靶向肿瘤血管αvβ_3整合素的脂质声学造影剂体外研究

目的 制作靶向脂质声学造影剂并评估其体外靶向造影成像的可行性。方法 制作高表达αvβ3 的黑色素瘤细胞K173 5的肿瘤细胞模型,利用新桥医院自行研制的脂质造影剂“脂氟显”,通过碳化二亚胺偶合技术,将单克隆抗体与微泡表面物质结合,制作成靶向微泡。分别与高表达αvβ3 的黑色素瘤细胞和低表达αvβ3 的黑色素瘤细胞进行体外结合实验,同时使用水流冲刷实验来验证靶向微泡与靶标结合后的抗流体剪切力的能力,从而在体外条件下研究微泡的靶向特性。结果 建立αvβ3 高表达的肿瘤细胞模型,并成功地制作出靶向肿瘤血管αvβ3 整合素的微泡,加入抗体在45ug以上时靶向抗体结合更加充分,体外试验结果提示靶向微泡与靶标有特异性结合能力,具有一定的抗流体剪切力能力。结论 靶向微泡体外试验结果提示进一步的体内靶向诊断和治疗是可行的。

超声微泡造影剂的发展及最新临床应用研究

目的:超声微泡造影剂经历了不同的技术发展阶段,目前靶向微泡造影剂的应用是一个重要的研究领域。方法:超声微泡造影剂可分为普通型和特殊型两类。普通超声造影剂经历了三个发展阶段,第一代为内含空气的气泡,无包膜且尺寸大;第二代内含空气,有膜包被,尺寸小;第三代内含氟碳类气体,有稳定的膜壳。靶向微泡造影剂是一类特殊造影剂,最新研究用于超声-微泡介导的靶向分子成像,如血栓、炎症显影,还可用于溶栓治疗,靶向药物或基因治疗等方面。结果:超声造影剂的稳定性不断提高,靶向微泡造影剂经静脉注射可到达特定靶区,低能超声作用下可提高局部组织显影的分辨率。携带治疗药物或基因的靶向微泡造影剂在低频(1MHz)超声作用下产生瞬态空化效应,细胞膜的通透性增加,因而有效提高了药物或基因的转染率。结论:超声联合靶向微泡技术在临床诊断和治疗中显示出了较大的优势,但其确切的生物学机制还未清楚,超声治疗参数需进一步优化。

超声空化效应和超声微泡在生物医学中的应用

近年来,随着超声技术在医疗领域的广泛应用及超声造影剂研制的进展,空化效应和超声造影剂协同运用作为一种高效、安全、操作简单,且具有一定靶向性的无创治疗手段,在基因治疗、药物输送、溶栓和治栓,以及炎症与肿瘤的靶向诊断与治疗方面显示了巨大的运用潜力。简要综述了超声空化效应和超声微泡的治疗机制及应用。

超声微泡造影剂携带基因和药物靶向治疗的研究进展

超声微泡造影剂携带基因和药物的靶向治疗是当前医学领域中的研究热点。超声微泡造影剂到达靶组织后,在超声能量作用下,因"空化效应",能有效穿透血管内皮屏障,定向释放内部包裹的基因或药物,使局部浓度大大增高,达到靶向治疗目的。本文就其在抗肿瘤、溶栓和炎症方面的研究进展做一简要综述。

靶向超声微泡造影剂与超声分子显像

超声分子显像是一门新兴发展的,以靶向超声微泡造影剂为显像剂,能够对体内组织器官微观病变进行分子水平的探测与显像的方法。本文对靶向超声微泡造影剂与超声分子显像的研究现状及发展方向进行了综述。

超声微泡造影剂携基因或药物治疗眼科疾病的研究进展

超声微泡造影剂携带药物和基因的靶向治疗系统是新兴的热门研究领域,目前已经在心血管疾病、肝肿瘤等疾病的靶向治疗方面得到了满意的研究成果,但在眼科的基础研究和临床疾病治疗方面尚处于初始阶段。我们就超声微泡造影剂携药物和基因靶向治疗在眼科基础研究和临床治疗方面的研究现状作一综述。

靶向超声造影微泡的制备及体外靶向性研究

目的制备一种靶向超声造影微泡,并进行体外靶向黏附效能评价。方法以磷脂为球壁材料,全氟丙烷为被包裹气体,采用高速剪切工艺制备氟碳脂质微泡,再应用生物素-亲和素桥连技术构建携带抗P-选择素单抗靶向氟碳脂质微泡,并应用P-选择素Fc段包被的平行板流动腔评价其体外靶向黏附效能。结果制备的靶向微泡呈圆整球形,粒度分布均匀,体外靶向黏附作用明显。结论本试验工艺可成功制备靶向氟碳脂质超声造影微泡,平行板流动腔法有助于评价靶向微泡的靶向黏附效能。

治疗超声介导微泡造影剂实现靶向性治疗的研究进展

治疗超声介导微泡造影剂实现辅助给药及治疗(如基因转染),成为超声研究中的热点。这种方法已经在体内和体外多种模型中实现,并可能为靶向个体化诊断和治疗开辟新的领域。本文就该技术的可能机制,研究现状以及研究前景作一综述。

超声微泡造影剂介导基因靶向治疗肝细胞癌的研究进展

随着超声造影及微泡制备技术的不断发展,超声微泡造影剂携带基因和药物的靶向治疗成为当前医学领域中的研究热点。利用超声波与微泡造影剂的相互作用及所产生的生物学效应,可实现微泡携带基因向目标组织转移释放,使肿瘤细胞局部目的基因的浓度大大增高,达到靶向治疗目的。

靶向微泡造影技术在超声诊疗中的应用

靶向微泡造影技术是通过静脉注射靶向微泡超声造影剂对体内组织器官微观病变进行分子水平的探测与显像,并可作为一种有效的基因或药物运载工具。靶向微泡造影剂的研究和应用,对组织、血栓及肿瘤的靶向显影应用前景广阔,在治疗中也显示出巨大的潜力。近几年来国内外对于靶向微泡造影技术的研究和应用也相当广泛。现就此项新技术在超声诊断与治疗中的进展予以综述。

Gαi2C-末端肽段靶向超声造影剂的制备及靶向性评价

目的探讨制备携Gαi2C-末端肽段(Gαi2ctp)靶向超声造影剂的可行性及靶向性。方法根据Gαi2ctp的质量将靶向微泡分为0.5、1.5、3 mg/L三组,利用静电吸附法制备Gαi2ctp靶向微泡,通过检测微泡大小、携带率来探索其最佳结合剂量。选取最佳剂量进行动物实验,复制犬房颤模型,利用超声靶向微泡破坏技术定点爆破微泡,采用免疫荧光法检测微泡的靶向性。结果 Gαi2ctp与SonoVue微泡可通过静电吸附法有效结合。1.5 mg/L组静置0.5、1、2 h Gαi2ctp靶向微泡携带率高于3 mg/L组,差异均有高度统计学意义(均P <0.01);1.5 mg/L组与0.5 mg/L组静置0.5、1、2 h Gαi2ctp靶向微泡携带率比较差异无统计学意义(P> 0.05)。1.5 mg/L组洗涤前后Gαi2ctp靶向微泡携带率比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。3 mg/L组和0.5 mg/L组洗涤后Gαi2ctp靶向微泡携带率低于携带前,差异均有高度统计学意义(均P <0.01)。犬左心房及肺静脉冰冻切片荧光显微镜下显示,实验组(携1.5 mg/L Gαi2ctp靶向微泡)犬左心房及肺静脉可见明亮的橙红色荧光表达,对照组(SonoVue空白微泡)未出现橙红色荧光。结论本研究成功制备Gαi2ctp靶向超声造影剂,其大小均一、性质稳定,并可与靶组织特异性结合。

靶向血管内皮生长因子受体2/整合素α_(v)β_(3)微泡体内评价肾细胞癌血管生成的实验研究

目的探讨血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)/整合素α_(v)β_(3)双靶向造影剂(MBD)在体内对肾细胞癌肿瘤新生血管的靶向能力。方法以造影剂USphere LA为模板,采用生物素-亲和素桥接法制备以VEGFR2、整合素α_(v)β_(3)为靶点的单靶向造影剂及双靶向造影剂。构建人肾脏透明细胞癌(786-O细胞株)裸鼠皮下种植瘤模型共40只,选取其中20只,每只均以任意顺序采用4种造影剂[非靶向造影剂(MBN)、VEGFR2单靶向造影剂(MBV)或整合素α_(v)β_(3)单靶向造影剂(MBI)及MBD]进行超声造影检查;另20只裸鼠行抗体阻断试验。所得声像图进行定量分析,得到以下定量参数:造影前3 min造影剂强度增量(a_(1))、峰值减半速度(a_(2))、曲线上升斜率(a_(3))、灌注时间(t_(0))、达峰时间(TTP)、峰值强度(PI)、平均渡越时间(MTT)和ROC曲线下面积(AUC),爆破前及爆破后10 s的峰值强度(P1及P2),以及二者的差值(dTE),比较4种造影剂间及抗体阻断前后各定量参数在不同组间的差异。免疫组化染色观察肿瘤组织CD31、VEGFR2及整合素β3表达情况。结果将MBN、MBV或MBI及MBD进行比较,结果显示2种单靶向造影剂间所有参数差异无统计学意义(均P>0.05),a_(1)、a_(3)、t_(0)、TTP、PI及P2在4种造影剂间差异无统计学意义(均P>0.05);AUC、MTT、P1及dTE表现为双靶向造影剂>单靶向造影剂>非靶向造影剂的趋势(均P<0.05),与之相反,参数a_(2)则表现为双靶向造影剂<单靶向造影剂<非靶向造影剂的趋势(均P<0.05)。比较双靶向造影剂MBD各定量参数在抗体阻断前后的差别显示,抗体阻断后a_(2)快于抗体阻断前(P<0.001),而AUC、MTT、P1及dTE较抗体阻断前降低(均P<0.001),其余参数在抗体阻断前后差异无统计学意义(均P>0.05)。免疫组化染色结果显示人肾细胞癌组织内有明显的CD31、VEGFR2及整合素β3表达。结论以VEGFR2及整合素α_(v)β_(3)为靶点的双靶向造影剂在体内对人肾细胞癌肿瘤新生血管有良好的靶向能力。

超声诊断或治疗用微/纳泡的研究进展

过去几十年中,微泡作为超声造影剂广泛应用于肿瘤成像领域,随着研究的逐渐深入,超声靶向微泡破坏技术结合载药微泡能够实现药物的精准释放,发挥治疗作用。微泡作为微米级载体难以透过肿瘤内皮细胞间隙,纳米级递药系统——纳泡应运而生,两者结构特征相似,但尺寸上的差异突显出纳泡在药物递送方面独特的优势。本综述以外壳材料为分类原则,对用作超声诊断或治疗的微/纳泡进行归纳总结,并探讨其未来可能的发展方向,为微/纳泡的后续开发提供参考。

C_3F_8脂质体超声微泡造影剂制备的初步研究

目的:制备稳定的脂质体C3F8气体微泡,为深入研究sulfatide导向的靶向声学造影剂准备必要材料。方法:通过改变卵磷脂、胆固醇和硬脂酸的比例及水化液成分,采用薄膜水化法,分多组实验,探索制备脂质体C3F8气体微泡的条件,观察和记录其物理特性参数。结果:质量比为3/1/(0.2-0.4)的卵磷脂/胆固醇/硬脂酸混合物的乙醚溶液,在压力-0.030MPa至-0.035MPa、转速130r/min、37℃水浴加热的条件下旋蒸35min左右制膜,然后用20%葡萄糖PBS进行水化,充入C3F8气体,50℃水浴70min和超声30s的条件下,所制备的微泡大小在2-4μm,平均半衰期为119min,表面带有更多的负电荷(平均电势-7.12)。结论:在该条件下制备的脂质体C3F8气体微泡造影剂的形态相对规则、粒径均一、稳定性好,符合通过肺循环的条件要求,下一步可以在此基础上进行导向分子的偶联研究。