宫颈癌组织和细胞中PAGE4的表达及其对癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响

目的:探究前列腺相关基因4(prostate-related gene 4,PAGE4)在宫颈癌组织和细胞中的表达及其对癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法:根据前期组学结果,已筛选出宫颈癌中显著差异表达的基因PAGE4。IHC和RT-qPCR检测PAGE4在宫颈癌组织和细胞中的水平。构建并验证PAGE4过表达载体,随后转染宫颈癌SiHa和HeLa细胞系,运用CCK-8实验、克隆形成实验、流式细胞术、划痕愈合实验、Transwell迁移实验和Western blotting探究PAGE4对宫颈癌细胞增殖、细胞周期、凋亡、迁移和上皮间质转化的影响。应用STRING数据库预测PAGE4的潜在互作分子c-Jun,RT-qPCR检测其在过表达PAGE4的宫颈癌细胞系中的水平。通过沉默c-Jun和回复实验初步探究c-Jun在PAGE4介导的宫颈癌细胞转移中的作用。结果:测序结果表明PAGE4在宫颈癌组织中表达明显下调,倍数约为457倍。PAGE4在宫颈癌组织及细胞系中均呈低表达。与对照组相比,过表达PAGE4组细胞增殖、细胞周期以及凋亡无明显差异,但细胞迁移明显减弱,E-cadherin蛋白表达上调且Vimentin蛋白表达下调。c-Jun逆转过表达PAGE4对宫颈癌细胞迁移和上皮间质转化的影响。结论:过表达PAGE4能抑制宫颈癌细胞的迁移和上皮间质转化,其机制可能与c-Jun相关。总之,PAGE4可能在宫颈癌的转移中起一定作用,PAGE4有望成为抑制肿瘤转移的新靶点。

PAGE-4单克隆抗体的制备及表达分布

目的 :制备抗PAGE 4mAb并鉴定其特异性及敏感性 ,应用该抗体在蛋白质水平上分析PAGE 4在正常与疾病组织中的表达 .方法 :以PAGE 4为抗原免疫BALB/c小鼠 ,利用杂交瘤技术建立稳定分泌抗PAGE 4mAb的杂交瘤细胞系 .采用WesternBlot及ELISA等方法鉴定抗体的特异性和敏感性 .应用正辛酸 饱和硫酸铵方法纯化抗体 .利用免疫组织化学方法对PAGE 4在正常与疾病组织中的表达进行分析 .结果 :获得 4株分泌特异性抗PAGE 4mAb的杂交瘤细胞株 ,mAb具有较高的特异性与敏感性 .在正常男女生殖系统组织如 :睾丸、前列腺、子宫中以及正常胰腺组织中有PAGE 4的表达 ,在前列腺癌、子宫内膜腺癌中PAGE 4高表达 .PAGE 4在蛋白质水平上的表达格局与以往有关PAGE 4在mRNA水平上的报道一致 .结论 :成功获得抗PAGE 4mAb ,为研究PAGE 4定位及功能提供了重要工具 .

全脑缺血再灌注大鼠脑组织水通道蛋白-4mRNA的表达及药物对其影响

目的观察实验药物对大鼠脑组织水通道蛋白-4(AQP-4)mRNA表达的影响,探讨芳香开窍药对缺血性中风的作用机理,为临床上运用芳香开窍法提供实验依据。方法按Pulsinelli的4-VO法改良后建立大鼠全脑缺血再灌注模型,采用半定量RT-PCR方法检测大鼠脑组织中AQP-4mRNA表达。结果芳香开窍中药能降低缺血再灌注大鼠脑组织含水量;模型组AQP-4mRNA表达显著增加,其次是尼莫通组,芳香开窍中药组轻微减少。结论AQP-4可能参与缺血性脑血管病脑水肿的发生发展过程,AQP-4抑制剂可减轻脑水肿。尼莫通对AQP-4mRNA表达影响不大,芳香开窍药可降低AQP-4表达,从而减少脑水肿,这可能是其芳香开窍的机理之一。

Pentium 4 CPU对系统存储体系的管理分析

本文介绍了Pentium 4 CPU对系统内存和磁盘虚拟内存的管理方式以及由此带来的主要特点。通过本文可以认识到Pentium 4 CPU强大的信息存储管理功能,对程序编制者编写符合Pentium 4 CPU特点的程序提供了依据。

小儿寒喘合剂对哮喘豚鼠模型IL-4、IL-5、TXB_2、6-keto-PGF_(1α)的影响

目的观察小儿寒喘合剂对哮喘豚鼠血IL-4、IL-5、TXB2、6-keto-PGF1α的影响。方法将80只豚鼠随机分为空白对照组、模型组、合剂大剂量组、合剂小剂量组和强的松组并造模。实验中观察IL-4、IL-5、TXB2、6-keto-PGF1α水平。结果小儿寒喘合剂高、低剂量及强的松组均可降低哮喘豚鼠血中IL-4、IL-5、TXB2水平,升高6-keto-PGF1α水平,与药物浓度呈正相关,且合剂高剂量组升高6-keto-PGF1α作用强于强的松组。结论小儿寒喘合剂能够降低气道变应性炎症,改善微循环及气道高反应性。

蜂窝物联网空口寻呼接入技术研究

针对在物联网和智慧城市应用中发现的大连接接入问题,利用蜂窝移动网络中的寻呼(Paging)技术解决终端海量准实时响应平台接入物联网问题,有效地降低终端的功耗并提高空口效率。寻呼是4G、5G、6G大连接重要技术之一。介绍如何采用寻呼技术系统满足平台与物联网终端实时通信需求。

四个春箭舌豌豆品系原种及第三代过氧化物酶同工酶分析

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对引自国际干旱农业研究中心的4个春箭舌豌豆品系原种(F0)和在甘肃省甘南藏族自治州经过3个世代选育的F3代,进行幼苗下胚轴过氧化物酶同工酶分析。结果表明,2505品系F3代在相对迁移率(Rf)为0.725位置和原种相比酶带缺失,而Rf值为其它位置处谱带颜色均较原种为浅;2556F3代在Rf值为0.725处呈现酶带,而原种该谱带缺失,其它位置各谱带明显较原种为深;2560F3代在Rf值为0.211和0.266位置处酶带变宽,颜色加深;2566F3代在Rf值为0.725处呈现酶带而原种该谱带缺失,在Rf值为0.211和0.266处2酶带较原种位置偏上,颜色偏深。供试8个品系过氧化物酶同工酶酶谱与对照品种333/A相比,均存在较大差异。由此对以上4品系原种和F3代呈现出的宏观上的生态适应性提供了分子水平上遗传变异依据。

无机氟对大鼠生物膜脂质流动性的影响

以ＡＮＳ，ＤＰＨ为荧光探剂，用荧光偏振技术观察氟对生物膜流动性的影响。体外实验，终浓度１～１２８ｍｍｏｌ／ＬＮａＦ对大鼠脑突触体上ＤＰＨ的荧光偏振度（Ｐ值）无明显影响（Ｐ＞０．０５）；而ＡＮＳ的Ｐ值增大，即膜表层流动性降低，呈剂量－效应关系。体内以每日２０ｍｇ／ｋｇＮａＦ腹腔注射染毒５０天，观察大鼠脑突触体膜，肝细胞膜和红细胞膜的平均流动性变化，发现３种膜中ＤＰＨ的Ｐ值均显著升高（Ｐ＜０．０１）。提示氟的直接作用和通过影响体内代谢导致生物膜流动性降低。

盐酸雷尼替丁胶囊体外溶出度测定

本文采用转篮法对国产几个厂家生产的盐酸雷尼替丁胶囊进行了溶出度考察，结果表明，同一厂家不同批号以及不同厂家的产品之间，溶出参数（Ｔ５０、Ｔｄ、ｍ）有显著性差别（Ｐ＜０．０１），提示有必要对每批产品进行溶出度检查以控制其内在质量。

影响SPH大鼠肝蛋白水解酶活性因素分析

用蛋白水解酶复性电泳技术分析了 4 3 6 3 6连续部分肝切除 ( 4 3 6 3 6successivepartialhepatectomy ,4 3 6 3 6SPH)中影响大鼠肝中性蛋白水解酶活性的因素。发现连续部分肝切除 (successivepartialhepatectomy ,SPH)的时间、SPH中营养条件、取材时间、制样条件和样品的后处理均可对大鼠中性蛋白水解酶活性产生不同程度的影响。

不同畦面覆盖物对龙胆草育苗效果的影响

本文探讨了单层黑色尼龙遮阳网、双层黑色尼龙遮阳网、绿色涂塑膜布和白布等畦面覆盖物对龙胆草育苗过程中畦上表层温度、湿度及出苗期与出苗率的影响。其中白布具有较好的保温效果，出苗率较高，浇水方便，一次性投入低，材料来源广泛，可在生产中大面积推广应用。涂塑膜布和单层遮阳同对出苗均有较好作用，但二者亦存在一次性投入较大、材料来源不如白布普遍等缺点，有条件的地方可推广使用。

人白内障球结膜微血管的电镜观察

目的 :观察人球结膜微血管的超微结构 ,认识白内障时球结膜微血管的电镜改变 ,为微循环和眼科研究工作提供参考。方法 :观察对象为 5例老年性白内障、1例糖尿病性白内障 ,术前一般状态良好。在白内障手术时取球结膜标本。电镜常规固定、包埋、定位、超薄切片、用电镜观察。结果 :球结膜毛细血管多由 2～ 3个内皮细胞围绕而成。核多为长椭圆形 ,核周缘有轻度凸凹。近腔侧胞浆细胞器较多 ,微丝和微管十分发达。基底膜、周细胞与一般毛细血管相似。 6例白内障球结膜毛细血管的内皮细胞、基底膜、周细胞、管腔都有不同程度的变化。其电镜改变可以分为三类 :( 1)代偿反应性增强改变 :微丝、微管十分发达、核周深凹、胞体突入管腔内、内皮细胞突起穿越基底膜、白细胞穿壁 ;( 2 )可恢复性退变 :线粒体退变、核质周集、胞浆出现空泡、基底膜分层、弥散、小量出血 ;( 3)严重不可恢复性改变 :核质固缩、腔内红细胞融合、血红蛋白溢出弥散、管壁断裂、腔内充满退变、裂解结构 ( 2例 ) ,并通过断裂处出至基底膜外。结论

血栓闭塞性脉管炎患者血栓素、前列环素及血液流变学指标的检测分析

目的 :探讨血栓闭塞性脉管炎患者血栓素B2 、前列环素与血液流变学指标的变化及其与发病机制的关系。方法 :用放射免疫法测定TXA2 和PGI2 的代谢产物血栓素B2 (TXB2 )、6 酮 前列腺素F1α( 6 K PGF1α) ,LBY N6A自清洗旋转式粘度计测定血液流变学指标 ,并与对照组对比分析。结果 :血栓闭塞性脉管炎患者TXB2 ( 53.59± 83.2 1ng/L)、6 K PGF1α( 14 .50± 3.4 5ng/L) ,与对照组相比差异显著 ;全血高切粘度、低切粘度、血浆粘度及纤维蛋白原疾病组均高于对照组 ,差异具有统计学意义。结论 :血栓闭塞性脉管炎患者存在TXA2 /PGI2失衡 。

前列腺癌潜在的标志物PAGE4/CT16.7

前列腺癌相关基因4(prostate-associated gene 4,PAGE4)是癌-睾丸抗原家族成员之一,具有在生殖系统组织中表达,而在非生殖系统组织中几乎不表达的特性。目前已发现前列腺癌患者可引起PAGE4的细胞免疫反应,前列腺炎患者血清中可检测到PAGE4蛋白。因此PAGE4有望成为前列腺癌免疫治疗潜在靶点及前列腺疾病筛查的又一新的血清标志物。对PAGE4基因及蛋白质的结构特点、表达特性、抗原肽筛选和生物学功能等方面进行综述。

犬骨髓血管内皮祖细胞的分离和诱导分化

目的 :分离并诱导犬骨髓内皮祖细胞分化为内皮细胞。并探讨不同培养条件、血清浓度和接种密度对分化的影响。方法 :密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞 ,以不同密度分别接种于DMEM和EBM 2 +SingleQuots培养基中 ,在不同浓度胎牛血清条件下培养。随后鉴定细胞并比较各组分化率。结果 :接种密度较低时细胞无法成活 ,接种密度达 10 5/cm2 时细胞能表达内皮细胞标志并具有内皮细胞功能。 2 %和 2 0 %胎牛血清培养细胞 ,其分化率存在显著差异。结论 :犬骨髓能够分离出内皮祖细胞并能在体外分化为内皮细胞 ;接种密度过低对其分化不利 ;低浓度胎牛血清有利于细胞的分化。

银染过程的时间考量

本文介绍了水稻几种细胞质雄性不育品种线粒体DNA的AFLP(Amplified Fragment Length Ploymorphism)预扩、选扩和变性的PCR程序。两种PAGE银染的方法中,强碱法简便节约,而弱碱法的成像效果好,但操作过程中时间的把握至关重要。

小麦中高分子量麦谷蛋白的高效分离回收

以普通小麦小偃6号为材料,研究从SDS-PAGE中快速回收和累积蛋白亚基的方法。采用制备电泳(17 cm×17 cm×1.5 mm)进行分离,KC l快速染色,将目的蛋白条带切下,置于透析袋中电洗脱回收蛋白亚基。结果表明,在蛋白提取过程中加入四乙烯吡啶与常规方法相比能够更好地分离高分子量麦谷蛋白14和15亚基,回收后的14亚基经电泳检测为单点纯。本方法为高效分离回收小麦中高分子量麦谷蛋白提供了新的技术思路。

中药三白草的化学成分研究(Ⅰ)

目的：寻找中药三白草的活性成分。方法：三白草地上部分乙醇提取物进行色谱分离，理化数据和光谱方法鉴定结构。结果：所得化合物鉴定结构为马兜铃内酰胺ＡⅡ（Ⅰ）、胡萝卜甙（Ⅱ）、金丝桃甙（Ⅲ）、异槲皮甙（Ⅳ）、槲皮甙（Ⅴ）、槲皮素３ＯβＤ吡喃葡萄糖（１→４）αＬ吡喃鼠李糖甙（Ⅵ），鞣花酸（Ⅶ）和柯里拉京（Ⅷ）。结论：除Ⅲ，Ⅳ和Ⅴ外，其它５个化合物均为首次从该植物中得到。

成年男性癫痫患者血清性腺激素水平的变化

目的： 探讨癫痫发作和ＡＥＤｓ 治疗对垂体一性腺激素平衡的影响。方法： 利用ＲＩＡ法测定了诊断明确的７３ 例成年男性癫痫患者血清ＬＨ、ＦＳＨ、Ｐ、Ｅ２、Ｔ水平， 并比较了ＡＥＤｓ 治疗组与未治疗组和健康对照组病人的血清性腺激素水平。同时，观察了其中的３１ 例癫痫患者癫痫发作前后血清性腺激素水平的变化。结果：癫痫发作前后血清性腺激素水平无明显差异。ＡＥＤｓ 明显影响血清性腺激素水平。在所有ＡＥＤｓ 治疗中， 血清Ｅ２ 水平明显升高， ＬＨ水平明显减低， Ｔ／Ｅ２ 的比较明显低于正常对照和病人对照组， 在ＡＥＤｓ 单一和联合治疗组中有３９．７％ 的病例性功能低下。结论： 癫痫发作不影响血清性腺激素水平。

颞叶癫痫海马、杏仁核及皮层病灶的超微结构观察

对１９例临床确认为颞叶癫痫而行海马杏仁核及皮层病灶切除术棘波灶的标本进行了电镜观察，发现在病变神经元周围，有髓神经纤维髓板松解、融合，轴突出芽；无髓神经纤维内微丝、微管排列紊乱，缠绕成团，见团样小体结构；突触中圆形突触小泡增多或耗竭。扁平状突触小泡相对较少；神经毡及毛细血管旁可见许多颗粒性电子致密物沉着，经Ｘ射线显微分析排除无机离子，考虑这些沉着物仍为机体的有机成份。半定量观察结果显示三个部位超微病理变化具有相似性。本课题的观察提示神经纤维及突触的病变可能是痫性活动的直接形态依据，而这种具有病变神经纤维及突触的神经元在痫性活动中则可能起着“起搏细胞”的作用，痫性活动的产生与兴奋性及抑制性递质的平衡失调有关。