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lncRNA UNC5B-AS1通过NF-κB信号通路调控骨肉瘤细胞的恶性生物学行为 被引量:1
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作者 阳庆林 张怀斌 +3 位作者 兰志杰 秦庆庆 王一坤 王勇平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1082-1088,共7页
目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)UNC5B-AS1调控骨肉瘤细胞恶性生物学行为的可能机制。方法通过RT-qPCR检测UNC5B-AS1在骨肉瘤细胞MG63、骨肉瘤细胞U2OS和成骨细胞hFOB1.19中的表达情况;对骨肉瘤细胞中的UNC5B-AS1进... 目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)UNC5B-AS1调控骨肉瘤细胞恶性生物学行为的可能机制。方法通过RT-qPCR检测UNC5B-AS1在骨肉瘤细胞MG63、骨肉瘤细胞U2OS和成骨细胞hFOB1.19中的表达情况;对骨肉瘤细胞中的UNC5B-AS1进行过表达和敲低后,通过CCK-8实验、Transwell实验以及流式细胞术分别检测骨肉瘤细胞的增殖、迁移和凋亡;同时,通过RT-qPCR和Western blot分别检测过表达和敲低UNC5B-AS1对NF-κB信号通路关键mRNA和蛋白表达的影响。结果相比于正常成骨细胞hFOB1.19,UNC5B-AS1在骨肉瘤细胞MG63和U2OS中的表达有不同程度的升高。过表达UNC5B-AS1明显促进骨肉瘤细胞的增殖能力,同时使骨肉瘤细胞的迁移能力明显升高,而细胞凋亡率明显降低,NF-κB信号通路相关mRNA和蛋白表达明显升高。敲低UNC5B-AS1的表达明显抑制骨肉瘤细胞的增殖能力,同时使骨肉瘤细胞的迁移能力明显降低,而细胞凋亡率明显升高,NF-κB信号通路相关mRNA和蛋白表达明显降低。结论lncRNA UNC5B-AS1在骨肉瘤细胞中呈高表达,且可能通过激活NF-κB信号通路来影响骨肉瘤细胞的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 骨肉瘤 lncRNA unc5B-AS1 NF-ΚB信号通路 增殖 凋亡 机制
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PRKAA1和UNC5CL基因多态性与胃癌易感性的关系 被引量:9
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作者 张永菊 张春艳 +4 位作者 于新娟 徐晓娜 王莉莉 耿长新 董全江 《中国临床医生杂志》 2016年第10期21-25,共5页
目的探讨PRKAA1和UNC5CL基因位点多态性与胃癌发生的关系。方法采用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱检测技术对60例胃炎和60例胃癌患者的rs10074991、rs13361707、rs10036575、rs2294693、rs742494位点进行基因分型。结果PRKAA1基因... 目的探讨PRKAA1和UNC5CL基因位点多态性与胃癌发生的关系。方法采用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱检测技术对60例胃炎和60例胃癌患者的rs10074991、rs13361707、rs10036575、rs2294693、rs742494位点进行基因分型。结果PRKAA1基因rs13361707位点CC基因型和○10074991位点GG基因型在胃癌组频率明显高于胃炎组,差异有显著性(P<0.05)。多因素Logistic回归分析校正性别年龄后,差异仍有显著性。rs10036575位点胃癌组CT+CC基因型频率低于胃炎组,差异有显著性(P<0.05)。多因素Logistic回归分析校正性别年龄后,差异仍有显著性。UNC5CL基因rs2294693位点CC基因型和rs742494位点TT基因型频率胃癌组高于胃炎组,但差异无显著性(P>0.05),多因素Logistic回归分析校正性别年龄后,差异无显著性。结论 PRKAA1基因rs13361707位点CC基因型、rs10074991位点GG基因型能增加胃癌的发病风险,而rs10036575位点CT+CC基因型降低胃癌的发病风险。UNC5CL基因rs2294693和rs742494位点基因多态性与胃癌发病风险无关。 展开更多
关键词 胃癌 基因多态性 PRKAA1 unc5CL
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大肠癌组织中unc5c基因启动子甲基化的分析 被引量:3
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作者 武洁 陈学军 +1 位作者 薛占瑞 王光川 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期683-686,共4页
目的分析大肠癌(colorectal cancer,CRC)组织中unc5c基因启动子区域甲基化的改变状况及其临床意义。方法运用甲基化特异性PCR技术,检测73例大肠癌患者手术切除的癌组织和相应的癌旁组织及28例正常组织、36例腺瘤患者手术切除的腺瘤组织... 目的分析大肠癌(colorectal cancer,CRC)组织中unc5c基因启动子区域甲基化的改变状况及其临床意义。方法运用甲基化特异性PCR技术,检测73例大肠癌患者手术切除的癌组织和相应的癌旁组织及28例正常组织、36例腺瘤患者手术切除的腺瘤组织中unc5c基因启动子区域甲基化的改变情况,并分析与临床病理特征之间的关系。结果 73例癌组织样本中甲基化检出率为75%(55/73),相应的癌旁组织为7%(5/73),腺瘤组织为63%(23/36),而正常组织中未检出unc5c基因甲基化。unc5c基因甲基化检出率与年龄、分化程度及TNM分期有关。结论检测unc5c基因启动子区域异常甲基化是大肠癌早期辅助诊断的分子标志物之一。 展开更多
关键词 大肠癌 unc5c基因 甲基化 甲基化特异性PCR
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人粪便中UNC5C基因甲基化在早期诊断大肠癌中的临床意义 被引量:2
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作者 孙冬生 王刚 +2 位作者 王明君 钟轩 费乐学 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第20期5688-5690,共3页
目的探讨人粪便中UNC5C基因甲基化在临床上早期诊断大肠癌的临床意义。方法选取2011年12月至2013年12月该院收治的大肠癌病人52例,健康体检者40例,对UNC5C启动子的两个区域(区域1和区域2),使用结合重亚硫酸盐限制性内切酶法(COBRA)研究... 目的探讨人粪便中UNC5C基因甲基化在临床上早期诊断大肠癌的临床意义。方法选取2011年12月至2013年12月该院收治的大肠癌病人52例,健康体检者40例,对UNC5C启动子的两个区域(区域1和区域2),使用结合重亚硫酸盐限制性内切酶法(COBRA)研究对象的粪便标本中UNC5C基因甲基化状态。结果广泛UNC5C的甲基化及部分甲基化在大肠癌患者粪便、健康体检者中分为54%(28/52)和81%(42/52);0%(0/40)和10%(4/40)。无论广泛还是部分UNC5C的甲基化率大肠癌患者粪便的检出率均明显高于健康体检者(P<0.05)。人粪便UNC5C基因甲基化状态改变与大肠癌患者的性别、年龄、肿块大小没有明显的相关性(P>0.05)。结论无论广泛还是部分UNC5C的甲基化率大肠癌患者粪便的检出率均明显高于健康体检者,而广泛甲基化为大肠癌所特有。 展开更多
关键词 大肠癌 unc5C基因 基因甲基化 早期诊断
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Unc5D基因在高、低危神经母细胞瘤中的表达及其意义 被引量:2
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作者 王弘 李佳特 +1 位作者 郝良纯 薛辛东 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期225-226,233,共3页
目的探讨膜蛋白受体Unc5D在高、低危神经母细胞瘤(NB)中表达模式与患儿生存期长短之间的关系。方法在118例NB标本cDNA中应用TaqMan探针实时PCR法检测Unc5D基因在高、低危NB中的表达,应用t检验及Kaplan-Meier生存分析法检测Unc5D表达水平... 目的探讨膜蛋白受体Unc5D在高、低危神经母细胞瘤(NB)中表达模式与患儿生存期长短之间的关系。方法在118例NB标本cDNA中应用TaqMan探针实时PCR法检测Unc5D基因在高、低危NB中的表达,应用t检验及Kaplan-Meier生存分析法检测Unc5D表达水平与NB恶性程度及生存期长短的关系。结果Unc5D基因在低危NB中表达明显高于其在高危NB中的表达水平(P<0.01),且高Unc5D表达与NB患儿长期生存相关(P<0.01)。结论Unc5D基因可作为NB分子生物学预后标记物。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 预后标志物 膜蛋白 荧光定量PCR unc5D基因
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UNC5H3和DCC在胃癌组织中的表达与增殖的关系及其预后 被引量:1
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作者 陈金明 王沈华 +2 位作者 吴定钱 戴梦昭 韩宝三 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期651-655,共5页
目的探讨UNC5H3和DCC在胃癌组织的表达,与临床病理特征和增殖的关系以及与患者生存和预后的关系。方法应用组织芯片和免疫组织化学技术,分析60例胃癌组织中UNC5H3、DCC和Ki-67的表达,并对其表达进行相关分析。利用图像分析软件Image-Pro... 目的探讨UNC5H3和DCC在胃癌组织的表达,与临床病理特征和增殖的关系以及与患者生存和预后的关系。方法应用组织芯片和免疫组织化学技术,分析60例胃癌组织中UNC5H3、DCC和Ki-67的表达,并对其表达进行相关分析。利用图像分析软件Image-Pro Plus 6.0测量切片积分吸光度,对结果进行验证。采用Kaplan-Meier限乘法计算生存率。建立Cox回归模型,评价UNC5H3和DCC作为胃癌患者预后的独立影响因素的可行性。结果在60例胃癌组织中,UNC5H3、DCC和Ki-67的阳性表达率分别为43.3%、53.3%和60.0%。UNC5H3和DCC与淋巴转移和远处转移之间,差异有显著性(P<0.05)。UNC5H3和DCC表达与Ki-67表达相互之间无相关性(P>0.05)。用Kaplan-Meier生存曲线经Log-rank检验发现,UNC5H3的阳性表达与胃癌患者生存之间存在相关性(P<0.05)。DCC的阳性表达与胃癌患者生存之间无相关性(P>0.05)。经Cox回归分析,UNC5H3和DCC的表达与胃癌患者预后无明显相关性。结论依赖性受体UNC5H3和DCC共同参与了胃癌的发生进展,检测UNC5H3和DCC可作为反映胃癌临床病理学特点的指标,检测UNC5H3可作为胃癌患者生存期的指标,但UNC5H3和DCC的表达不是判断胃癌患者预后的独立影响因素。 展开更多
关键词 胃癌 unc5H3 DCC 增殖 预后 组织芯片 免疫组织化学
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LncRNA UNC5B-AS1对肺癌细胞黏附、侵袭及迁移的影响及其机制 被引量:4
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作者 谭建军 隆姝孜 张涛 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期622-627,共6页
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA) UNC5B-AS1调控miR-218-5p的表达影响肺癌细胞黏附、侵袭和迁移及其作用机制。方法:选取2017年6月至2019年6月在重庆三峡中心医院肿瘤科经手术切除的20例肺癌患者癌组织和对应癌旁组织标本,采用实时荧光... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA) UNC5B-AS1调控miR-218-5p的表达影响肺癌细胞黏附、侵袭和迁移及其作用机制。方法:选取2017年6月至2019年6月在重庆三峡中心医院肿瘤科经手术切除的20例肺癌患者癌组织和对应癌旁组织标本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肺癌组织和癌旁组织及其支气管上皮细胞HBE和不同肺癌细胞A549、H1437、H1975、H1299和H460中UNC5B-AS1的表达。将UNC5B-AS1 siRNA转染至肺癌A549细胞,采用黏附实验、Transwell侵袭实验及划痕实验检测下调UNC5B-AS1对A549细胞黏附、侵袭和迁移能力的影响;qRT-PCR和双荧光素酶报告基因检测实验鉴定UNC5B-AS1对miR-218-5p的靶向调控关系;Western blot检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白表达情况。结果:肺癌组织和细胞中UNC5B-AS1表达显著高于癌旁组织和支气管上皮细胞(P<0.05),UNC5B-AS1在肺癌A549细胞中的表达量最高(P<0.05)。下调UNC5B-AS1的表达能够抑制A549细胞黏附、侵袭和迁移能力(P<0.05)。qRT-PCR和双荧光素酶报告基因检测结果表明UNC5B-AS1能靶向调控miR-218-5p的表达。下调UNC5B-AS1可抑制E-cadherin蛋白表达,促进Vimentin和Twist蛋白表达。结论:lncRNA UNC5B-AS1通过靶向调控miR-218-5p的表达促进肺癌细胞黏附、侵袭和迁移,其作用机制可能与促进EMT的发生有关。 展开更多
关键词 unc5B-AS1 miR-218-5p 肺癌细胞 黏附 侵袭 迁移
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UNC5C基因启动子的甲基化状况与大肠癌UNC5C的相关性分析 被引量:1
8
作者 孙冬生 高春艳 +2 位作者 王志刚 刘宁 贾凤洁 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第11期1487-1489,共3页
目的探讨UNC5C基因启动子的甲基化状况与大肠癌UNC5C的相关性。方法选择河北省唐山市开滦总医院肿瘤科2010年2月至2013年3月共54例散发性大肠癌及相关正常黏膜组织,以及6个大肠癌细胞株和纤维细胞株(FCL)作为研究对象。对研究对象实... 目的探讨UNC5C基因启动子的甲基化状况与大肠癌UNC5C的相关性。方法选择河北省唐山市开滦总医院肿瘤科2010年2月至2013年3月共54例散发性大肠癌及相关正常黏膜组织,以及6个大肠癌细胞株和纤维细胞株(FCL)作为研究对象。对研究对象实施基因mRNA和甲基化分析。结果 UNC5A和UNC5B的mRNA,在所检测的大肠癌细胞株中均有表达。而UNC5C除FCL外,所有的癌细胞株中均无mRNA表达。在大肠癌组织中UNC5C的甲基化明显高于正常黏膜,差异有统计学意义(P〈0.05)。UNC5C基因在Ⅰ~Ⅱ期,以及Ⅲ~Ⅳ期的甲基化水平均显著高于未甲基化水平,均差异有统计学意义(P〈0.05)。依照Spearman法进行相关性分析,UNC5C缺陷与大肠癌疾病呈正相关(r=0.856,P〈0.05)。结论 Netrin-1受体UNC5C缺陷与大肠癌具有一定相关性。 展开更多
关键词 Netrin-1受体 unc5C缺陷 结直肠肿瘤 相关性
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UNC5B单克隆抗体的制备及对黑素瘤细胞体外迁移能力的影响 被引量:1
9
作者 左元玲 杨剑峰 +1 位作者 何杨 赵益明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1259-1262,共4页
目的制备非协调性分子5同源蛋白B(UNC5B)的单克隆抗体(mAb),分析其功能。方法将UNC5B基因片段与原核表达载体pET-32a连接,连接产物转化大肠杆菌BL21(DE3),进行原核诱导表达并纯化重组蛋白。用UNC5B重组蛋白免疫BALB/c小鼠,经杂交瘤技术... 目的制备非协调性分子5同源蛋白B(UNC5B)的单克隆抗体(mAb),分析其功能。方法将UNC5B基因片段与原核表达载体pET-32a连接,连接产物转化大肠杆菌BL21(DE3),进行原核诱导表达并纯化重组蛋白。用UNC5B重组蛋白免疫BALB/c小鼠,经杂交瘤技术筛选可稳定分泌抗UNC5B的杂交瘤细胞株,并用Western blot法、ELISA和流式细胞术鉴定。利用细胞划痕实验观察UNC5BmAb对黑素瘤细胞迁移能力的影响。结果表达并纯化了UNC5B重组蛋白;筛选出1株高效价的2C9mAb,通过ELISA、Western blot法和流式细胞术证实该m Ab特异性识别UNC5B;划痕实验证明在netrin-1存在的条件下,UNC5BmAb可促进黑素瘤细胞迁移。结论成功制备了UNC5B的特异性m Ab,在netrin-1存在时,该抗体可促进黑素瘤细胞迁移。 展开更多
关键词 非协调性分子5同源蛋白B(unc5B) 蛋白纯化 单克隆抗体 细胞迁移
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UNC5A基因过表达对膀胱癌T24细胞增殖、转移的影响及其机制探讨 被引量:1
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作者 孟冬冬 吴军 +2 位作者 黄敏玉 覃天资 黄群 《医学分子生物学杂志》 CAS 2021年第5期343-348,共6页
目的探究UNC5A基因过表达对膀胱癌T24细胞增殖、转移及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法选取T24细胞,转染UNC5A-pcDNA和pcDNA-NC,将细胞随机分为Control组、pcDNA-NC组和UNC5A-pcDNA组。RT-PCR检测UNC5A mRNA表达水平;克隆形成实验... 目的探究UNC5A基因过表达对膀胱癌T24细胞增殖、转移及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法选取T24细胞,转染UNC5A-pcDNA和pcDNA-NC,将细胞随机分为Control组、pcDNA-NC组和UNC5A-pcDNA组。RT-PCR检测UNC5A mRNA表达水平;克隆形成实验检测细胞克隆形成率;流式细胞术检测细胞凋亡率;Transwell检测细胞侵袭细胞数;Western印迹检测UNC5A、Wnt1、β-catenin蛋白表达水平;加入Wnt/β-catenin信号通路激活剂LiCl检测各组细胞增殖、凋亡、侵袭情况。结果与Control组比较,UNC5A-pcDNA组UNC5A mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05),克隆形成率降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),侵袭细胞数降低(P<0.05),Wnt1、β-catenin蛋白表达水平降低(P<0.05)。加入Wnt/β-catenin信号通路激活剂LiCl则能逆转过表达UNC5A对T24细胞增殖、侵袭的抑制作用,凋亡促进作用。结论UNC5A基因过表达可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化抑制T24细胞增殖、侵袭,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 膀胱癌 unc5A 增殖 侵袭 凋亡 WNT/Β-CATENIN信号通路
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UNC5C蛋白在大肠癌中的表达及其与预后的关系 被引量:2
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作者 武洁 王光川 陈学军 《医学与哲学(B)》 2012年第4期46-48,共3页
探讨大肠癌组织中UNC5C基因表达情况与大肠癌的分化、转移及临床预后的关系。采用免疫组织化学方法分析UNC5C蛋白的表达水平,以Kaplan-Meier生存曲线分析UNC5C与预后的关系。结果正常大肠组织中UNC5C的表达与大肠癌组织和腺瘤组织各组... 探讨大肠癌组织中UNC5C基因表达情况与大肠癌的分化、转移及临床预后的关系。采用免疫组织化学方法分析UNC5C蛋白的表达水平,以Kaplan-Meier生存曲线分析UNC5C与预后的关系。结果正常大肠组织中UNC5C的表达与大肠癌组织和腺瘤组织各组之间存在明显差异,并且大肠癌组织中UNC5C的表达与TNM分期有关。UNC5C阴性组与阳性组的生存率存在差异。因此得出结论,UNC5C蛋白表达可作为大肠癌病情发展及预后的标记物之一。 展开更多
关键词 大肠癌 unc5C 免疫组化 预后
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膀胱癌中UNC5B的表达及临床意义 被引量:1
12
作者 刘娇 张哲 孔垂泽 《现代肿瘤医学》 CAS 2012年第10期2087-2089,共3页
目的:通过比较不同分期膀胱癌组织标本及不同恶性程度的膀胱癌细胞系UNC5B表达量的差异,为膀胱癌寻找新的生物标志物和治疗手段。方法:选取临床膀胱癌组织标本100例及三种膀胱癌细胞系,RT-PCR及Western-Blot检测UNC5B的表达量及其差异... 目的:通过比较不同分期膀胱癌组织标本及不同恶性程度的膀胱癌细胞系UNC5B表达量的差异,为膀胱癌寻找新的生物标志物和治疗手段。方法:选取临床膀胱癌组织标本100例及三种膀胱癌细胞系,RT-PCR及Western-Blot检测UNC5B的表达量及其差异。结果:UNC5B在膀胱癌中均有表达,分期高较分期低的膀胱癌组织标本中UNC5B表达量明显减少(P<0.05),恶性程度高较恶性程度低的膀胱癌细胞系中UNC5B表达量明显减少(P<0.05)。结论:UNC5B表达量与膀胱癌的浸润及进展程度显著相关,UNC5B可以作为一种潜在的生物标志物来预测膀胱癌的恶性程度。 展开更多
关键词 膀胱癌 组织 细胞 unc5B
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前列腺癌中netrin-1/UNC5B的表达及临床意义 被引量:1
13
作者 刘娇 孔垂泽 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2013年第12期1072-1076,共5页
目的:通过比较不同侵袭能力的前列腺癌细胞netrin-1/UNC5B表达量的差异,为前列腺癌寻找新的生物标志物及治疗手段。方法:选取前列腺癌细胞系DU145、22RV1、PC3、PC3M、RWPE-1,通过RT-PCR、Western印迹检测netrin-1/UNC5B的表达及其差异... 目的:通过比较不同侵袭能力的前列腺癌细胞netrin-1/UNC5B表达量的差异,为前列腺癌寻找新的生物标志物及治疗手段。方法:选取前列腺癌细胞系DU145、22RV1、PC3、PC3M、RWPE-1,通过RT-PCR、Western印迹检测netrin-1/UNC5B的表达及其差异,并通过免疫荧光检测配体netrin-1及其受体UNC5B在前列腺癌细胞中的定位。结果:netrin-1/UNC5B在前列腺癌细胞中均表达,侵袭能力强的前列腺癌细胞中netrin-1表达量明显增多(P<0.05),而UNC5B在RWPE-1(正常细胞)中表达量明显增多(P<0.05)。结论:netrin-1/UNC5B表达量与前列腺癌的浸润及进展程度紧密关联,有望作为一种潜在的生物标志物来预测前列腺癌的恶性程度。 展开更多
关键词 前列腺癌 NETRIN-1 unc5B DU145细胞 22RV1细胞 PC3细胞 PC3M细胞 RWPE-1细胞
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免疫组织化学检测膀胱癌中UNC5B的表达 被引量:1
14
作者 刘娇 张哲 孔垂泽 《山西医药杂志(上半月)》 CAS 2012年第11期1067-1070,共4页
目的通过比较不同临床分期膀胱癌组织标本切片中UNC5B表达量的差异,分析其与膀胱癌不同临床分期的病理参数关系,为膀胱癌的治疗提供新的方向。方法选取临床膀胱癌组织标本切片100份,采用免疫组织化学方法检测UNC5B表达量的差异及其定位... 目的通过比较不同临床分期膀胱癌组织标本切片中UNC5B表达量的差异,分析其与膀胱癌不同临床分期的病理参数关系,为膀胱癌的治疗提供新的方向。方法选取临床膀胱癌组织标本切片100份,采用免疫组织化学方法检测UNC5B表达量的差异及其定位。结果膀胱癌的浸润程度越高,UNC5B的表达量越低(P<0.05)。结论 UNC5B表达量与膀胱癌的浸润程度显著相关,有望作为一种潜在的生物肿瘤标志物来预测膀胱癌的恶性程度及预示肿瘤患者的预后和复发,并为探索膀胱癌的治疗提供新的方向。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 免疫组织化学 unc5B
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Role of unc5b in retinal neovascularization in mice with oxygen-induced retinopathy 被引量:2
15
作者 Dan Liu, Lei Shang 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2011年第2期137-142,共6页
AIM: To explore the role of unc5b in retinal neovascularization in murine oxygen-induced retinopathy (OIR). METHODS: On postnatal 7 (P7), C57BL/6J mice were exposed to 75% +/- 2% oxygen for 5 days. On postnatal 12 (P1... AIM: To explore the role of unc5b in retinal neovascularization in murine oxygen-induced retinopathy (OIR). METHODS: On postnatal 7 (P7), C57BL/6J mice were exposed to 75% +/- 2% oxygen for 5 days. On postnatal 12 (P12), the mice were brought back to the room air (21% oxygen) to induce retinal neovascularization. Western blot analysis was performed to examine the temporal expression of unc5b in murine retinas. Double staining for unc5b and isolectin B4 were employed to determine the location of unc5b in murine retinas. The effect of unc5b on retinal neovascularization was evaluated by intravitreal injection of unc5b-FC in mice with OIR. Retinal neovascularization was measured by counting neovascular cell nuclei above the internal limiting membrane and by angiography of flat-mounted retinas perfused with fluorescein dextran. o RESULTS: Compared to age-matched normal mice, the expression of unc5b was significantly increased in retinas of OIR mice on P17 and P21. Unc5b was apparently expressed in retinal vessels of OIR while being negative in normal retinal vessels. Retinal neovascularization in eyes injected with unc5b-FC was significantly reduced. CONCLUSION: Unc5b-FC can effectively inhibit retinal neovascularization induced by OIR. It may serve as a powerful and novel therapy for ischemia-induced retinal disease. 展开更多
关键词 oxygen-induced retinopathy unc5b unc5b-FC
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Netrin-1受体UNC5C广泛甲基化与大肠癌的相关性分析
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作者 孙冬生 贾凤杰 +4 位作者 刘宁 王刚 李海洋 高春艳 王志钢 《现代中西医结合杂志》 CAS 2015年第18期1964-1965,2015,共3页
目的:探讨神经突起生长导向因子( Netrin -1)受体 UNC5C 广泛甲基化与大肠癌发生、发展的相关性。方法使用结合重亚硫酸盐限制性内切酶法( COBRA)检测54例散发性大肠癌组织及其相关正常黏膜组织以及52例大肠腺瘤组织中 UNC5C 启动... 目的:探讨神经突起生长导向因子( Netrin -1)受体 UNC5C 广泛甲基化与大肠癌发生、发展的相关性。方法使用结合重亚硫酸盐限制性内切酶法( COBRA)检测54例散发性大肠癌组织及其相关正常黏膜组织以及52例大肠腺瘤组织中 UNC5C 启动子的2个区域(区域1和区域2)中 UNC5C甲基化情况,分析 UNC5C 甲基化与大肠癌发病的相关性。结果广泛 UNC5C甲基化(区域1和区域2均甲基化)及部分甲基化(区域1或区域2甲基化)在大肠癌组织、腺瘤组织及正常黏膜组织中分别占59%(32/54)和87%(47/54),8%(4/52)和38%(20/52),0%(0/54)和9%(5/54)。无论广泛还是部分 UNC5C 的甲基化率大肠癌组织均明显高于腺瘤组织及正常组织(P均﹤0.05)。UNC5C 基因在Ⅰ~Ⅱ期以及Ⅲ~Ⅳ期的甲基化水平均显著高于未甲基化水平,Ⅰ~Ⅱ期甲基化水平与Ⅲ~Ⅳ期甲基化水平相比差异无统计学意义(P均﹥0.05)。UNC5C甲基化与大肠癌发病呈显著正相关(r=0.856,P ﹤0.05),但广泛甲基化与肿瘤的分期并无明显相关性。结论 Netrin-1受体 UNC5C甲基化及其范围与大肠癌发生具有紧密联系,值得临床重视。 展开更多
关键词 Netrin-1受体 unc5C甲基化 广泛甲基化 部分甲基化 大肠癌
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人UNC5CL原核蛋白的表达及多克隆抗体的制备和鉴定 被引量:3
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作者 吕丹 钱晓萍 +2 位作者 田晓军 张毓 张君 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期242-245,共4页
目的:构建UNC5CL基因的原核表达载体,纯化GST-UNC5CL融合蛋白,并以其为抗原免疫家兔,制备抗人UNC5CL多克隆抗体,并鉴定其反应性和特异性。方法:用PCR方法扩增UNC5CL基因(表达其280-518位氨基酸)片段并克隆至pGEX-4T-2原核表达载体中,转... 目的:构建UNC5CL基因的原核表达载体,纯化GST-UNC5CL融合蛋白,并以其为抗原免疫家兔,制备抗人UNC5CL多克隆抗体,并鉴定其反应性和特异性。方法:用PCR方法扩增UNC5CL基因(表达其280-518位氨基酸)片段并克隆至pGEX-4T-2原核表达载体中,转化大肠杆菌BL21诱导融合蛋白GST-UNC5CL(aa 280-518)表达;所获得的可溶性蛋白经亲和层析纯化,免疫家兔制备抗血清,再采用ELISA、Western blot和免疫组化的方法检测抗体的效价及特异性。结果:测序证实原核重组质粒构建成功;经IPTG诱导,可表达Mr为52 000的GST-UNC5CL(aa280-518)的融合蛋白;谷胱甘肽亲和层析柱纯化的融合蛋白免疫家兔制备的抗血清经Western blot和免疫组化检测证实可识别目的蛋白。结论:制备了兔抗人UNC5CL的多克隆抗体,且抗体对内源性UNC5CL具有较好的反应性和特异性,为进一步研究UNC5CL的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 unc5CL 融合蛋白 多克隆抗体
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LncRNA UNC5B-AS1通过调控Toll样受体信号通路对宫颈癌细胞增殖及上皮间质转化的影响 被引量:3
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作者 蔡璟 何敏 +4 位作者 宋晶 唐永曜 李照东 李海玉 宋方洲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期258-268,共11页
目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)UNC5B-AS1对宫颈癌细胞增殖及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法利用GEO和TCGA数据库进行差异表达分析,采用qRT-PCR在正常与癌变宫颈组织中进行验证... 目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)UNC5B-AS1对宫颈癌细胞增殖及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法利用GEO和TCGA数据库进行差异表达分析,采用qRT-PCR在正常与癌变宫颈组织中进行验证,筛选出差异表达lncRNA UNC5B-AS1。在宫颈癌细胞株中转染lncRNA UNC5B-AS1干扰和过表达质粒,通过平板克隆、CCK-8、EdU实验检测lncRNA UNC5B-AS1对宫颈癌细胞增殖的影响;通过Transwell实验检测其对宫颈癌细胞迁移、侵袭能力的影响;通过Western blot检测EMT相关蛋白E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin的表达水平;通过转录组测序得到lncRNA UNC5B-AS1调控的信号通路,验证其相关基因的表达水平。结果RNA微阵列和生物信息学分析显示,lncRNA UNC5B-AS1在宫颈癌中的表达水平明显高于正常宫颈组织,并与患者的总生存时间相关。与阴性对照组相比,敲低lncRNA UNC5B-AS1可降低宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭,而过表达则促进宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭。Western blot显示,lncRNA UNC5B-AS1能调控宫颈癌细胞EMT。转录组测序表明lncRNA UNC5B-AS1能调控Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)信号通路。qRT-PCR及Western blot结果提示,敲低及过表达lncRNA UNC5B-AS1组中TLR相关基因IL6、TICAM2表达水平明显改变(P<0.05)。结论LncRNA UNC5B-AS1在宫颈癌中高表达,高表达lncRNA UNC5B-AS1可通过增强TLR信号通路活性,促进宫颈癌细胞增殖及EMT能力。 展开更多
关键词 LncRNA unc5B-AS1 生物信息学 宫颈癌 细胞增殖 上皮间质转化 TOLL样受体信号通路
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lncRNA UNC5B-AS1靶向miR-300影响非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭 被引量:2
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作者 贾静 吴建 金媛 《临床肺科杂志》 2021年第7期1069-1075,共7页
目的探究长链非编码RNA(lncRNA)不协调同源基因5B反义RNA1(UNC5B-AS1)对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响和分子机制。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肺癌组织、癌旁组织中UNC5B-AS1和miR-300的表达水平。将si-NC、si-UNC5B-... 目的探究长链非编码RNA(lncRNA)不协调同源基因5B反义RNA1(UNC5B-AS1)对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响和分子机制。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肺癌组织、癌旁组织中UNC5B-AS1和miR-300的表达水平。将si-NC、si-UNC5B-AS1、miR-NC、miR-300、si-UNC5B-AS1+antimiR-NC、si-UNC5B-AS1+anti-miR-300分别转染A549细胞。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、Transwell实验分别检测细胞活力、迁移侵袭细胞数。蛋白质印记(Western blot)检测细胞周期素D1(CyclinD1)、p21、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白的表达水平。双荧光素酶报告实验和检测RT-qPCR确定UNC5B-A S1对miR-300的靶向调控作用。结果与癌旁组织比较,肺癌组织中UNC5B-AS1表达升高,miR-300表达降低(P<0.05)。与转染si-NC比较,转染si-UNC5B-AS1后A549细胞活力、迁移侵袭细胞数降低,CyclinD1、MMP-2和MMP-9表达降低,P21表达升高(P<0.05)。与转染miR-NC比较,转染miR-300后A549细胞活力、迁移侵袭细胞数降低,CyclinD1、MMP-2和MMP-9表达降低,p21表达升高(P<0.05)。与共转染si-UNC5B-AS1和anti-miR-NC比较,共转染si-UNC5B-AS1和anti-miR-300后A549细胞活力、迁移侵袭细胞数升高,CyclinD1、MMP-2和MMP-9表达升高,P21表达降低(P<0.05)。miR-300是UNC5B-AS1的靶基因,UNC5B-AS1靶向负性调控miR-300表达。结论肺癌中UNC5B-AS1呈高表达,抑制UNC5B-AS1通过靶向miR-300可抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 unc5B-AS1 miR-30 非小细胞肺癌 细胞增殖 迁移和侵袭
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UNC5B-AS1在胃癌中差异表达的临床意义及对胃癌细胞活力和迁徙的影响 被引量:7
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作者 葛维 曾斌 《中南医学科学杂志》 CAS 2020年第1期59-64,共6页
本文旨在研究长链非编码RNA UNC5B-AS1在胃癌中差异表达的临床意义及其对胃癌细胞活力和迁徙的影响。从TCGA和GEO数据库中筛选出所有差异表达的mRNAs和lncRNAs,通过qRT-PCR检测mRNA水平UNC5B-AS1在胃癌中的差异表达;CCK-8实验检测UNC5B-... 本文旨在研究长链非编码RNA UNC5B-AS1在胃癌中差异表达的临床意义及其对胃癌细胞活力和迁徙的影响。从TCGA和GEO数据库中筛选出所有差异表达的mRNAs和lncRNAs,通过qRT-PCR检测mRNA水平UNC5B-AS1在胃癌中的差异表达;CCK-8实验检测UNC5B-AS1表达对胃癌细胞增殖的影响;划痕实验检测UNC5B-AS1对胃癌细胞迁移的影响。结果显示,相较于癌旁组织,UNC5B-AS1在人胃癌组织中表达显著下调,但胃癌患者的总生存期无显著影响,高表达UNC5B-AS1的胃癌患者无复发生存期较差,且相对于Ⅰ期胃癌患者,Ⅱ-Ⅳ期的胃癌患者高表达UNC5B-AS1,异常表达的UNC5B-AS1对胃癌细胞的增殖无显著影响,然而敲降UNC5B-AS1,胃癌细胞的迁移能力显著增加;过表达UNC5B-AS1,胃癌细胞的迁移能力显著抑制。结果推测UNC5B-AS1可作为评价胃癌复发和转移的相关标志物和潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 胃癌 癌症基因组图谱数据库 基因表达综合数据库 长链非编码unc5B-AS1 增殖 迁移
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