Two new secolignans from the roots of Urtica mairei Levi.

Two new secolignans （1 and 2） were isolated from the roots of Urtica mairei Levi. The structures of these two compounds were determined on the basis of extensive spectroscopic methods including HR-EI-MS, 1D and 2D NMR experiments.

滇藏荨麻根中化学成分的分离与鉴定

目的研究荨麻属植物滇藏荨麻的化学成分。方法运用硅胶柱色谱、薄层色谱、制备薄层色谱、Sephadex LH-20柱色谱等方法进行分离纯化,通过理化性质和^1H-NMR、^13C-NMR、EI-MS等数据以及与对照品对照等方法进行结构鉴定。结果从滇藏荨麻根分离得到10个化合物，分别鉴定为：豆甾-4-烯-3-酮（1）、4-羟基反式桂皮酸（2）、4-羟基苯甲醛（3）、4-甲氧基苯甲酸（4）、4-羟基苯甲酸（5）、己二酸（6）、二十四烷酸甲酯（7）、2-羟基二十四烷酸甲酯（8）、胡萝卜苷（9）、β-谷甾醇（10）.结论化合物1～10均为首次从滇藏荨麻中分离得到，其中化合物4、6～8为首次从荨麻属植物中分离得到。

人工栽培的南方红豆杉化学成分(Ⅱ)

目的:人工栽培红豆杉是解决红豆杉资源问题的一个重要方法;为了探索人工栽培红豆杉的化学基础,对人工栽培南方红豆杉进行化学研究。方法:人工栽培的南方红豆杉全株的乙醇提取物,经用脱色素、萃取、硅胶柱层析、凝胶柱层析等方法分离,从其氯仿萃取部位分离鉴定得5个化合物,采用波谱解析(UV,IR,ESI-MS,1H NMR,13C NMR)等方法确定其结构。结果:这5个化合物分别为taxuchin B(Ⅰ),10-deacetoxy-baccatinⅢ(Ⅱ),1-βhydroxy-7,9-dideacetylbaccatinⅠ(Ⅲ),1-βaccetoxy-5-deacetyl baccatinⅠ(Ⅳ),isolariciresinol(Ⅴ);其中化合物1为首次从该种植物中分得。结论:人工栽培的南方红豆杉的化学成分同野生的南方红豆杉相近。

响应面分析南方红豆杉黄酮微波提取工艺研究

目的:优化南方红豆杉[Taxus mairei(Lemee et Levl.)S.Y.Hu ex Liu]枝叶中总黄酮的微波提取工艺。方法:在单因素实验基础上,采用响应面分析法对影响南方红豆杉枝叶中总黄酮提取率的主要因素(提取时间、料液比和乙醇体积分数)进行优化,建立影响因素与响应值之间的数学模型,确定最佳微波提取工艺条件。结果:南方红豆杉枝叶中总黄酮最佳微波提取工艺为:料液比27.39(V/W),乙醇体积分数61.44%,提取时间15.27min,微波频率1 887MHz。结论:采用响应面法对南方红豆杉中总黄酮的提取条件进行优化,该方法合理可靠,为生产工艺提供理论依据。

南方红豆杉扦插繁殖技术研究

2003～2004年应用2年生南方红豆杉幼苗进行扦插试验研究,结果表明：不同时间扦插的插穗生根时间最多相差2个月,2月中旬至3月中旬为最适宜扦插季节,扦插后3～5个月的生根率高于其它月份.用河沙与红泥作基质扦插,在不同季节扦插中以河沙作基质的生根效果比红泥的好.用生根剂处理有利于插穗提早生根及增加生根数量,以冬季及早春应用的效果较为明显,应用生根剂的插穗在扦插3～5个月后的生根率和生根数量与对照比有显著差异.不同类型插穗的扦插生根率在不同月份扦插的结果不同,但其差异不显著.

南方红豆杉总生物碱的含量测定

目的考察南方红豆杉总生物碱的含量测定方法。方法采用分光光度法测定南方红豆杉中总生物碱的含量。以乌头碱为对照品,溴甲酚绿为酸性染料,在pH为3.0±0.1的缓冲液条件下,三氯甲烷萃取,于415 nm波长处测定其吸光度。结果乌头碱在0.009 6～0.022 4 mg/mL质量浓度范围内线性关系良好,回归方程Y=48.813X-0.025 2,r=0.999 6,平均加样回收率为100.26%(RSD为2.04%),其总生物碱含量平均值为0.382%。结论分光光度法简便、准确,可用于南方红豆杉总生物碱的含量测定。

HPLC测定银叶桂中桂皮醛的含量

目的:建立高效液相色谱法测定樟科植物银叶桂中桂皮醛含量的方法。方法:采用高效液相色谱法,Diamonsil C18(250×4.6 mm,5mm);流动相为乙腈-水(35∶65),检测波长为290nm,柱温为35℃,流速为1.0ml/min。结果:桂皮醛在0.009487～0.9487μg范围内线性关系良好。平均回收率为99.07%(RSD=0.6%)。结论:本法简单、准确,重复性好,可用于银叶桂药材的质量控制。

温度、日照时数及降水量与南方红豆杉初生代谢产物的相关性研究

目的:探讨环境因子与南方红豆杉初生代谢产物的相关性,为进一步研究南方红豆杉生物学特性及开发利用提供实验依据。方法:运用SPSS 19.0统计软件进行相关性分析和通径分析,探究温度、日照时数、降水量与初生代谢产物含量的相关性。结果:各环境因子直接贡献绝对值最大的为月均温度,且月均温度通过月累积光照时数对南方红豆与南方红豆杉相对生物量和总多糖含量的相关程度和杉相对生物量和总多糖含量的影响最大,说明月均温度通过月累积光照时数对南方红豆杉初生代谢产物含量的影响最大。结论:温度与光照时数两者之间关系较为密切,且温度变化对南方红豆杉初生代谢产物含量的累积影响最为明显。该研究对南方红豆杉采收、加工、利用及揭示南方红豆杉生物学特性具有一定指导意义。

南方红豆杉愈伤组织培养及其紫杉烷二萜类成分的分析

目的研究南方红豆杉愈伤组织的出愈时间、诱导率、生长率、生长状态、褐变程度,比较愈伤组织中紫杉醇等5种紫杉烷二萜类成分的量。方法采用单因素比较、正交试验设计,研究影响南方红豆杉愈伤组织诱导和生长的各种因素;采用HPLC法测定不同来源愈伤组织中10-脱乙酰基巴卡丁Ⅲ(10-DAB)、巴卡亭Ⅲ、三尖杉宁碱、紫杉醇和东北红豆杉素5种紫杉烷二萜类成分的量;采用加权评分综合考虑以上各因素优选组织培养条件。结果外植体脱分化形成愈伤组织的能力,以完整叶片及茎段最好;暗培养有利于紫杉醇等5种萜类成分的富集;愈伤组织诱导的最适培养基为B5+2,4-D 3.0mg/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L。结论南方红豆杉愈伤组织诱导、培养与外植体种类、培养基种类、光照有较大关联,紫杉醇等5种紫杉烷二萜类成分的富集受植物生长调节剂种类及浓度影响显著。

激素加变温层积法处理南方红豆杉种子生理生化变化研究

目的:研究南方红豆杉种子萌发的机制,即南方红豆杉种子形态后熟过程中的生物大分子的变化过程。方法:采用0.05%赤霉素(GA3)加低(4℃)-暖(23℃)-低(4℃)变温层积处理南方红豆杉种子,研究其生理生化变化。结果:采用激素加变温层积法处理种子后,蛋白质、氨基酸、可溶性糖都具有在低温层积时期累积较快,暖层积时期消耗较快的特点,三者的含量总体都呈上升趋势,分别比处理前增加115.56%、123.70%、50.71%,但脂肪含量下降40.00%。脱氢酶、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、蛋白酶活性分别比处理前增加111.05%、178.73%、141.84%、169.97%。结论:激素加变温层积法影响南方红豆杉种子生理生化变化,使种子内贮藏物质不断分解代谢、转化和利用,这也是破除其休眠的关键。

响应面分析南方红豆杉枝条多糖超声提取工艺及其抗氧化作用研究

目的:研究南方红豆杉枝条中多糖的超声提取工艺及抗氧化作用。方法:在单因素实验基础上,采用响应面分析法对影响南方红豆杉枝条中多糖提取率的主要因素进行优化,建立影响因素与响应值之间的数学模型,确定最佳超声提取工艺条件;通过DPPH自由基清除率、还原力和总的抗氧化活性的测定,分析其抗氧化作用。结果:最佳超声提取工艺为:料液比26.78(V/W),提取时间42.81min,超声频率为33.88kHz,提取2次;南方红豆杉多糖对DPPH自由基具有一定的清除作用,总的抗氧化活性和还原能力均随多糖浓度的增加而上升。结论:采用该方法对提取条件进行优化,合理可靠,能为生产工艺提供理论依据;其多糖具有较强的抗氧化作用。

南方红豆杉不同组织总RNA提取方法研究

目的:从南方红豆杉不同组织中提取高质量的总RNA。方法:以南方红豆杉幼叶、嫩茎和种子为材料,采用Trizol法、CTAB法、热酚法、改良热酚法和天根RNAprep Pure多糖多酚植物总RNA提取试剂盒法5种方法进行比较分析。结果:Trizol法基本未提取到南方红豆杉不同组织的RNA;CTAB法提取的RNA浓度较高,但OD_(260)/OD_(280)大于2.1,RNA降解严重;热酚法提取的RNA浓度较高,OD_(260)/OD_(280)均小于1.8,蛋白质和酚类物质等残留严重,质量较低;改良热酚法和试剂盒法28S rRNA、18S rRNA和5S rRNA条带清晰,完整性好,OD_(260)/OD_(280)均在1.8~2.1范围内,纯度高。结论:Trizol法、CTAB法和热酚法均不适用于南方红豆杉总RNA提取,而改良热酚法和试剂盒法可提取到质量较好的南方红豆杉总RNA。