新城疫病毒V4株F基因的克隆与核苷酸序列分析

本试验采用RT_PCR方法对NDVV4 克隆株V4(Hr)的F基因进行了扩增与克隆,并以Sanger’s 双脱氧末端终止法测定出其核苷酸序列,推导出氨基酸序列。F基因全长为1662bp,单一的开放阅读框编码553 个氨基酸的长肽。F蛋白的疏水构型有3 个强疏水区;F蛋白上共有12 个Cys 残基位点和5 个潜在糖基化位点。同其亲本毒株Queensland 相比,核苷酸同源率为99.3% ,氨基酸同源率98.7% 。上述主要功能区的序列完全一致,但其中7 个氨基酸的不同,的确导致了二级结构的变化(主要表现为α_螺旋、β_折叠、β_转角和β_卷曲的数量和位置的不同),而且单一的氨基酸差异足以导致二级结构的变化,如:214位的P对L的替换,就导致212 ～215

鸡新城疫病毒V4株一些特性的研究

对鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｖ４株的毒价、血凝（ＨＡ）稳定性和致病指数进行了研究，结果显示ＮＤＶＶ４株的毒价（ＥＩＤ）为１０－８．３～１０－１０．１／０．１ｍＬ，２５℃存放２８ｄ、３７℃存放１２ｄ及反复冻融７次ＨＡ滴度不变，其１日龄雏鸡脑内接种、６周龄鸡静脉接种发病指数和鸡胚平均致死时间分别为：ＩＣＰＩ＝０．００，ＩＶＰＩ＝０．００。

鸡新城疫V4株弱毒疫苗的研究进展

本文叙述了鸡新城疫Ｖ４株自然弱毒的发现及国内外的研究进展，表明了我国在新城疫疫苗的应用研究方面所处的地位。

新城疫V_4株免疫和攻毒鸡外分泌物中病毒抗原的检测

利用间接夹心ELISA对新城疫V4(NDV_4)免疫鸡,免疫攻毒鸡和对照攻毒鸡口腔和泄殖腔内的病毒抗原进行了检测。结果,雏鸡免疫后第2d,口腔内病毒抗原的随机检出率为4/10,泄殖腔内随机检出率很低(0/10),持续18d以上。攻毒后第1d直到第6～8d雏鸡全部死亡时,对照鸡口腔和泄殖腔内均能查到病毒抗原。免疫鸡攻毒后全部保护,没有任何临床症状。攻毒后1d,口腔和泄殖腔内病毒抗原的随机检出率分别是8/10和6/10。第13d,泄殖腔内病毒抗原消失;而此时口腔内病毒抗原检出率仍较高(7/10),可能与鸡群内普遍存在的V4病毒有关。

新城疫V_4株弱毒变种的选育

应用有限稀释法通过SPF鸡胚传代,从新城疫V_4株自然弱毒中克隆出一个变种,即20代以后的继代毒,命名为新娥疫V_4克隆20弱毒株,(ND-V_4C_(20))。该毒以10^(-2)～10^(-13)×0.1ml接种10日龄SPF鸡胚尿囊腔150小时内,鸡胚极少死亡,每个滴度5个胚的尿液均可凝集鸡红血球。第10代和第20代的每个滴度5个胚的混合尿液以10^(-6)×0.5ml一次饮水免疫鸡,即能引起HI抗体反应,也能抵抗新城疫强毒的攻击。批量生产的中式冻干疫苗以应用剂量(500羽/瓶)饮水免疫鸡5天即可产生坚强的免疫力;以10^(-8)×0.5ml一次饮水免疫鸡,不但能产生HI抗体反应,也能10/10抵抗新城疫强毒攻击。

鸡新城疫病毒V_4株的生物学特性研究

鸡新城疫病毒Ｖ４株对１日龄雏鸡安全；对１０日龄雏鸡一次饮水或滴鼻免疫．半年内，ＨＩ抗体平均效价为２５左右；以１００ＥＩＤ５０Ｆ系标准强毒（毒力为１０８．５ＥＩＤ５０／０．１ｍｌ）攻击，保护率１００％。并成功地培育了能在５６℃水浴中处理５小时而血凝效价稳定的耐高温毒株Ｖ４－９２．该毒株在２５℃至少保存５周，血凝效价不降。

鸡新城疫V_4株(NDV_4)疫苗研究进展

鸡新城疫V4株是1966年澳大利亚学者Simmons于Queensland州从一只营养不良并伴有葡萄球菌感染的肉鸡腺胃分离到的一株无毒ND毒株,在此基础上澳大利亚和马来西亚两国学者经数年合作研究培育出的一株无毒耐热毒株（NDV4）。 近10年来,国内外学者围绕NDV4株的生物学特性及对鸡的免疫效果作了大量工作,为配合此株疫苗的推广应用,我们收集了国内外有关资料及我们的试验结果。

鸡新城疫V_4株油乳剂灭活苗免疫效果观察

鸡新城疫V_4株油乳剂灭活苗接种1月龄SPF来航鸡,进行了正常免疫剂量的安全性试验和接种前后血凝抑制抗体效价的动态监测。结果,此灭活苗是安全的;接种后10d产生免疫力,效价为6.8log2,40d效价达高峰10.3log2;210d其效价仍为6.4log2。同时在免疫接种后40d进行了攻毒试验,5/5保护。

鸡新城疫无毒株——V_4株的研究概况及应用前景

本世纪30年代以来,澳大利亚一直没有发生过临床型的鸡新城疫（简称 ND）,鸡群亦不接种 ND 疫苗,但血清学检查发现广泛存在 ND 的血球凝集抑制抗体。为此,澳大利亚学者 Simmons 作过许多研究,终于1967年在 Queensland 州从一只营养不良并伴有感染葡萄球菌的肉鸡腺胃中分离到无毒的 ND 毒株,当时命名为 Queensland 株,后定为 V4株。

鸡新城疫V_4克隆株疫苗研究与应用 Ⅰ.V_4克隆株/HB92选育及生物学特性测定

从澳大利亚引进NDV4自然无毒株,经耐热选育,利用蚀斑技术克隆病毒,选育出NDVHB92株,56℃ 6h对该毒株病毒活性没有影响;室温(10-25℃)条件下保存6个月,37℃保存2周,病毒仍有活力;37℃下保存8周,HA滴度不变。鸡胚平均致死时间(MDT)>168h;1日龄鸡脑内致病指数(ICPI)为0.00;鸡静脉致病指数(IVPI)为0.00。将含毒尿液接种18日龄雏鸡,接种量为105EID50,接种后14d测定NDHI抗体效价≥24,强毒攻击保护为100％。

口服鸡新城疫V_4株病毒免疫效果研究

口服鸡新城疫Ｖ_４株病毒免疫效果研究夏平安①侯安祖②李宏基③摘要经嗉囊接种１０８．５ＥＩＤ５０鸡新城疫Ｖ４株病毒。后第４～８天，能从粪便中分离出病毒。５周龄鸡拌料一次口服１０８．５ＥＩＤ５０鸡新成疫Ｖ４株病毒，半年内ＨＩ抗体平均效价为２５左右，用１０?..

新城疫活疫苗(V4/HB92克隆株)对鹌鹑、鸽临床试验

应用兽药GMP车间生产的3批新城疫活疫苗(V4/HB92克隆株)中试产品分别在安陆和云梦对7 500只鹌鹑和4 500只鸽进行了临床效力试验。安全试验结果表明,3批疫苗用10倍剂量分别对30日龄的鹌鹑和鸽滴鼻,观察10 d,无任何毒副反应。免疫效力试验分为滴鼻和饮水2种方法,3批疫苗滴鼻免疫3 000只鹌鹑,免疫后2周抗体开始上升,ND-HI达3.9 log2,抗体持续16周;饮水免疫的3 000只鹌鹑,2周抗体为3.1 log2,抗体持续8周。三批疫苗滴鼻免疫1 500只鸽,免疫2周ND-HI抗体达4.1log2,抗体持续8周;饮水免疫的1 500只鸽,免疫后2周抗体为3.8 log2,持续8周抗体仍然为4.1 log2。试验攻毒保护力测定结果与ND-HI抗体水平呈正相关。

耐热鸡新城疫V4苗对高母源抗体雏鸡的口服免疫试验

用两个剂量分别以拌料和连续添加的方式，对具新城疫高母源抗体的雏鸡进行耐热新城疫弱毒Ｖ４苗的口服免疫试验，并用Ⅳ系苗滴鼻滴眼免疫作对照．血清ＨＩ抗体测定结果显示，４个试验组的ＨＩ抗体水平在全程的８次测定中均较低且消长平缓，攻毒试验显示试验组与对照组相当，均具有较高的保护率．在进行免疫试验的同时，对试验鸡进行称重，经Ｖ４苗免疫的试验组的体重比对照组增加．

新城疫最新流行趋势和预防措施

精确的病原型研究显示：目前，新城疫病毒共有15个基因型。在1950年之前分离出的多是基因型2、3、4型。而后逐步地被基因型5～8型病毒取代，说明发病型基因逐步从2～4变异为5～8型。而疫苗的毒株（LaSota源性的、V4株、Mukteswar、B1、F）都属于基因1～3型。