的治疗方法后,观察组患者的临床治疗总有效率明显高于对照组,P<0.05,差异具有统计学意义;两组患者治疗后平均显效时间和用药安全性对比中,观察组患者结果明显优于对照组患者,且差异具有统计学意义,P<0.05。结论:针对斑秃患者,给予308nm准分子光联合复方甘草酸苷进行治疗,临床效果显著,且有较高的临床用药安全性,因此值得推荐应用。

窄谱紫外线NB-UVB联合维A酸治疗银屑病疗效分析

目的对治疗银屑病使用窄谱紫外线NB-UVB联合维A酸方法的疗效分析。方法对银屑病患者600例进行随机分为对照组和观察组,分别300例。对照组仅使用窄谱紫外线NB-UVB治疗,观察组在对照组的基础上,联合使用维A酸治疗银屑病。通过受损皮肤面积和PASI严重指数来评价疗效。结果通过治疗,观察组在治愈率、显效率、总有效率等方面均优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。但是两者在复发率和副作用方面并无明显差异。结论通过临床观察,窄谱紫外线NB-UVB联合维A酸治疗银屑病有着较为理想的治疗效果,其优点有:安全、稳定和起效快等,可以推广临床应用。

百癣夏塔热片联合窄波紫外线NB—UVB治疗银屑病临床观察

目的观察百癣夏塔热片联合窄波紫外线州B—UVB）治疗寻常性银屑病的疗效。方法将2009年5月～2010年5月就诊的40例银屑病患者分为两组，治疗组18例，UVB照射联合百癣夏塔热片口服0．9克每次，每天3次；对照组22例单用UVB照射，观察两组的疗效和安全性。结果治疗组临床有效率、PASI评分改善程度均明显优于对照组田均〈0．05），且无严重不良反应发生。结论窄波紫外线NB—UVB联合百癣夏塔热片治疗银屑病疗效好，副作用小，患者易接受。

窄波紫外线NB—UVB联合百癣夏塔热片治疗银屑病疗效观察

目的观察百癣夏塔热片联合窄波紫外线（NB—UVB）治疗寻常性银屑病的疗效。方法将2009年5月～2010年5月就诊的40例银屑病患者分为两组，治疗组18例，UVB照射联合百癣夏塔热片口服0．9克每次，每天3次；对照组22例单用UVB照射，观察两组的疗效和安全性。结果治疗组临床有效率、PASI评分改善程度均明显优于对照SN（P均〈0．05），且无严重不良反应发生。结论窄波紫外线NB—UVB联合百癣夏塔热片治疗银屑病疗效好，副作用小，患者易接受。

川芎嗪对中波紫外线辐射后细胞光产物影响及其光保护作用机制的研究

目的观察中波紫外线(UVB)辐射后永生化角质形成细胞株(HaCaT细胞)中光产物环丁烷嘧啶二聚体(CPDs)的产生和清除情况,观察川芎嗪对UVB辐射后细胞光产物的影响并探讨其保护作用机制。方法采用30mJ/cm2UVB照射培养的HaCaT细胞,加入川芎嗪干预处理,采用免疫组织化学法检测CPDs,以RT-PCR法和Western blotting法检测各受试组中p53和增殖细胞核抗原(PCNA)的mRNA和蛋白的表达水平。结果UVB辐射后HaCaT细胞中CPDs生成,0.5h达高峰,辐射后4h内清除速率较快,4h后清除速率较慢直至辐射24h。川芎嗪处理UVB辐射的细胞中CPDs少于单纯照射组(P<0.05)。川芎嗪可下调p53(34.9%)和PCNA(30.9%)的mRNA表达,还可下调p53(23.1%)和PCNA(24.9%)的蛋白表达。结论HaCaT细胞对UVB照射所致光产物CPDs的清除存在快速期及慢速期;川芎嗪可降低光产物CPDs水平。川芎嗪的光保护作用可能与其下调修复相关调控分子p53和PCNA基因及蛋白表达有关。

雌激素对紫外线作用下人永生化角质形成细胞的保护作用

目的探讨雌二醇(17β-E2)对中波紫外线(UVB)照射下人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)的保护作用。方法将体外培养的HaCaT细胞随机分为3组:正常组、UVB组、E2组,分别加入不同的处理因素,UVB组在UVB灯下照射6min后继续培养,E2组照射前预先给予17β-E2使其终浓度达10-7mol/L,正常组不加处理因素;照射结束后继续培养12h后收集细胞,测定各组细胞的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平以及细胞内钙离子浓度和细胞线粒体膜电位的变化。结果与正常组比较,UVB组和E2组细胞线粒体膜电位显著降低(P<0.05),细胞内钙离子浓度显著升高(P<0.05),SOD水平显著降低(P<0.05),MDA水平显著升高(P<0.05);与UVB组相比较,E2组细胞线粒体膜电位显著升高(P<0.05),细胞内钙离子浓度差别不显著(P>0.05),SOD水平显著升高(P<0.05),MDA水平显著降低(P<0.05)。结论 17β-E2可通过抗氧化和抗凋亡作用拮抗UVB引起的HaCaT细胞损伤,对UVB照射下的HaCaT细胞具有保护作用。

参芩仿生化提取物对中波紫外线照射致生物体损伤的保护作用

目的通过人参、黄芩仿生化提取物,对中波紫外线(UVB)照射致人永生化角质形成细胞(HaCaT)及小鼠皮肤损伤的保护作用进行研究,为中药抗辐射提供理论依据。方法采用MTT法检测HaCaT细胞生存率,黄嘌呤氧化酶法检测细胞溶解液中及小鼠皮肤组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法检测细胞溶解液中及小鼠皮肤组织匀浆中丙二醛(MDA)含量变化。结果参芩仿生化提取物能够显著提高UVB照射损伤细胞的活性,明显升高细胞溶解液及小鼠皮肤组织匀浆中SOD活力,降低MDA含量。结论参芩仿生化提取物对UVB辐射致HaCaT细胞和小鼠皮肤损伤均有明显的保护作用,能够有效的抵抗UVB所致的氧化损伤。

补骨脂注射液外涂后照射窄谱中波紫外线联合他克莫司软膏治疗白癜风48例

白癜风是一种常见的获得性色素脱失症,易诊难治〔1〕,临床表现为皮损处色素完全脱失,呈乳白色斑片。白斑边缘境界清楚,大小、形态不一,可发生于任何部位,以指背、前臂、面、颈、生殖器及其周围较为常见。既往补骨脂注射液及紫外线照射的方法疗效确切,近年来,临床试验表明,新型钙磷镁调节剂他克莫司软膏对白癜风具有肯定的治疗作用〔2〕。

GX-50对中波紫外线辐射皮肤成纤维细胞的保护作用

为观察花椒中的提取物GX-50是否对UVB诱导的光老化皮肤细胞具保护作用,使用组织块法分离培养原代人皮肤成纤维细胞,通过观察不同剂量UVB照射后的细胞形态学改变确定后续实验的UVB单次照射剂量;MTT法检测不同浓度GX-50处理后的细胞活性;采用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)细胞化学染色法确定皮肤细胞衰老程度;测定丙二醛(MDA)和ROS含量评估皮肤细胞氧化损伤的程度;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞TGF-β1表达量的变化;Western blot法检测细胞胶原蛋白表达量的变化。结果显示UVB辐射成纤维细胞后,细胞胞体增大、颗粒增多、部分细胞死亡,在不引起细胞明显死亡的UVB最大剂量50 mJ/cm2作用下,10-6mol/L的GX-50在孵育24h时可显著增加成纤维细胞存活率(125.7%,P<0.01);经UVB照射后细胞SA-β-Gal染色阳性率增加,GX-50预处理后辐射组的阳性率明显降低(45.9%,P<0.05);UVB组与对照组相比,MDA、ROS含量明显上升,GX-50预处理后辐射组MDA、ROS含量分别下降了22.6%(P<0.01),22.8%(P>0.05),基本与对照组持平;UVB辐射后TGF-β1分泌减少,GX-50预处理后辐射组则明显上升(14.7%,P<0.05);Western blot结果显示,UVB可显著抑制胶原蛋白的表达,而GX-50预处理后表达量则基本恢复。推断GX-50对UVB引起的皮肤成纤维细胞损伤起到了保护作用,其机制可能是清除自由基和抗氧化,同时活化被UVB抑制的TGF-β信号通路,从而增加了胶原蛋白的表达。

不同时间紫外线照射对SD大鼠的皮肤光毒性损伤作用

目的比较不同辐射时间紫外线引起的SD大鼠皮肤光毒性损伤差异。方法采用长波紫外线(UVA,320～400 nm)(4.5 mJ·cm^(-2)·s^(-1))+中波紫外线(UVB,280～320 nm)(0.036 mJ·cm^(-2)·s^(-1))辐射的方法,建立皮肤光毒性损伤大鼠模型,每周照射2次,连续4周,模型1组、模型2组、模型3组累计辐射时间分别为342 min、440 min、520 min,正常对照组不予照射。实验结束后,对大鼠皮肤进行组织病理学观察,并采用免疫组化方法检测皮肤黑色素瘤特异性标记(HMB45)、波形蛋白(Vimentin)、内皮细胞标记(CD34)的表达情况。结果与正常对照组比较,模型1组、模型2组、模型3组均出现部分表皮角化过度、表皮厚薄不均、皱纹加深、毛囊增大、皮脂腺增生等变化;另外,随着辐射时间的增加,表皮病变更为严重,表皮厚度、皮脂腺横截面积更大,皮肤损伤评分也更高。与正常对照组比较,各模型组大鼠的皮肤成纤维细胞Vimentin、真皮层毛细血管CD34表达均增多,其中模型2组、模型3组增多更为明显;模型2组、模型3组皮肤HMB45表达明显增多。结论随着紫外线辐射时间的延长,皮肤损伤程度也逐渐加重,本研究或可为防晒功效评价提供合适的动物模型。

窄谱中波紫外线治疗玫瑰糠疹疗效观察

我科于2010年1～12月采用窄谱中波紫外（NB．UVB）联合常规药物治疗玫瑰糠疹45例取得较好疗效，现报告如下。

重组弹性蛋白的表征及在紫外诱导皮肤光老化过程中的作用

采用基因工程技术构建重组弹性蛋白工程菌,再利用发酵纯化技术得到重组弹性蛋白,并经氨基酸N端测序、分子量测定、氨基酸组成、蛋白纯度分析、内毒素含量测定及其红外光谱和圆二色谱分析对其进行表征鉴定。通过测定重组弹性蛋白对L929小鼠胚胎成纤维细胞粘附能力和细胞活力影响,以及在中波紫外线(UVB)诱导L929细胞光老化模型中,考察重组弹性蛋白对Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)、弹性蛋白(Elastin)以及基质金属蛋白酶1(MMP-1)mRNA转录水平的影响,探究重组弹性蛋白在UVB诱导皮肤光老化过程中的作用。结果表明,获得的重组弹性蛋白与天然弹性蛋白二级结构相似;在0.1 mg/mL质量浓度下无细胞毒性且具有一定的细胞活力,显著促进L929细胞的粘附和增殖。此外,重组弹性蛋白可通过下调UVB辐射后L929细胞内MMP-1转录水平,提高细胞中的CollagenⅠ,CollagenⅢ和Elastin表达,对UVB诱导的L929细胞光损伤具有良好的保护作用,显著提升L929细胞的存活率。

中波紫外线治疗玫瑰糠疹的疗效观察

目的:探讨中波紫外线治疗玫瑰糠疹的临床效果。方法:232例玫瑰糖疹患者分为紫外线组120例和对照组112例,均口服抗组胺及维生素类药,外用尿素软膏及炉甘石洗剂,紫外线组加用中波紫外线治疗。结果:治疗10 d后,与对照组比较,紫外线组患者患处红斑鳞屑明显减少或消失,瘙痒明显减轻或消失所用的时间显著缩短(P<0.01);临床疗效比较,紫外线组痊愈率及总有效率明显高于对照组(82.5%、99.2%与51.8%、8.9%,P<0.01)。结论:药物辅以中波紫外线照射治疗能显著缓解玫瑰糠疹患者临床症状,提高治疗效果。

不同防晒标准品对紫外线致大鼠皮肤光损伤的防护作用

目的研究不同防晒标准品对紫外线致大鼠皮肤光损伤的防护作用,为防晒化妆品防晒功效评价提供背景数据.方法采用长波紫外线(UVA,320~400 nm,4.5 mJ·cm^2·s^-1)+中波紫外线(UVB,280~320nm,0.036 mJ·cm^-2·S^-1)辐射的方法建立皮肤光毒性损伤大鼠模型,每周照射2次,连续4周,累计辐射时间440 min,各防晒标准品组(s1、S2、P2、P3、P7)每次照射前30 min涂抹防晒标准品.实验结束后,对皮肤进行组织病理学观察,并采用免疫组织化学方法检测皮肤黑色素瘤特异性标记(HMB45)的表达情况.结果S2组在表皮增厚、皮脂腺增生、皮肤损伤评分和黑色素瘤特异性标记(HMB45)表达4项指标均较模型组显著减轻(P<0.05);P3组和P2组在表皮增厚、皮肤损伤评分和HMB45表达3项指标均较模型组显著减轻;S1组[对UVA的防御能力(PFA)4.5]在表皮增厚和皮肤损伤评分2项指标均较模型组显著减轻P7组仅在表皮增厚1项指标较模型组显著减轻.总体来说标准品的防护效果符合PFA和防晒指数(SPF)值的大小.结论防晒化妆品对紫外线致皮肤光损伤的防护效果与PFA和SPF值有关,本研究方法可用于防晒化妆品防晒功效评价.

人参多糖的分离纯化及其对UVB致皮肤损伤的保护作用

以药食同源中药材人参为原材料,通过超声辅助热水法提取人参多糖(Ginseng polysaccharides,GPS),经酶解法去除淀粉和蛋白质,再经DEAE-52纤维素柱层析分离纯化得到精制人参多糖(GPS-1)。通过高效凝胶渗透色谱、红外光谱和核磁共振波谱测定了GPS-1的相对分子质量、单糖构成和结构特征,另外研究了GPS-1对人皮肤成纤维细胞(Human skin fibroblasts,HFF-1)存活率和HFF-1中活性氧(Reactive oxygen,ROS)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathion peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、金属蛋白酶1(Metalloproteinase 1,MMP-1)和金属蛋白酶9(Metalloproteinase 9,MMP-9)的影响。结果表明,GPS-1为均一性多糖,多糖纯度为95.13%,重均分子量为2.104 kDa,由α-D-葡萄糖、α-D-半乳糖醛酸、α-D-阿拉伯糖、α-D-岩藻糖、α-D-核糖、β-D-甘露糖和β-D-阿拉伯糖构成。GPS-1可保护UVB照射下的HFF-1细胞活性,质量浓度为200μg/mL的GPS-1溶液即可显著抑制MMP-1和MMP-9的表达(P<0.01),显著提升SOD和GSH-Px的含量(P<0.01),显著降低ROS和MDA的含量(P<0.01),为人参多糖的分离纯化以及在开发抗衰老产品的应用提供了科学依据。