敲降lncRNA UCA1降低人膀胱癌细胞系T24对吉西他滨耐药

目的探讨lncRNA UCA1对人膀胱癌细胞系T24体外对吉西他滨(GEM)耐药的影响及相关分子机制。方法用RT-qPCR检测T24细胞和T24/GEM细胞中UCA1 mRNA表达。用不同浓度GEM(0.1、1和10μmol/L)刺激T24/GEM细胞48 h,用LC3染色法观察自噬斑,Western blot检测自噬相关蛋白质表达。将UCA1-shRNA或UCA1-shRNA+pcDNA-Bcl-2转入T24/GEM细胞,用MTT法和流式细胞测量术评估细胞对GEM的敏感性;用Western blot检测p53、Bcl-2和自噬相关蛋白质的表达。结果T24/GEM细胞中UCA1的表达显著高于亲本T24细胞(P<0.05)。在0~10μmol/L浓度范围的GEM呈依赖性促进T24/GEM细胞自噬(P<0.05)。敲降UCA1后,T24/GEM细胞对GEM的敏感性增加(P<0.05),自噬能力减弱(P<0.05),p53和Bcl-2表达降低(P<0.05)。Bcl-2过表达能部分逆转UCA1-shRNA对T24/GEM细胞的GEM增敏和抑制自噬的作用(P<0.05)。结论敲降lncRNA UCA1通过抑制Bcl-2介导的自噬降低T24/GEM细胞对GEM的耐药性。

长链非编码RNA TUG1和UCA1在结肠癌组织中的表达及临床意义

目的探究长链非编码RNA TUG1和UCA1在结肠癌组织中的表达及临床意义。方法选取2018年5月—2020年5月收治的80例结肠癌患者为研究对象,利用原位杂交与qRT-PCR法检测TUG1和UCA1的表达,对表达情况和患者病理特征及预后进行研究。结果UCA1和TUG1在结直肠癌组织表达过程中与性别、年龄以及病理情况关系较小(P>0.05),和患者肿瘤大小、是否存在淋巴结转移、疾病的分化情况以及分期情况高度相关(P<0.05)。UCA1和TUG1高表达患者肿瘤更大,淋巴结存在转移情况,分化程度较高且TNM分期以Ⅰ/Ⅱ为主;80例患者进行随访36个月,中位生存时间33.75个月,死亡人数16例,术后总生存率80.00%(64/80);Kaplan-Meier生存分析显示UCA1和TUG1高表达死亡12例,生存38例,生存率76.00%(38/50);UCA1和TUG1低表达死亡4例,生存26例,生存率86.66%(26/30)。结论直肠癌组织中lncRNA TUG1和UCA1高表达与低表达对患者疾病预后有一定影响。

lncRNA UCA1在急性髓系白血病患者中的表达及其临床意义

目的:检测急性髓系白血病(AML)患者骨髓中尿路上皮癌胚抗原1(lncRNA UCA1)的表达水平,并探讨lnc RNA UCA1表达水平在AML患者中的临床意义。方法:收集50例AML患者骨髓标本作为实验组和20例缺铁性贫血(IDA)患者骨髓标本作为对照组,并收集AML患者的相关临床病理特征资料。采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测lnc RNA UCA1在实验组和对照组中的表达水平,并分析lnc RNA UCA1在AML患者中的表达水平与临床病理特征及预后的关系。采用Kaplan-Meier曲线分析lnc RNA UCA1表达水平对AML患者总体生存时间(OS)的影响;采用Cox风险回归模型分析影响AML患者预后的因素。结果:与对照组相比,lnc RNA UCA1表达水平在AML患者中明显升高(P<0.001);lnc RNA UCA1高表达组中血红蛋白低于90 g/L的患者占比明显高于低表达组(P=0.004);lnc RNA UCA1在M1、M2和M4型AML患者中表达水平较高,而在M0、M5型AML患者中表达水平较低,差异具有统计学意义(P=0.009)。lnc RNA UCA1高表达组患者与低表达组患者的性别、年龄、WBC计数、PLT计数、骨髓原始细胞比例、化疗方案及疗效、核型、基因突变及预后风险分层的差异均无统计学意义(均P>0.05);lnc RNA UCA1高表达组患者的OS较低表达组患者显著缩短(P=0.0229)。结论:lnc RNA UCA1表达水平在AML患者中明显上调,其高表达与较差的临床病理特征及不良预后相关,可作为判断AML患者预后的指标和潜在的治疗靶点。

基于UCA-FDA雷达距离补偿的DOA估计方法

主瓣欺骗式干扰给雷达在电子对抗中的应用带来了挑战。为了解决电子对抗中主瓣距离欺骗干扰的到达方向(direction of arrival,DOA)估计问题,基于均匀圆阵的频率分集阵列(uniform circular array-frequency diverse array,UCA-FDA)雷达,提出了一种利用距离补偿的DOA估计方法。所提方法通过对雷达接收信号进行距离补偿,消除距离维度上的影响,并将角度联合导向矢量和处理后的协方差矩阵代入多重信号分类(multiple signal classification,MUSIC)算法,从而获得目标的方位角和俯仰角。此外,所提方法还增加了分辨来自同一方向的多个目标的功能,具有角度估计精度高、抗干扰性能好、适用低快拍情景的优点。仿真实验也证明了所提方法的有效性。

UCA1在AML患者骨髓组织单个核细胞中的表达及对AML细胞增殖凋亡调节作用观察

目的观察长链非编码RNA(long non-coding RNAs,LncRNA)尿路上皮癌胚抗原(urothelial carcinoma associated gene 1,UCA1)在急性髓系白血病(AML)患者骨髓组织单个核细胞中的表达情况及对人AML不同亚型细胞株U937、HL60增殖凋亡的调节作用,并探讨其可能作用机制。方法(1)30例AML患者、30例缺铁性贫血患者的骨髓标本,采用RT-PCR检测骨髓组织单个核细胞UCA1。(2)将U937及HL60细胞各分为1、2、3组。1、2组分别用UCA1-siRNA(可抑制UCA1表达)和空载siRNA转染,3组为空白对照(不作任何处理)。分别于转染24、48、72 h取各组细胞,MTT法测算细胞增殖活力。转染48 h时采用流式细胞术观察各组细胞凋亡情况。转染48 h时采用WESTERN Blotting法检测各组细胞Wnt、β-连环蛋白(β-catenin)、p-gsk-3?蛋白。结果AML及缺铁性贫血患者骨髓组织单个核细胞UCA1相对表达量分别为4.96±1.51、1.09±0.93,二者比较,P<0.05。与2、3组比较,转染24、48、72 h时U937及HL-601组细胞增殖活力低(P均<0.05)。U937细胞1、2、3组细胞凋亡率分别为34.20%±1.21%、7.21%±1.41%、6.84%±1.53%,HL-60细胞1、2、3组细胞凋亡率分别为34.21%±1.83%、7.20%±1.56%、7.85%±1.93%,与2、3组比较,U937及HL-60细胞1组细胞凋亡率高(P均<0.05)。与2、3组比较,U937及HL-601组细胞Wnt、β-catenin相对表达量降低,p-gsk-3?蛋白相对表达量升高(P均<0.05)。结论与缺铁性贫血患者比较,AML患者骨髓组织单个核细胞UCA1表达升高。抑制UCA1表达可抑制U937及HL-60细胞的增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与UCA1抑制细胞Wnt/β-catenin信号通路有关。

益气养阴通络方通过lncRNA UCA1靶向调控miR-485-5p抑制糖尿病肾病大鼠肾小管上皮细胞凋亡及炎症反应作用机制

目的:探讨益气养阴通络方通过lncRNA UCA1靶向调控miR-485-5p抑制糖尿病肾病(DN)大鼠肾小管上皮细胞凋亡和炎症反应作用机制。方法:选取雄性Wistar大鼠50只,随机分为空白组、模型组和益气养阴通络方低、中、高剂量组,每组各10只;除空白组外,其余组大鼠采用高糖高脂胆固醇饮食造模。检测各组大鼠肾功能指标和炎症因子水平;采用流式细胞术检测各组大鼠细胞凋亡率;WB检测各组大鼠细胞凋亡蛋白表达;PCR检测大鼠UCA1、miR-485-5p mRNA水平;采用双荧光素酶报告基因实验检测UCA1与miR-485-5p的结合位点。结果:与模型组比较,益气养阴通络方不同剂量组24 h尿蛋白(24 hUTP)、血清肌酐(SCr)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平较低,且呈剂量依赖性(均P<0.05);与模型组比较,益气养阴通络方不同剂量组大鼠细胞凋亡率较低,且呈剂量依赖性(均P<0.05);与模型组比较,益气养阴通络方不同剂量组NLRP3、Caspase-1蛋白表达量较低,且呈剂量依赖性(均P<0.05);与模型组比较,益气养阴通络方不同剂量组UCA1 mRNA水平较高,miR-485-5p mRNA水平较低,且呈剂量依赖性(均P<0.05);UCA1与miR-485-5p存在结合位点,具有靶向调控关系。结论:益气养阴通络方可能通过lncRNA UCA1靶向调控miR-485-5p抑制DN大鼠肾小管上皮细胞凋亡和炎症反应。

长链非编码RNA UCA1促进人骨髓间充质干细胞成骨分化研究

目的探讨lncRNA UCA1对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法构建过表达lncRNA UCA1的慢病毒载体(UCA1a和UCA1b)和空载体分别感染人骨髓间充质干细胞。实验分为4组:对照组1为干细胞对照组;对照组2为空载体对照组;UCA1a为高表达UCA1a的实验组;UCA1b为高表达UCA1b的实验组。在成骨诱导分化7 d、14 d、21 d时,进行茜素红染色。采用Real-Time RT-PCR检测成骨相关基因Col1、ALP、OPN和SP7的mRNA表达水平。结果表达UCA1a和UCA1b上调hBMSCs成骨相关基因。在7 d时Col1表达水平高于对照组。14 d时hBMSCs的成骨相关基因ALP、Col1、OPN和SP7的mRNA水平均高于对照组。21 d时,ALP的表达水平上调,P<0.05为差异有统计学意义。两对照组间无显著差异。结论表达两种结构的UCA1体外均促进hBMSCs的成骨分化能力,未来有望基于UCA1调控hBMSCs成骨分化,用于修复颌面部骨缺损。

人UCA1基因新剪接变异体UCA1a全长cDNA序列的生物信息学分析

目的对UCA1基因新剪接变异体UCA1a全长cDNA序列进行生物信息学分析。方法运用生物信息学的电子基因定位和序列比对进行预测。结果 UCA1a基因与已登录的CUDR基因是同一基因。我们用UCA1a(CUDR)指代这一基因。此外,UCA1a(CUDR)与UCA1之间有一段长1 265bp的共同序列。结论推测UCA1a(CUDR)基因可能具有与UCA1基因相同的生物学功能。

一般情形下的UCA辐射方向图理论研究

产生涡旋波束的方法有多种,其中最常见的是均匀圆阵列(UCA),具有简单的结构和便捷的模式调控能力。然而,在高阶模态下,增加UCA的单元数会导致成本和空间占比增大,并且可能降低高阶模态的纯度。目前,UCA的设计多种多样,但对于选择合适单元数量的研究还比较缺乏。本文基于DFT,分析UCA的辐射方向图,并在偶数单元数的基础上增加奇数单元数,同时考虑了阵列半径、观测面与圆阵的距离以及观测圆的半径这些因素对纯度的影响。通过仿真研究设定了纯度阈值,从而确定最适合的单元数量。UCA实验结果表明,N=3时带内隔离度可达到35dB,而N=4保持在28-35dB,因此奇数单元有较稳定的隔离度。此外内环N=3,外环N=5的同心圆环阵列(UUCA)的隔离度均大于20dB。综上,在选择UCA单元数量时需要综合考虑纯度要求、成本、空间限制和系统性能等因素。

非编码RNAUCA1基因的细胞定位和组织表达谱分析

目的对UCA1基因进行细胞定位和组织表达谱分析,证实它与膀胱肿瘤的相关性,为进一步研究该基因在膀胱肿瘤中的作用提供实验依据。方法采用电镜原位杂交方法对基因进行细胞定位,RT-PCR分析基因在组织中的表达情况。结果透射电镜观察细胞膜上可见散在胶体金颗粒,胞浆有大量的胶体金均匀分布,没有特异性聚集现象,核内有散在的金颗粒。组织表达谱分析UCA1基因在绒毛组织、胎盘组织和胎儿的膀胱均有明显表达;在成人心脏和脾脏有表达外,其余组织均无表达;在8种常见癌中均有差异表达,且大多数癌比相应的癌旁组织表达量高;在膀胱正常粘膜、前列腺增生、肾癌及相应的癌旁组织中均不表达,而在膀胱肿瘤中均有不同程度的表达。结论UCA1基因定位于细胞浆,该基因可能与膀胱肿瘤密切相关,有望成为膀胱肿瘤分子标记物。

长链非编码RNA UCA1靶向miR-582-5p对膀胱癌UM-UC-3细胞生存和运动能力的调节作用及机制研究

目的:探究长链非编码RNA UCA1通过靶向miR-582-5p对膀胱癌细胞生存和运动能力的作用及作用机制。方法:用UCA1 shRNA(sh-UCA1)和(或)miR-582-5p inhibitor转染细胞,荧光定量检测转染效率及miR-582-5p的表达水平;荧光素酶报告实验确定UCA1和miR-582-5p的靶向关系;CCK8检测细胞活性,流式检测细胞凋亡情况,侵袭及划痕实验检测细胞侵袭迁移能力,免疫印迹检测细胞增殖、凋亡及迁移相关蛋白的表达。结果:sh-UCA1能显著降低膀胱癌细胞UCA1表达水平(P<0.05),促进miR-582-5p表达(P<0.05);miR-582-5p inhibitor能明显减弱sh-UCA1对miR-582-5p表达的促进作用(P<0.05);荧光素酶报告实验表明UCA1上有miR-582-5p的结合位点;沉默UCA1可显著抑制膀胱癌细胞增殖及Ki67的表达,促进细胞凋亡及cleaved caspase-3的表达(P<0.05);同时,sh-UCA1还能显著抑制膀胱癌细胞侵袭、迁移及VEGF的表达(P<0.05);此外,miR-582-5p inhibitor可显著减弱sh-UCA1对细胞增殖、凋亡及侵袭迁移能力的作用(P<0.05)。结论:UCA1可通过靶向miR-582-5p增强膀胱癌UM-UC-3细胞的生存及运动能力。

LncRNA UCA1对卵巢癌细胞侵袭及迁移的影响及机制

目的:探讨长链非编码RNA UCA1对卵巢癌细胞SKOV3侵袭及迁移能力的影响及可能的作用机制。方法:用脂质体2000将pc DNA/UCA1表达载体及pc DNA3.1空载体转染卵巢癌细胞SKOV3细胞。用G418筛选,建立稳定表达UCA1 RNA的SKOV3/pc DNA-UCA1细胞及转染空载体的SKOV3/pc DNA3.1细胞。RT-PCR方法检测两株细胞中UCA1的表达,鉴定阳性细胞株。Millicell小室检测两株细胞侵袭及迁移能力的变化,蛋白印迹法检测两株细胞MMP2及MMP9蛋白表达的变化。结果:成功构建稳定表达UCA1的SKOV3细胞,表达UCA1 RNA后,SKOV3细胞的侵袭及迁移能力均增加,MMP2及MMP9蛋白表达增加。结论:UCA1 RNA可能通过增加SKOV3细胞中MMP2及MMP9的表达来增强其侵袭及迁移能力,在卵巢癌侵袭及进展中发挥作用。

UCA通信协议体系介绍

:介绍了美国电力科学研究院制定的公共设施通信协议体系 ( UCA) ;对制造报文规范 ( MMS)技术、现场设备模型、控制中心间的通信协议 ( ICCP)模型作了介绍 ,总结了 UCA协议体系的特点 ;最后介绍

lncRNA UCA1靶向miR-145调节卵巢癌细胞SK-OV-3增殖和迁移行为

目的:探究lncRNA UCA1靶向miR-145对卵巢癌细胞增殖和迁移的作用。方法:RT-qPCR检测卵巢癌细胞和正常卵巢上皮细胞UCA1和miR-145表达;在线数据库分析卵巢癌中UCA1表达;过表达和沉默UCA1,RT-qPCR检测miR-145表达;荧光素酶报告实验确定UCA1与miR-145的靶向关系;CCK8和Transwell实验检测细胞活性和迁移能力。结果:根据预实验结果选择SK-OV-3细胞进行实验。过表达UCA1可明显抑制miR-145表达(P<0.01),沉默UCA1可显著促进miR-145表达(P<0.01),减弱miR-145 inhibitor对miR-145表达的抑制作用(P<0.05);荧光素酶报告实验证实UCA1可靶向结合miR-145(P<0.05);细胞生物学实验证实沉默UCA1可显著抑制卵巢癌细胞增殖及迁移(P<0.05);下调UCA1显著抑制增殖和迁移相关蛋白PCNA、MMP-15表达。结论:沉默UCA1可靶向miR-145调节卵巢癌细胞的增殖和迁移能力。

人UCA1基因转录调控的生物信息学分析与鉴定

目的生物信息学分析与鉴定人类膀胱癌特异性表达的UCA1基因转录调控作用原理。方法运用CpG岛预测软件EMBOSS CpGplot、CpG Island Searcher、Methprimer、CpG finder对UCA1基因启动子CpG岛进行分析。利用转录因子预测软件MatrixCatch和TFSEARCH对UCA1基因核心启动子区可能结合的转录因子进行分析。染色质免疫沉淀技术对所预测到的转录因子进行分子生物学实验验证。结果 CpG岛预测发现UCA1基因全长启动子区中不存在CpG岛,因此UCA1基因属于组织特异性基因与前期研究报道结果一致。生物信息学预测及筛选发现UCA1基因核心启动子存在4个与肿瘤关系密切的转录因子。根据预测结果选取2个转录因子利用染色质免疫沉淀实验鉴定,确定1个转录因子可与UCA1基因核心启动子区结合。结论 UCA1基因启动子区无CpG岛存在,该基因核心启动子区可能与多种转录因子结合,并确定转录因子c-Myb可以与UCA1基因核心启动子区结合。

非编码RNA—UCA1对膀胱癌细胞耐药及转化能力的影响

目的:构建长链非编码RNA-UCA1的真核表达载体pcDNA/UCA1,探讨UCA1对膀胱癌细胞BLS-211耐药及转化能力的影响。方法:构建UCA1的真核表达载体pcDNA/UCA1,用脂质体2000将pcDNA/UCA1表达载体及空载体pcDNA3.1转染入膀胱癌细胞BLS-211细胞,用G418筛选,建立稳定表达UCA1RNA的BLS-211/UCA1细胞及转染空载体的BLS-211/pcDNA3.1细胞,用RT-PCR方法检测两株细胞中UCA1及neo基因的表达,鉴定阳性细胞株,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测两株细胞对顺铂及丝裂霉素耐药的变化,软琼脂克隆形成实验检测两株细胞克隆形成率的变化。结果:成功构建pcDNA/UCA1真核表达载体,并建立起稳定表达UCA1的BLS-211/UCA1细胞,表达UCA1 RNA后,BLS-211/UCA1细胞对顺铂及丝裂霉素C的耐药性增加,软琼脂克隆形成能力增强。结论:UCA1 RNA增强了膀胱癌细胞BLS-211的耐药能力及转化能力,可能在膀胱癌复发及进展中发挥作用。

智能天线UCA-ESPRIT算法的仿真

首先介绍了用于均匀圆阵的 UCA- ESPRIT测向算法 ,并对其进行了改进和简化 ,将二维角度估计问题简化为一维的方位角估计问题 ,然后比较了该算法与 MUSIC算法在智能天线中的仿真结果 ,最后给出了相应的结论和改进思路。

一种基于UCA体系的网络化远动通信结构

UCA为控制中心之间和变电站及馈线中的实时现场设备之间提出了互操作模型,但是对于远动协议没有确定的模型。文中概括了现有电力系统远动通信协议中存在的一些缺陷;分析了UCA两个模型分别用于网络化远动通信方案的优缺点。最后结合两种模型,提出了一种新的面向对象电力系统信息模型(O2PSIM)。O2PSIM采用统一对象对电力系统建模,并引入适配层,通过统一的适配映射,能够兼容各种对象,并能适应新的CORBA,XML等技术应用。通过统一建模,最终实现EMS和变电站的无缝通信,还可以满足今后远动通信对网络安全的要求。

长链非编码RNA UCA1对微卫星不稳定的人类结肠癌细胞侵袭和迁移能力的影响

目的检测长链非编码RNA UCA1在微卫星不稳定的人类结直肠癌细胞中的表达,并观察下调表达UCA1对微卫星不稳定的人类结直肠癌细胞侵袭和迁移能力的影响。方法检测人正常结肠细胞HUM-CELL-0033及微卫星不稳定的人类结肠癌细胞Lo Vo细胞系中UCA1的水平,在Lo Vo细胞中转染UCA1 siRNA质粒,利用Transwell小室及划痕实验观察下调表达UCA1对细胞侵袭和迁移能力的影响,通过Western印迹检测DNA错配修复蛋白MSH2与MSH6的变化。结果微卫星不稳定的人类结直肠癌细胞Lo Vo中UCA1的水平明显高于人正常结肠细胞HUM-CELL-0033;在Lo Vo细胞中下调表达UCA1后能够明显抑制细胞的侵袭和迁移能力; Transwell侵袭实验和迁移实验显示下调表达UCA1组Lo Vo细胞的穿膜数与对照组比较明显减少。划痕实验中下调表达UCA1后细胞间距较对照组明显增大,提示细胞运动能力减弱。同时下调表达UCA1可明显降低细胞中MSH2与MSH6的表达。结论人结直肠癌中长链非编码RNA UCA1较正常结直肠癌细胞明显升高;在微卫星不稳定的人类结直肠癌细胞中下调表达UCA1可抑制细胞的侵袭、迁移运动能力,并且可能通过影响DNA错配修复蛋白MSH2与MSH6的表达发挥上述功能。

长链非编码RNA UCA1与miRNA-99b在膀胱癌细胞株和膀胱癌组织表达的相关性分析

目的:验证LncRNA UCA1与miRNA-99b的相关性。方法:采用荧光定量PCR法检测UCA1和miRNA-99b在过表达和敲低表达UCA1的膀胱癌细胞、膀胱癌组织中的表达。结果:在敲低UCA1表达的膀胱癌细胞5637中,UCA1表达下调60%,而miRNA-99b的表达上调250%;在过表达UCA1的膀胱癌细胞UMUC2中,UCA1表达上调410%,而miRNA-99b的表达下调60%;UCA1在膀胱癌中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05),而miRNA-99b在膀胱癌中的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.05);UCA1与miRNA-99b在膀胱癌组织中的表达呈负相关(R=-0.502,P<0.05)。结论:UCA1负向调节miRNA-99b的表达,但是它对miRNA-99b的调节在膀胱癌发生发展中的作用机制还需深入研究。