猫尾射的组织培养

以猫尾射无菌播种苗(去除根部)为外殖体,对其愈伤组织诱导和分化及其不定芽增殖进行研究。结果表明,外殖体在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基上,愈伤组织诱导和分化的效果较好,愈伤诱导率为82.0%,分化率为74.5%;经不定芽增殖培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L培养,不定芽增殖倍数为8.2,平均株高为4.7cm。组培苗在MS+IBA0.5mg/L培养基上生根率达90%。生根苗移栽成活率达84%。

虎尾轮根化学成分及其体外抗肾间质纤维化活性

目的研究虎尾轮根Uraria crinita(L.)Desv.ex DC的化学成分及其体外抗肾间质纤维化活性。方法虎尾轮根乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH⁃20进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用MTT法进行体外抗肾间质纤维化活性筛选。结果从中分离得到16个化合物,分别鉴定为divaricataester A(1)、pyrrolezanthine⁃6⁃ethyl ether(2)、5,7⁃二羟基⁃2′⁃甲氧基⁃3′,4′⁃亚甲基二氧异黄酮(3)、dehydroespeleton(4)、pleuchiol(5)、1,6⁃desoxypipoxide(6)、p⁃coumaroyl⁃β⁃phenethylamine(7)、isolugrandoside(8)、紫苜蓿烷(9)、二氢木豆异黄酮(10)、8⁃O⁃4⁃dehydrodiferulic acid(11)、8,9⁃dehydropellitorine(12)、6⁃O⁃(E)⁃肉桂酰基⁃α/β⁃D⁃吡喃葡萄糖苷(13)、trans⁃3′,4′⁃diacetylkhellacton(14)、3⁃甲氧基⁃4⁃O⁃β⁃D⁃吡喃葡萄糖基苯甲酸甲酯(15)、euparone(16)。化合物5、8对胶原纤维Ⅳ、Ⅲ型前胶原蛋白、层粘连蛋白;化合物11、14对胶原纤维Ⅳ、Ⅲ型前胶原蛋白;化合物2、7对Ⅲ型前胶原蛋白;化合物4、12对胶原纤维Ⅳ、层粘连蛋白均具有体外抑制作用。结论除化合物3外,所有化合物均为首次从该植物中分离得到,化合物2、4~5、7~8、11~12、14对肾间质纤维化指标有不同程度的抑制作用。

虎尾轮转录组测序及生物信息学分析

虎尾轮(Uraria crinita(L.)Desv.ex DC)为闽南民间常用保肝护肝中草药,是一种极有使用、研究、开发价值的天然药用植物资源,但对其分子机制研究严重滞后,在一定程度上限制了该民间资源的利用和开发。本实验通过Illumina Hiseq对虎尾轮的根和茎转录组测序,采用Trinity软件完成虎尾轮高质量数据转录本拼装,而后进行生物信息学分析。研究结果表明:总共获得的高质量unigene有255407896个,N50的长度是992 bp,其平均长度是559.07 bp;将虎尾轮的122207条unigene与NR、GO、KEGG等7个重要的数据库系统进行比对,获得了虎尾轮基因功能的注释信息,结果表明,有75530条unigene至少注释到1个数据库,占61.8%;虎尾轮的根对茎的差异表达unigene有19714个,其中有9038个上调表达,10676个下调表达。在对虎尾轮根与茎差异基因分析中,利用KEGG数据库代谢途径对132个显著性KO途径分析,发现共挖掘出114个unigene与虎尾轮黄酮类生物合成途径密切相关。提取虎尾轮转录组中与黄酮类生物合成密切相关基因的TPM值,60.71%的基因在根中的TPM值高于茎中的TPM植,根中的表达远高于茎的表达,符合民间习用其根的用法。以上结果为今后进一步挖掘虎尾轮药用活性成分的功能基因、生物合成调控、品质改良等提供参考依据。