内减张技术辅助前交叉韧带重建促进滇南小耳猪跟腱移植物韧带化

背景:前期研究已经成功建立了内减张技术联合自体跟腱重建前交叉韧带的滇南小耳猪动物模型,并验证了模型的稳定性和可靠性,但内减张技术能否促进自体跟腱移植物的韧带化进程问题仍未被研究。目的:从大体观、组织学、电镜检测多方面探讨普通重建与内减张重建前交叉韧带韧带化进程的差异。方法:选取30只成年雌性滇南小耳猪,左后肢膝关节取同侧膝关节跟腱行前交叉韧带重建(普通组n=30),右后肢膝关节取同侧膝关节跟腱联合内减张增强系统行前交叉韧带重建(减张组n=30),以自体右前肢作为对照组,暴露前交叉韧带但不行离断及手术处理。在术后12,24,48周分别处死10只动物,取左右膝关节标本行大体形态学观察评估移植物形态,MAS评分评估各个时间点韧带优良率,苏木精-伊红染色评估韧带移植物血管化程度,观察胶原纤维及细胞核形态并进行细胞核形态学评分,扫描电镜与透射电镜评估超微结构重塑。结果与结论:①在术后各个时间点减张组的韧带愈合形态更好,可以获得更高的MAS评分优良率(P<0.05),并可以获得更高的韧带血管化评分(P<0.05);②两组移植物胶原束及纤维束的排列均逐渐趋于有序,胶原间的横向纤维连接逐渐增多增粗,提示移植物的强度和塑形程度逐渐提升,术后各个时间点减张组韧带的重塑始终快于普通组;③术后各个时间点减张组胶原纤维的直径、分布密度、排列有序度均优于普通组,尤其在胶原纤维直径的比较上,组间及组内比较减张组均优于普通组(P<0.05)。

温针灸对膝骨关节炎兔损伤前交叉韧带修复及相关因子的影响

背景:温针灸可有效治疗膝骨关节炎。前交叉韧带的退变、损伤、断裂可影响膝关节局部稳定性,进而诱发膝骨关节炎的形成,温针灸是否可修复损伤前交叉韧带及其作用机制,目前尚不清楚。目的:观察温针灸对膝骨关节炎兔前交叉韧带形态学及相关生长因子类胰岛素样生长因子1、转化生长因子β表达的变化,明确温针灸修复前交叉韧带的作用机制。方法:将30只新西兰兔采用随机数字表法分为空白组、模型组、温针灸组3组,每组10只。模型组和温针灸组兔采用石膏管型固定法制备膝骨关节炎兔模型。造模成功后,模型组每日于兔固定架固定15 min;温针灸组选取“鹤顶”“内膝眼”“外膝眼”行温针灸治疗,每日1次,7日为1个疗程,共治疗2个疗程;空白组不予干预。治疗结束后MRI观察前交叉韧带影像学改变,并进行MRI分级统计;透射电镜、苏木精-伊红染色观察其形态学变化;RT-PCR、Western blot检测组织类胰岛素样生长因子1、转化生长因子βmRNA及蛋白的表达。结果与结论:①MRI检查:与空白组比较,模型组前交叉韧带增粗、水肿、部分撕裂,分级评估差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,温针灸组韧带增粗略轻,轻度水肿,无撕裂,分级评估差异有统计学意义(P<0.05)。②大体观察:模型组前交叉韧带表面光泽变淡,边侧有絮状被膜覆盖,有明显组织坏死;温针灸组韧带表面光泽,韧带呈正常螺旋走形。③苏木精-伊红染色:模型组前交叉韧带内明显组织坏死,大量新生毛细血管,成纤维细胞及胶原纤维排列松散;温针灸组韧带内有少量组织坏死,偶见新生血管,细胞及胶原纤维排列疏松、欠规则。④透射电镜观察:模型组前交叉韧带纤维排列紊乱,粗细不均,分布不均,成纤维细胞较多且形态不规则;温针灸组纤维基本呈纵向排列,纤维粗细、分布不均,少量椭圆形的纤维细胞存在。⑤RT-PCR和Western blot结果:与空白组比较,模型组类胰岛素样生长因子1、转化生长因子βmRNA及蛋白表达明显降低(均P<0.05);温针灸组上述2项指标表达明显升高(均P<0.05)。⑥结果说明,温针灸可改善前交叉韧带的损伤,可能通过调控类胰岛素样生长因子1、转化生长因子β的表达治疗膝骨关节炎。

肾小球血栓性微血管病样改变的超微病理观察

目的:通过对肾活检标本表现为肾小球血栓性微血管病(thrombotic microangiopathy,TMA)或TMA样改变的电镜观察,分析其超微病理改变特征,为临床准确诊断TMA提供超微病理学依据。方法:回顾性分析了560例超微结构具有TMA样改变的肾活检标本,根据肾小球毛细血管内皮细胞损伤范围和程度,分为病理特征典型的肾小球TMA样改变组和病理特征不典型的肾小球TMA样改变组;根据是否合并其它肾脏疾病,分为单纯肾小球TMA样改变组和其它肾脏疾病伴发TMA样改变组。结果:560例标本电镜下均有不同程度的急性和/或慢性内皮损伤的超微病理改变。病理特征典型的肾小球TMA样改变22例(3.9%),病理特征不典型的肾小球TMA样改变538例(96.1%)。单纯肾小球TMA样改变133例(23.8%),其它肾脏疾病伴发TMA样改变427例(76.2%)。结论:电镜观察可发现肾小球毛细血管内皮细胞轻微的病理变化,对于病变轻微或不典型肾小球TMA样改变及其它肾脏疾病伴发TMA样改变,电镜检查具有独特优势。

元宝枫色素含量、分布及超微结构与叶色的关系

【目的】探究元宝枫叶片颜色属性与不同叶色叶片各组织中色素含量和分布,以及与细胞超微结构的关系,为明确元宝枫叶片呈色的内部机制提供细胞学依据,为揭示红叶植物变色机制提供参考。【方法】分析元宝枫叶片颜色属性,测定各颜色叶片叶绿素、类胡萝卜素和花色素苷含量,观察叶片各组织中色素分布情况,使用透视电镜观察叶肉细胞的叶绿体和其他细胞器的超微结构。【结果】元宝枫不同叶色叶片色素含量、分布和超微结构均存在差异。1)红叶花色素苷含量极显著(P<0.05)高于黄叶和绿叶,叶绿素含量较低。黄叶叶绿素含量最低,类胡萝卜素含量显著(P<0.05)高于红叶,类胡萝卜素与叶绿素含量比值显著高于绿叶和红叶(P<0.05)。绿叶叶绿素和类胡萝卜素含量显著(P<0.05)高于黄叶和红叶,花色素苷含量显著(P<0.05)低于红叶,与黄叶之间无显著差异。相关分析表明,元宝枫叶片色素含量比值均与叶绿素含量呈负相关关系。2)元宝枫叶片上下表皮细胞均无色素分布,花色素苷主要分布于栅栏组织。红叶花色素苷分布明显,绿叶和黄叶花色素苷分布较少。黄叶类胡萝卜素分布明显,在海绵组织也有花色素苷分布。3)嫩绿色叶片叶绿体尚在发育中;绿叶细胞发育成熟,有淀粉粒。叶片变红后,叶绿体中核糖体减少,全红叶片中出现叶绿体解体的残留物;黄叶中叶绿体受损,细胞中有嗜锇颗粒;尖端变褐的叶片细胞中有大量嗜锇颗粒,有些细胞基本为空腔。【结论】元宝枫彩叶未发生结构变异,其颜色变化是因为在叶片变红过程中,叶绿素和类胡萝卜素含量降低尤其叶绿素含量下降迅速,而花色素苷含量上升,其内部花色素苷与叶绿素和类胡萝卜素的比值上升造成的,属于色素型彩叶。叶片花色素苷主要分布于栅栏组织,在变红前就已产生,随其含量上升,最终在叶色上呈现出来。在叶色变化过程中,叶绿体逐渐解体,出现衰老症状,为衰老期型彩叶。黄叶生长势差,叶色从绿转黄,不能呈现红色,衰老速度较红叶更快。

小白菊内酯对杏仁核电点燃大鼠的神经保护作用及机制

目的探讨小白菊内酯对杏仁核电点燃癫痫大鼠行为学影响及其机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为4组,每组10只。对照组不进行电刺激,每天给予Tween80腹腔注射;模型组、小白菊内酯低剂量组、小白菊内酯高剂量组每天给予1次电刺激制备杏仁核电点燃癫痫模型,其中小白菊内酯低、高剂量组于电刺激1 h前分别给予小白菊内酯250μg/kg、500μg/kg腹腔注射,模型组给予Tween80腹腔注射,共干预15 d。观察各组大鼠癫痫发作情况;电刺激结束后24 h行Morris水迷宫实验,记录大鼠逃避潜伏期及穿越平台象限百分比;然后检测脑组织中丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量,透射电镜观察海马CA1区超微结构。结果随着造模时间的延长,癫痫造模各组大鼠癫痫发作等级逐渐升高,但小白菊内酯低、高剂量组大鼠癫痫发作级别均明显低于模型组(P均<0.05),且小白菊内酯高剂量组明显低于同期小白菊内酯低剂量组(P均<0.05)。水迷宫实验中,模型组大鼠第1~4天的逃避潜伏期均明显长于对照组(P均<0.05),穿越平台象限百分比明显低于对照组(P<0.05);小白菊内酯低、高剂量组大鼠第1~4天的逃避潜伏期均明显短于模型组(P均<0.05),穿越平台象限百分比均明显高于模型组(P均<0.05);可视平台实验中,各组大鼠逃避潜伏期、游泳速度比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。与对照组比较,模型组大鼠脑组织中MDA含量明显升高(P<0.05),GSH含量明显降低(P<0.05);海马突触间隙明显增宽(P<0.05),活性带长度明显缩短(P<0.05),突触后致密物厚度明显降低(P<0.05)。与模型组比较,小白菊内酯低、高剂量组大鼠MDA含量均明显降低(P均<0.05),GSH含量均明显升高(P均<0.05);海马突触间隙均明显缩短(P均<0.05),活性带长度均明显变长(P均<0.05),突触后致密物厚度均明显增加(P均<0.05)。与小白菊内酯低剂量组比较,小白菊内酯高剂量组大鼠脑组织中MDA、GSH含量变化更明显(P均<0.05)。结论小白菊内酯对杏仁核癫痫大鼠有很好的神经保护作用,机制可能与其抗氧化和保护海马超微结构有关。

稀释液添加不同抗氧化剂对冷冻姜曲海猪精子质量的影响

旨在探究稀释液中添加不同抗氧化剂对冷冻姜曲海猪精子的保护作用。采用精子直线运动检测精子活力,异硫氰荧光素标记的花生凝集素(FITC-PNA)染色检测精子顶体完整性,碘化丙啶(PI)染色检测精子质膜完整性,体外受精和培养检测受精卵的卵裂情况,透射电镜观察精子超微结构,评价冷冻保存对精子质量的影响;对姜曲海猪精液分别冷冻保存1周、1个月、3个月、6个月、9个月和12个月,观察冷冻保存时间对精子质量的影响;在稀释液中分别添加抗氧化剂甲磺酸米托醌(MitoQ),2,4-二硝基酚(DNP)和4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶-1-烃氧基(Tempol),每种抗氧化剂均添加25、50和100μmol/L 3种浓度,以筛选出冷冻保存效果最优的抗氧化剂;对添加50μmol/L MitoQ的解冻精子进行透射电镜观察。结果显示:精子冷冻保存不同时间后,各指标均无显著差异(P>0.05);添加不同浓度的MitoQ、DNP和Tempol均对冷冻保存1周精子的活力、顶体完整率、质膜完整率和体外受精卵裂率有一定的改善作用,但以添加50μmol/L MitoQ效果最好;添加50μmol/L MitoQ对精子质膜、线粒体和微管等结构均具有一定的冷冻保护作用。综上,稀释液中添加50μmol/L MitoQ对于超低温保存姜曲海猪精液具有潜在的保护优势,具有一定的开发价值。

阴囊热应激对山羊血睾屏障结构和功能的影响

旨在探究热应激对山羊血睾屏障(BTB)结构和功能的影响,为山羊热应激防治提供理论依据。本研究选择6只1~1.5岁的健康雄性关中山羊,随机分为2组,每组3只。对照组正常饲喂,试验组采用改良后的阴囊热刺激法建立山羊睾丸热应激模型。利用CASA法检测精液质量变化,光镜与透射电镜观测睾丸结构,生物素示踪法显示BTB通透性改变,蛋白质印记法与免疫组织化学法检测BTB关键蛋白表达定位。热应激组中山羊睾丸指数、精子数量、精子活率、精子总运动性和精子前进运动率均显著降低(P<0.05)。热应激导致睾丸组织形态受损明显,生精细胞数量减少且排列紊乱;支持细胞内质网扩张,并出现大量空泡;支持细胞间紧密连接结构松散且不连续。热应激引起BTB通透性升高,关键连接蛋白表达水平显著降低(P<0.05),但分布定位未受影响。热应激损伤山羊睾丸组织形态,破坏支持细胞结构并降低BTB关键蛋白表达,从而导致BTB结构和功能完整性受损,造成精子质量下降,影响雄性山羊繁殖性能。

奶山羊睾丸支持细胞分离培养与鉴定

本研究以2月龄莎能奶山羊为实验动物分离睾丸支持细胞(SCs),比较三种酶消化法(胰酶消化法、两步酶消化法和两步混合酶消化法)的分离效率,并采用形态学及分子生物学技术评估培养效果。结果显示,两步酶消化法和两步混合酶消化法获得的细胞数量以及细胞活率和增殖力均显著高于胰酶消化法。形态学观察两步酶消化法分离的细胞符合典型SCs形态,并能稳定传代至第5代。HE染色可观察到细胞核中的双极小体,油红O染色可见细胞核周围大小不一的脂滴。免疫荧光染色显示SCs特异蛋白WT1和Vimen-tin抗体免疫阳性率大于96%。超微结构观察发现细胞结构完整,细胞器丰富,细胞核呈不规则形状,符合SCs超微结构特征。综上,两步酶消化法操作简单、成本低,且分离的SCs数量多、活力好、纯度高,能在体外稳定培养,为最佳的奶山羊SCs分离方法,可为深入开展奶山羊雄性生殖机能研究提供良好的细胞学模型。

基于透射电镜下超微结构探讨不同温度悬起灸干预对压疮创面修复的影响

目的 观察不同温度悬起灸干预对大鼠压疮创面组织超微结构的影响,明确悬起灸促进压疮创面修复的最佳干预温度,以期为临床艾灸治疗压疮及慢性难愈性创面提供理论依据。方法 取133只雌性健康SD成年大鼠,随机选择3只大鼠作为空白对照组,其余130只大鼠通过缺血再灌注损伤方式建立2~3期压疮模型。将模型制备成功的125只大鼠随机分为模型对照组、水凝胶组、低温艾灸干预组、中温艾灸干预组及高温艾灸干预组,每组25只。模型对照组和空白对照组仅进行碘伏常规处理;水凝胶组用碘伏处理压疮创面后将水凝胶伤口敷料覆盖于创面处;低、中、高温艾灸干预组给予碘伏处理后分别对压疮创面中心施以38~41℃、43~46℃、48~51℃的悬起灸干预(通过红外热像仪检测创面皮肤表面温度),艾灸干预1次/d,每次持续15 min。分别于干预1,3,5,7,10 d后取各造模组大鼠压疮创面组织,透射电镜下观察压疮组织超微结构;空白对照组大鼠一并取材以观察正常皮肤组织镜下超微结构。结果 与空白对照组相比,各造模组大鼠造模后干预前均出现表皮脱落或损伤及真皮层损伤。(1)表皮修复情况:模型对照组压疮创面中基底细胞结构及功能恢复相对较慢,干预10 d后才可见大部分基底细胞基本恢复正常,但细胞器相对较少,功能较低下。低、中温艾灸干预组干预5 d后可见大部分基底细胞基本恢复正常,中温艾灸干预组可见绝大部分基底细胞基本恢复正常,绝大部分基底细胞的线粒体状态较好,结构较清晰,10 d后基底细胞线粒体数目增多,胶原纤维致密,新生表皮完整,更优于低温艾灸干预组。水凝胶组干预5 d后可见部分基底细胞线粒体肿胀;7 d后可见大部分基底细胞细胞器增多,线粒体结构逐渐恢复正常。高温艾灸干预组干预7 d后可见少部分有线粒体自噬产生,相对略差于水凝胶组。(2)真皮修复情况:模型对照组干预5 d后可见真皮层炎性细胞高度浸润,成纤维细胞变性;7 d后真皮层尚有少量炎性细胞,真皮成纤维细胞增生并有功能恢复,少部分胶原纤维相对较致密;10 d后真皮成纤维细胞增生明显,真皮有淋巴细胞,真皮损伤有恢复,部分胶原纤维相对较致密。中温艾灸干预组干预1 d后真皮层出现大量的炎性细胞浸润;5 d后可见真皮层不新鲜的粒细胞浸润,大量的成纤维细胞增生活跃,大部分胶原纤维较致密;7 d后绝大部分真皮成纤维细胞数目增多,功能活跃,且胶原纤维较致密;10 d后真皮成纤维细胞功能旺盛,胶原纤维致密。低温艾灸干预组可见上述类似大体趋势;水凝胶组及高温艾灸干预组干预5,7,10 d后亦可见真皮成纤维细胞不同程度的增生,其功能亦逐渐恢复,胶原纤维排列逐渐致密,但修复情况均较中温艾灸干预组差。结论 不同温度悬起灸干预及水凝胶处理能够整体上提前压疮创面急性炎症浸润的高峰,促进压疮创面由炎症损伤阶段向增殖修复阶段的顺利转变,继而加快压疮创面修复进程。不同温度悬起灸干预后压疮创面修复存在一定差异,其中38~41℃、43~46℃温度下悬起灸更有利于促进压疮组织残存表皮修复、新生表皮生成及真皮浅层修复,且43~46℃温度下悬起灸更具优势。

3种生物样本透射电镜OTE染色效果

为探究乌龙茶提取物(OTE)取代醋酸双氧铀(UA)在畜牧生物样本透射电镜制样中的染色效果,选取畜牧业中3种常见的生物样本即山羊坐骨神经、酵母菌及苜蓿叶片组织为测试对象,经多聚甲醛-戊二醛PBS混合溶液预固定后制备超薄切片,采用OTE染色,再用透射电镜观察样品反差情况,并与传统UA染色法进行比较。结果显示3种生物样品的OTE单染组和双染组(OTE-Pb双染)在反差对比度、图像清晰度、结构辨识度等方面均与对应的UA单染组和双染组(UA-Pb双染)相当,甚至更佳。结果说明OTE染色在畜牧生物类样品透射电镜制样中的染色效果稳定,反差良好,而且比常规使用的UA安全性高,具有更广阔的应用前景。

施氮量对云烟121上部烟叶代谢及品质的影响

为提高烤烟上部叶品质与可用性,筛选出曲靖烟区云烟121适宜的施氮量,分别施用纯氮82.5、105.0和127.5 kg·hm^(-2)进行大田试验,测定不同处理的农艺性状、上部成熟鲜烟叶的超微结构及烘烤后的外观质量、化学成分、感官质量等指标,并进行代谢组学分析,综合评价不同施氮量处理下云烟121的生长情况与上部烟叶品质。结果表明,3个施氮量处理烟株的长势无明显差异,其中105.0 kg·hm^(-2)处理烟株的综合发病率最低。随着施氮量的增加,云烟121上部叶片中的叶绿体降解减缓,淀粉粒与嗜锇颗粒体积增大,其中105.0 kg·hm^(-2)处理烟叶的嗜锇颗粒数量最多。施氮水平影响云烟121上部叶的代谢模式,且主要集中在莽草酸和苯丙烷代谢途径。在105.0 kg·hm^(-2)处理下,云烟121上部叶烤后的外观质量、化学成分、感官质量、经济性状均优于其他施氮水平。由此表明,施用纯氮105.0 kg·hm^(-2)能够有效提高曲靖烟区云烟121上部叶的品质与可用性。

大辟缘蝽触角感器的扫描电镜观察

为了解大辟缘蝽(Prionolomia gigas Distant)触角感器与其嗅觉感受机制的关系,采用扫描电镜观察大辟缘蝽雌、雄成虫触角感器类型、超微形态及其分布。结果表明:大辟缘蝽雌、雄成虫触角均呈线状,由柄节、梗节和鞭节3部分组成;雌、雄成虫触角上共观察到6种类型感器,分别为毛形感器、刺形感器、锥形感器、腔形感器、腔锥形感器和具弯钩型感器,其中,以毛型感器数量最多、分布范围最广,鞭节上的感器类型较柄节和梗节丰富,雌虫的感器类型多于雄虫,表现出明显的性二型现象。

断尾对兰州大尾羊脂肪细胞结构和脂肪代谢相关基因表达的影响

旨在观察断尾对兰州大尾羊尾部脂肪细胞数量、结构以及皮下脂肪、大网膜脂肪、尾部脂肪、肾周脂肪和背最长肌脂肪代谢相关基因表达的影响,明确断尾引起脂肪沉积重新分布后,脂肪细胞和各脂肪沉积部位脂肪代谢相关基因表达的变化,为阐明断尾对脂尾型绵羊脂肪代谢调控的分子机理提供参考。选择5日龄[(3.79±0.12)kg]单羔兰州大尾羊羔羊18只,随机分为对照组(C组)和试验组(T组),每组9只羔羊,试验组羔羊采用橡皮圈结扎法断尾。试验羊2月龄断奶后饲喂配合日粮,两组羊日粮相同。试验期240 d。试验结束后,采集样品进行分析。1)相对于背最长肌肌内脂肪和内脏脂肪,断尾对尾部脂肪、皮下脂肪基因表达影响较大,断尾组尾部脂肪SCD、LEP、PLIN1的mRNA表达量显著升高,LPL、FAS、PEPCK的表达量显著降低(P<0.05);皮下脂肪中SCD显著升高,LEP、ADPN、FABP4、PLIN1显著降低(P<0.05);肾周脂肪中LPL、ADPN、PEPCK、UCP1和大网膜脂肪中的PEPCK显著降低(P<0.05);背最长肌中SCD显著升高,PEPCK、PLIN1显著降低(P<0.05)。2)断尾组背最长肌的肌内脂肪含量(6.96%和6.05%)、脂滴面积比(4.28%和3.04%)显著增加(P<0.05),脂滴面积比增加了约1%,而尾部脂肪中脂滴面积比例降低了约10%(87.43%和97.58%),尾部脂肪细胞直径显著降低(P<0.05);3)兰州大尾羊尾部脂肪细胞被融合的大脂滴填充,细胞核、细胞质等被大脂滴挤到细胞边缘,细胞边缘的细胞质薄层中含有线粒体、内质网、高尔基体、自噬小体等细胞器和小脂滴,断尾组尾部脂肪细胞质中单个脂滴体积较小,周围糖原颗粒较多。综上所述,长脂尾型绵羊兰州大尾羊早期断尾后,背最长肌的脂滴面积比增加,尾部脂肪中脂滴面积比降低,尾部脂肪细胞直径减小,各部位脂肪代谢相关基因表达也发生变化,断尾后脂肪沉积分布改变可能是在SCD、PLIN1、LPL、FAS、PEPCK等一系列脂肪代谢相关基因的调控下实现的。

基于胃微观动力结构研究整肠散干预兔功能性胃排空障碍的药效作用机制

目的探讨整肠散穴位贴敷干预功能性胃排空障碍(FDGE)的可能药效作用机制。方法将30只雄性家兔按随机数表法分为正常组、模型组和穴位贴敷组,每组各10只。正常组行假手术,模型组和穴位贴敷组家兔行胃大部分切除术进行造模。正常组与模型组给予无药穴位贴敷,穴位贴敷组行整肠散穴位贴敷,各组均干预14 d。检测术日术前及术后第15日家兔血钾(K+)、胃动素(MTL)水平;术后第16日通过测定胃内色素残留量反映残胃排空功能;术后第16日运用电镜行残胃平滑肌细胞及Cajal间质细胞(ICC)的超微结构测定。结果与正常组比较,模型组MTL、K^(+)的含量显著降低(P<0.001),与模型组比较,穴位贴敷组MTL、K^(+)的含量显著提高(P<0.001);与正常组比较,模型组胃内色素残留量升高(P<0.001);与模型组比较,穴位贴敷组胃内色素残留量显著降低(P<0.001)。与正常组比较,模型组细胞核排列紊乱,形态不规则,ICC细胞结构模糊,核固缩,线粒体少,出现空泡。而与模型组比较,穴位贴敷组细胞破损较轻,排列较整齐,ICC细胞结构较清晰,突起增多,未见自噬小体,提示整肠散穴位贴敷能够改善兔胃黏膜细胞损伤,改善胃大部分切除术后家兔平滑肌细胞中ICC的超微结构。结论整肠散穴位贴敷能够有效预防家兔胃大部分切除术后FDGE的发生,其作用机制可能与稳定K^(+)水平,促进MTL分泌,提高胃排空功能,改善残胃平滑肌细胞与ICC的超微结构有关。

不同钾素供应和光强对油菜叶片光合能力的影响

为明确钾素供应和光强对油菜叶片生长和光合特性的影响,本研究采用钾素供应和光强两因素的试验设计,其中钾素供应设计3个水平,分别为严重缺钾(0.03 mmol·L^(-1)KCl)、轻度缺钾(0.09 mmol·L^(-1)KCl)和充足钾供应(2.00 mmol·L^(-1)KCl),光强设置2个水平,分别为低光强(LL,~200μmol·m^(-2)·s^(-1))和高光强(HL,~400μmol·m^(-2)·s^(-1)),在水培条件下研究了不同钾素供应和光强处理油菜叶片的生长、气体交换参数、叶绿素荧光特征以及叶肉细胞超微结构特征,以期为多变环境条件下钾肥的合理施用提供理论依据。结果表明,钾素供应和光强显著影响油菜叶片的生长。相同的钾素供应下,高光强处理油菜叶片厚度和比叶重较低光强分别增加了19.6%~24.3%和57.1%~73.6%,而在严重缺钾胁迫时,净光合速率较低光强条件降低了63.8%。严重缺钾胁迫叶片在高光强条件下受到光抑制,实际光化学效率、最大羧化速率和最大电子传递速率等光合关键参数明显降低,叶绿体发育不良,同时缺钾导致叶肉细胞间空隙比例减小,叶肉导度降低,进而使得叶片光合能力显著下降。综上所述,钾素供应和光强共同调节叶片形态结构,影响光合能力,高光强下钾素供应不足会严重影响油菜的生长,合理施用钾肥有利于提高油菜对光强变化的适应性,保持光合能力的稳定。

滇南小耳猪自体跟腱移植前交叉韧带重建模型的构建

背景:目前关于前交叉韧带重建术的大动物模型仍较为缺乏,而滇南小耳猪作为实验动物广泛用于其他学科基础研究,但仍未见将其用于前交叉韧带重建造模的相关报道。目的:建立自体跟腱移植前交叉韧带重建的大型动物滇南小耳猪模型。方法:选取20只成年雌性滇南小耳猪,随机平均分为自体跟腱组和假手术组。自体跟腱组取小耳猪自体跟腱作为移植物行右膝关节前交叉韧带重建术,假手术组小耳猪在右膝采取类似的操作,但对前交叉韧带不行任何处理。术前及术后12个月,分别观察小耳猪一般情况;对韧带及移植物进行大体观察及MAS评分;苏木精-伊红染色观察韧带形态学特点;免疫组化评估Ⅰ型胶原与Ⅲ型胶原染色与排列情况;透射电镜观察韧带胶原纤维的类型、大小、直径、比例和分布。结果与结论:①所有动物饮食活动均正常,伤口愈合良好,无明显炎症反应,局部无化脓性感染,精神及尿便情况较术前无明显改变;膝关节重建的交叉韧带连续性完整,关节无僵硬、活动度正常,前抽屉及Lachman试验均阴性。②移植物大体观察:术后12个月关节腔内移植物位置良好,完整性尚可,张力较明显,韧带色泽接近原有前交叉韧带,表面滑膜覆盖较为完整。③自体跟腱组术后12个月关节腔内韧带大部为MASⅠ型,少数为MASⅡ型;假手术组关节腔内韧带为MASⅠ型。④苏木精-伊红染色提示,术后12个月,自体跟腱组胶原纤维已开始出现束状、同向、均匀排列,同向波纹已较为明显,细胞核以线形或纺锤形为主,与假手术组正常前交叉韧带组织较相似。⑤免疫组化提示,术后12个月,自体跟腱组重建的前交叉韧带中有较大量Ⅰ型胶原表达,Ⅲ型胶原表达明显较少;两组Ⅰ型、Ⅲ型胶原染色程度相近。⑥透射电镜显示,术后12个月,自体跟腱组重建前交叉韧带中胶原纤维直径、排列、密度与原有前交叉韧带相近,说明术后12个月自体跟腱组已基本完成韧带重塑过程。⑦综合评估,实验成功建立了自体跟腱移植前交叉韧带重建的大型动物滇南小耳猪模型,具有良好的形态学、组织学及超微结构结果。

海拔高度对烟叶生长代谢及烤后品质的影响

为明确四川凉山烟区不同海拔高度对烟叶生长以及烤后品质的影响,以烤烟品种YKS-9为供试品种,在四川凉山1800、2000、2200 m三种海拔高度处进行试验,研究海拔高度对YKS-9农艺性状、烤后烟叶品质、鲜烟叶超微结构和叶片代谢的影响。结果表明,海拔2000 m高度处的烟株农艺性状及烤后烟叶品质较好,2200 m高度处农艺性状及烤后烟叶品质最差;随着海拔升高,烟叶细胞内液泡体积增大,细胞内产生更多、更小的线粒体,且叶绿体内淀粉粒数目增多、体积增大,但叶绿体片层数和垛叠程度减少。代谢组学分析结果显示,3个处理组间共筛选出102种显著差异代谢物,其中多数糖类(D-半乳糖酸、D-甘露糖、D-阿洛糖、D-塔格糖)、部分氨基酸类(L-天门冬氨酸、L-瓜氨酸、L-苏氨酸、D-脯氨酸、2,3-二羟基-3-甲基丁酸、丙氨酸)、莽草酸代谢相关物质(L-苯丙氨酸、莽草酸、奎尼酸)相对含量均随海拔升高呈现先升后降趋势;而嘌呤代谢物质(鸟苷、腺嘌呤)以及苯丙烷代谢相关物质(山奈酚、芸香苷、绿原酸)相对含量随海拔升高急剧上升。整体而言,在四川凉山烟区海拔2000 m处种植烤烟最为适宜,1800 m处次之,2200 m处较差。

广西北部湾海域织锦巴非蛤卵巢发育、卵子及卵黄发生的研究

采用解剖观察、卵巢组织切片和透射电镜技术对广西北部湾海域织锦巴非蛤(Paphia textile)的卵巢发育、卵子发育及卵黄粒合成过程和特点进行探讨。结果表明,织锦巴非蛤在1周年内具有1个繁殖周期,根据卵巢发育时期划分为5个时期,分别为增殖期(5月-7月)、生长期(7月-9月)、成熟期(9月-11月)、排放期(11月-翌年1月)、休止期(翌年1月-4月)。根据织锦巴非蛤卵子发育和卵黄合成的相关特点,可将卵子发育划分4个主要阶段,第一阶段为卵原细胞,第二阶段为卵黄合成前期卵母细胞,第三阶段为卵黄合成期卵母细胞,第四阶段为卵黄合成后期卵母细胞,其中卵黄合成期是卵黄粒生成的重要时期,在此期线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等细胞器通过不同的方式合成卵黄粒。此外,海区水温与织锦巴非蛤卵巢发育密切相关,是影响织锦巴非蛤卵巢发育的重要因素。广西北部湾海域织锦巴非蛤为雌雄异体,未发现雌雄同体现象。

混合盐碱胁迫对骏枣叶片结构和光合荧光特性的影响

为进一步探究骏枣对混合盐碱胁迫的生理响应机制,在骏枣盛果期分别设计0、60、120、180、240、300 mmol·L^(-1)的NaCl和NaHCO_(3)混合盐溶液来模拟土壤盐碱复合胁迫环境,分析不同胁迫水平下骏枣叶片的显微结构、超微结构及光合、荧光参数的变化。结果表明,在混合盐碱胁迫下,骏枣叶片的厚度、角质层厚度、表皮厚度和栅栏组织厚度均随着胁迫水平的增加呈先上升后下降趋势;海绵组织厚度和细胞结构疏松度呈逐渐下降趋势。在混合盐溶液高于180 mmol·L^(-1)时,叶绿体内的嗜锇颗粒数量明显增多,且体积变大,基质片层结构松散;同时,随着胁迫水平的增加,叶片的净光合速率、气孔导度与蒸腾速率逐渐降低,胞间CO_(2)浓度升高,光合限制以非气孔因素为主。在240、300 mmol·L^(-1)高胁迫水平处理下,叶片初始荧光(F_(0))显著升高,而最大荧光(F_(m))、F_(v)/F_(m)、F_(v)/F_(0)显著降低,单位反应中心吸收的光能(ABS/RC)、用于还原QA的能量(TR_(o)/RC)、热耗散的能量(DI_(o)/RC)均呈先下降后上升趋势,而用于电子传递的能量呈持续下降趋势。综上,较高水平的盐碱胁迫会使骏枣叶片的超微结构发生明显变化,抑制其光合能力,使嗜锇小体增多、变大,并出现淀粉粒。以上结果为深入研究枣的耐盐机制提供了理论基础。

广西北部湾海域织锦巴非蛤精巢发育、精子发生及超微结构研究

为了解广西北部湾海域织锦巴非蛤(Paphia textile)精巢发育、精子发生及成熟精子的超微结构,文章采用解剖观察、精巢组织切片、扫描和透射电镜技术进行了研究。结果表明,所采集织锦巴非蛤中未发现雌雄同体,观察的个体皆为雌雄异体,将其精巢发育划分为增殖期、生长期、成熟期、排放期、休止期5个时期,织锦巴非蛤精巢成熟与排放期在9月-翌年1月。精子发生分为精原细胞期、初级精母细胞期、次级精母细胞期、精细胞期、成熟精子期5个时期。织锦巴非蛤成熟精子由头部、中部和尾部组成,为典型的鞭毛型精子,全长约为46.04μm。精子头部分为顶体和精核,顶体为圆锥形,精核呈长圆柱形,前端直径约为0.71μm,后端直径约为1.34μm;中部由4个环绕成瓣状的线粒体与2个相互垂直的近、远端中心粒组成;尾部鞭毛长约38.8μm,直径约为0.21μm,外被质膜,为典型“9+2”双联体微管结构。研究结果为织锦巴非蛤的繁殖生物学、人工苗种繁育及种质资源保护提供研究基础。