黄山石耳多糖的提取及其抗氧化性研究

文章研究了黄山石耳多糖的复合酶法辅助提取工艺及其抗氧化性。通过单因素和L9(33)正交实验确定复合酶的最佳添加量为每0.2g样品中添加240U纤维素酶、720U果胶酶和2 400U木瓜蛋白酶;通过单因素和L9(34)正交实验优化石耳多糖的提取工艺,得出最优条件,即提取温度为60℃,提取时间为1h,pH值为6和料液比1∶40,该工艺条件下多糖提取率为12.52%;通过单因素和L9(33)正交实验优化石耳多糖的醇沉工艺,得出最优醇沉时间为5h,醇沉温度为5℃,乙醇体积分数为80%,此时多糖最终提取率为10.52%。黄山石耳多糖的体外抗氧化性实验结果表明,石耳多糖具有较高的体外抗氧化活性,其对ABTS自由基、DPPH自由基和OH自由基的清除率分别达到82.95%、74.58%和70.87%。

石耳化学成分的研究

目的 :研究石耳的化学成分。方法 :硅胶、大孔吸附树脂及反向柱色谱法分离纯化 ,波谱法进行结构鉴定。结果 :从乙醇提取物中分得 5个化合物 ,鉴定为ethylorsellinate(1) ,orsellinicacid(2 ) ,orcinol(3) ,lecanoricacid(4) ,lecanorin(5 )。结论 :化合物 1,2 ,3,5为首次从该植物中分离得到。

真菌共祖起源的分子证据

以真菌界、动物界和植物界中的19种各类生物作为代表,从具有进化速率不同区段结构的核糖体核酸基因大亚基全序列的C3、C9及C11三个高度保守区段中鉴定出了4条真菌所共有的核苷酸序列,亦即真菌界所特有的核苷酸序列。从其保守区段C5中鉴定出了1条子囊菌门所特有的保守序列;从保守区段C7中鉴定出了1条担子菌门所特有的保守序列。研究结果为各类真菌起源于一个共同祖先提供了分子证据。用于研究的美味石耳的核糖体核酸基因大亚基全序列是由本实验室所提供;其他18种核糖体核酸基因大亚基全序列来自GenBank。

酵母发酵法提取石耳粗多糖工艺优化

为了研究酵母法发酵纯化石耳多糖的工艺,探明酵母对石耳酶解液中多糖、还原糖、总氮含量及pH值的影响,以及浸提液不同pH对石耳多糖含量的影响,设立酵母添加量、蔗糖添加量、温度及时间的单因素实验,并对单因素进行了正交优化。试验结果表明,最佳工艺:发酵液pH为5,酵母添加量为0.75mg/mL,蔗糖的补加量为90mg/mL,温度为30℃,发酵时间为16h。该发酵工艺条件简单,可靠,适合生产。

石耳提取物对高脂症小鼠的降血脂作用

以昆明小鼠为实验动物,研究石耳(Umbilicaria esculenta)石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇和水等粗提物及单体提取物苔黑酚羧酸乙酯、苔色酸对高血脂症小鼠总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDLC)和低密度脂蛋白胆固醇(1ow density lipoprotein cholesterol,LDLC)含量的影响,并对高脂症小鼠进行肝脏显微结构观察。结果表明:与阴性对照(高脂模型组)比较,苔黑酚羧酸乙酯、苔色酸、甲醇、水提取物的2个剂量组以及石油醚400 mg/kg/d剂量组的TC含量极显著地降低(P<0.01);苔黑酚羧酸乙酯、苔色酸、石油醚、甲醇、水提的2剂量组以及丙酮1500 mg/kg/d剂量组中的TG含量极显著地降低(P<0.01);苔黑酚羧酸乙酯、苔色酸、丙酮、甲醇、水提2个剂量组及石油醚200 mg/kg/d剂量组都极显著地增加高脂小鼠的高密度脂蛋白(P<0.01);除乙酸乙酯1500 mg/kg/d剂量组外,其它给药组都有降低高脂小鼠低密度脂蛋白的作用,其中苔色酸20 mg/kg/d和甲醇提取物1500 mg/kg/d剂量组的作用极显著。苔黑酚羧酸乙酯、苔色酸、水和甲醇提取物组小鼠肝脏中未见明显脂质斑,对高脂小鼠肝组织均有明显改善作用。

响应面法优化黄山石耳多糖提取工艺

为提高黄山石耳多糖的提取效率,在单因素试验基础上,以提取温度、提取时间、料液比为自变量,糖提取率为因变量,通过响应面法优化黄山石耳多糖的提取条件.结果表明,Box-Behnken中心组合试验获得的最优工艺条件为提取温度89℃,提取时间3.25 h,料液比1∶38(g/ml),多糖的得率为19.18%,实际值与模型理论值相符度高.试验结果为黄山石耳多糖的开发利用提供了有益参考.

石耳中微量元素的测定

用原子吸收法和原子荧光法测定了洞口石耳中的微量元素。结果表明,洞口石耳中含有丰富的微量元素铁、钙、锌、硒等,为进一步开发和利用洞口石耳提供了参考。

两种石耳科多糖的理化特性及其抗炎症作用

为研究石耳科多糖的理化特性、微观结构和抗炎症作用,从石耳科两个相近物种石耳(Umbilicaria esculenta)和疱脐衣(Lasallia papulosa)中制备得到多糖CUEP和YUFP,采用高效液相色谱法、红外光谱法和透射电子显微镜分析两种多糖的化学成分和微观结构,利用脂多糖诱导RAW264.7细胞产生炎症因子,进而研究多糖对炎症因子mRNA相对表达量的影响.结果表明:从Umbilicaria esculenta和Lasallia papulosa中分离纯化得到CUEP和YUFP的得率分别为25%和27%,二者均含有糖类物质的特征官能团,CUEP由162~474 u的多糖链聚合而成,YUFP由98 u单一多糖组成;CUEP和YUFP均由葡萄糖、木糖、半乳糖、甘露糖组成,摩尔比分别为177.96∶1.00∶4.45∶3.19和33.21∶3.17∶1.00∶2.40;CUEP呈线状,糖链间相互缠绕且聚合度高、不易分散,而YUFP则呈蝴蝶结状,更易解聚;75μg·mLYUFP能显著地降低IL-1β的mRNA相对表达量,而75μg·mLCUEP则能显著地降低炎症因子TNF-α,IL-1β,IL-6,COX-2的mRNA相对表达量.

石耳与黑石耳多糖的抗炎作用研究

目的对4个不同产地石耳和黑石耳多糖的理化性质、微观结构和抗炎活性进行研究。方法采用热水提取法提取粗多糖。利用Sevag法,透析和DEAE-Sepharose CL-6B柱色谱等方法进行分离纯化。高效体积排阻色谱法和红外光谱法等研究理化性质,透射电子显微镜观察微观结构,实时定量PCR研究抗炎症作用。结果得到黄山石耳多糖(HUEP),宁安石耳多糖(NUEP),张家界黑石耳多糖(ZDMP)和神农架黑石耳多糖(SDMP),得率分别为质量分数20%,15.40%,48%和38.25%。HUEP和NUEP由均一多糖组成,ZDMP和SDMP由不均一糖聚合而成。4种纯化多糖均由葡萄糖、木糖、半乳糖和甘露糖组成,HUEP和NUEP各单糖占比均匀,ZDMP和SDMP葡萄糖比例高。HUEP呈现无分支的长链交织结构,NUEP由3股以上无分支的短链缠绕组成,ZDMP和SDMP则由长短不一的链聚合组成。采用1μg·mL^(-1)脂多糖诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7建立炎症模型,添加5μg·mL^(-1)的HUEP或NUEP,结果显著降低白细胞介素1βmRNA的表达(抑制率HUEP=89.06%,NUEP=84.73%,P<0.000 1)。添加75μg·mL^(-1)的ZDMP或SDMP则能显著降低所有炎症因子的mRNA表达,且部分抗炎效果高于阳性对照地塞米松。结论产地不同对石耳或黑石耳多糖的特性和抗炎活性没有影响,黑石耳多糖抗炎效果优于石耳多糖。