UCH-L1、PRDX1与AIS患者阿替普酶治疗效果的关系

目的研究泛素羧基末端水解酶L1(ubiquitin carboxyl terminal hydrolase L1,UCH-L1)、过氧化还原蛋白1(peroxiredox protein 1,PRDX1)与急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者阿替普酶治疗效果的关系。方法选取2020年6月至2022年6月嘉兴市第一医院收治的198例AIS患者作为研究组,选取同期100名健康体检者作为健康组,利用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清UCH-L1、PRDX1水平。AIS患者均使用阿替普酶静脉溶栓治疗,治疗10d后评价临床疗效,比较不同疗效患者临床资料及血清UCH-L1、PRDX1水平差异,分析UCH-L1、PRDX1与阿替普酶治疗效果的关系。结果研究组患者的UCH-L1、PRDX1水平高于健康组(P<0.05)。重症AIS患者的UCH-L1、PRDX1水平高于中症、轻症患者(P<0.05)。完全前循环梗死型AIS患者的UCH-L1、PRDX1水平高于腔隙性梗死、后循环梗死、部分前循环梗死型(P<0.05)。AIS患者阿替普酶治疗后UCH-L1、PRDX1水平低于治疗前,且阿替普酶治疗效果越差UCH-L1、PRDX1水平越高(P<0.05)。UCH-L1、PRDX1联合预测AIS患者阿替普酶治疗效果的效能优于单一预测(P<0.05)。年龄、疾病严重程度、入院时美国国立卫生研究院卒中量表评分、UCH-L1、PRDX1是影响AIS患者阿替普酶治疗效果的危险因素(P<0.05)。结论UCH-L1、PRDX1水平在AIS患者血清中升高,与患者疾病严重程度、脑卒中分型有关,是影响AIS患者阿替普酶治疗效果的危险因素,可用于阿替普酶治疗效果的早期预测。

血清UCH-L1、HO-1联合aEEG在早产儿脑损伤早期诊断及预后评估中的价值

目的探讨血清泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)、血红素氧化酶-1(HO-1)联合振幅整合脑电图(aEEG)在早产儿脑损伤(BIPI)中早期诊断及预后评判的价值。方法选择2021年10月—2022年10月江苏省苏北人民医院收治的早产儿100例,根据颅脑核磁检查结果分为对照组(颅脑磁共振检查未见异常)40例,脑室旁-脑室内出血(PVH-IVH)组35例及脑白质损伤(WMD)组25例。PVH-IVH及WMD组早产儿根据纠正胎龄6个月的Gesell发育诊断量表中发育商(DQ)结果进一步分为预后良好组45例及预后不良组15例。检测3组早产儿出生后24 h、72 h的血清UCH-L1、HO-1水平。比较各组生后7 d及纠正胎龄40周时aEEG评分。采用ROC曲线分析UCH-L1、HO-1、aEEG评分在BIPI早期诊断及预后中的价值。结果血清UCH-L1及HO-1水平在生后24 h、72 h,PVH-IVH组及WMD组均高于对照组,且WMD组亦高于PVH-IVH组(P<0.05)。aEEG评分生后7 d及纠正胎龄40周PVH-IVH组及WMD组早产儿水平均明显低于对照组(P<0.05);WMD组、PVH-IVH组差异无统计学意义(P>0.05)。UCH-L1、HO-1、aEEG早期诊断BIPI的曲线下面积(AUC)分别为0.877、0.889、0.781,三者联合的AUC为0.929。预后不良组早产儿血清UCH-L1及HO-1水平在生后24 h、72 h均高于预后良好组(P<0.05)。生后7 d及纠正胎龄40周时,预后不良组早产儿aEEG评分水平明显低于预后良好组(P<0.05)。UCH-L1、HO-1、aEEG在评估BIPI患者预后的AUC分别为0.830、0.861、0.782,三者联合的AUC为0.953。结论BIPI早产儿UCH-L1、HO-1、aEEG评分明显呈异常表达状态,在早期诊断及评估预后方面具有一定价值。

脑创伤致脑震荡患者UCHL1水平和认知功能的相关性

目的 探讨脑创伤致脑震荡患者泛素羧基末端水解酶-1(UCHL1)水平和认知功能的相关性。方法 选取2018年1月至2019年11月该院收治的脑创伤所致脑震荡患者126例设为观察组,以认知功能评分中位数为界分为高分组(>65分)和低分组(≤6分),每组63例。选取同期在该院进行健康体检者100例设为对照组。记录观察组入院后临床资料,包括年龄、性别、体重指数、入院时间、临床体征等,并且根据韦氏智力测试记忆测试评判患者认知功能,比较与分析2组研究对象UCHL1水平。结果 观察组患者UCHL1水平明显高于对照组,高分组患者认知功能评分明显高于低分组,高分组患者UCHL1水平明显低于低分组,差异均有统计学意义(P<0.05);高分组患者年龄、性别、文化程度、UCHL1水平与低分组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);年龄、性别、文化程度、UCHL1水平均为影响因素,其中年龄、UCHL1水平为独立危险因素,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 脑创伤致脑震荡患者UCHL1水平可作为认知功能独立危险因素,检测UCHL1水平可准确反映患者认知功能和预后情况。

血清sTREM-1、UCH-L1对重度脑损伤患者预后的评估价值

目的探讨血清可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)、泛素羧基末端水解酶-L1(UCH-L1)对重度脑损伤(SBI)患者预后的评估价值。方法选取2018年6月至2020年1月开封市中心医院急诊科收治的170例SBI患者作为研究对象(SBI组),另选取同期门诊体检的80例健康者作为对照组(CON组),根据1 a内SBI患者预后情况将其分为预后良好组(105例)和预后不良组(65例)。检测入组对象血清sTREM-1、UCH-L1的水平,并分析二者对SBI患者预后的评估价值。结果SBI组患者血清sTREM-1、UCH-L1水平高于CON组(P<0.05)。单因素分析显示预后不良组患者血清sTREM-1、UCH-L1、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)水平及年龄、中线移位、Marshall CT分级级别高于预后不良组(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示sTREM-1(OR=2.079)、UCH-L1(OR=2.512)、Marshall CT分级(OR=1.737)是SBI患者预后不良的独立危险预测因子(P<0.05)。结论SBI患者血清中sTREM-1、UCH-L1水平升高,且二者是患者预后不良的危险因素,有助于患者预后的早期评估。

重症颅脑损伤患者血清NSE、UCH-L1水平变化及对预后的预测价值

目的探讨重症颅脑损伤患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、泛素羧基末端水解酶1(UCH-L1)水平变化情况及其对预后的预测价值。方法选择2017年1月—2019年12月本院收治的97例重症颅脑损伤患者纳入研究组,另选取同期体检健康者56名纳入对照组,均行血清NSE、UCH-L1水平检测。治疗结束后随访6个月,根据格拉斯哥预后量表评分(GOS)将研究组患者分为预后良好组(GOS4-5分)与预后不良组(GOS1-3分),对比血清NSE、UCH-L1水平,且采用多因素Logistic回顾分析法分析血清NSE、UCH-L1水平与患者预后不良的关系,另采用受试者工作曲线(ROC)评估其对预后不良的预测效能。结果研究组血清NSE、UCH-L1水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后随访6个月,97例重症颅脑损伤患者中预后良好74例(76.29%),预后不良23例(23.71%);预后不良组入院时血清NSE、UCH-L1水平均高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。经多因素Logistic回归分析,入院时格拉斯哥昏迷量表评分(GCS)评分、受伤至手术开展时间、低氧血症、并发症及血清NSE、UCH-L1水平均是重症颅脑损伤患者预后不良的危险因素,差异均有统计学意义(OR=3.235、2.680、2.333、2.497、3.536及3.380,P<0.05)。根据ROC分析结果,血清NSE、UCH-L1水平单项及联合预测重型颅脑损伤患者预后不良的灵敏度分别为78.26%、82.61%和91.30%,特异度分别为83.78%、74.92%和93.21%,曲线下面积(AUC)分别为0.840、0.843和0.946,血清NSE与UCH-L1联合预测的AUC高于各指标单独预测的AUC,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论重症颅脑损伤患者血清NSE、UCH-L1水平异常升高,且预后不良者入院时的血清NSE、UCH-L1水平高于预后良好者,入院时GCS评分、受伤至手术开展时间、低氧血症、并发症及血清NSE、UCH-L1水平均是重症颅脑损伤患者预后不良的危险因素,通过早期检测血清NSE、UCH-L1水平可对患者预后不良进行有效预测,但二者联合检测时的预测价值更高。

靶向USP2下调PD-L1表达的丹酚酸B抗肿瘤免疫作用研究

以程序性死亡配体1/程序性死亡受体1(programmed cell death ligand 1/programmed cell death protein 1,PD-L1/PD-1)免疫检查点阻断治疗为代表的肿瘤免疫疗法在临床上取得了令人鼓舞的治疗效果。小分子肿瘤免疫治疗药物与免疫检查点抗体药物的联用,为肿瘤治疗提供了新策略。因此,研发能阻断PD-L1/PD-1免疫检查点相互作用的小分子药物是下一代肿瘤免疫疗法的新方向。本研究对丹酚酸B(salvianolic acid B,SAB)下调肿瘤细胞中PD-L1表达发挥抗肿瘤作用及机制进行了研究。利用Western blot、流式细胞术、PD-1/PD-L1相互作用分析SAB对结肠癌细胞RKO和前列腺癌细胞PC3细胞内和膜表面PD-L1蛋白表达水平的影响;荧光定量PCR检测SAB对PD-L1 mRNA的影响;细胞阻抗法和结晶紫法检测SAB对人类外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)杀伤肿瘤细胞的效果;表面等离子共振技术分析SAB与泛素羧基末端水解酶2(ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 2,USP2)的直接相互作用;MC38荷瘤小鼠(所有动物实验均遵循中国医学科学院医药生物技术研究所伦理委员会的规定)检测SAB的体内抑瘤效果。结果表明,SAB能分别以浓度依赖性和时间依赖性方式下调RKO、PC3细胞中以及细胞膜表面PD-L1的水平,这与SAB抑制肿瘤细胞中去泛素化酶USP2的活性有关。机制研究发现,SAB可与USP2发生直接相互作用并抑制其去泛素化酶活性,从而促进PD-L1发生泛素-蛋白酶体途径降解。此外,SAB可促进共培养的PBMC对RKO细胞的杀伤作用。小鼠荷瘤实验证实,SAB可显著抑制C57BL/6小鼠中MC38移植瘤的生长。20 mg·kg^(-1) SAB处理荷瘤小鼠后,可使瘤体积减少63.2%。以上结果说明,SAB通过直接结合USP2并抑制其活性,促进PD-L1发生泛素-蛋白酶体途径降解,从而发挥抗肿瘤作用。本研究为将SAB研发成靶向USP2-PD-L1轴的小分子肿瘤免疫治疗药物奠定了基础。

去泛素化酶UCHL5在甲状腺癌组织中表达的临床意义及其与肿瘤细胞恶性行为的关系

目的:探究泛素羧基端水解酶5(ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase L5,UCHL5)在甲状腺癌(thyroid carcinoma,TC)组织中表达的临床意义及其体外生物学效应。方法:TCGA数据库分析UCHL5在TC组织中的表达及其与患者预后的关系,临床收集四川省人民医院血管·甲状腺外科2018年5月至2019年7月期间手术切除的TC及癌旁组织各82例,体外培养TC细胞KTC-1及WRO并慢病毒转染UCHL5过表达及相应对照载体,qPCR及Western blotting检测组织及细胞中UCHL5及B-Raf原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(B-Raf proto-oncogene serine/threonine-protein kinase,BRAF)的mRNA和蛋白表达水平,CCK-8检测细胞增殖能力,划痕修复实验及Transwell检测细胞侵袭及迁移能力。结果:UCHL5在TC组织中呈低表达(P<0.01),在TNM分期高的患者肿瘤组织中表达重新上调(P<0.01),UCHL5的表达与BRAF表达及患者TNM分期显著相关(P<0.01),而与患者年龄、性别、病理类型及BRAF突变无显著联系(P>0.05)。体外KTC-1及WRO细胞中过表达UCHL5可显著促进细胞BRAF的表达及细胞的增殖、转移能力(均P<0.01)。结论:UCHL5在TC组织中低表达,但在肿瘤进展时UCHL5表达上调,TC患者UCHL5高表达提示预后较差;同时UCHL5在体外可促进TC细胞的恶性行为。

急性缺血性脑卒中患者血浆趋化因子12与白细胞介素-33和泛素羧基末端水解酶-1水平变化及意义

目的探讨急性缺血性脑卒中患者血浆趋化因子12(CXC chemokine ligand-12,CXCL-12)、白细胞介素-33(interleukin-33,IL-33)、泛素羧基末端水解酶-1(ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase-L1,UCH-L1)水平变化,及其与病情严重程度、预后的关系。方法急性缺血性脑卒中患者89例为观察组,依据美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分分为轻度患者27例、中度患者42例,重度患者20例;患者入院后均给予抗血小板聚集、改善侧支循环等常规处理或溶栓治疗,并依据改良Rankin量表(modified Rankin scale,mRS)评分分为预后良好组46例和预后不良组43例;同期60例体检健康者为对照组。采用ELISA法检测观察组和对照组入院时血浆CXCL-12、IL-33及UCH-L1水平,并进行比较;Spearman法分析血浆CXCL-12、IL-33及UCH-L1与NIHSS评分、mRS评分的相关性。结果观察组入院时血浆CXCL-12[(7.47±1.71)ng/L]、IL-33[(62.91±11.33)ng/L]及UCH-L1[0.17(0.09,0.23)μg/L]水平均高于对照组[(3.24±1.29)ng/L、(34.26±9.45)ng/L、0.06(0.03,0.11)μg/L](P<0.05);观察组轻、中、重度患者血浆CXCL-12[(5.61±0.75)、(7.61±0.58)、(9.70±1.38)ng/L]、UCH-L1[0.12(0.07,0.18)、0.18(0.13,0.22)、0.25(0.23,0.29)μg/L]水平均逐渐升高(P<0.05),血浆IL-33水平在轻度患者[(66.29±10.55)ng/L]、中度患者[(64.05±11.60)ng/L]均高于重度患者[(58.64±10.52)ng/L](P<0.05),轻度患者与中度患者比较差异无统计学意义(P>0.05);预后良好组血浆CXCL-12[(6.21±0.93)ng/L]、UCH-L1[0.16(0.09,0.20)μg/L]水平均低于预后不良组[(8.23±1.26)ng/L、0.22(0.13,0.26)μg/L],血浆IL-33[(65.23±11.49)ng/L]水平高于预后不良组[(60.43±10.72)ng/L](P<0.05);Spearman相关分析结果显示,观察组血浆CXCL-12、UCH-L1与NIHSS评分(r=0.794,P<0.001;r=0.638,P<0.001)及mRS评分(r=0.422,P<0.001;r=0.215,P=0.043)均呈正相关,血浆IL-33与NIHSS评分(r=-0.289,P=0.006)和mRS评分(r=-0.256,P=0.015)均呈负相关。结论急性缺血性脑卒中患者血浆CXCL-12、IL-33及UCH-L1水平均升高,且与病情严重程度及预后密切相关。