裙带菜(Undaria pinnatifida)色素蛋白复合物的分离及光谱特性的初步研究

以褐藻裙带菜 (Undariapinnatifida)为实验材料 ,采用蔗糖密度梯度超速离心的方法纯化类囊体膜 ;以去污剂SDS为增溶剂 (SDS∶Chl =2 0∶1 ,4℃增溶 2 0min) ,再用蔗糖密度为60 %、5 0 %、40 %、30 %、2 0 %、1 5 %和 1 0 %的梯度离心法 ,从裙带菜中成功地分离出 5条含色素的蛋白质复合物带。离心结果显示在离心管顶部没有任何颜色 ,表明经过SDS增溶没有产生游离色素 ,纯化的类囊体膜和 5条色素条带进行吸收光谱分析 ,显示了属于叶绿素a(Chl a)的吸收峰 :41 8、436和 667到 672nm。叶绿素c(Chl c)的吸收峰 :61 5和 62 0nm。荧光发射最高峰位于 682到 690nm的区域。荧光激发光谱显示有Chl a和Chl c的激发峰 ,40 %层带所含有的色素复合物只有属于Chl a的吸收峰。分析结果表明 :1 0 %、1 5 %层带所含有的色素复合物是褐藻的捕光色素复合物 ;2 0 %、30 %层带所含有的色素复合物是浅绿色的PSⅡ复合体 (仍然含有捕光色素 ) ,40 %层带所含有的色素复合物是深绿色PSⅠ复合体 ,5 0

褐藻色素-蛋白质复合物PAGE分离研究

对裙带菜色素－蛋白质复合物ＰＡＧＥ分离过程中影响因素的研究表明，去污剂不同，分离得到的色素－蛋白质复合物的数目和种类有差异，在４种去污剂中，以ＤＭＧ和ＤＩＧ增溶的效果最好，游离色素较少．随着类囊体膜存放时间的延长，分离的色素－蛋白质复合物的数目和种类不变，但电泳后产生的游离色素增多．电泳分离结果与分离胶中Ａｃｒ的质量浓度有关，最适质量浓度为１００ｇ／Ｌ，可分离出８种色素－蛋白质复合物．

裙带菜多肽的制备及其抗氧化活性的研究

实验以裙带菜为原料制备裙带菜蛋白,通过单因素和正交试验确定了碱性蛋白酶为裙带菜抗氧化肽制备的最佳酶,最优酶解条件为:料液比4%、酶解温度55℃、酶解时间3.5h、加酶量7500U/g、pH 10.0,该条件下制备的裙带菜多肽的还原能力最强,700nm处的吸光值为0.411。对制备的裙带菜多肽进行超滤分级,从O_2^-·清除率、·OH清除率、DPPH自由基清除率、Fe^(2+)螯合率4个方面,探究了不同分子量裙带菜多肽的抗氧化能力。结果表明:裙带菜多肽对Fe^(2+)的螯合能力和DPPH自由基的清除能力较强,对O_2^-·和·OH的清除能力相对较弱,且总体呈现低分子量肽段的抗氧化活性较强,高分子量肽段的抗氧化活性较弱的趋势。

去污剂对裙带菜色素-蛋白质复合物电泳分离效果及其性质的影响

于 1 998年 3月在青岛市太平角采集裙带菜孢子体 ,通过破碎、离心制备类囊体膜。用去污剂SDS、DOC、DMG和DIG增溶裙带菜类囊体膜 ,经PAGE分离色素 -蛋白质复合物 ,并测定其光谱特性。结果表明 ,电泳分离效果与所用的去污剂的种类有关。去污剂不同 ,分离到的同一类型复合物的吸收光谱有差异 ,捕光色素 -蛋白质复合物的数目、种类及吸收光谱明显不同。电泳中产生的游离色素的多少也随去污剂种类而异。在 4种去污剂中 ,以DMG和DIG增溶的效果最好 ,经SDS PAGE分出 6种色素 -蛋白质复合物 ,游离色素较少。

褐藻裙带菜色素蛋白复合物的性质

用去污剂 DMG 增溶褐藻裙带菜(Undaria pinnatifida)的类囊体膜,通过 PAGE 分离色素-蛋白复合物并分析其性质,结果表明:CPⅠa和 CPⅠ都含有66 kDa 的多肽,低温荧光发射光谱中有715 nm 的长波荧光峰,激发光谱测定结果表明 CPⅠa是含有墨角藻黄素的叶绿素 a/c-蛋白复合物,CPⅠ是只含有叶绿素 a 的色素-蛋白复合物。CPa 含有51、37、34和20 kDa 四种多肽,低温荧光发射峰位于683 nm,激发光谱表明它含有叶绿素 a、c 和少量墨角藻黄素,是裙带菜的 PSⅠ复合物。其余5条为捕光色素-蛋白复合物,它们都是由20 kDa 的多肽组成,其中 LHC_1和 LHC_3有相似的光谱特性,是墨角藻黄素-叶绿素 a/c-蛋白复合物,LHC_2、LHC_4和 LHC_5的光谱特性相似,是叶绿素 a/c-蛋白复合物。

两种电泳系统分离裙带菜色素-蛋白复合物的比较

裙带菜的类囊体膜经过去污剂癸基-N-甲基匍萄糖胺增溶,采用SDS-PAGE分离技术,在Tris-Gly和Tris-硼酸两种电泳系统中分离其色素-蛋白质复合物,并比较其复合物的光谱特性。结果表明:采用Tris-Gly电泳分离系统从裙带菜中分离到8种色食-蛋白质复合物,分别是CP Ia、CPI、LHC_1、CPa、LHC_2、LHC_3、LHC_4和LHC_5。在Tris-硼酸电泳分离系统中共分离到5种色素-蛋白质复合物,分别是CPI、CPa、LHC_1、LHC_2、LHC_3。吸收光谱和荧光光谱的测定结果表明,两种电泳系统中分离的相对应条带的光谱特性基本相近。

不同去污剂对裙带菜和石莼色素蛋白复合物分离的影响

以褐藻裙带菜(Undaria pinnatifida)和绿藻石莼(Ulva pertusa)为实验材料,利用SDS,Dig,Triton X-100三种去污剂,分别与叶绿素按不同比例增溶类囊体膜,采用蔗糖密度梯度超速离心的方法分离色素蛋白复合物,蔗糖密度梯度为60%,50%,40%,30%,20%,15%和10%。实验结果表明:当SDS与叶绿素质量比为20∶1时,能够从裙带菜类囊体膜中分离得到5条含蛋白质复合物带。对于石莼类囊体膜的增溶,当SDS与叶绿素的质量比为10∶1,Triton与叶绿素质量为20∶1时,同样能够分离得到5条含蛋白质复合物带。褐藻和绿藻色素蛋白复合物对去污剂的敏感程度有很大差别。

裙带菜蛋白的提取工艺研究

以裙带菜为原料,采用碱提法对裙带菜蛋白的提取工艺进行研究。通过控制单因素如料液比、p H、浸提温度、浸提时间,寻找合适的试验条件,并在单因素基础上进行正交试验,分析不同因素对裙带菜蛋白提取的影响,确定最佳提取工艺条件为:料液比1∶20(g/m L),浸提温度50℃,浸提时间3.5 h,p H 9。提取率可达84.85%。