Tim-3及其配体Galectin-9在多发性骨髓瘤患者Th1/Th2细胞失衡中的意义

目的:探讨Tim-3及Galectin-9在多发性骨髓瘤患者Th1/Th2细胞失衡中的意义。方法:纳入初诊MM患者55例,健康对照20例,流式细胞术检测外周血CD4^(+)T细胞上Tim-3的表达水平、Th1和Th2细胞水平、Tim-3^(+)Th1和Tim-3^(+)Th2细胞水平,ELISA法检测血清中IFN-γ和IL-4的水平,PCR检测Galectin-9mRNA的水平,并分析Galectin-9mRNA表达与Th细胞亚群和细胞因子水平的相关性,以及Tim-3^(+)Th1/Tim-3^(+)Th2与相应临床特征的关系。结果:MM患者Tim-3^(+)CD4^(+)T细胞、Tim-3^(+)Th1、Tim-3^(+)Th2细胞水平及Tim-3^(+)Th1/Tim-3^(+)Th2细胞比值较健康对照组明显升高(P<0.05),Th1细胞水平及Th1/Th2细胞比值明显下降(P<0.05)。MM患者血清中IFN-γ及IFN-γ/IL-4比值明显下降(P<0.05),IL-4水平明显升高(P>0.05),Galectin-9mRNA的水平明显高于健康对照组(P<0.05)。Galectin-9mRNA与Tim-3^(+)CD4^(+)T细胞、Tim-3^(+)Th2细胞、IL-4均呈正相关(r=0.663,r=0.492,r=0.470),与IFN-γ呈负相关(r=-0.593)。进一步分析显示,患者Tim-3^(+)Th1/Tim-3^(+)Th2细胞比值与临床ISS分期、有溶骨性损害、染色体核型异常呈正相关(r=0.511,r=0.556,r=0.632)。结论:Tim-3及Galectin-9参与了MM患者Th1/Th2失衡,并且Tim-3^(+)Th1/Tim-3^(+)Th2细胞比值高与临床预后较差的指标有关。

基底节脑出血手术患者HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA变化及其与预后的关系

目的探讨基底节脑出血外侧裂入路手术患者糖化血红蛋白(HbA1c)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(TIM-3)mRNA的变化及其与预后的关系。方法选取经外侧裂入路治疗基底节脑出血的患者286例,根据患者术后90 d改良Rankin量表(mRS)评分分为预后良好组(0~2分,n=234)和预后不良组(3~6分,n=52)。比较2组患者术前、术后1 d、术后3 d、术后7 d的HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA水平变化,并记录2组患者美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分和格拉斯哥昏迷评分(GCS)变化。采用Pearson相关分析法分析各血液指标与NIHSS评分、GCS评分的相关性;采用Logistic回归方程分析各血液指标与患者预后的关系;采用受试者工作特征曲线(ROC)及ROC下面积(AUC)分析术前、术后7 d各血液指标预测预后的效能,以ROC分析各指标的截断值,将患者分为HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA高危、低危患者;采用卡普兰—迈耶(KM)生存曲线分析HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA高危、低危患者的不良预后发生率。结果预后不良组术前、术后1 d、术后3 d、术后7 d的HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA水平均高于预后良好组(P<0.05)。预后不良组术前、术后1 d、术后3 d、术后7 d的NIHSS评分均高于预后良好组,GCS评分均低于预后良好组(P<0.05)。患者术前、术后1 d、术后3 d、术后7 d的HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA水平与术前NIHSS评分均呈正相关,与GCS评分均呈负相关(P<0.05);术前、术后7 d的HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA水平较高与患者不良预后显著相关(P<0.05);术前各指标联合预测不良预后的AUC为0.856,术后7 d为0.881,高于任一单一指标预测结果;KM生存曲线分析显示,术前、术后7 d高危患者不良预后发生率高于低危患者(P<0.05)。结论基底节脑出血外侧裂入路手术围术期HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA处于持续高水平状态的患者多存在预后不良的可能,且术前、术后7 d的HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA水平与预后显著相关,检测患者HbA1c、TNF-α、TIM-3 mRNA水平有望成为一个预测预后的可靠方法。

外周血单个核细胞Tim-3/Tim-1mRNA比值失衡对桥本甲状腺炎癌变的诊断意义

目的 分析外周血单个核细胞Tim-3/Tim-1 mRNA比值失衡对桥本甲状腺炎（HT）癌变的诊断意义.方法 92例桥本甲状腺炎,其中24例HT合并癌变,另取22例单纯性甲状腺癌患者外周血和38例正常人的外周血作为对照,采用RT-PCR法分别检测所有外周血单个核细胞中Tim-3/Tim-1 mRNA比值的情况.结果 HT组,HT癌变组,甲状腺癌组和正常对照组中外周血单个核细胞Tim-3/Tim-1 mRNA比值有显著性差异.HT组的Tim-3/Tim-1[（0.91±0.38） copies/μL]低于对照组（P＜0.05）,HT癌变组的Tim-3/Tim-1[（0.43±0.26） copies/μL]低于HT组和对照组（P＜0.05）,甲状腺癌组[（0.81 ±0.48） copies/μL]的Tim-3/Tim-1和对照组差别异无统计学意义（P＞0.05）.结论 本研究结果提示外周血Tim-3/Tim-1比值失衡在对诊断HT及其癌变有重要的临床意义,证实HT是一种癌前病变,Tim-3/Tim-1比值失衡可能是HT癌变的标志.

PD-1和TIM-3在胃癌病人免疫组织CD3^+T细胞中的表达分析

目的探讨在胃癌病人外周血、癌旁组织和肿瘤组织中T细胞上PD-1和TIM-3的表达状况及意义。方法应用流式细胞术检测来自胃癌病人外周血、癌旁组织和肿瘤组织及正常供体外周血的CD3+T细胞,分析PD-1和TIM-3的表达水平。结果PD-1和TIM-3在胃癌病人T细胞上表达水平明显高于正常供体。相比胃癌病人外周血,肿瘤组织TIL的PD-1和TIM-3表达水平更高。另外,PD-1和TIM-3的表达水平与胃癌病人的年龄和肿瘤大小存在相关性。通过阻断PD-1和TIM-3信号通路可以增强TIL抗肿瘤细胞毒性。结论 PD-1和TIM-3可能与胃癌的恶变有关。单克隆抗体靶向阻断PD-1和TIM-3通路有希望成为胃癌免疫治疗的新方法。

可溶性Tim-3对原因不明性复发性流产患者Th1/Th2分化的免疫调节作用及其机制

目的:观察可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(sTim-3)在原因不明性复发性流产(URSA)患者血清中表达水平的变化及其对Th1/Th2细胞分化的调节,探讨sTim-3在URSA病理过程中的免疫机制。方法:选择52例URSA患者作为URSA组,选取同期正常妊娠孕妇20人作为正常妊娠组,育龄非孕者20人为健康对照组。采用ELISA法检测3组研究对象血清sTim-3和半乳糖结合蛋白9(Galectin-9)水平;双抗体夹心ELISA法检测血清中Th1型细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和白细胞价素2(IL-2)、Th2型细胞因子IL-4和IL^(-1)0水平。结果:与健康对照组比较,URSA组患者血清sTim-3(t=7.34,P<0.05)及Galectin-9水平(t=4.86,P<0.05)均升高;URSA组患者血清sTim-3水平明显高于正常妊娠组(t=5.63,P<0.05),而Galectin-9水平则低于正常妊娠组(t=2.76,P<0.05)。正常妊娠组(t=2.81,P<0.05;t=2.84,P<0.05)和URSA组(t=3.66,P<0.05;t=2.91,P<0.05)研究对象血清IFN-γ及IL-2水平低于健康对照组;URSA组患者血清IFN-γ和IL-2水平明显高于正常妊娠组(t=6.11,P<0.05;t=5.95,P<0.05)。与健康对照组比较,正常妊娠组和URSA组研究对象血清IL-4和IL^(-1)0水平升高(t=2.53,P<0.05;t=2.52,P<0.05;t=2.69,P<0.05;t=2.33,P<0.05);URSA组患者血清IL-4和IL^(-1)0水平明显低于正常妊娠组(t=6.48,P<0.05;t=7.76,P<0.05)。结论:sTim-3表达增加和Th1/Th2稳态调节失衡可能是导致URSA患者反复流产的关键免疫机制之一。

Tim-3/Galectin-9与Th1/Th2相关因子在人细粒棘球蚴感染中的表达研究

目的探讨人细粒棘球蚴感染中Tim-3/Galectin-9与Thl/Th2的平衡关系及其与该疾病发生、发展的关系。方法用实时荧光定量PCR法分别检测30例慢性细粒棘球蚴感染者和30例健康体检人群外周血中Tim-3、Galectin-9、T-bet和GATA-3mRNA的表达,同时用酶联免疫吸附(ELISA)法检测慢性细粒棘球蚴感染者和健康对照者血清中可溶性Tim-3和Galectin-9及IFN-γ、IL-12和IL-4的水平。结果 (1)实时荧光定量PCR检测结果显示:与健康对照组相比,感染组Tim-3和Galectin-9mRNA水平显著升高,T-bet mRNA水平显著降低,GATA-3mRNA水平显著升高。(2)ELISA检测结果显示:与健康对照组相比,感染组血清中可溶性Tim-3和Galectin-9水平显著升高,IFN-γ和IL-12水平显著下降,IL-4水平显著升高。Tim-3与Galectin-9呈正相关(P=0.000,r=0.776);Tim-3与T-bet呈负相关(P=0.000,r=-0.645);Tim-3与GATA-3呈正相关(P=0.000,r=-0.752)。结论 Tim-3/Galectin-9在人细粒棘球蚴持续性感染中发挥一定的作用,Tim-3/Galectin-9可能通过影响Th1/Th2相关的转录因子T-bet/GATA-3和细胞因子IL-12、IFN-γ和IL-4的水平变化,促进Th1/Th2细胞失衡现象的发生,从而促进感染的持续性发展。

Tim-3和PD-1在慢性丙型肝炎患者不同单核细胞亚群的表达水平分析

目的分析慢性丙型肝炎(CHC)患者外周血单核细胞亚群分布,同时观察负性调节分子T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域蛋白3(Tim-3)和程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)在各亚群表达的变化及意义。方法利用流式细胞术检测CHC患者外周血单核细胞亚群比例和各亚群Tim-3、PD-1表达,并与临床指标如丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)采用Spearman方法进行相关性分析。结果与健康对照组比较,CHC患者外周血CD14^+CD16^+单核细胞比例增高,以CD14CD16^+单核细胞比例增高显著。Tim-3在CD14CD16-单核细胞和CD14^+CD16单核细胞上表达水平升高;PD-1在CD14CD16-单核细胞和CD14CD16^+单核细胞上表达水平升高。CHC患者单核细胞亚群以及各亚群Tim-3、PD-1和临床指标ALT及AST无明显相关性。结论 Tim-3和PD-1在不同单核细胞亚群表达水平不同。

重组BCG-EgG1Y162蛋白免疫小鼠对细粒棘球蚴感染中Tim-3因子表达的影响

目的探讨重组BCG-EgG1Y162蛋白免疫小鼠后,感染包虫病的小鼠免疫细胞Tim-3因子的动态改变和表达。方法采用实验小鼠30只,随机分为2组,实验组用BCG-EgG1Y162疫苗免疫小鼠,对照组注射生理盐水,各免疫1次。免疫第10周后,用细粒棘球蚴进行小鼠腹腔内注射,在免疫后的第24周采血,用实时荧光定量PCR法分别检测15例正常对照组小鼠和15例实验组小鼠外周血中Tim-3、Galectin-9的表达,同时用酶联免疫吸附(ELISA)法检测2组血清中可溶性Tim-3、Galectin-9及IFN-γ、IL-12和IL-4的水平。流式细胞仪检测小鼠脾细胞悬液中Tim-3、CD4^+T、CD8^+T、CD4^+T/CD8^+T细胞的表达。结果经实时荧光定量PCR检测结果显示:正常对照组的小鼠在感染包虫后体内的Tim-3和Galectin-9mRNA水平显著升高,实验组小鼠在经过BCG-EgG1Y162疫苗免疫后,体内的Tim-3和Galectin-9水平显著降低与正常对照组相比差异有统计学意义(P <0.05)。ELISA实验检测显示:实验组小鼠血清中存在的可溶性Tim-3和Galectin-9水平,与正常对照组相比,水平显著降低;流式细胞仪检测也发现免疫组存在Tim-3降低。结论小鼠在经过BCG-EgG1Y162疫苗免疫后,在细粒棘球蚴持续性感染中能够明显纠正Tim-3、Galectin-9的高表达,进一步影响Th1/Th2的相关转录因子T-bet/GATA-3和细胞因子IFN-γ、IL-12和IL-4的水平的改变,从而纠正Th1/Th2免疫细胞失衡的现象,抑制感染的进一步发展。

系统性红斑狼疮外周血T淋巴细胞PD-1和Tim-3表达和意义

目的:检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血T淋巴细胞上PD-1和Tim-3表达水平,探讨其在SLE中的作用。方法:采用流式细胞术检测41例SLE患者、33例健康对照者(HC)外周血T淋巴细胞上PD-1和Tim-3的表达情况。分析SLE患者外周血T淋巴细胞上PD-1和Tim-3的共表达与实验室检查、临床表现、治疗的关系。结果:(1)SLE患者组PD-1~+T淋巴细胞百分比、Tim-3~+T淋巴细胞百分比和T淋巴细胞PD-1表达的平均荧光强度(MFI)均显著高于HC组,差异具有统计学意义;(2)SLE患者组PD-1~+Tim-3~-、PD-1~+Tim-3~+、PD-1~-Tim-3~+T淋巴细胞百分比和PD-1~+Tim-3~-T淋巴细胞PD-1表达的MFI显著高于HC组,差异具有统计学意义;(3)anti-nucleosome、anti-Ro52阳性的SLE患者PD-1~+Tim-3~-T淋巴细胞PD-1表达MFI明显高于阴性者,差异具有统计学意义;(4)PD-1~+Tim-3~+T淋巴细胞百分比与L呈负相关;PD-1~+Tim-3~-T淋巴细胞PD-1表达MFI与WBC、RBC、HGB、HCT、L、N、C3、C4呈负相关,与PLR、RDW呈正相关;(5)低红细胞血症组、贫血组SLE患者PD-1~+Tim-3~-T淋巴细胞PD-1表达MFI明显高于阴性者,差异有统计学意义;(6)治疗后SLE患者PD-1~+Tim-3~-T淋巴细胞PD-1表达MFI明显低于治疗前,差异具有统计学意义。结论:SLE患者PD-1~+Tim-3~-T淋巴细胞百分比和PD-1表达MFI明显升高,且与自身抗体的产生、疾病的严重程度和治疗密切相关。

支气管哮喘患者诱导痰炎性细胞中Tim-3 mRNA的表达及作用机制研究

目的探讨支气管哮喘患者诱导痰炎性细胞中Tim-3mRNA的表达及作用机制,并分析其与上清液中IL-4、IFN-γ和肺功能指标的相关性。方法将2012年5月-2013年8月我院收治的支气管哮喘患者分为哮喘缓解组和哮喘发作组,并于同期随机选取120例健康体检者为对照组,通过逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测三组的诱导痰炎性细胞中Tim-3mRNA的水平,同时采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液中IL-4、IFN-γ,分析其与Tim-3mRNA的相关性。结果哮喘发作组、哮喘缓解组FEV1、FVC、FEV1/FVC低于对照组,哮喘发作组低于哮喘缓解组,差异有统计学意义(P<0.05),哮喘发作组、哮喘缓解组的Tim-3/β-actin水平高于健康对照组,且哮喘发作组高于哮喘缓解组,差异有统计学意义(P<0.05);哮喘发作组、哮喘缓解组IL-4高于健康对照组,哮喘发作组高于哮喘缓解组,哮喘发作组、哮喘缓解组IFN-γ低于健康对照组,哮喘发作组低于哮喘缓解组,差异有统计学意义(P<0.05);哮喘缓解组Tim-3 mRNA与IL-4有正相关关系(r=0.71,P<0.05),与IFN-γ和FEV1/FVC有负相关关系(r=-0.86、-0.81,P<0.05),哮喘发作组Tim-3mRNA与IL-4有正相关关系(r=0.65,P<0.05),与IFN-γ和FEV1/FVC有负相关关系(r=-0.77、-0.78,P<0.05)。结论通过检测Tim-3mRNA水平可以有效评估支气管哮喘的发生与发展,临床有重要参考价值。

急性脑梗死患者外周血CD8^(+)T细胞中PD-1、Tim-3和CTLA-4的表达

目的:探讨急性脑梗死患者外周血CD8^(+)T细胞中PD-1、Tim-3和CTLA-4的表达,并分析其与患者预后的关系。方法:用流式细胞学的方法检测108例急性脑梗死患者以及90例健康对照外周血CD8^(+)T细胞中PD-1、Tim-3和CTLA-4的表达。急性脑梗死患者随访90 d后给予modified Rankin Scale(mRS)评分评价患者预后(0~2分为预后好,3~5分为预后差)。采用logistic回归筛选影响急性脑梗死患者预后的因素。采用ROC曲线评价患者外周血CD8^(+)T细胞中PD-1、Tim-3和CTLA-4阳性率对患者预后的预测价值。结果:急性脑梗死患者CD8^(+)T细胞中PD-1和CTLA-4的阳性率降低(P<0.001)。患者外周血CD8^(+)T细胞中PD-1阳性率在预后好的急性脑梗死患者中表达上调(P<0.001)。Logistic回归结果显示PD-1阳性率是急性脑梗患者预后的影响因素(OR为1.794,95%CI:1.411~2.281)。急性脑梗患者外周血CD8^(+)T细胞中PD-1阳性率预测患者较好预后的ROC曲线下面积为0.888(95%CI:0.825~0.951),截断值是13.65%,此时的敏感度为88.4%,特异度为80.0%。结论:CD8^(+)T细胞中PD-1阳性率可能成为急性脑梗死患者的预后指标。

Tim-3、PD-1在慢性HBV感染中的免疫调节作用

慢性HBV感染者体内免疫细胞存在功能障碍,免疫功能无法发挥正常作用;其CD4^+、CD8^+T淋巴细胞、NK细胞等免疫细胞表面存在Tim-3、PD-1的过度表达。大量文献表明该现象与HBV持续感染、疾病的发生发展以及预后密切相关,推测Tim-3、PD-1或许可作为新的免疫靶点治疗慢性乙型肝炎。

Tim-3,一个Th1相关的免疫调节分子

T细胞免疫球蛋白粘蛋白3(Tim-3)基因是Tim家族成员,可以特异性地表达于活化的Th1细胞表面,调控Th1型细胞因子的分泌。因此可能与自身免疫病、过敏性疾病及诱导移植物耐受等有关。本文就有关内容作一综述。

共刺激分子PD-1和Tim-3在HIV感染中的作用

PD-1和Tim-3是近期发现的T细胞表面的共刺激分子,分别与其配体PD-L和Galectin-9结合并传递抑制性的第二信号,在机体细胞免疫调节中发挥作用。研究发现共刺激分子PD-1、Tim-3以及它们的配体在HIV病毒感染中发挥非常重要的作用。本文主要介绍PD-1和Tim-3及其配体的结构与表达、PD-1和Tim-3与HIV感染及其表达水平与HIV感染病程进展的关系,探讨其在艾滋病病情发展中的作用机制和治疗方面的应用前景。

阿托伐他汀对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脑组织TIM-3、TIM-1表达的影响

目的:观察阿托伐他汀对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)Wistar大鼠的发病情况、组织病理变化及脑组织内T细胞免疫球蛋白和黏液域蛋白-3(TIM-3)、T细胞免疫球蛋白和黏液域蛋白-1(TIM-1)表达水平的影响。方法:将30只雌性Wistar大鼠随机分为佐剂组、EAE组、阿托伐他汀组,以豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)诱发制备大鼠EAE模型,并于给予GPSCH当日开始1次/d灌服0.1%PBS溶液1.5ml/只(佐剂组和EAE组)和含阿托伐他汀的0.1%PBS溶液,1次/d,剂量为8mg/(kg·d),连续13d,观察EAE症状并评分,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Tim-1mRNA、Tim-3mRNA在脑组织中的表达。结果:阿托伐他汀组发病率降低、临床症状减轻,体重下降减少(P<0.05);与佐剂组比较,EAE组TIM-3mRNA明显上升(P<0.05),阿托伐他汀组TIM-3mRNA较EAE组明显下降(P<0.05);与佐剂组比较,EAE组TIM-1mRNA下降(P<0.05),阿托伐他汀组TIM-1mRNA较EAE组上升(P<0.05)。结论:EAE大鼠TIM-3上升,TIM-1下降,提示其在EAE发病机制中发挥作用,通过下调TIM-3、上调TIM-1的表达,可能是阿托伐他汀对EAE保护作用机制之一。

原因不明复发性流产患者外周血单核细胞上Tim-3和PD-1的表达及意义

目的探讨原因不明复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)和先兆流产患者外周血单核细胞上PD-1和Tim-3的表达及其细胞因子的分泌情况,为先兆流产和URSA发病机制研究提供理论依据。方法随机选取29例健康早孕妇女作为正常早孕组(A组),37例仅有少量阴道出血的早孕妇女为先兆流产组(B组),22例URSA早孕患者为URSA组(C组);应用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,然后采用流式细胞分析技术检测3组孕妇外周血中CD14+单核细胞上Tim-3、PD-1的表达水平;ELISA法检测外周血中IL-4、IL-12、IFN-γ的含量。结果与正常早孕组相比,先兆流产组和URSA组外周血单核细胞上Tim-3、PD-1表达降低,外周血IL-4表达降低,URSA组低于先兆流产组(P<0.05);IFN-γ、IL-12表达增高,URSA组高于先兆流产组(P<0.05);相关性分析提示先兆流产组及URSA组外周血单核细胞上Tim-3与PD-1之间呈正相关;Tim-3、PD-1与IL-12呈负相关,IL-12与IL-4呈负相关,与IFN-γ呈正相关。结论外周血单核细胞上Tim-3、PD-1可能通过调节IL-12产生间接调节Th1/Th2平衡参与先兆流产和URSA的发生。

恶性实体肿瘤患者外周血T细胞中PD-1、LAG-3、TIM-3的表达情况

目的探究恶性实体肿瘤患者淋巴细胞亚群及CD4^+T细胞、CD8^+T细胞上免疫检查点分子PD-1、LAG-3、TIM-3的表达情况。方法使用流式细胞术(FCM)对30例恶性实体肿瘤患者和15例健康对照者外周血CD3^-细胞、CD3^+T细胞、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、CD4/CD8比值、B细胞、NK细胞及其免疫检查点PD-1、LAG-3、TIM-3的表达比例进行检测;同时对肿瘤患者淋巴细胞亚群及免疫检查点表达比例进行相关性分析。结果与健康对照者相比,肿瘤患者外周血CD3^-细胞比例升高,CD3^+T细胞比例降低,但差异无统计学意义;肿瘤患者与健康对照相比,CD4^+T细胞比例(57.64%±15.52%)vs(54.69%±11.33%)、CD8^+T细胞比例(34.03%±14.27%)vs(31.13%±9.97%)、CD4/CD8比值1.94(0.96,2.68)vs 1.85(1.30,2.67)、B细胞比例5.90%(3.09%,10.69%)vs 7.63%(6.67%,10.85%),差异均无统计学意义,但NK细胞比例8.61%(5.58%,16.15%)vs 21.96%(12.84%,36.47%)降低;肿瘤患者CD4^+T细胞、CD8^+T细胞上免疫检查点分子PD-1、LAG-3、TIM-3的表达比例高于健康对照者,双阳耗竭CD4^+T比例增加,双阳耗竭CD8^+T比例差异无统计学意义;肿瘤患者CD4^+T细胞比例与PD-1^+CD4^+T细胞、双阳耗竭CD4^+T细胞比例均呈负相关性。结论恶性实体肿瘤患者外周血部分淋巴细胞比例紊乱,负性免疫检查点分子高表达、共表达,耗竭T细胞比例升高,对细胞免疫进行负性调控。免疫检查点分子的协同作用可能参与了肿瘤的发生发展。肿瘤患者免疫检查点抑制剂单药治疗无效的患者,多靶点联合治疗可能会取得更好的效果。

负性协同刺激分子PD-1和Tim-3及细胞因子在布鲁氏菌病中的变化

目的检测布鲁氏菌病患者程序性死亡蛋白1(PD-1)、T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(Tim-3)及细胞因子IL-17A和IL-6的变化。方法 72例布鲁氏菌患者组与50例正常对照组采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中PD-1和Tim-3的表达,实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞中PD-1 mRNA和Tim-3 mRNA的表达,流式液相多重蛋白定量技术(CBA)检测血清中IL-17A和IL-6的水平,Pearson法分析布鲁氏菌病患者外周血中PD-1^+Tim-3^+CD4^+T的表达与IL-17A和IL-6的相关性,分析布鲁氏菌病患者外周血中PD-1^+Tim-3^+CD4^+T的表达及临床特点。结果与正常对照组相比,布鲁氏菌病患者组PD-1^+Tim-3^+CD4^+T细胞、PD-1 mRNA和Tim-3 mRNA的表达、IL-17A和IL-6的水平均明显增加(P<0.01),布鲁氏菌病患者外周血中PD-1^+Tim-3^+CD4^+T的表达与IL-17A(r=0.71,P<0.01)和IL-6(r=0.83,P<0.01)的水平均呈明显的正相关,并且布鲁氏菌病患者出现发热、骨关节痛、多器官受累时外周血中PD-1^+Tim-3^+CD4^+T的表达明显增高(P<0.01)。结论 PD-1与Tim-3在布鲁氏菌病患者中表达增加,可能共同参与了布鲁氏菌对免疫应答的负性调控,不利于机体对布鲁氏菌的有效清除。

Tim-3、PD-1和CD28表达与慢性乙肝患者肝脏iNKT细胞功能的关系

目的研究慢性乙肝患者肝脏中恒定自然杀伤T(invariant nature killer T,iNKT)细胞的功能与其表面Tim-3、PD-1、CD28表达的关系。方法无菌分离人体肝脏单个核细胞,建立α-半乳糖神经酰胺(α-GalCer)诱导慢性HBV感染后的iNKT细胞体外诱导扩增模型,以流式细胞术检测体外培养基线水平0 h和72 h的iNKT细胞的表面Tim-3、PD-1、CD28的表达以及IL-4、IFN-γ的分泌情况;用ELISA法检测培养上清中IL-4、IFN-γ的水平;阻断PD-1、Tim-3及活化CD28信号通路,以流式和ELISA法检测IL-4+iNKT与IFN-γ+iNKT。结果慢性乙肝患者(实验组)肝脏中的iNKT细胞的比例明显低于正常人(对照组)(P<0.05);iNKT表面Tim-3、PD-1的表达明显增多(P<0.05),而CD28的表达则明显减少(P<0.05);iNKT细胞分泌IL-4、IFN-γ的功能明显降低(P<0.05);单一α-GalCer刺激培养72 h后,实验组IL-4+iNKT、IFN-γ+iNKT的表达没有明显变化(P>0.05),而阻断PD/PDL1、Tim-3/Tim-3L和(或)活化CD28/CD80信号通路后,IL-4+iNKT、IFN-γ+iNKT细胞的表达明显提高(P<0.05)。结论慢性乙肝患者肝脏iNKT细胞功能存在明显的缺陷,并提示负向调控因子Tim-3、PD-1表达的增加和正向调控因子CD28表达的降低可能与iNKT细胞功能的下调密切相关。

食管鳞状细胞癌患者外周血和肿瘤组织来源的髓源抑制性细胞中PD-1和TIM-3的表达

目的:探讨程序性细胞死亡蛋白-1(PD-1)和T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(TIM-3)在食管鳞状细胞癌(ESCC)患者外周血和肿瘤组织来源的髓源抑制性细胞(MDSCs)上的表达情况。方法:将48例ESCC手术患者外周血单个核细胞和肿瘤组织单细胞进行CD11b、CD14、CD33、HLA-DR标记,并检测单核MDSCs和多形核MDSCs两个亚群上PD-1和TIM-3的表达,分析其表达水平与临床病理指标的关系。结果:肿瘤组织来源的MDSCs上PD-1和TIM-3的表达均高于外周血来源的MDSCs(P <0. 05)。肿瘤组织来源的多形核MDSCs上PD-1和TIM-3的表达水平高于单核MDSCs(P <0. 05),但是PD-1、TIM-3高表达和低表达患者生存曲线差异无统计学意义(P>0. 05)。PD-1、TIM-3在外周血和肿瘤组织来源的MDSCs上的表达均与ESCC患者临床病理指标无关(P> 0. 05)。结论:PD-1和TIM-3在ESCC患者肿瘤组织来源的MDSCs上的表达明显升高,二者可能成为与MDSCs功能相关的标志物。