鲤鱼肌肉Ⅴ型胶原蛋白的分离纯化及其抗体制备

通过酸溶、胃蛋白酶酶解和氯化钠盐析等方法,从鲤鱼肌肉中纯化得到了V型胶原蛋白.SDS-PAGE电泳图谱分析发现,其至少由2条α链(α_1和α_2)组成,其中α1分子质量约为135 ku,α_2分子质量约为120 ku.通过圆二色光谱仪分析其二级结构,发现其具有胶原蛋白三股螺旋结构的典型特征,其热变性温度为30.5℃.将V型胶原蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔,成功制备了多克隆抗体.采用免疫印迹法对该多克隆抗体的特异性进行分析,证明其仅与鱼类V型胶原蛋白产生反应,特异性良好.

磁共振成像灌注参数与COL5A2、Galectin-3的相关性及对食管癌的诊断价值

目的探讨磁共振成像(MRI)灌注参数与V型胶原蛋白α2链(COL5A2)、半乳糖苷凝集素-3(Galectin-3)的相关性及对食管癌的诊断价值。方法选取2020年12月—2021年12月我院收治的疑似食管癌患者100例,以内镜和活检病理检查为金标准,最终确诊为食管癌患者的55例为观察组,其余45例食管炎病变患者为对照组。所有患者行磁共振成像检查及COL5A2、Galectin-3水平测定,对比两组MRI灌注参数,分析食管癌患者MRI灌注参数与肿瘤标志物水平的相关性,分析MRI灌注参数对食管癌的诊断价值。结果与对照组相比,观察组K^(trans)、K_(ep)、V_(e)水平较高(P<0.05);与Ⅰ~Ⅱ期食管癌患者相比,Ⅲ~Ⅳ期食管癌患者K trans、K ep、V e水平较高(P<0.05);与Ⅰ~Ⅱ期食管癌患者相比,Ⅲ~Ⅳ期食管癌COL5A2、Galectin-3水平升高(P<0.05);食管癌患者K^(trans)、K_(ep)、V_(e)、COL5A2、Galectin-3均与病情分期呈正相关(P<0.05);K^(trans)、K_(ep)、V_(e)均与COL5A2、Galectin-3水平呈正相关,差异具有统计学意义(P<0.05);与磁共振成像、COL5A2、Galectin-3单一诊断相比,联合诊断对食管癌的预测价值较高(P<0.05)。结论MRI灌注参数与血清Galectin-3、COL5A2三者联合检测准确度及灵敏度较高于单一检测,弥补了单一检测的不足,三者联合对不同分期食管癌患者具有一定的诊断价值。

ALC1、miR-1299、COL5 A2与食管癌恶性生物学行为的关系及预测胸腹腔镜外科手术后复发的效能

目的探究ALC1、微小RNA-1299(miR-1299)、V型胶原蛋白α2链(COL5 A2)与食管癌(EC)恶性生物学行为的关系及预测胸腹腔镜外科手术后复发的效能。方法选取2017年10月至2019年6月胸腹腔镜外科手术治疗后1年内复发的EC患者45例为研究组,另选取胸腹腔镜外科手术治疗后1年内未复发的EC患者45例为对照组,比较2组一般资料、血清恶性生物学行为指标[血清半乳凝素-9(Gal-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、半乳糖凝集素-3(Galectin-3)]、EC组织中ALC1、miR-1299、COL5 A2 mRNA表达情况,探究术后EC组织中ALC1、miR-1299、COL5 A2 mRNA与血清恶性生物学指标的相关性,比较ALC1、miR-1299、COL5 A2高表达与低表达者病理特征,探究ALC1、miR-1299、COL5 A2与恶性生物学行为的关系,及预测EC术后复发的效能。结果研究组血清Gal-9、VEGF、Galectin-3水平高于对照组(P<0.05);研究组术后、入组时EC组织ALC1、COL5 A2 mRNA均高于对照组,miR-1299 mRNA低于对照组(P<0.05);血清Gal-9、VEGF、Galectin-3与术后EC组织ALC1、COL5 A2表达呈正相关,与miR-1299表达呈负相关(P<0.05);术后EC组织ALC1、miR-1299、COL5-A2高表达与低表达患者的肿瘤分期、分化程度、淋巴转移、肿瘤浸润深度对比,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤分期、分化程度、淋巴转移、肿瘤浸润深度与术后EC组织ALC1、COL5 A2呈正相关,与miR-1299呈负相关(P<0.05);术后EC组织ALC1、miR-1299、COL5-A2联合预测EC术后复发的曲线下面积(AUC)为0.872,大于各指标单一预测,联合预测的最佳敏感度、特异度分别为86.67%、80.00%。结论ALC1、miR-1299、COL5 A2表达水平与EC恶性生物学行为存在良好线性关系,各指标联合在预测胸腹腔镜外科手术后复发方面具有较高效能。

肾安丸对慢性肾衰竭患者血清中组织纤维化相关指标的影响

目的探讨肾安丸对慢性肾衰竭患者肾纤维化的影响。方法选取2016年6月至2017年6月在潍坊益都中心医院肾内科确诊的慢性肾脏病3～5期患者,随机分为治疗组(42例)和对照组(50例),两组患者均嘱其优质低蛋白(0.6 g·kg^(-1)·d^(-1))、低磷饮食,进行磷结合剂、降压药(血肌酐<265μmol/L时加用ACEI或ARB类药物)等对症治疗。治疗组患者规律服用肾安丸治疗。两组患者均观察6个月。比较两组患者治疗前以及治疗3、6个月时的肾脏功能、炎症指标及肾纤维化指标变化。结果治疗前两组患者各项指标无明显统计学差异(P>0.05),治疗3个月及6个月时,治疗组患者的超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血清肌酐(Scr)、Ⅳ型胶原(Collagen-Ⅳ,Col-Ⅳ)、转化生长因子-β(transform growth factor-β,TGF-β)水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),eGFR水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肾安丸在临床观察中可以打破"虚、湿、瘀、毒"恶性循环,调节水液代谢,活血化瘀,降低体内毒素,改善患者症状;肾安丸中的大黄成分可通过抑制细胞增殖、抑制促纤维化因子的产生、调节细胞外基质的合成和分解,从而起到延缓肾纤维化的作用。

LncRNA牛磺酸上调基因1通过miR-32靶向COL5A1对TPC-1细胞的影响

目的探究牛磺酸上调基因1(taurine upregulated gene 1,TUG1)对乳头状甲状腺癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)-1细胞生长、侵袭和迁移及体内成瘤的影响及其作用机制。方法检测TUG1和miR-32在正常细胞系和甲状腺癌细胞系中的表达;检测沉默TUG1对细胞生长、侵袭和迁移的影响;荧光素酶报告实验检测miR-32与C0L5A1靶向关系;检测COL5A1蛋白表达和细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力;建立裸鼠移植瘤模型,检测沉默TUG1后肿瘤组织体积、重量和TUG1、miR-32、Ki67、VEGF、COLSA1表达。结果TUG1在甲状腺癌组织和细胞系中高表达,miR-32低表达。沉默TUG1抑制TPC-1细胞增殖、侵袭和迁移,促进细胞凋亡。miR-32和C0L5A1存在靶向关系。沉默TUGI逆转了miR-32 inhibi-tor对细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的作用,并降低肿瘤体积和重量,下调TUG1表达、上调miR-32表达,降低Ki67、VEGF和COL5A1表达。结论TUG1通过miR-32靶向下调C0L5A1调节TPC-1细胞生长、转移和肿瘤形成。