大黄通便片中非法成分土大黄苷的定性筛查和定量测定研究

目的:建立大黄通便片中土大黄苷的定性筛查和定量测定方法。方法:采用薄层色谱(TLC)法初筛,高效液相色谱(HPLC)法定量测定及超高效液相色谱-质谱联用(UHPLC-MS)法定性确证。结果:TLC法检测结果显示专属性强,耐用性好。HPLC法方法学考察结果显示:土大黄苷质量浓度在2.59~259.6μg·mL^(-1)范围内呈良好的线性关系(R^(2)=0.9999);精密度、重复性、稳定性试验RSD均小于2.0%;平均加样回收率为97.89%(RSD=0.61%)。UHPLC-MS/MS法确证结果与TLC、HPLC法结果一致,阳性检出样品与土大黄苷对照品呈现同一保留时间的提取离子对(421.1→258.9,421.1→199.0)。结论:该方法灵敏、准确,可作为大黄通便片中非法成分土大黄苷的检查方法。

加速溶剂萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿配方乳粉中17种磺胺类药物残留

建立了加速溶剂萃取(ASE)-超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)测定婴幼儿配方乳粉中17种磺胺类药物残留的方法,并对方法的线性、灵敏度、回收率及基质效应等进行验证分析,同时将该方法应用于市场采集的婴幼儿配方乳粉样品中磺胺类药物残留进行分析和确证。试验结果表明,17种磺胺类药物在0.5~100μg·kg^(-1)范围内呈线性,决定系数均大于0.998,不同添加浓度下的回收率为75.3%~103.6%,相对标准偏差(RSD)均小于11.0%,基质效应为0.4~1.0,检出限为0.1~3.0μg·kg^(-1),定量限为0.3~10μg·kg^(-1)。该方法具有萃取便捷、灵敏度和准确度高等特点,可同时对婴幼儿配方乳粉中17种磺胺类药物残留进行测定。

超高效液相色谱法同时测定红景天保健品中红景天苷和甙元酪醇含量

提出了超高效液相色谱法同时测定红景天保健品中红景天苷和甙元酪醇含量的方法。样品经甲醇超声提取，以Acquity UPLC^TM BEH色谱柱（2.1mm×50mm,1.7μm）为固定相，以磷酸（0．05＋99．5）溶液-乙腈混合液为流动相作梯度淋洗，用二极管列阵检测器，检测波长为221．3nm。红景天苷和甙元酪醇的质量在0．01～0．3g·L^-1范围内与其吸光度呈线性关系。应用此法测定红景天茎根和红景天胶囊，平均回收率在90．67％～95．55％和90．73％～96．52％之间。

超高效液相串联质谱仪快速测定鱼肉中黄霉素A含量

[目的]建立鱼肉中黄霉素A含量的快速定量检测方法。[方法]样品经氨化甲醇溶液提取后,加入水饱和正己烷除去脂肪,取适量净化液氮气吹干、复溶后经超高效液相串联质谱仪测定。[结果]黄霉素A在1.0~50 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数r>0.999,鱼肉中黄霉素A的平均回收率为64.97%~71.43%,相对标准偏差(RSD)为2.10%~13.40%,方法检出限为1.0μg/kg,定量限为3.0μg/kg。[结论]超高效液相串联质谱仪具有简单快捷、对环境友好、准确度高、灵敏度好等优势,可用于快速大批量测定鱼肉及水产制品中黄霉素A残留量。

穿心莲在鸡中血清药物化学初步研究

【目的】对穿心莲在鸡中血清药物化学进行初步研究。【方法】在建立穿心莲超微粉高效液相色谱-质谱指纹分析方法的基础上,分析比较空白对照鸡血清、给药后所得鸡血清样品指纹图谱,鉴定内服穿心莲超微粉血中移行成分、来源及其代谢产物。【结果】鸡内服给药后,在60min时,有9个组分在血中出现;其中有4个主要成分来源于原药并在给药后0～480min内维持较高浓度,其余的组分可能是代谢产物。【结论】血中移行成分及代谢产物将成为穿心莲的体内作用基础,对其血清药物化学深入研究将为穿心莲活性成分的进一步研究奠定基础。

高效液相色谱法测定人血清中氯林可霉素

本文研究建立了人血清中氯林可霉素的高效液相色谱测定法（ＨＰＬＣ），该方法在超低紫外（１９８ｎｍ）下测定，具有取样量小（２００μｇ），线性范围宽（０．５％～５０μｇ／ｍｌ）；灵敏度高，以３倍基线噪音计算，最低检测限可达０．０５μｇ／ｍｌ；重现性好，高中低３个质控样品批间ＲＳＤ％分别为１．９７、０．４０和２．１５，批内ＲＳＤ％分别为０．８０、０．４６和２．３３，平均回收率分别为１０１．８７，１００．３４％和９３．８１％；方法操作简便等特点，为测定血清中药物浓度，确定给药方案和治疗剂量。

Comparative pharmacokinetics of five saponins after intravenous administration of TSFS injection and TSFS injection plus TFFG in rats under different physiological states

Sanqi is a popular traditional Chinese medicine and commonly used for promoting blood circulation and removing blood stasis. Notoginsenoside R1, ginsenoside Rg1, Re, Rb1 and Rd are the major active constituents of Sanqi. The purpose of the study was to investigate the pharmacokinetic behavior of the five active constituents from total saponin from Sanqi when it was used in the blood stasis animals or in combination with Gegen. The concentrations of the five active constituents in rat plasma were determined by an ultra-HPLC-ESI-MS/MS method. The main pharmacokinetic parameters were calculated and statistically analyzed using the unpaired student＆#39;s t-test. It was found that the pharmacokinetic parameters of notoginsenoside R1, ginsenoside Rg1 and Rb1 represented a statistically significant difference （Po0.05） between the normal rats and the blood stasis rats after administration of total saponin from Sanqi （TSFS）. And there were statistically significant differences （Po0.05） in the pharmacokinetic parameters of all the five constituents between administration of TSFS alone and combined with total flavonoid from Gegen （TFFG） in blood stasis rats. It suggested that the pharmacokinetic behavior of the active constituents from TSFS could be changed when it was used in blood stasis animals or in combination with TFFG.

测定土茯苓中二氢黄酮醇类含量的UPLC法和HPLC法的建立与比较

目的:建立与比较土茯苓中二氢黄酮醇类成分的两种含量测定方法,为完善土茯苓的质量标准奠定基础。方法:分别用超高效液相色谱(UPLC)和高效液相色谱(HPLC)对来自15个不同产地的土茯苓中4种二氢黄酮醇类成分进行含量测定,并比较两种方法的分离时间、线性、灵敏度、精密度、重复性、加样回收率和样品测定结果。结果:与HPLC法比较,UPLC的分析时间短、灵敏度高,两种方法在线性范围、精密度、准确度方面均无显著差异。结论:所建立的HPLC法简便可靠,可用于土茯苓的质量评价;UPLC法节省了分析时间和溶剂的消耗,是一种值得推广的、更为快速、准确的中药质量评价方法。

储存损伤对血小板超微结构、磷脂及聚集功能的影响

目的对保存期间血小板脂质、超微结构及功能的改变进行观察分析，探讨储存损伤对血小板的影响。方法２０名健康献血者，常规采血，经二次离心获得浓缩血小板，将每单位浓缩血小板分装成两份，分别编为甲、乙两组，每组２０个样本。甲组于２２℃水平振摇保存，分别在３天、５天时取样检测；乙组采用ＤＭＳＯ作为防冻剂，终浓度为５％，－８０℃保存，分别在１月、３月、６月时取样测定；采血当天的新鲜血小板为对照组。采用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ－ＵＶ）分析血小板磷脂的变化，电镜观察血小板超微结构的改变。结果正常人新鲜血小板中四种主要磷脂：磷脂酰胆碱（ＰＣ），磷脂酰乙醇胺（ＰＥ），磷脂酰丝氨酸（ＰＳ），磷脂酰肌醇（ＰＩ）的含量依次为ＰＣ＞ＰＥ＞ＰＳ＞ＰＩ，各占总磷脂含量的３７％，２７％，１２％，７％左右。血小板在２２℃水平振摇保存３天、５天，磷脂丢失率为５．８％，３１．８％；－８０℃冷冻保存（防冻剂为ＤＭＳＯ）１～６月，磷脂丢失率约为３３～３６％左右，且不随冷冻时间延长而增加。透射电镜观察血小板超微结构，发现血小板出现激活信号，如由盘状向球形转变，伪足延伸，开放小管系统（ＯＣＳ）肿胀，储存颗粒丧失，空地形成等。血小板聚集实验显示：血小板对聚集?

超高效液相色谱法快速检测牛乳中β-乳球蛋白

本文采用了超高效液相色谱法快速检测牛乳中的β-乳球蛋白。使用C4色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm),柱温40℃,检测器波长210nm,流动相为0.1%三氟乙酸溶液和0.1%三氟乙酸乙腈溶液,梯度洗脱,流速0.4mL/min,保留时间在7~8min。验证结果表明,β-乳球蛋白回收率在70%~90%,变异系数为0.93%~3.22%,定量限为40.0mg/kg。该方法适合批量测定样品。

超高压物理能对胡萝卜汁中类胡萝卜素异构体的影响

本实验研究了超高压处理对胡萝卜汁中类胡萝卜素异构体的作用,为利用超高压技术调控利于人体吸收的类胡萝卜素几何异构体奠定基础。胡萝卜汁分别进行100、300、500、700MPa处理5min,然后用C30柱加之二极管阵列检测器的HPLC分离检测样品中类胡萝卜素几何异构体。根据类胡萝卜素组分的色谱行为、光谱特征及Q值对其异构体进行定性,确定主要的类胡萝卜素有全反式β-胡萝卜素、15-顺-、13-顺-、9,15-顺-、9-顺-β-胡萝卜素和全反式α-胡萝卜素等。结果表明,超高压处理可使能垒较低的9、13、15位等全反式类胡萝卜素发生部分顺式异构化或降解生成小分子片段。

不同粉体二妙丸HPLC指纹图谱对比研究

目的:分别建立超微粉和细粉二妙丸的HPLC指纹图谱,并对其进行对比研究。方法:采用HPLC对不同粉体形态制备的二妙丸建立指纹图谱,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件"建立标准指纹图谱,对不同粉体二妙丸的指纹图谱进行相似度分析。结果:方法的精密度、重复性及稳定性良好。两种不同粉体形态制备的二妙丸指纹图谱的相似度均大于0.91,两者在共有峰上没明显差别,而峰面积差别明显。结论:该方法稳定准确,建立的HPLC指纹图谱能从整体上反映出二妙丸的化学成分信息,为建立二妙丸质量标准提供参考。

《化妆品卫生规范》中紫外线吸收剂检测方法的改进

〔目的〕为了对《化妆品卫生规范》中所提供的紫外线吸收剂的高效液相色谱检测方法进行完善 ,以便对化妆品市场进行有效的监督管理。〔方法〕采用反相高效液相色谱法。〔结果〕实验证明 :通过对标准液配制及样品前处理方法的修改 ,方法准确度和回收率提高近一倍 ;同时通过改变测试条件 ,可以有效的排除 4-甲氧基肉桂酸异戊酯(Eusolex10 0 0 )在测定时对 3- (4 -甲基亚苄基 ) -d - 1-樟脑 (Eusolex 6 30 0 )产生的干扰 ,该方法准确性好 ,相对标准偏差RSD <5 % ,样品加标回收率范围为 89.5 %～ 10 4.0 % ,测定结果令人满意。〔结论〕修改后的方法是对目前《化妆品卫生规范》

木瓜蛋白酶中具有水解壳聚糖活性的酶组分分离纯化

采用超滤、制备电泳对木瓜蛋白酶进行分离纯化。结果显示:超滤后木瓜蛋白酶的蛋白酶和壳聚糖酶比活力分别从435.10U/mg和2.17U/mg提高到531.39U/mg和2.65U/mg,纯化倍数均提高了1.22倍。制备电泳图谱上显示有五条明显的酶条带,酶活性测定显示条带2具有较高的壳聚糖酶比活力。采用SDS-PAGE和HPLC对此纯化酶组分进行纯度鉴定,结果显示为单一条带和单一峰,说明木瓜蛋白酶中存在具有水解壳聚糖活力的酶组分。HPLC-MS/MS测定该纯化酶组分的氨基酸序列为MRITISGSPG SGTTTLGRSI AEKYSYRYVS AGEVFRGL AK ERNMDLAAFG KIAETDPAID LEIADARQKEI GESSDDIILE GRLAGWMVEN ADLKILLCAS PECRSTRIAA REGLTEKQ AFEMTIERE ACEAGRYMEYYEI DILDFSPYDL ILNSETFSAN ELFAIVDAAVS SLLKRE。

HPLC法测定行连续性肾脏替代治疗超滤液中莫西沙星的含量及其应用

目的建立HPLC法测定行连续性肾脏替代治疗重症医学科患者超滤液中莫西沙星的含量,反映滤器对莫西沙星的清除情况,为其给药剂量调整提供可靠依据。方法选用Agilent ZORBAX SB-C_(18)(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液(40∶60),设置流速为1.0 mL/min;检测波长为293 nm;柱温25℃;进样量10μL;运行时间6 min。结果莫西沙星在2.000~60.00μg/m L范围内与其峰面积线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为98.74%(n=9),RSD为0.76%。结论本方法简单、快速,结果准确,重复性好,适用于行连续性肾脏替代治疗超滤液中莫西沙星的含量测定,能够反映滤器对莫西沙星的清除情况。

分散固相萃取-HPLC及UPLC-MS/MS法测定豆干和调味品中的二甲基黄和二乙基黄

建立豆干和调味品中二甲基黄、二乙基黄的高效液相色谱初步筛查方法和超高效液相色谱-串联质谱确证方法。样品用酸化乙腈提取,经旋转蒸发浓缩和分散固相萃取净化后,采用高效液相色谱仪进行筛查,遇到阳性样品时,结合超高效液相色谱-串联质谱法进行确证分析,并对方法的有效性进行验证。结果表明,在高、中、低3个水平进行加标回收实验,高效液相色谱法和超高效液相色谱-串联质谱法回收率分别在92.2%~102.6%和84.7%~110.7%之间,相对标准偏差分别为0.14%~6.71%和0.16%~6.43%。高效液相色谱法成本较低、操作简单,适用于样品的筛查工作;超高效液相色谱-串联质谱法灵敏度高、定性准确性强,适用于阳性样品的确证。

中药复杂样品高效液相色谱和超高效液相色谱分析条件转换方法

目的:建立中药复杂样品高效液相色谱(HPLC)和超高效液相色谱(UPLC)分析条件相互转化的方法。方法:采用丹参水提组分为模型样本,利用五次线性梯度分别求算该样品中12个色谱峰在HPLC和UPLC中的保留参数(a,c值),然后对a,c值进行分别关联,获取线性方程,利用该线性方程可以实现a,c值的相互转换,由计算的a,c值进行色谱条件的预测与优化。结果:HPLC和UPLC的a,c值存在良好的线性关系。a,c值线性关联的R2值分别为0.9914和0.9936。根据a,c值转换的线性方程,将川芎水提组分中各色谱峰在HPLC上的a,c值转换为UPLC上的a,c值,利用计算的a,c值进行UPLC的分离预测,以实验验证,模拟图与实验谱图一致。结论:本方法实现了两种分析条件的相互转化,实现了数据在这两个分析方法的通用性。方法简单、准确,有利于复杂样品的分析预测与优化。

超高效液相色谱法测定婴幼儿配方奶粉中的叶黄素

建立了采用超高效液相色谱测定婴幼儿配方奶粉中叶黄素的检测方法。样品经丙酮溶液提取,离心分层,冷冻离心去脂,YMC Carotenoid C30色谱柱（150 mm×4.6 mm,3μm）分离。以甲醇-甲基叔丁基醚（70∶30,v/v）为流动相等度洗脱,流速为0.5 mL/min,进样量5μL,柱温25℃,二极管阵列检测器检测,检测波长445 nm。方法在20~500μg/L范围内线性关系良好;相关系数为0.999 9;定量限为20μg/L。添加量在50、250、2 000μg/kg时,叶黄素的回收率为97.9%~104.4%。本方法操作简便,结果准确,灵敏度高,适用于婴幼儿奶粉中叶黄素的测定。

香肠中红色2G的HPLC法及UPLC-MS/MS检测

建立香肠中红色2G色素的高效液相色谱法(HPLC)测定和确证的超高压液相色谱-质谱/质谱法(UPLC-MS/MS)。以0.662mol/L氨水为提取液,样品均质提取两次,离心后用C18柱净化,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)检测,流动相为乙酸-乙酸铵缓冲液-甲醇(55:45,V/V),等度洗脱,流速为1mL/min,检测波长为530nm,阳性结果用UPLC-MS/MS确证。HPLC-DAD法在0.0212～1.06mg/L范围内,红色2G的峰面积与其相应浓度呈现良好相关性,r>0.999,方法测定限为0.106mg/kg,在空白样品中添加已知浓度的红色2G色素,平均回收率在79.0%～86.5%之间,相对标准偏差(RSD)在3.19%～5.06%之间。UPLC-MS/MS法的测定限为0.005mg/kg,平均回收率在75.5%～80.2%之间,RSD在3.62%～9.97%之间。该方法可用于香肠中红色2G的检测及确证。

重组人促红细胞生成素的HPLC与UPLC肽图谱分析

目的分析rHuEPO供试品及其对照品经胰酶酶解后分别在HPLC与UPLC上的肽图谱表现。方法rHuEPO供试品及对照品经透析、冻干、重新溶解和胰酶酶切后,以三氟醋酸/水,三氟醋酸/乙腈/水作为流动相梯度洗脱,分别以HPLC及UPLC连接反相色谱柱分析酶切后的肽段。结果rHuEPO供试品及其对照品经胰酶酶切后的肽段在HPLC上肽图谱表现一致,在UPLC上肽图谱也完全一致。UPLC分析rHuEPO肽图需要的进样量更少,且较传统HPLC的分析时间大为缩短,同时不损失分离度及灵敏度。结论UPLC与HPLC均能验证rHuEPO供试品及对照品肽图的一致性,相比于HPLC、UPLC分析肽图谱更方便快捷,更节省样品,更适合分析rHuEPO肽图。