血清胱抑素C、尿液肾损伤分子-1评估妊娠期高血压疾病患者肾小管间质损伤程度的意义

目的研究检测血清胱抑素C(CysC)、尿液肾损伤分子-1(KIM-1)水平在评估妊娠期高血压疾病(HDP)患者肾小管间质损伤程度的意义。方法选取2021年1月至2021年12月在常州市妇幼保健院就诊的74例有肾小管间质损伤的HDP患者为肾损伤组,86例无肾小管间质损伤的HDP患者为非肾损伤组,另选取常规体检孕妇80例作为健康对照组。于孕22~26周比较三组的CysC水平、KIM-1水平。采用Cox回归分析肾小管间质损伤程度的影响因素,采用受试者工作特征曲线(ROC)评估CysC、KIM-1指标的预测价值。结果肾损伤组CysC水平、KIM-1水平高于非肾损伤组和健康对照组,非肾损伤组高于健康对照组(F值分别为84.712、516.732,P<0.05);肾损伤组内重度29例,轻度45例;重度患者CysC水平、KIM-1水平高于轻度患者(t值分别为5.301、5.706,P<0.05);经Cox回归分析显示CysC水平、KIM-1水平是肾小管间质损伤程度的独立影响因素,其OR值及95%CI分别为7.412(3.547~11.236)、7.215(2.842~13.985),P<0.05;经ROC分析显示,CysC、KIM-1评估HDP患者肾小管间质损伤程度的截断值分别为1.57mg/L、6.08ng/mL,ROC曲线下面积(AUC)分别为0.844、0.783,且两指标均具有较好的灵敏度和特异度。结论血清CysC、尿液KIM-1在诊断HDP患者的肾小管间质损伤程度中有着重要价值,能为临床评估患者病情和制定后续治疗方案提供参考依据。

肾损伤分子1介导游离轻链内吞致近端肾小管上皮细胞损伤

目的:探究近端肾小管上皮细胞中肾损伤分子1(KIM-1)介导免疫球蛋白轻链(FLCs)内吞对肾小管损伤的影响及机制。方法:(1)选取4例多发性骨髓瘤肾损伤患者尿标本,采用离子交换层析法纯化FLCs;(2)体外实验构建纯化的FLCs诱导人肾脏近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞)损伤模型,继续给予FLCs刺激,并予KIM-1抑制剂TW-37干预;体内实验向小鼠腹腔注射FLCs,14 d后建立FLCs致小鼠肾小管损伤的动物模型,并予TW-37干预。Western Blot检测HK-2细胞和小鼠肾组织KIM-1、megalin、核因子E2相关因子2(Nrf2)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及转化生长因子β(TGF-β)等水平,ELISA法检测小鼠尿白蛋白/肌酐比值、尿液KIM-1的含量,天狼星红染观察小鼠肾间质纤维化程度等。结果:(1)体外实验中FLCs刺激HK-2细胞诱导KIM-1表达增加,并与FLCs存在共定位,TW-37处理后可减少HK-2细胞中FLCs内吞,减轻FLCs刺激所致的肾小管细胞溶酶体的核周聚集,降低氧化应激及纤维化指标表达。(2)动物模型结果显示,TW-37干预可缓解FLCs所致的肾小管损伤,包括尿KIM-1水平及肾组织KIM-1表达下降,肾组织氧化应激和纤维化指标表达下降,肾组织胶原沉积减轻。结论:KIM-1可介导肾近端小管细胞内吞FLCs,抑制KIM-1有助于缓解FLCs造成的肾损伤。

UACR联合血清KIM-1、NGAL对冠心病病人术后并发造影剂肾病的预测分析

目的:探讨尿微量白蛋白/尿肌酐比值水平(urine micro-albumin/urinary creatinine ratio,UACR)联合血清肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1,KIM-1)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)对冠心病病人术后并发造影剂肾病(contrast-induced nephropathy,CIN)的评估价值。方法:选取162例冠心病病人,均行冠状动脉造影、经皮冠状动脉介入术,根据术后是否发生CIN分为CIN组(22例)、非CIN组(140例)。比较2组病人临床基线资料以及术后24 h的UACR、血清KIM-1、NGAL水平,采用多因素logistic回归分析CIN发生的危险因素,采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析UACR、KIM-1、NGAL预测CIN的诊断价值。结果:CIN病人术后24 h的NGAL、血清KIM-1、UACR水平以及术前尿肌酐均高于非CIN组,而术前肾小球滤过率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05~P<0.01)。多因素logistic回归分析显示,UACR、KIM-1、NGAL升高均是CIN发生的危险因素(P<0.01)。ROC曲线分析显示,NGAL、KIM-1、UACR以及联合诊断预测CIN的曲线下面积分别为0.826、0.801、0.790、0.886,联合诊断的曲线下面积明显高于单独诊断,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:UACR以及血清KIM-1、NGAL是冠心病病人术后发生CIN的独立危险因素,发生CIN的高风险病人各指标均处于较高水平,三种指标联合检测可提高CIN的预测价值。

连续性肾脏替代治疗对脓毒症AKI患者尿肾损伤分子-1表达的影响及其机制初步探讨

目的 通过监测连续性肾脏替代治疗（CRRT）对脓毒症相关性急性肾损伤（AKI）患者尿肾损伤分子-1（uKim-1）表达水平的影响,初步探讨CRRT疗效评价的可靠指标及其机制.方法 ICU确诊为脓毒症AKI患者38例,分为标准抗脓毒症治疗组（A组,n=17）和CRRT组（B组,n=21）.所有脓毒症AKI患者均予以标准规范的药物抗脓毒症治疗（2008 SSC标准）,B组在标准抗脓毒症治疗的基础上予以CRRT 24 h.监测两组患者治疗0、12、24、48 h时间点血肌酐（sCr）、血Kim-1（sKim-1）、uKim-1水平,同时监测B组CRRT废液Kim-1的表达水平,记录28 d患者病死率.从本院体检人群中选取20例体检健康者作为健康对照组（C组,n=20）.结果 A组uKim-1水平在12、24h较0h显著下降（P＜0.05）,48 h与0h比较差异无统计学意义（P＞0.05）;B组uKim-1在CRRT后12、24、48 h较0h显著下降（P＜0.05）,但A、B两组uKim-1同期表达水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）;B组超滤液中未检测到Kim-1表达;B组28 d病死率显著低于A组（22.7％ vs 61.2％,P＜0.05）;A、B两组sKim-1水平在治疗前后差异无统计学意义（P＞0.05）,但B组sKim-1水平在治疗后12、24、48 h显著低于A组同期水平（P＜0.05）.结论 CRRT能降低uKim-1的表达水平,但对sKim-1水平影响不显著;CRRT废液中未能检测出Kim-1的表达,uKim-1能更好地反映CRRT对肾功能影响,可作为CRRT疗效判断的可靠指标.

尿视黄醇结合蛋白、肾损伤分子-1及血胱抑素C在早期糖尿病肾病中的变化及其诊断价值

目的观察尿液中视黄醇结合蛋白(RBP)、尿肾损伤分子-1(KIM-1)及血胱抑素C(CysC)在糖尿病肾病(DN)中的变化及诊断价值。方法选取2014年6月—2016年6月沈阳军区总医院内分泌科收治的DM患者124例作为研究对象,根据24 h尿微量白蛋白排泄率(UAER)分为正常白蛋白尿(NA)组35例,微量白蛋白尿(MA)组45例和临床白蛋白尿(CP)组44例,另选取35例健康体检者为健康对照组(CON组),记录各组临床资料,测定各组生化指标,应用ELISA法测定各组尿液RBP、KIM-1及血CysC水平。结果 NA组、MA组、CP组BMI、腰围(WC)、空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 hPG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛抵抗指数(HOMA-IR)、血肌酐(SCr)、尿蛋白排泄率(UAER)、尿素氮(BUN)、RBP、KIM-1、CysC水平显著高于CON组(F=17.669、15.734、18.639、19.835、17.885、25.693、129.72、444.15、128.20、168.90、75.382、47.856,P均<0.01)。与NA组比,MA组、CP组BMI、WC、FPG、2hPG、HOMA-IR、SCr、UAER、Cys C、BUN、RBP、KIM-1水平较高(P均<0.01),而CP组血清SCr、CysC及尿UAER、BUN、RBP、KIM-1水平高于MA组(P<0.01)。受试者特异性曲线(ROC)分析,经ROC分析可知,尿RBP诊断DN的ROC曲线下面积(AUC)为0.712,95%CI(0.612~0.845);尿KIM-1诊断DN的AUC为0.682,95%CI(0.608~0.782);血CysC诊断DN的AUC为0.652,95%CI(0.526~0.712)。结论尿RBP、KIM-1及血CysC水平与早期DN发生有密切的关系,可作为DN早期诊断指标。

肾小管缺氧损伤中肾损伤分子-1表达信号通路的调节

目的:观察肾损伤分子-1(KIM-1)及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在人近端小管上皮细胞(HK-2)缺氧复氧过程中的表达及相互关系,探讨HIF-1α对KIM-1表达的调控作用及机制。方法:收集缺氧、缺氧复氧后不同时段培养的HK-2细胞,用RT-PCR和Western-Blot检测KIM-1及HIF-1α表达,同时观察HIF激动剂(CoCl2)及抑制剂(雷帕霉素)对KIM-1表达的影响;应用凝胶迁移实验(EMSA)和染色质免疫沉淀实验(ChIP)验证KIM-1启动子区和HIF-1结合情况。结果:HK-2细胞缺氧复氧过程中KIM-1和HIF-1在mRNA水平和蛋白水平表达相关,HIF-1激动剂CoCl2或抑制剂雷帕霉素可上调或下调KIM-1表达,并呈剂量依赖性;EMSA表明HIF-1α可以和KIM-1启动子区HRE结合位点为模板所设计的双链寡核苷酸探针特异性结合,而且这种特异性结合受HIF-1α调节,同时ChIP实验证实了KIM-1启动子区和HIF-1α的结合。结论:KIM-1在近端肾小管上皮细胞缺氧损伤时的表达受HIF-1α调控,KIM-1可能作为HIF-1的下游分子参与肾损伤及修复过程。

NRK-52E缺血再灌注损伤时Kim-1、NO变化及虫草对其的干预作用

目的通过抗霉素A(Antimycin A,AA)刺激大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)模拟体外缺血再灌注损伤过程,观察缺血再灌注损伤时NRK-52E中肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1,Kim-1)及NO表达的变化及冬虫夏草对其的干预作用。方法将体外培养的NRK-52E分为对照组、模型组和虫草组。虫草组予含40 mg/L虫草原液的培基预处理。培养72 h后NRK-52E去除培基,予10-10 mol/L抗霉素A(AA)刺激1 h,模拟体外缺血过程,1 h后再加入培基,模拟体外再灌注损伤过程。分别在AA刺激前,AA刺激后1 h,加入培基再灌注10 min,30 min,60 min,120 min共6个时间点终止实验。用流式细胞仪以Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;分别用硝酸还原酶法和ELISA检测细胞上清液Kim-1与NO浓度;用RT-PCR法观察Kim-1 mRNA表达。结果 NRK-52E细胞经AA刺激后,细胞凋亡率显著增高,同时Kim-1表达上调;缺血60 min较缺血前Kim-1蛋白水平增加了3.1倍,再灌注10 min增加了3.6倍(P<0.05)。Kim-1 mRNA也呈现类似结果。NO浓度随灌注时间延长发生类似变化。与模型组比较,虫草组对缺血再灌注损伤显示出较明显的耐受性,主要表现为在细胞凋亡率降低的同时Kim-1表达及NO浓度下降(P<0.05)。结论抗霉素A能诱导NRK-52E细胞出现以凋亡为主的缺血再灌注损伤状态,伴随Kim-1 mRNA的早期高表达及NO浓度升高;冬虫夏草可通过下调Kim-1的表达及降低NO浓度,抑制细胞凋亡,发挥肾保护作用。

血清Hcy、ET-1联合尿U-m Alb/Cr比值对子痫前期患者早期肾损伤的诊断价值

目的探究子痫前期早期肾损伤患者血清同型半胱氨酸(Hcy)、内皮素-1(ET-1)及尿微量白蛋白/肌酐(UmAlb/Cr)的诊断价值。方法选取2018年3月~2019年5月在河北省唐山市妇幼保健院收治的95例子痫前期患者进行研究,依据肾小球滤过率检测结果分为肾功能异常组(42例)、肾功能正常组(53例),另选取同期产检的60名健康产妇作为对照组,检测血清Hcy、ET-1、U-mAlb及尿液中Cr水平。结果与对照组比较,肾功能异常组与肾功能正常组血清Hcy、ET-1及尿U-mAlb/Cr水平均升高(P <0.05)。与肾功能正常组比较,肾功能异常组Hcy、ET-1及尿U-mAlb/Cr水平均升高(P <0.05)。肾小球滤过率、Hcy、ET-1、U-mAlb/Cr均为子痫前期患者早期肾损伤的独立危险因素。Hcy、ET-1、U-mAlb/Cr及三项联合诊断早期肾损伤ROC的AUC分别为0.815、0.774、0.832、0.892,灵敏度分别为75.78%、73.68%、78.94%、88.42%,特异度分别为78.94%、75.78%、85.26%、81.05%。结论子痫前期患者早期肾损伤后血清Hcy、ET-1水平及U-mAlb/Cr均升高,且均具有一定诊断价值。

妊娠期高血压疾病早期肾损伤患者检测血清胱抑素C及尿液肾损伤分子-1的临床意义

目的探讨妊娠期高血压疾病(HDCP)早期肾损伤患者检测血清胱抑素C(SCys C)及尿液肾损伤分子-1(UKIM-1)的临床意义。方法选取2017年10月-2018年7月江西省妇幼保健院收治的95例HDCP并发早期肾损伤患者(肾损伤组)、81例HDCP未并发肾损伤患者(非肾损伤组)以及120例正常妊娠孕妇(对照组)作为研究对象,检测所有研究对象SCys C、UKIM-1等指标。结果3组研究对象SCys C、UKIM-1相比差异有统计学意义(P<0.01),肾损伤组SCys C、UKIM-1显著高于非肾损伤组和对照组(P<0.01),非肾损伤组与对照组之间SCys C、UKIM-1相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论SCys C、UKIM-1可以用于HDCP患者早期肾损伤的筛查。

NGAL和KIM-1检测在儿童脓毒症合并急性肾损伤中的诊断价值

目的探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)和肾损伤因子1(kidney injury molecule 1,KIM-1)的检测在脓毒症合并急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)患儿诊疗过程中的临床应用价值。方法采用病例对照研究,按照纳入标准选取2019年1—12月入住复旦大学附属儿科医院PICU的脓毒症患儿82例,按照排除标准去除13例。按入院后是否发生AKI分为脓毒症AKI组28例和脓毒症非AKI组41例。脓毒症AKI组患儿根据治疗过程中是否进行连续性肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)分为脓毒症AKI-CRRT组和脓毒症AKI-非CRRT组。检测脓毒症AKI和非AKI患儿住院后0 h、24 h和72 h的血NGAL、KIM-1、肌酐、胱抑素C(cystatin C,CysC)和视黄醇结合蛋白(retinol-binding protein,RBP)水平,同时监测24 h和72 h的尿量。用非参数检验统计方法分析数据,通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析NGAL、KIM-1、肌酐、尿量、CysC、RBP对脓毒症并发AKI的诊断价值。结果脓毒症AKI组患儿的NGAL、KIM-1、肌酐、CysC水平在0 h、24 h、72 h时均显著高于脓毒症非AKI组(P<0.05)。脓毒症AKI-CRRT组和非CRRT组各时点NGAL、肌酐的水平均高于脓毒症非AKI组(P<0.05)。KIM-1、CysC、RBP、尿量在24 h和72 h时,脓毒症AKI患儿较非AKI患儿有明显差异(P<0.05)。ROC曲线比较显示:脓毒症AKICRRT组和非CRRT组0 h时NGAL的AUC面积均最大(分别为0.907和0.951)、灵敏度最高(分别为92%和100%)。脓毒症AKI-CRTT组患儿的肌酐水平在72 h时呈现下降,并且较24 h时肌酐的AUC面积减小、敏感度和特异性均降低(P<0.05);NGAL和KIM-1水平在24 h显著升高后,至72 h仍维持在较高水平,且NGAL在3个时点、KIM-1在后2个时点均维持良好的诊断效能。结论NGAL灵敏度较高,可在早期提示AKI的发生。在血液净化的治疗过程中NGAL、KIM-1受干扰因素较少,可为AKI患儿肾功能真实水平的评估提供参考。

NGAL、KIM-1和IL-18三者联合检测在儿童急性肾损伤早期诊断中的意义

目的探讨NGAL、KIM-1和IL-18三者联合检测在儿童急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）早期诊断中的意义。方法选取2011年6月~2013年6月在我院PICU的100例危重症患儿为研究对象,分为AKI组（40例）与非AKI组（n=60）。收集两组患儿晨起尿液6~8 m L,用酶联免疫吸附法检测尿液中NGAL、IL-18和KIM-1水平,并将三个指标与血清肌酐进行比较,同时绘制ROC曲线,评价尿NGAL、IL-18和KIM-1在AKI早期诊断中价值。结果 AKI组与非AKI组在年龄、性别、收缩压、舒张压、尿比重上无明显差异（P〉0.05）;AKI组与非AKI组比较,Scr、NGAL、KIM-1以及IL-18水平,均显著提高,差异有统计学意义（P〈0.05）;AKI组NGAL、KIM-1、IL-18水平在Scr没有升高之前已经升高,组间差异有统计学意义（P〈0.05）;AKI组患者NGAL在诊断当天曲线下面积0.961（95%CI：0.876~1.000）均好于IL-18与KIM-1 ROC曲线下面积,0.948（95%CI：0.891~1.000）与0.951（95%CI：0.873~1.000）。结论尿中NGAL、KIM-1、IL-18水平在Scr没有升高之前已经显著升高,这为提早诊断儿童急性肾损伤疾病提供了依据,具有重要的临床意义。

尿NGAL、KIM-1和IL-18联合检测对儿童急性肾损伤早期诊断的价值

目的探讨尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾损伤分子-1(KIM-1)及白细胞介素-18(IL-18)联合检测在儿童急性肾损伤(AKI)早期诊断中的价值。方法选择2015年1月至2016年8月期间石家庄市第一医院儿科诊治的32例AKI患儿为研究对象,检测不同时间及不同分期AKI患儿尿NGAL、KIM-1、IL-18和血肌酐的变化。结果 AKI患儿尿NGAL、KIM-1、IL-18在诊断前3 d分别为(1.23±0.28)μg/m L、(37.58±5.88)ng/m L、(30.35±6.21)ng/m L,在诊断前2 d分别为(1.77±0.39)μg/m L、(43.29±6.32)ng/m L、(36.49±9.35)ng/m L,及诊断前1 d水平(2.28±0.71)μg/m L、(60.38±12.83)ng/m L、(58.32±20.12)ng/m L,均明显依次升高,差异均有统计学意义(P<0.05);但是血肌酐在诊断前1 d与诊断前2 d、3 d比较差异均无统计学意义(P>0.05);尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平在AKI 1期为(2.68±0.48)μg/m L、(69.23±5.31)ng/m L、(65.84±6.43)ng/m L,2期为(3.19±0.41)μg/m L、(60.38±12.83)ng/m L、(73.29±6.68)ng/m L,3期为(3.81±0.42)μg/m L、(89.67±6.22)ng/m L、(81.31±7.42)ng/m L,均依次升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论尿NGAL、KIM-1、IL-18在儿童AKI早期即可明显升高,三者联合检测对早期诊断儿童AKI具有重要意义。

肾损伤分子-1对肝硬化继发肾功能损害早期预测的价值

目的探讨肾损伤分子-1(KIM-1)在肝硬化继发肾功能损害早期预测的价值。方法选取肝硬化患者104例,其中合并肝肾综合征(HRS)32例。所有患者按肝功能Child-Pugh积分分级,A级22例,B级32例,C级50例。另选取健康体检者20例作为对照组。测定外周血KIM-1水平,进行KIM-1诊断HRS的ROC曲线分析,并将KIM-1与估算肾小球滤过率(eGRF)、胱抑素-C(Cys-C)、血肌酐(Scr)进行相关性分析。结果肝硬化患者随着Child-Pugh分级的上升,eGRF逐渐下降,血KIM-1的水平逐渐升高(P<0.05)。肝硬化并HRS患者血KIM-1水平明显高于单纯肝硬化患者(P<0.01)。KIM-1诊断HRS的ROC曲线下面积为0.850(P<0.01)。KIM-1与Cys-C、Scr呈正相关(r分别为0.178、0.129,P<0.01),与eGFR呈负相关(r=-0.396,P<0.01)。结论血KIM-1有助于肝硬化继发肾功能损害的早期监测,对预防HRS的发生、发展具有重要的临床价值。

肾损伤分子1在低渗造影剂肾病模型大鼠肾组织的表达及缺氧诱导因子1α对其的影响

目的:观察低渗造影剂碘必乐诱导的造影剂肾病大鼠肾小管上皮细胞损伤情况和肾损伤分子1(kidney injury molecule-1,KIM-1)的表达以及缺氧诱导因子1α上调对其的影响。方法:清洁级雄性SD大鼠45只,分为对照组(CON组,n=15),造影剂肾病模型组(CM组,n=15)及氯化钴预处理组(Cocl2+CM组,n=15)。为建立造影剂肾病大鼠模型,应用碘必乐(3gI/kg)前,依次尾静脉注射吲哚美辛(INDO,10mg/kg)和左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME,10mg/kg)。分别于造模后第2h、12h、24h、48h、72h处死动物,并检测血肌酐值,HE染色评估肾小管损伤程度,免疫组化、Western Blot及Real time-PCR方法测定肾组织中KIM-1蛋白及mRNA表达水平。结果:(1)与对照组相比,CM组造模后第2h、12h血清肌酐值无显著性差异(P>0.05),24h、48h、72h均显著升高(P值均<0.01),显示造模成功,Cocl2+CM组较同一时间点CM组血清肌酐值显著下降(P<0.01);(2)HE染色可见CM组24h、48h、72h均出现不同程度的急性肾小管损伤,伴有上皮细胞刷状缘脱落、空泡变性、细胞脱落及再生,部分肾小管结构破坏,髓质区病变较皮质病变更严重;Cocl2+CM组较同一时间点的CM组肾损伤评分显著降低(P<0.05);(3)免疫组化、Western Blot和Real time-PCR结果表明,自造模后2h始,CM组较阴性对照组大鼠肾组织KIM-1蛋白及mRNA表达水平均显著增加(P<0.05),而Cocl2+CM组较同一时间点的CM组KIM-1表达水平显著减少(P<0.05)。结论:低渗造影剂碘必乐诱导的急性肾小管上皮细胞损伤大鼠肾组织KIM-1表达水平显著增加,较血肌酐更早的反映肾损伤,上调肾组织HIF-1α表达可以减轻肾小管上皮细胞损伤,KIM-1表达亦相应降低。

雷公藤内酯醇对肾缺血再灌注大鼠凋亡诱导因子及细胞间黏附分子-1表达的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇(TP)对肾缺血再灌注(I/R)大鼠的肾保护作用,及对凋亡诱导因子、细胞间黏附分子-1的影响。方法:48只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、I/R模型组(I/R组)、TP高、中、低剂量干预组、泼尼松对照组(Pred组)。采用夹闭双侧肾动脉30 min,再灌注18 h的方法制作肾I/R大鼠模型。检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),原位末端标记法检测肾小管上皮细胞凋亡,观察肾病理改变,计算肾小管损伤(ATN)评分。Western印迹和RT-PCR分别检测AIF、ICAM-1蛋白和基因表达。结果:(1)I/R组血Scr、BUN、ATN评分及细胞凋亡指数较假手术组显著升高(P<0.01);与I/R组比较,TP各组以上指标均改善(P<0.01),pred组血Scr、BUN、ATN评分改善(P<0.01),但细胞凋亡指数无明显变化(P>0.05)。(2)I/R组大鼠肾组织AIF、ICAM-1较假手术组高表达(P<0.01);与I/R组比较,TP各组二者表达均减弱(P<0.01),pred组ICAM-1表达减弱(P<0.01)但AIF表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TP对肾I/R大鼠具有肾保护作用,其部分机制可能与抑制肾小管上皮细胞过度凋亡及AIF、ICAM-1表达有关。

高糖环境下HIF1α-KIM1信号通路对糖尿病肾病肾间质纤维化的影响

目的:探讨高糖环境下缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF1α)-肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1,KIM1)信号通路对糖尿病肾病肾间质纤维化的影响。方法:体外培养人肾小管上皮细胞,分为正常对照组、高糖组、转染对照组、HIF1α转染组和KIM1转染组:(1)正常对照组(5.6 mmol/L葡萄糖);(2)高糖组(30 mmol/L葡萄糖);(3)转染对照组(30 mmol/L葡萄糖+乱序的非特异性siRNA);(4)HIF1α转染组(30 mmol/L葡萄糖+HIF1αsiRNA);(5)KIM1转染组(30 mmol/L葡萄糖+KIM1siRNA)。分析HIF1α、KIM1、纤维连接蛋白(fiber link protein,FN)和Ⅰ型胶原蛋白(Ⅰtype COLlagen,COL-Ⅰ)的表达。结果:高糖组的的HIF1α、KIM1、FN、COL-Ⅰ的蛋白相对表达量和mRNA相对表达量明显高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。HIF1α转染组的HIF1α、KIM1、FN、COL-Ⅰ的蛋白相对表达量和mRNA相对表达量明显低于转染对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。KIM1转染组的KIM1、FN、COL-Ⅰ的蛋白相对表达量和mRNA相对表达量明显低于转染对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。KIM1转染组的HIF1α的蛋白相对表达量和mRNA相对表达量与转染对照组比较并无明显变化。结论:高糖环境下HIF1α-KIM1信号通路能够通过调控FN、COL-Ⅰ等相关蛋白的表达影响糖尿病肾病肾间质纤维化的发生和发展。

接受连续性肾脏替代治疗的老年急性肾损伤患者NGAL、KIM-1检测的意义

目的探讨接受连续性肾脏替代(CRRT)治疗的老年急性肾损伤(AKI)患者血清的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)及肾损伤分子-1(KIM-1)的表达水平及其临床意义。方法分析56例老年AKI患者在接受CRRT治疗前血清NGAL、KIM-1的水平,根据患者转归不同分为存活组(30例)和死亡组(26例),比较两组NGAL、KIM-1水平的差异,并进行受试者工作特征(ROC)曲线分析。结果死亡组血清NGAL、KIM-1水平明显高于存活组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。血清NGAL、KIM-1预测接受CRRT治疗的老年AKI患者转归的曲线下面积分别为0.885、0.725。结论血清NGAL、KIM-1可能成为预测老年AKI患者行CRRT治疗时机及转归的生物学标志物。

尿NGAL、KIM-1、UACR在原发性高血压早期心血管损伤中的临床意义

目的 通过分析尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾损伤分子1(KIM-1)、尿白蛋白肌酐比(UACR)与高血压患者心脏、颈动脉血管病变相关指标的相关性,探讨尿NGAL、KIM-1水平及UACR在早期高血压脏器损伤中的意义。方法以原发性高血压患者为研究对象,根据UACR将其分为正常蛋白尿组(NA)、微量蛋白尿组(MA)、临床蛋白尿组(CA),检测各组的生化指标、血压和尿NGAL、KIM-1水平,超声检查心脏和血管。结果①CA组的舒张末期左室后壁厚度(LVPWT)、舒张末期室间隔厚度(IVST)均明显大于MA组和NA组(均 P <0.05);CA组、MA组左室重量指数(LVMI)高于NA组(均 P <0.05);CA组右室内径(RV)及左室肥厚(LVH)、颈动脉斑块形成检出比例均显著高于NA组(均 P <0.05)。②MA组尿NGAL/Cr明显高于NA组( P <0.01),尿KIM-1/Cr高于NA组( P <0.05);CA组NGAL/Cr、KIM-1/Cr均明显高于MA组(均 P <0.01)。③相关性分析:尿NGAL/Cr在NA组与LVPWT、IVST、LVMI、肺动脉内径(PA)呈正相关,在MA组与LVMI呈正相关,在CA组与舒张期末左室内径(LVIDd)、LVPWT、IVST、LVMI、升主动脉内径(AO)、PA呈正相关;尿KIM-1在NA组与各心脏指标均无相关性,在MA组与LVMI呈正相关,在CA组与LVPWT、IVST、LVMI、AO、RV呈正相关;UACR在NA组与LVIDd呈正相关,在MA组与LVMI呈正相关,在CA组与LVIDd、IVST、LVMI、RV呈正相关;④二元Logistic回归分析:尿NGAL/Cr是左心室肥厚和颈动脉斑块形成的独立危险因素。结论尿NGAL相比UACR和KIM-1,在预测心血管健康方面有更大的优势,能早期评估高血压心脏损伤,是左心室肥厚和颈动脉斑块形成的独立危险因素。

连续性肾脏替代治疗联合中药灌肠对急性肾损伤患者尿KIM-1、NGAL水平的影响

目的:探讨连续性肾脏替代治疗(CRRT)联合中药灌肠对重症急性肾损伤患者尿肾损伤分子-1(KIM-1)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平和预后的影响。方法:回顾性分析89例重症急性肾损伤患者临床资料,依据不同治疗方式分为对照组43例和研究组46例,对照组采用CRRT治疗,研究组采用CRRT联合中药灌肠治疗。比较两组尿量恢复时间、重症医学科(ICU)住院时间、治疗前后肾功能、尿KIM-1、NGAL水平,序贯器官衰竭估计评分(SOFA)、急性生理与慢性健康评分表(APACHEⅡ)评分和预后情况。结果:研究组尿量恢复时间、ICU住院时间均少于对照组(P<0.05)。治疗前,两组肾功能、尿KIM-1、NGAL水平,SOFA、APACHEⅡ评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组肾功能指标、尿KIM-1、NGAL水平,SOFA、APACHEⅡ评分均较治疗前下降,研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组死亡率较对照组低(P<0.05)。结论:CRRT联合中药灌肠能够促进重症急性肾损伤患者肾功能的恢复,降低尿KIM-1、NGAL水平,改善预后。

敲除Vanin-1促进肾缺血再灌注损伤后功能恢复的作用及机制

目的探讨血管非炎症分子1(vascular noninflammatory molecule-1,Vanin-1)在缺血再灌注损伤后肾组织的表达水平及其与肾脏功能恢复的关系。方法选取8周龄BALB/c野生型、Vanin-1基因敲除雄鼠,采用完全随机法分为假手术组、缺血再灌注组、敲除组、敲除+缺血再灌注组,每组6只。缺血再灌注组、敲除+缺血再灌注组分离双侧肾蒂后夹闭35 min,后松开夹闭,恢复血流;假手术组、敲除组仅暴露肾蒂,不夹闭。术后0、3、14 d,留取血清、尿液、肾组织标本,检测血清肌酐、尿素氮水平,检测尿液TGF-β水平,PAS染色明确肾组织损伤严重程度,免疫组化检测肾组织Vanin-1表达水平。提取野生型和Vanin-1基因敲除鼠原代肾小管上皮细胞,传代至第2代,设置对照组、对照+损伤组、敲除组、敲除+损伤组,损伤条件为缺氧(1%O2,94%N2,5%CO2,48 h)、复氧(5%CO2,95%空气,24 h),模拟体内缺血再灌注损伤模型,收取肾小管上皮细胞和上清,检测Vanin-1蛋白和上清中TGF-β表达水平。结果缺血再灌注损伤后第3天,与假手术组相比,缺血再灌注组、敲除+缺血再灌注组血清肌酐、尿素氮水平明显升高(P<0.05),PAS染色提示肾组织损伤明显;但缺血再灌注组与敲除+缺血再灌注组小鼠比较,血清肌酐、尿素氮水平无明显差异,PAS染色提示两组肾组织损伤无明显差异。缺血再灌注后第14天,该两组血清肌酐、尿素氮、PAS肾组织损伤均比缺血再灌注后第3天显著恢复,敲除+缺血再灌注组的恢复速度均明显快于缺血再灌注组,PAS肾组织慢性化改变明显轻于缺血再灌注组(P<0.05),且敲除+缺血再灌注组尿中TGF-β水平明显低于缺血再灌注组(P<0.05)。免疫组化结果提示:损伤后第14天,肾组织Vanin-1表达明显升高(P<0.01),且主要表达于受损肾小管上皮细胞。细胞实验结果显示:予以缺氧-复氧损伤后,对照+损伤组肾小管上皮细胞Vanin-1蛋白表达明显升高(P<0.01),上清中TGF-β水平明显高于敲除+损伤组(P<0.05)。结论 Vanin-1可促进缺血再灌注损伤后肾小管上皮细胞TGF-β分泌,延缓肾脏功能恢复,促进急性肾损伤向慢性肾脏病进展。