毛钩藤叶的化学成分

目的:对毛钩藤(Uncaria hirsuta Haviland)叶的化学成分进行研究。方法:采用不同柱色谱技术进行分离,通过波谱分析确定化合物结构。结果:分离鉴定了11个化合物,其中9个为黄酮类化合物,分别为山柰酚(1),槲皮素(2),槲皮苷(3),afzelin(4),异槲皮苷(5),(-)-表儿茶素(6),金丝桃苷(7),芦丁(8)和manghaslin(9);另外两个化合物为绿原酸(10)和胡萝卜苷(11)。结论:化合物1,2,5,6,7和9为首次从该植物中分离得到,其中化合物1,2,5和9系首次从该属植物中分离得到。

候钩藤总碱含量测定及其药理作用的初步研究

目的检测候钩藤的总碱含量,探讨其中枢药理作用,比较其与中药钩藤的差异。方法采用紫外分光光度法检测候钩藤总碱的含量;采用小鼠自主活动实验及戊巴比妥钠诱导催眠实验,观察候钩藤的镇静催眠作用;通过士的宁致小鼠惊厥实验,观察候钩藤的抗惊厥作用。结果紫外分光光度法检测到候钩藤带钩茎枝中总生物碱的含量为0.038%(g/g),钩藤的带钩茎枝的总碱含量为0.207%(g/g)。药理实验结果表明,候钩藤提取物能减少小鼠自主活动次数,增加戊巴比妥钠诱导小鼠入睡个数,并延长小鼠睡眠时间,减少士的宁致小鼠惊厥死亡数。候钩藤高剂量(20 g/kg)组的中枢抑制作用较显著,与钩藤组(15 g/kg)无明显差异(P>0.05),但候钩藤中、低剂量组的药理作用与钩藤组有显著差异(P<0.05或P<0.01)。结论候钩藤总碱含量较钩藤低。候钩藤具有一定程度的镇静催眠和抗惊厥作用,其作用强度与剂量有一定关系。

不同产地钩藤中钩藤碱含量比较研究

目的 比较不同产地的钩藤中主要化学成分钩藤碱的含量.方法 应用HPLC测定15批不同产地钩藤中钩藤碱的含量,以Phenomenex Gemini C1s（4.6 mm×250 mm,5μm）为色谱柱,甲醇-0.01mol/L三乙胺溶液（体积比70∶30）为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长为254 nm,柱温为25℃.结果 钩藤碱在0.1～1.0μg范围内线性关系良好,回归方程Y=2767.6X-1.0584（r=0.999 9）,加样平均回收率为98.3％,相对标准偏差（RSD）为2.1％;不同产地钩藤中钩藤碱含量有一定差异,以广西融水县产钩藤碱含量最高.结论 不同产地钩藤药材质量参差不齐,在制药及临床用药时应引起重视.

毛钩藤叶对中枢抑制作用的初步研究

目的研究毛钩藤叶对中枢神经系统的药理作用。方法采用小动物自主活动测定仪测定小鼠的自主活动。采用戊巴比妥钠阈下催眠实验及戊巴比妥钠阈剂量诱导小鼠睡眠时间实验,观察毛钩藤叶的镇静催眠作用。结果钩藤组(12 g/kg)与毛钩藤叶低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3个剂量组均能使小鼠自发活动减少,使戊巴比妥钠阈下睡眠剂量致小鼠入睡个数增多,并延长戊巴比妥钠阈剂量睡眠时间,且以毛钩藤叶高剂量组效果最为明显。结论毛钩藤叶具有显著的中枢抑制作用。

毛钩藤不同采收期总生物碱含量变化研究

目的通过测定不同采收期毛钩藤中总生物碱含量的变化,研究毛钩藤的最佳采收期。方法以p H=3.4的醋酸-醋酸钠缓冲溶液条件下用溴甲酚绿与生物碱显色后在410 nm波长处用紫外-可见分光光度计进行测定[1]。结果毛钩藤中的总生物碱在全年气温相对较高时段呈现含量相对较低,而在气温相对较低时段呈现含量相对较高现象。结论毛钩藤药材的采收期应选择在每年气温相对较低的时段采收,质量相对较好。

调压益心胶囊中钩藤的薄层层析鉴别

目的：用薄层层析和紫外分析方法对调压益心胶囊中所含的钩藤成份进行分析鉴别。方法：以中药钩藤对照药材作为对照品，以０．５％ＣＭＣ－Ｎａ、硅胶Ｇ铺板，在氯仿－乙酸乙酯－乙醇（４．５∶４∶１．５）；苯－氯仿－丙酮－氨水（３∶５∶２∶０．５）二个系统中分别展开后喷碘化铋钾、碘、碘化钾试剂显色。结果：在同一薄层色谱中，和药材对照品相同的位置上，供试品显清晰分离良好的斑点，阴性对照品无此斑点。结论：该方法具有定性检查的鉴别意义，为制定调压益心胶囊质量标准提供了实验方法和依据。

贵州地产钩藤根区与非根区土壤碳、氮、磷分布特征

目的:为探究钩藤产地土壤中碳、氮、磷含量的丰缺现状及主要限制因子,促进钩藤优质、高产的可持续发展。方法:对钩藤产地根区土壤与非根区土壤的碳、氮、磷的含量及相关性进行了研究,并与其周边林地与荒草地土壤碳、氮、磷进行对比研究。结果:钩藤产地土壤根区与非根区产地土壤性状存在不同差异,其中,钩藤基地土壤pH平均值为5.60,符合钩藤生长土壤的酸碱度;钩藤基地根区与非根区土壤有机质为四级;钩藤基地根区与非根区土壤全氮为二级;钩藤根区土壤碱解氮为二级,非根区土壤碱解氮为三级;钩藤基地根区与非根区土壤有效磷为四级;土壤pH值与土壤全氮之间呈极显著正相关性,全氮与土壤有机质、碱解氮、全磷呈极显著正相关性。结论:钩藤基地土壤有效态养分含量比较匮乏,在种植过程应加强人为管理和施肥,而土壤缺磷问题是钩藤种植基地土壤主要限制因素。

毛钩藤叶的生药学鉴定

目的建立毛钩藤叶的生药鉴定方法。方法采用生药性状鉴别、显微鉴别及薄层层析色谱法对毛钩藤叶进行生药学研究。结果毛钩藤叶含众多多细胞非腺毛,栅栏组织细胞2列,叶片薄璧细胞含草酸钙簇晶,于上表面的表皮下层细胞沿网脉成列分布,气孔直轴式,薄层层析显示与对照药材至少有2种相同的生物碱成分。结论本实验为毛钩藤叶的鉴定、质量标准的制定及进一步开发利用提供了科学依据。

钩藤超临界CO_2流体萃取物化学成分的GC-MS分析

采用超临界CO_2流体萃取法提取钩藤的化学成分,应用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对其分析鉴定,共确定了65个化学成分的结构,已鉴定成分相对含量之和占萃取物总量的57.34%,含量较高的成分有棕榈酸(6.34%)和甲氧基肉桂酸乙酯(5.96%)等;该超临界流体萃取物含有多种化学成分,对其进行的分析研究为进一步阐明钩藤的化学物质基础提供了相关依据。

钩藤炭疽病病原鉴定、生物学特性及防治药剂筛选

目的:明确钩藤炭疽病病原及其生物学特性,筛选有效防控药剂。方法:通过分离、纯化和回接试验,结合形态学和分子生物学对病原菌进行鉴定,并采用菌丝生长速率法测定7种杀菌剂对该病原菌的毒力。结果:引起钩藤炭疽病病原菌为博宁炭疽菌Colletotrichum boninense;适宜该菌株生长的温度为28℃,pH为6~7,适宜光照条件为24 h全光照,在蔗糖与硝酸钾条件下菌丝生长速度分别高于其他碳、氮源;7种不同杀菌剂中,75%肟菌·戊唑醇WG对博宁炭疽菌毒力较强,EC50达1.4925 mg/L,其次为250 g/L嘧菌酯SC,EC50为6.8886 mg/L。结论:钩藤炭疽病致病菌为博宁炭疽菌Colletotrichum boninense。

钩藤化学成分研究

目的:研究钩藤Uncaria rhynchophylla(Miq.)Miq.ex Havil茎枝中的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、聚酰胺色谱、反向硅胶柱色谱以及制备型高效液相等多种技术对钩藤茎枝的70%乙醇提取物进行分离纯化,综合运用多种波谱技术鉴定化合物的结构。结果:从钩藤茎枝的70%乙醇提取物中分离得到22个化合物,分别鉴定为:crotonine(1)、7-epi-javaniside(2)、烟酰胺(3)、吲哚-3-甲醛(4)、vincosamide-2′-O-β-D-xylopyranoside-11-O-β-D-glucopyranoside(5)、2′-O-[β-D-glucopyranosyl-(1→6)-glucopyranosyl]-11-hydroxyvincosamide(6)、isolariciresinol(7)、1,2-bis(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1,3-propanediol(8)、threo-3,3′-dimethoxy-4,8′-oxyneoligna-9,4′,7′,9′-tetraol-7(8)-ene(9)、leptolepisol C(10)、leptolepisol D(11)、(+)-lyoniresinol(12)、(-)-lyoniresinol(13)、lyoniresinol-3α-O-β-D-glucopyranoside(14)、(+)-表丁香树脂醇-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(15)、香草酸(16)、阿魏酸(17)、对羟基苯甲酸(18)、原儿茶醛(19)、山柰酚(20)、阿魏酸乙酯(21)、2-phenethyl-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside(22)。结论:其中,化合物1、7~15、22为首次从茜草科植物中分离得到,化合物2、3、5、6、21为首次从钩藤属植物中分离得到。

广西钩藤栽培技术

钩藤是我国常用的大宗中药材,有很高的药用价值高,在广西的有较大面积的栽培。文章从钩藤的植物形态特征、生长特性、栽培技术、病虫害防治及采收与加工等多个方面进行了系统论述,旨在为其生产提供技术指导,推动广西钩藤产业的发展。

一测多评法测定钩藤中7种生物碱类成分的含量

目的:建立测定钩藤中7种生物碱类成分含量的一测多评方法,探讨其可行性。方法:以钩藤碱为内参物,建立去氢钩藤碱、异钩藤碱、异去氢钩藤碱、缝籽嗪甲醚、去氢毛钩藤碱、毛钩藤碱6种生物碱类成分的相对校正因子;采用外标法验证一测多评法的可行性。结果:建立了一测多评法同时测定钩藤中7种成分的含量,去氢钩藤碱、异钩藤碱、异去氢钩藤碱、缝籽嗪甲醚、去氢毛钩藤碱、毛钩藤碱的相对校正因子分别为0.959、1.002、0.973、0.663、0.658和0.790。外标法与一测多评法定量结果无显著差异。结论:建立的一测多评法快速、准确、耐用性好,可用于该品种钩藤中7种生物碱类成分的定量分析,为建立简便、可靠的钩藤质量控制方法提供了基础。

安徽植物增补及地理新分布Ⅱ

本文第二次增补《安徽植物志》未记入的植物２２种５变种。其中２０种３变种为安徽地理新分布，３属（白屈菜属、离子芥属和石莲属）为安徽地理新分布属。本文所引用的植物标本，全部收藏于安微大学资源植物标本室。

复方钩藤口服液的制备及其对小鼠睡眠的改善

本研究采用正交试验优化复方钩藤口服液的制备工艺,并评价其改善小鼠睡眠的作用。结果表明,优化后的制备工艺为加12倍水提取药材3次,每次2.5 h,以70%乙醇醇沉24 h后浓缩即得。改善小鼠睡眠实验中,高(16 g/kg·BW)、中(8 g/kg·BW)、低(4 g/kg·BW)三个剂量组对小鼠均无直接睡眠作用;与空白对照组相比,中、高剂量组可显著延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间(P<0.05),而三个剂量组均能显著协同阈下剂量的戊巴比妥钠提高小鼠的入睡率(P<0.05),以及协同巴比妥钠显著缩短小鼠的睡眠潜伏期(P<0.05)。实验结果表明优化的复方钩藤口服液制备工艺稳定、可行,复方钩藤口服液具有改善小鼠睡眠的功能。

钩藤发根的高效诱导和最适培养基的筛选

目的:建立钩藤发根的高效诱导体系,筛选最适于钩藤发根生长和活性成分积累的培养基。方法:用发根农杆菌C58C1(pRiA4)浸染钩藤无菌的茎、嫩叶和老叶,探究C58C1对不同外植体的发根诱导率;用6种植物培养基(1/2MS、MS、N6、White、B5、WPM)培养钩藤发根,HPLC测定钩藤碱和异钩藤的含量。结果:农杆菌C58C1对3种外植体的诱导率都超过了80%,嫩叶的最高达到了91.8%;PCR检测表明农杆菌中rolB和rolC基因均已整合入钩藤发根的基因组;钩藤发根能合成钩藤碱和异钩藤碱2种活性成分,且钩藤碱占优势;B5培养基最适于钩藤发根的生长和2种生物碱的积累,钩藤碱与异钩藤碱产量最高,100 mL培养基分别可积累0.506 mg和0.160 mg;1/2MS是次优培养基。结论:该研究建立了钩藤发根的高效诱导体系和最适培养体系,为钩藤活性成分的大量生产和农杆菌介导的发根遗传转化体系研究奠定了技术基础。

基于网络药理学、分子对接与实验验证探究钩藤治疗热性惊厥的作用机制

目的通过网络药理学与分子对接技术探究钩藤Uncaria rhynchophylla治疗热性惊厥的作用机制,并进行实验验证。方法通过TCMSP与BATMAN-TCM数据库检索钩藤活性成分及相关作用靶点,用TCMSP、PubChem数据库和SwissADME平台对活性成分进行筛选;通过Gene Cards数据库和OMIM数据库提取热性惊厥疾病靶点,经Uniprot数据库进行蛋白-基因symbol转换;药物靶点与疾病靶点取交集绘制Venn图,通过STRING数据库绘制蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,使用Cytoscape 3.7.2软件构建“中药-活性成分-关键靶点-疾病”网络,采用DAVID v6.8在线分析平台对关键靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,利用Cytoscape 3.7.2软件将富集分析结果可视化并将分析所得关键化合物及靶点进行分子对接。通过免疫组化、Western blotting及脑片膜片钳技术对钩藤的作用机制进行验证。结果得到钩藤活性成分29个,活性成分对应靶点297个,活性成分靶点与疾病靶点取交集得到关键靶点81个。KEGG通路富集分析结果显示,钩藤治疗热性惊厥主要作用于神经元配体-受体相互作用、尼古丁成瘾、环磷酸腺苷信号通路。GO功能富集分析结果显示,尼古丁反应、质膜和细胞外配体门控离子通道活性显著性最大。免疫组化及Western blotting结果显示,钩藤显著抑制热性惊厥模型乳鼠脑组织中N-甲基-D-天冬氨酸受体2A(N-methyl-D-aspartic acid receptor 2A,NMDAR2A)、N-甲基-D-天冬氨酸受体2B(N-methyl-D-aspartic acid receptor 2B,NMDAR2B)的表达(P<0.05、0.01、0.001)。脑片膜片钳实验结果显示,钩藤对海马CA1区锥体神经元NMDA受体诱发兴奋性突触后电流(NMDA receptor evoked excitatory postsynaptic currents,e EPSCNMDA)具有抑制作用。结论通过网络药理学及分子对接技术发现了钩藤治疗热性惊厥的活性成分及作用靶点,通过免疫组化、Western blotting及膜片钳技术证实了钩藤对NMDAR的抑制作用,为进一步研究钩藤治疗热性惊厥的作用机制、药物研发等提供理论基础。

毛钩藤和无柄果钩藤的ITS序列分析研究

目的以核糖体转录间隔区(rDNA ITS)序列为分子标记,对钩藤属的2种常用中药材毛钩藤Uncariahirsute和无柄果钩藤U.sessilifructus进行遗传分析,阐明钩藤属内不同种间的分子系统发育关系。方法通过改良CTAB法对毛钩藤和无柄果钩藤进行总DNA提取,利用通用引物对rDNA ITS序列进行PCR扩增,RFLP分析和序列测定,用PAUP软件进行系统发育分析,构建最大简约树。结果获得毛钩藤和无柄果钩藤的限制性内切酶(MspⅠ&HaeⅢ)酶切图谱以及rDNA ITS区的完整序列,其序列长度均为718 bp。结论通过基于rDNAITS序列进行RFLP分析、序列测定和系统发育树构建的分子生物学方法,能够对钩藤属植物进行准确的分子鉴定,为钩藤属中药材的种类鉴定和种间的分类地位提供分子生物学依据。

华钩藤中黄酮类化学成分的分离和结构鉴定

目的对茜草科植物华钩藤[Uncaria sinensis(Oliv.)Havil.]的干燥带钩茎枝的黄酮类化学成分进行研究。方法用体积分数95%乙醇对华钩藤的干燥带钩茎枝进行提取,分别对乙酸乙酯和正丁醇部位采用各种柱色谱进行分离,通过NMR和MS等波谱学数据分析进行结构鉴定。结果分离鉴定了5个黄酮类化合物的结构:槲皮素(quercetin,1),山柰酚(kaempferol,2),蒙花苷(linarin,3),槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷(quercetin-3-O-β-D-galactopyranside,4),槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-半乳糖苷(quercetin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-galactopyranoside,5)。结论化合物1～5均为首次从该植物中分离得到。

中药减压提取沸点与饱和蒸气压关系影响因素研究

目的研究减压提取工艺条件下水和不同体积分数乙醇沸点、饱和蒸气压的相关性,并比较不同药材(穿心莲、红花、白芷、钩藤、黄芩、丹参、陈皮)的加入和不同粒径药材的加入对饱和蒸气压的影响。方法采用理论计算和仪器实验测定结合方法,获取不同沸点下和饱和蒸气压的理论值及实测值,并进行统计分析。结果得到饱和蒸气压与溶剂乙醇体积分数和沸点之间的回归方程P=76.467 1+0.035 2 T2+1.201 0TV-30.749 4V2-3.123 9T-14.966 7V;实验条件下,水和不同体积分数乙醇纯溶剂饱和蒸气压理论值较实测值小;加入药材后饱和蒸气压实测值比纯溶剂实测值增大;药材粉碎后,提取温度达到一定温度后饱和蒸气压会降低。结论药材的加入和粉碎对溶剂饱和蒸气压有影响,但其变化范围小。