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恶性疟原虫Var基因家族的变异调控机制 被引量:4
1
作者 张青锋 潘卫庆 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期337-341,共5页
本文对恶性疟原虫变异抗原基因家族(Var基因)变异机制的研究进行了综述。Var基因家族的近60个基因中只有一个能够得到表达,其余皆被沉默。这种相互排斥性表达机制是在转录水平上进行控制的,主要包括三方面调控途径:非编码DNA元件、染色... 本文对恶性疟原虫变异抗原基因家族(Var基因)变异机制的研究进行了综述。Var基因家族的近60个基因中只有一个能够得到表达,其余皆被沉默。这种相互排斥性表达机制是在转录水平上进行控制的,主要包括三方面调控途径:非编码DNA元件、染色质结构以及核外周基因位点的迁移。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 var基因家族 基因变异 基因调控
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恶性疟原虫var基因家族研究进展
2
作者 彭恒 张冬梅 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2007年第4期196-201,共6页
疟疾严重威胁人类健康,恶性疟原虫是致疟疾病例死亡的主要病因。PfEMP1蛋白由var基因家族编码在恶性疟原虫的生存和重症疟疾发病过程中起重要作用。vor基因家族基因数目多,调控机制复杂,一直是研究的热点。该文就vor基因家族的分布... 疟疾严重威胁人类健康,恶性疟原虫是致疟疾病例死亡的主要病因。PfEMP1蛋白由var基因家族编码在恶性疟原虫的生存和重症疟疾发病过程中起重要作用。vor基因家族基因数目多,调控机制复杂,一直是研究的热点。该文就vor基因家族的分布、结构、多态性、转录、表达及其调控机制方面近期的进展加以综述。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 var基因 基因调控
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恶性疟原虫红细胞膜蛋白1(PfEMP1)与var基因家族
3
作者 尹继刚 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期241-245,共5页
关键词 恶性疟原虫 红细胞膜蛋白1 var基因 家族
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恶性疟原虫ApiAP2蛋白与var基因内含子序列相互作用的体内鉴定 被引量:3
4
作者 韩世通 张青锋 潘卫庆 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期1-5,共5页
目的鉴定恶性疟原虫ApiAP2蛋白家族成员PF3D7_1107800与var基因内含子保守序列(iNPE)存在体内相互结合作用。方法提取恶性疟原虫标准株3D7基因组DNA,PCR扩增PF3D7_1107800基因5′端片段。扩增产物经双酶切后连接入原核表达载体pGex-4T-1... 目的鉴定恶性疟原虫ApiAP2蛋白家族成员PF3D7_1107800与var基因内含子保守序列(iNPE)存在体内相互结合作用。方法提取恶性疟原虫标准株3D7基因组DNA,PCR扩增PF3D7_1107800基因5′端片段。扩增产物经双酶切后连接入原核表达载体pGex-4T-1,重组质粒转化至大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白表达情况,谷胱甘肽亲和层析纯化重组蛋白。20只BALB/c小鼠分为重组蛋白免疫组和PBS对照组,每组10只,免疫组小鼠每鼠背部皮下注射纯化的重组蛋白100μl(约含蛋白20μg),对照组小鼠注射等量PBS,共免疫3次,每次间隔2周,末次免疫后2周处死小鼠,收集血清。重组纯化蛋白G(Protein G)纯化2组小鼠血清,Western blotting鉴定免疫血清抗体情况。染色质免疫沉淀(ChIP)获得恶性疟原虫DNA,qPCR检测PF3D7_1107800蛋白抗体组在C类var基因的内含子区域的富集情况。结果 PCR扩增PF3D7_1107800基因5′端片段结果显示,在约345 bp处有一特异性条带,与理论值相符。重组表达载体pGEX-4T-1-PF3D7_1107800N经测序表明构建成功。重组蛋白经诱导表达和纯化后,SDS-PAGE和Western blotting结果显示,所获的重组蛋白为目的蛋白,其相对分子质量(Mr)约为37 000,与预测值一致。重组蛋白免疫小鼠后,获得抗体血清,Western blotting分析结果显示,血清中抗体可与重组蛋白特异结合,在约Mr200 000处有一目的条带,与预测值一致。ChIP实验产物经qPCR分析显示,在var基因内含子区域的相对富集程度为内参seryl-tRNA合成酶基因区域的2倍以上。结论恶性疟原虫ApiAP2家族成员PF3D7_1107800可在体内与C类var基因内含子区域结合。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 ApiAP2 var基因 内含子调控蛋白
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恶性疟原虫的抗原变异与var基因家族 被引量:2
5
作者 贾默稚 高兴政 《国外医学(寄生虫病分册)》 1999年第3期111-113,共3页
恶性疟原虫利用改变暴露于宿主免疫系统的抗原逃避宿主的攻击。在恶性疟原虫7号染色体上发现的基因家族var编码了恶性疟原虫红细胞膜蛋白1(Pf—EMP1),并参与调节受染红细胞的抗原变异和与血管内皮细胞的胞间粘附。认识并深入研究var基... 恶性疟原虫利用改变暴露于宿主免疫系统的抗原逃避宿主的攻击。在恶性疟原虫7号染色体上发现的基因家族var编码了恶性疟原虫红细胞膜蛋白1(Pf—EMP1),并参与调节受染红细胞的抗原变异和与血管内皮细胞的胞间粘附。认识并深入研究var基因有助于人们进一步了解恶性疟原虫抗原变异机制,研制具有针对性的抗疟疫苗,最终达到控制疟疾的目的。 展开更多
关键词 抗原变异 恶性疟原虫 红细胞膜蛋白1 var基因
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var基因在单个恶性疟原虫中的镶嵌样转录
6
作者 王洁 袁凯 《国外医学(寄生虫病分册)》 2004年第2期80-81,共2页
关键词 var基因 恶性疟原虫 靶蛋白 免疫逃逸 基因转录
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频繁重组引起恶性疟原虫var基因的多样性
7
作者 赵凯 《国外医学(寄生虫病分册)》 2002年第2期77-78,共2页
恶性疟原虫扩增出的400-500 bp片段大部分是var基因。该基因编码红细胞表面变异抗原PfEMP1(恶性疟原虫红细胞膜蛋白1)。在每一个单倍体基因组中有大约50个不同var基因拷贝,它们多位于染色体末端。有些学者提出这些端粒末的区域可能与va... 恶性疟原虫扩增出的400-500 bp片段大部分是var基因。该基因编码红细胞表面变异抗原PfEMP1(恶性疟原虫红细胞膜蛋白1)。在每一个单倍体基因组中有大约50个不同var基因拷贝,它们多位于染色体末端。有些学者提出这些端粒末的区域可能与var基因多样性的产生有关。 展开更多
关键词 疟疾 基因多样性 频繁重组 恶性疟原虫 var基因
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疟原虫var基因转换速率变化导致抗原变异
8
作者 宁北芳 《国外医学(寄生虫病分册)》 2005年第4期190-191,共2页
关键词 疟原虫 var基因转换 抗原变异 免疫应答
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恶性疟原虫var基因相关研究新进展 被引量:1
9
作者 李节 何永蜀 杨照青 《热带医学杂志》 CAS 2009年第2期222-223,共2页
本文通过对恶性疟原虫变异抗原基因var基因家族的相关变异机制,在7号染色体var基因区域(pfemp1)和抗药基因pfcrt的特定区域的相关研究报道,以及变异var基因与妊娠感染疟疾的相关致病机制进行综述。
关键词 恶性疟原虫 var基因家族 pfempl pfert 妊娠疟疾
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恶性疟原虫var基因的表达调控机制研究进展
10
作者 石明丽 肖波 江陆斌 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CSCD 北大核心 2021年第6期719-724,共6页
疟疾是由疟原虫感染引起的传染性疾病。var基因编码的红细胞膜表面蛋白1(PfEMP1)是恶性疟原虫致病过程中最主要的毒力因子,与疟原虫感染红细胞的抗原变异及细胞黏附过程密切相关。var基因表达受严格的时空调控,一般来说,单个疟原虫在红... 疟疾是由疟原虫感染引起的传染性疾病。var基因编码的红细胞膜表面蛋白1(PfEMP1)是恶性疟原虫致病过程中最主要的毒力因子,与疟原虫感染红细胞的抗原变异及细胞黏附过程密切相关。var基因表达受严格的时空调控,一般来说,单个疟原虫在红内期只表达一个var基因,遵循相互排斥的表达策略。本文综述了恶性疟原虫var基因调控的研究进展以加深人们对疟疾致病机制的理解。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 毒力因子 var基因 表达调控 表观修饰
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恶性疟原虫海南株var2csa基因DBL区蛋白的原核表达及功能分析 被引量:1
11
作者 康巍 常志广 +3 位作者 陆慧君 姜宁 尹继刚 陈启军 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期37-41,共5页
目的克隆、表达恶性疟原虫海南株变异抗原基因(var)家族之一var2csa基因的血型抗原结合基团(duffy anti-gen-binding ligand,DBL)4、DBL5、DBL6区,比较其与硫酸软骨素A(chondroitin sulfate A,CSA)黏附能力的差异。方法 PCR扩增恶性疟... 目的克隆、表达恶性疟原虫海南株变异抗原基因(var)家族之一var2csa基因的血型抗原结合基团(duffy anti-gen-binding ligand,DBL)4、DBL5、DBL6区,比较其与硫酸软骨素A(chondroitin sulfate A,CSA)黏附能力的差异。方法 PCR扩增恶性疟原虫海南株基因组DNA中3个目的片段,将扩增产物与pMD18-T克隆载体连接,经酶切、测序鉴定正确后克隆至表达载体pET-22b上,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白,并用组氨酸标签融合蛋白纯化柱(His GraciTrap)纯化,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白质印迹(Western blotting)检测目的蛋白。ELISA检测不同DBL区重组蛋白与CSA的结合情况。结果 PCR扩增获得目的片段分别为996、859和894bp,酶切及DNA测序结果均显示重组质粒构建成功,在大肠埃希菌BL21(DE3)中成功表达并纯化3个DBL区重组蛋白,DBL4区、DBL5区和DBL6区的相对分子质量分别为Mr 439800,Mr 34500,Mr 36000。West-ern blotting检测结果显示,目的蛋白具有反应原性。ELISA结果显示,不同蛋白浓度条件下DBL5区均明显比其他两个DBL区的吸光度(A405值)高(P<0.05),表明DBL5区与CSA的黏附能力较强。结论 var2csa基因3个DBL区重组蛋白表达成功,DBL5区与CSA的黏附能力较强。 展开更多
关键词 妊娠相关疟疾 恶性疟原虫 var2csa基因 DBL 硫酸软骨素A
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长非编码RNA调节恶性疟原虫的毒力及其基因激活研究进展
12
作者 揭君津 柳建发 +3 位作者 刘丹妮 廖奇 陈佳 蒋雯雯 《临床医学进展》 2019年第4期613-618,共6页
长链非编码RNA (long non-coding RNAs, lncRNAs)为一类长度大于200 nt,不具有蛋白质编码功能且大多具有polyA尾巴结构的RNA分子。截止2016年,全球每年疟疾发病病例高达2.16亿例,近年来,由于耐药性原虫和耐杀虫剂蚊的出现,消除疟疾对人... 长链非编码RNA (long non-coding RNAs, lncRNAs)为一类长度大于200 nt,不具有蛋白质编码功能且大多具有polyA尾巴结构的RNA分子。截止2016年,全球每年疟疾发病病例高达2.16亿例,近年来,由于耐药性原虫和耐杀虫剂蚊的出现,消除疟疾对人类的危害仍是一项艰巨的科学任务。应对这一挑战的关键在于研制有效的疫苗、开发新的抗疟药物以及创新使用现有抗疟药物,而疟原虫的毒力调节机制、基因激活、代谢等过程尚有许多未知的方面,为疫苗研发和药物开发带来许多困难。lncRNAs在恶性疟原虫发育、代谢、致病机制中可能发挥重要作用,进一步了解lncRNAs的毒力调节机制、基因激活过程,有利于对恶性疟原虫的致病机制有更清晰的了解,以便有针对性地制定诊疗策略,开发有效的抗疟方法。本文就lncRNAs调节恶性疟原虫的毒力及其基因激活研究进展作一综述。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 长链非编码RNA var基因
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Anther Culture of Chinese Radish(Raphanus sativus L. var. Longinnatus Bailey):Response of Different Genotypes to the Embryogenesis and the Traits of Regenerated Plantlets
13
作者 ZHANG Li 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2011年第3期337-339,共3页
[Objective] The aims were to ① conduct anther culture of Chinese radish varieties; ② observe the development of embryos from anther culture; ③ study the response of different genotypes to embryogenesis in anther cu... [Objective] The aims were to ① conduct anther culture of Chinese radish varieties; ② observe the development of embryos from anther culture; ③ study the response of different genotypes to embryogenesis in anther culture; ④ observe the morphology of regenerated plantlets; ⑤ analyze the ploidy level of regenerated plantlets arising from the anther culture process. [Method]Anthers of 15 genotypes with diverse genetic backgrounds of Chinese radish have been cultured in vitro and induced to undergo embryogenesis and plant formation. [Result] Of 15 genotypes evaluated,four produced embryos. The genotype was the main factor to influence the embryogenesis. The morphology and the ploidy of the regenerated plantlets were observed,and the anther-derived plantlets included a mix of haploids,diploids and hexaploids. Of the plants that regenerated from anther embryos 60% were diploid. [Conclusion] The plantlets had the high ability to double spontaneously. 展开更多
关键词 RADISH Isolated anther culture GENOTYPE EMBRYOGENESIS
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恶性疟原虫PfEMP-1的研究进展 被引量:1
14
作者 袁丽莉 杨婕 杨照青 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期290-293,共4页
目的恶性疟原虫红细胞表面蛋白-1(PfEMP-1)是由var基因家族编码的一种蛋白质,它是疟原虫在宿主体内存活的重要蛋白。不但参与疟原虫的抗原变异,调节人的免疫应答,而且还是重要的粘附分子。本文对PfEMP-1的基础结构特征及其与临床的病理... 目的恶性疟原虫红细胞表面蛋白-1(PfEMP-1)是由var基因家族编码的一种蛋白质,它是疟原虫在宿主体内存活的重要蛋白。不但参与疟原虫的抗原变异,调节人的免疫应答,而且还是重要的粘附分子。本文对PfEMP-1的基础结构特征及其与临床的病理联系,及以其为基础的抗疟疫苗研发方面的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 恶性疟原虫红细胞表面蛋白-1 var基因
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疟疾病原体存在多伪装
15
《医院与医学》 2013年第1期49-49,共1页
当前一代的季节性流感疫苗的药效,因需要利用当疟疾寄生虫“镰刀形疟原虫”感染红血球时,它逃避免疫检测的办法是,一次只表达从抗原上来讲截然不同的60个var基因中的一个,然后在感染过程中再改为表达一个新的基因。在这项研究中,Lo... 当前一代的季节性流感疫苗的药效,因需要利用当疟疾寄生虫“镰刀形疟原虫”感染红血球时,它逃避免疫检测的办法是,一次只表达从抗原上来讲截然不同的60个var基因中的一个,然后在感染过程中再改为表达一个新的基因。在这项研究中,LouisMiller及其同事发现, 展开更多
关键词 疟疾 病原体 var基因 伪装 感染过程 流感疫苗 免疫检测 季节性
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恶性疟原虫海南株var2csa基因的克隆、表达及免疫识别研究
16
作者 康巍 彭帅 +3 位作者 陆慧君 尹继刚 陈启军 姜宁 《热带医学杂志》 CAS 2011年第11期1243-1247,共5页
目的克隆、表达恶性疟原虫海南株HN(2)var2csa基因DBL4、DBL5、DBL6区,通过ELISA方法比较其与硫酸软骨素A(CSA)的亲和能力差异,以及人体对恶性疟原虫海南株HN(1)、(2)VAR2CSA不同DBL区的免疫应答差异。方法根据DBL区序列设计3对引物,PC... 目的克隆、表达恶性疟原虫海南株HN(2)var2csa基因DBL4、DBL5、DBL6区,通过ELISA方法比较其与硫酸软骨素A(CSA)的亲和能力差异,以及人体对恶性疟原虫海南株HN(1)、(2)VAR2CSA不同DBL区的免疫应答差异。方法根据DBL区序列设计3对引物,PCR扩增目的片段,并与pMD18-T克隆载体连接。经PCR、酶切、测序鉴定正确后克隆至表达载体pET-22b,通过转化、诱导、纯化表达重组蛋白质,SDS-PAGE和Western blot检测。通过ELISA方法进行重组蛋白质与CSA的粘附实验以及与患者血清的免疫识别实验。结果酶切及DNA测序结果均表明表达载体构建成功,表达并纯化3个DBL区重组蛋白质,分子量与预计大小相同,Western blott检测目的蛋白质具有免疫反应性,ELISA显示不同蛋白浓度条件下DBL5区均明显比其它两个DBL区有更高的OD405值,并且DBL5区被妊娠相关疟疾病人血清识别水平显著高。结论 var2csa基因3个DBL区重组蛋白质表达成功,DBL5区与CSA的粘附能力较强,人体对DBL5区的免疫应答反应可能在抗病免疫过程中起到关键作用。 展开更多
关键词 妊娠相关疟疾 恶性疟原虫 var2csa基因 DBL 硫酸软骨素A
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VARS1基因突变致小头畸形-癫痫-皮质萎缩的神经发育障碍1例及分子遗传学分析 被引量:1
17
作者 童文佳 宋从磊 +3 位作者 段袁园 许愿愿 李敏 金丹群 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1367-1373,共7页
目的:探讨VARS1基因突变致小头畸形-癫痫-皮质萎缩的神经发育障碍临床特点及基因型。方法:回顾并随访2021年12月在安徽省儿童医院就诊的1例VARS1基因突变患者临床资料。以“VARS1”“VARS”“VALYL-tRNA synthetase”“缬氨酰-tRNA合成... 目的:探讨VARS1基因突变致小头畸形-癫痫-皮质萎缩的神经发育障碍临床特点及基因型。方法:回顾并随访2021年12月在安徽省儿童医院就诊的1例VARS1基因突变患者临床资料。以“VARS1”“VARS”“VALYL-tRNA synthetase”“缬氨酰-tRNA合成酶”为检索词检索在中文数据库(中国知网数据库、万方数据库)和PubMed数据库(建库至2022年2月)中检索遗传疾病相关文献,总结其临床表型及基因型。结果:本例患儿为3月龄女婴,出生后出现反复抽搐及喂养困难,并逐渐出现小头畸形、肌张力低下、全面发育落后等表现。头颅影像学检查结果示皮质萎缩、胼胝体发育不良、颅缝早闭。全外显子组测序结果提示VARS1基因新发纯合突变:第6号染色体第27号外显子存在c.3203C>T(p.Thr1068 Met)突变,分别来自其父母。患者先后规律服用苯巴比妥、左乙拉西坦、丙戊酸钠抗癫痫治疗,后抽搐发作为间隔数天发作1次。符合检索条件的文献共5篇,报道了19例患者,均表现为神经发育障碍。目前共发现20个VARS1基因突变位点。结论:对于出现小头畸形、癫痫、发育落后、皮质萎缩等症状神经发育障碍患者应考虑小头畸形-癫痫-皮质萎缩的神经发育障碍,基因测序对该疾病的确诊有重要作用。 展开更多
关键词 小头畸形 萎缩 癫痫 发育障碍 婴儿 突变 varS1基因
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The chimeric genes in the hybrid lineage of Carassius auratus cuvieri(♀)×Carassius auratus red var.(♂) 被引量:7
18
作者 Qingfeng Liu Yanhua Qi +11 位作者 Qiuli Liang Xiujuan Xu Fangzhou Hu Jing Wang Jun Xiao Shi Wang Wuhui Li Min Tao Qinbo Qin Rurong Zhao Zhanzhou Yao Shaojun Liu 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2018年第9期1079-1089,共11页
Hybridization can combine the genomes of different strains or species, which leads to changes of genotype and phenotype in the hybrids. In this study, we aimed to investigate the genetic variations of hybrids(WR-F1 an... Hybridization can combine the genomes of different strains or species, which leads to changes of genotype and phenotype in the hybrids. In this study, we aimed to investigate the genetic variations of hybrids(WR-F1 and WR-F2) derived from the intraspecific hybridization of white crucian carp(Carassius auratus cuvieri, WCC, ♀) and red crucian carp(Carassius auratus red var., RCC, ♂). Here, we compared the orthologous genes in the liver transcriptomes of hybrids with those of WCC and RCC, and classified the orthologous genes into eight gene patterns within three categories(chimera, mutant, and biparental origin genes).The results revealed 19.04%, 4.17% chimeric genes and 6.90%, 5.05% mutations of orthologous genes in WR-F1 and WR-F2 respectively. Seventeen of twenty-three characterized genes(77%) were confirmed to be the chimeras at the genomic DNA level.The GO classification discovered that some chimeric and mutant genes were related to metabolic process, immune system and developmental process in WR-F1. Our results provide the new evidence that hybridization can combine the parental genomes,leading to changes in the genotype of the resultant hybrids. This is the first report on the formation of chimeric genes from fish intraspecific hybridization, which is potentially interesting from the context of both evolution and the genetic breeding of fish. 展开更多
关键词 intraspecific hybridization chimeric genes transcriptomes sequence validation genetic variation
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重症疟疾相关分子机制的研究进展 被引量:3
19
作者 王飞 张青锋 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2015年第2期61-66,93,共7页
由恶性疟原虫感染引起的疟疾导致全球每年100余万病例死亡,其中以脑型疟为代表的重症疟疾是引起疟疾患者死亡的主要原因.目前在临床上对重症疟疾的诊断、病理学分析以及治疗策略方面已比较成熟,但是对重症疟疾发生和发展过程中涉及的分... 由恶性疟原虫感染引起的疟疾导致全球每年100余万病例死亡,其中以脑型疟为代表的重症疟疾是引起疟疾患者死亡的主要原因.目前在临床上对重症疟疾的诊断、病理学分析以及治疗策略方面已比较成熟,但是对重症疟疾发生和发展过程中涉及的分子机制尚未完全清楚.该文对重症疟疾相关的关键分子及其调控机制的研究进展作一综述. 展开更多
关键词 凶险型疟疾 var基因家族 恶性疟原虫红细胞表面蛋白-1
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恶性疟原虫免疫逃避的表观遗传调控 被引量:1
20
作者 张旭 江陆斌 《中国科学基金》 CSSCI CSCD 北大核心 2014年第3期204-205,共2页
疟疾是威胁人类健康最为严重的三大传染病之一,其中最严重的恶性疟原虫导致全球每年约100万人口的死亡。恶性疟原虫通过表面抗原相互排斥性表达的方式进行免疫逃避,其调控机制一直以来是疟疾工作者的研究重点。对恶性疟原虫抗原表达的... 疟疾是威胁人类健康最为严重的三大传染病之一,其中最严重的恶性疟原虫导致全球每年约100万人口的死亡。恶性疟原虫通过表面抗原相互排斥性表达的方式进行免疫逃避,其调控机制一直以来是疟疾工作者的研究重点。对恶性疟原虫抗原表达的调控主要来自于遗传因子和表观遗传因子两个方面。受国家自然科学基金委员会和中国科学院共同资助,中国科学院上海巴斯德研究所的江陆斌研究员及合作者通过共同努力。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 表观遗传调控 var基因 H3K36me3
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