肌苷对CPZ介导的急性脱髓鞘小鼠行为学及皮质髓鞘的影响

目的:探讨肌苷对双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)介导的急性脱髓鞘小鼠行为学及皮质髓鞘的影响。方法:在普通饲料中掺入0.2%CPZ,饲养小鼠6 w,同时联合腹腔注射肌苷,制备脱髓鞘治疗模型,利用体重测量、Morris水迷宫、悬尾实验、透射电镜等技术,观察肌苷对脱髓鞘小鼠治疗后行为学及皮质髓鞘的影响。结果:(1)体重变化:与生理盐水对照组比较,CPZ损伤组、肌苷治疗组小鼠体重从第6 d开始均明显降低(P<0.05);(2)行为学:Morris水迷宫空间定位实验中,与CPZ损伤组比较,肌苷治疗组平台象限停留时间明显增加(P<0.05);悬尾实验中,小鼠6 min不动时间均无明显差异(P>0.05);(3)皮质髓鞘电镜观察显示,肌苷治疗组小鼠的皮质髓鞘病理改变程度降低,有新生髓鞘。结论:通过含0.2%CPZ饲料饲养联合腹腔注射肌苷制备脱髓鞘治疗小鼠,可使小鼠的学习、记忆功能明显改善,皮质髓鞘有明显的修复与再生,揭示肌苷对伴有学习记忆功能障碍的脱髓鞘小鼠有髓鞘保护作用。

肌苷对帕金森病小鼠模型的神经保护作用

目的:观察肌苷对MPTP致帕金森病(PD)小鼠模 型的神经保护作用.方法:用MPTP建立C57BL小鼠PD模 型,在MPTP前给予肌苷,通过行为学检测(自主活动计数 Rotarod检测、游泳实验)、免疫组织化学和荧光分光光度法 观察肌苷对PD小鼠模型的行为学表现、黑质多巴胺(DA)神 经元和纹状体酪氨酸羟化酶免疫反应阳性(TH ir)神经纤维 以及纹状体DA水平的影响.结果:给予MPTP后,小鼠行为 学计数降低,自主活动计数、Rotarod检测、游泳实验分别降低 约45%、43%和22%,黑质DA神经元数目减少约58%,纹状 体TH ir神经纤维密度减低,纹状体DA水平明显降低约 88%,提前给予肌苷后降低程度减轻,自主活动计数、Rotarod 检测、游泳实验降低程度分别约为5%、11%和12%,黑质DA 神经元数目减少约43%,纹状体DA水平降低约71%,两组相 比有显著性差异(P<0.01).结论:肌苷对MPTP所致的 C57BL小鼠的神经损伤具有保护作用.

肌苷对精神分裂症小鼠认知能力及海马超微结构的影响

目的:探究口服肌苷对精神分裂症(SP)小鼠模型学习记忆能力及海马神经元和髓鞘超微结构的作用。方法:30只ICR雄性小鼠按照随机性分为对照组(control)、模型组(MK-801)以及肌苷治疗组(Inosine+MK-801),每组10只。连续14d腹腔注射MK-801制备SP模型,Inosine+MK-801组小鼠于制备模型前30 min给予肌苷灌胃治疗并持续治疗16d。Morris水迷宫观察肌苷治疗S P模型小鼠后的行为学改变,透射电子显微镜观察海马髓鞘、神经元超微结构的变化。结果:Morris水迷宫结果显示:与control组相比较,MK-801组小鼠的逃避潜伏时间明显增加,经过平台所在位置的次数明显降低(P<0.01);Inosine+MK-801组与MK-801组比较,Inosine+MK-801组的逃避潜伏时间明显减少,经过平台所在位置的次数明显增多(P<0.05)。透射电镜图像结果示control组小鼠海马髓鞘形态规则、结构致密完整、板层清晰可见、无水肿,神经元核膜完整规则、染色质均匀、各细胞器形态规则完整并清晰可见;MK-801组小鼠海马内的髓鞘形态不规则且出现髓鞘局灶性溶解、板层结构模糊不清,神经元核膜不完整、胞质局部性空化和水肿,内质网减少;Inosine+MK-801组髓鞘和神经元超微结构损伤明显改善。结论:肌苷治疗可提高SP小鼠学习记忆能力、改善SP小鼠海马髓鞘和神经元的超微结构损伤。

国产异丙肌苷对小鼠免疫功能影响的研究

本实验研究了国产异丙肌苷对小鼠几个免疫学指标的影响。结果表明,异丙肌苷在体内外均能有意义地增加淋巴细胞转化,但单独对小鼠淋巴细胞无明显作用。异丙肌苷还能显著增强巨噬细胞的功能及血清溶菌酶含量。此外亦能使抗体反应明显增加。因而提示异丙肌苷对小鼠免疲功能具有促进作用。本文还讨论了其可能的作用机理。

多聚肌苷酸在支气管哮喘防治中的价值

目的研究多聚肌苷酸[polyinosinic:polycytidylic acid,Poly(I:C)]在支气管哮喘防治中的意义。方法将健康雌性Balb/c 6周龄小鼠80只,随机分为对照组、致敏组、激发前干预组、激发时干预组,每组20只。除对照组外,其余3组小鼠用OVA致敏建立哮喘模型,其中激发前干预组在OVA激发前给予Poly(I:C)干预;激发时干预组在OVA激发同时给予Poly(I:C)干预。通过乙酰胆碱量测定评定气道反应性,ELISA测定血浆IgE水平;测定肺泡灌洗液(BALF)中的细胞总数Eos计数;IL-4和IFN-γ浓度;肺组织切片测定IL-4和IFN-γmRNA浓度。结果致敏组、激发前干预组、激发时干预组小鼠对乙酰胆碱的反应性明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);3组哮喘小鼠之间的差异无统计学意义(P>0.05)。3组哮喘小鼠的血浆IgE水平、BALF中的细胞总数和Eos计数、IL-4和IFN-γ浓度、肺组织中IL-4和IFN-γmRNA水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且3组哮喘小鼠之间的差异也有统计学意义(P<0.05)。结论在OVA激发前、激发时给予Poly(I:C),均不能改变哮喘小鼠对乙酰胆碱的气道反应性;在OVA激发前给予Poly(I:C)干预可减轻炎症反应,但在OVA激发哮喘时给予Poly(I:C)干预则可加重炎症反应。

以PNP酶为靶点的急性高尿酸血症小鼠模型组建

目的建立一种新的急性高尿酸血症小鼠模型并利用该模型对PNP酶抑制剂Ulodesine进行体内药效作用评价。方法小鼠腹腔注射肌苷(inosine)和皮下注射氧嗪酸钾(oteracil potassium)诱导体内尿酸蓄积,在一定时间段内对小鼠进行内眦静脉或摘眼球采血,测定血清尿酸值,判断小鼠急性高尿酸血症模型成功与否;再利用酶动力学分析Ulodesine对PNP酶的体外抑制作用,并于造模前给予小鼠灌胃Ulodesine,造模后测定血清尿酸值,评价Ulodesine的降血尿酸作用。结果小鼠腹腔注射200 mg·kg^(-1)肌苷联合皮下注射200 mg·kg^(-1)氧嗪酸钾在1.5 h时能形成较为稳定的急性高尿酸血症;酶动力学测定结果显示Ulodesine对PNP酶有极强的抑制作用,其IC_(50)值为2.293 nmol·L^(-1);另外,Ulodesine的体内药效表明,Ulodesine能够明显减低急性高尿酸血症小鼠体内尿酸水平。结论我们已经成功地建立了一种新的急性高尿酸血症小鼠模型,该造模制作方法更简单有效,且该模型可以应用于验证PNP酶抑制剂。

内毒素对小鼠多种组织中A至IRNA编辑酶活性和mRNA中肌苷的诱导

A至IRNA编辑是近年来发现的一种遗传信息修饰新机制,它对于维持生物体的生命活动必不可少,某些转录后的前 mRNA必须经过 A至 IRNA编辑才能生成结构和功能正确的蛋白质.研究发现在内毒素刺激下小鼠肺、脾、胸腺和淋巴结等器官中RNA编辑酶活性呈现时间依赖性增强,编辑酶活性在 4～6 h到达峰值,其增高活性的维持可以达 16 h.内毒素刺激后,自小鼠肺脏和脾脏分离出的mRNA中肌苷的数量呈现时间依赖性增多.经过校正计算后的结果显示,与对照时间点的结果相比,内毒素刺激使pI增加达4.5倍.由于黑色素瘤细胞中内源性RNA编辑酶活性极低,由该细胞核失控转录出的RNA中的A几乎未受到编辑,然而将该RNA与小鼠胸腺提取物共同反应后,RNA中发生A至I编辑反应,这一编辑反应在内毒素刺激后的胸腺提取物中明显增强.结果表明,在内毒素刺激条件下,众多基因受到A至IRNA编辑的调控,并且提示RNA编辑酶可能在急性炎症时的调控免疫系统功能和调控基因产物多样性方面发挥重要作用.

球毛壳菌素F对Poly(I∶C)诱导的RAW264.7细胞TNF-α水平的影响

该实验主要研究球毛壳菌素F对聚肌苷酸胞苷酸Poly(I∶C)诱导的小鼠巨噬细胞系RAW264.7 TNF-α表达水平的影响.采用不同浓度的Poly(I∶C)(50μg.mL-1、100μg.mL-1和200μg.mL-1)和球毛壳菌素F(2μg.mL-1)对RAW264.7进行处理,运用流式细胞术检测细胞内TNF-α的表达水平.结果表明,各浓度的Poly(I∶C)与对照组相比均能极显著提高RAW264.7的TNF-α水平(P<0.001),并且具有浓度依赖性;球毛壳菌素F能够极显著地降低Poly(I∶C)诱导的细胞TNF-α水平(P<0.01).结论,球毛壳菌素F可能是通过降低炎症因子TNF-α的分泌而达到抗炎作用的.