Ena/VASP家族对人巨核细胞白血病Dami细胞中GPIb-IX复合物表达的影响

目的:探索Ena/VASP家族对人巨核细胞白血病Dami细胞中GPIb-IX复合物表达的影响。方法:设计合成针对Ena/VASP家族的Enah、EVL及VASP 3个基因的干扰siRNA,通过Lipofectamine^(TM) 2000转染人巨核细胞白血病Dami细胞株,培养48 h后收取细胞,利用qRT-PCR、Western blot和流式细胞术等方法检测巨核细胞中GPIb-IX复合物的表达情况。结果:构建了Ena/VASP家族基因干扰效果较佳的Dami细胞株。在敲减Enah、EVL及VASP基因表达后,在mRNA水平上,巨核细胞中GPIb-IX复合物的表达无明显变化;在总蛋白和膜表面蛋白水平上,敲减Enah后,巨核细胞中GPIb-IX复合物表达明显降低。结论:Enah基因可能对人巨核细胞白血病Dami细胞中GPIb-IX复合物的表达有影响,但是具体机制仍需要进一步探索。

大肠腺癌组织中VASP和PCNA的表达

目的研究大肠腺癌组织中VASP和PCNA的表达及临床意义。方法采用SP免疫组化染色法检测25例大肠腺癌组织中VASP及PCNA的表达。结果VASP阳性21例(84%),PCNA阳性18例(72%),两者均为阳性16例(64%),均为阴性2例(8%);VASP表达率和PCNA表达率之间有明显正相关性(P<0.05);VASP表达与PCNA表达均与大肠腺癌分化程度显著相关(P<0.05),在合并后的Duke's分期A、B和C、D期间有显著性差异(P<0.05)。结论VASP随着大肠腺癌分期、分级增加而表达增强的特性提示,VASP变化可能成为辅助判断大肠腺癌的转移和增殖特性的一个新指标。

稳定层流剪应力对内皮细胞骨架调节蛋白VASP表达的影响

为探讨生理强度的稳定层流剪应力对内皮细胞骨架 actin相关蛋白 VASP特征影响规律 ,我们采用胰蛋白酶消化法分离人脐静脉内皮细胞 (HU VECs) ,模拟体内流动环境 ,建立平行板流动腔模型。利用细胞图像分析系统和 AL EXA4 88-若丹明 -次毒蕈环肽双标记法 ,观察内皮细胞在稳态层流下形态、actin排列变化与 VASP分布变化之间的规律。采用 Western blot定量动态检测细胞内 VASP表达及磷酸化的水平。结果表明 ,内皮细胞在 10 dyn/cm2剪切作用后 ,随时间细胞逐渐延长 ,长轴趋于剪应力作用方向排列 ,细胞与静息态的细胞相比 ,细胞内骨架沿剪应力方向重组 ,与此同时 VASP表达增强 ,沿着 actin纤维呈点状分布 ,尤其集中在细胞膜下 actin末端区域 ;West-ern blot检测显示在剪切后 ,细胞内 VASP出现快速磷酸化 ,VASP总体表达量增加 ,2 h达高峰后逐渐恢复 ,8h后再次逐渐升高。以上结果提示血流动力学特性中剪应力引起了细胞胞质内骨架蛋白分子重组 ,血管内皮细胞形态改变 ,在此过程中 ,VASP发挥骨架调节蛋白的作用。

流式细胞术检测血小板VASP磷酸化评价氯吡格雷疗效

目的观察血小板血管扩张剂刺激磷蛋白(vasodilator-stimulated phosphoprotein,VASP)的磷酸化程度检测对氯吡格雷疗效的评价作用。方法15例健康志愿者不予任何药物干预,20例稳定性心绞痛患者仅予阿司匹林抗血小板治疗,33例急性冠脉综合征患者给予氯吡格雷、阿司匹林和肝素等标准抗血小板治疗。在入选时和冠心病患者抗血小板治疗后第7天分别行流式细胞术检测血小板VASP磷酸化程度并据此计算出血小板反应性指数(PRI)。结果入选时健康志愿者、稳定性心绞痛患者和急性冠脉综合征患者PRI均匀同质总体均数(76.90%±5.10%),范围(65.70%～92.10%),抗血小板治疗7天后稳定性心绞痛患者PRI无明显变化(75.64%±4.39%vs74.82%±3.90%P>0.05),急性冠脉综合征患者PRI明显降低(77.52%±5.60%vs.57.05%±13.69%,P<0.001=但分布明显离散(17.80%～80.10%),9例急性冠脉综合征患者(27%)PRI无明显下降且高于治疗前均数-2倍标准差。PRI下降与氯吡格雷相关(r=0.7661,P<0.001)。结论①流式细胞术检测血小板VASP磷酸化程度能特异性评价氯吡格雷疗效;②急性冠脉综合征患者常规抗血小板治疗后近30%患者对氯吡格雷反应低下。

应用VASP分析含氧碳化硅的拉伸性能

利用VASP模拟了含氧碳化硅晶体的理想拉伸过程,研究间隙位氧原子和替换位氧原子对碳化硅机械性能的影响。研究发现掺氧碳化硅的应力-应变曲线在峰值之后出现突然下降,说明含氧碳化硅的机械性能发生了变化。同时还分析了不同掺氧方式碳化硅模型的拉伸强度和杨氏模量,结果显示,含氧碳化硅的拉伸强度和杨氏模量均有不同程度的减弱。

用VASP的Pseudopotential和Projectoraugmented-wave方法计算Fe,Co和Ni的bcc,fcc和hcp结构磁性的比较

应用Pseudopotential(PP)和Projector augmented-wave(PAW)方法分别计算Fe,Co,Ni的bcc,fcc和hcp三种晶体结构时的晶格常数,原子磁矩和总能量以及它们的关系。并对所得的结果进行了比较,得出了在进行有关磁性材料的结构和磁性方面的计算时,使用PAW方法比使用PP方法更可靠的结论,并指出了Fe,Co,Ni的bce,fcc,hcp这三种结构与磁性的关系。

VASP在切应力诱导的内皮细胞骨架重排中的变化

目的探讨不同强度的稳定层流切应力对内皮细胞骨架肌动蛋白相关蛋白VASP表达、磷酸化和分布影响规律及其机制。方法采用平行板流动腔模型,刺激培养HUVECs。免疫荧光双标显示层流下细胞中肌动蛋白重排与VASP分布变化之间的规律。RTPCR检测VASPmRNA表达;Westernblot监测VASP表达及磷酸化水平。结果10dyn/cm2剪切24h后,细胞延长、长轴重排、形成顺流场排列的粗大肌动蛋白纤维丝;VASP沿肌动蛋白纤维分布,在其末端汇聚成明显的点状;10dyn/cm2剪切1h诱导VASPmRNA表达增加;24h内VASP反复磷酸化、总表达量增加2h达高峰后恢复,8h后再次升高;cAMP抑制剂H89显著抑制切应力诱导VASP表达增加及磷酸化。结论切应力通过cAMP/cAK途径磷酸化VASP,发挥骨架调节蛋白作用,介导血液流动引起的内皮细胞骨架重组、形态改变。

OpenMPI环境下的VASP软件的并行与进程

VASP是材料微观物性模拟的重要软件,并行性能优良,其中矩阵对角化在其运算过程中占据大量时间。在HPC作业调度下,VASP并行的进程分配表现单节点和跨节点的差异。通过对MPI并行的节点内和节点间进程、EDDIAG和RMM-DIIS运行时间分析,明确了VASP程序并行中,矩阵对角化的重要性和OpenMPI对矩阵对角化并行的作用。并编写了一个通讯优化的矩阵对角化程序,通过测试并行程序托比串行的马斯算法表现出强大的可扩展性,基于OpenMPI的并行程序能够极大提高对角化的并行效率,但其并行度、通讯代价与计算规模之间的关系需要进一步研究。

miR-193a-5p靶向VASP干扰PI3K/AKT信号通路抑制胃癌细胞增殖和诱导细胞凋亡的机制研究

目的分析miR-193a-5p影响胃癌细胞增殖和凋亡的具体作用机制。方法采用RT-qPCR和Western blot法检测60例胃癌组织、癌旁组织和细胞中miR-193a-5p和VASP蛋白的表达;采用CCK-8法和流式细胞术检测miR-193a-5p和VASP对胃癌细胞BGC-823和SGC7901增殖和凋亡的影响;双荧光素酶报告基因实验检测VASP与miR-193a-5p间的靶向作用关系;Western blot法检测miR-193a-5p对PI3K/AKT信号通路的影响。结果在胃癌组织和胃癌细胞BGC-823和SGC7901中,miR-193a-5p表达显著降低,而VASP表达则显著上调;miR-193a-5p过表达或敲低VASP可抑制胃癌细胞的增殖并诱导细胞凋亡,与沉默miR-193a-5p或VASP过表达结果相反;双荧光素酶报告基因实验证实VASP是miR-193a-5p的靶基因,且miR-193a-5p可调控VASP表达;miR-193a-5p过表达可干扰PI3K/AKT信号通路,而外源回补VASP则可部分逆转miR-193a-5p对PI3K/AKT信号通路活性的抑制作用。结论miR-193a-5p通过靶向VASP干扰PI3K/AKT信号通路,进而抑制胃癌细胞增殖和诱导细胞凋亡。

润肺解毒汤加减对冠心病心绞痛气滞血瘀证病人血清PAPP-A及VASP的影响

目的观察润肺解毒汤加减对冠心病心绞痛气滞血瘀证病人血清妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)及血管扩张刺激磷蛋白(VASP)的影响。方法选取2019年6月—2019年12月我院收治的120例冠心病心绞痛气滞血瘀证病人,采用随机数字表法分为对照组和观察组,各60例。对照组给予常规西医治疗,观察组在对照组基础上给予润肺解毒汤治疗,治疗1个月后评价两组临床疗效。比较治疗前后两组中医主症积分、血液流变学指标、心电图、血清PAPP-A、VASP表达水平变化,同时观察两组治疗期间不良反应发生情况。结果对照组总有效率为78.33%,观察组为91.67%,两组比较差异有统计学意义(χ^(2)=4.183,P=0.041)。治疗后,两组胸闷、胸痛评分、全血高切黏度、全血低切黏度、血小板聚集率和红细胞聚集指数、PAPP-A表达均降低,VASP表达均升高,且观察组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。治疗后,两组V1导联P波双向的负向波振幅及宽度乘积(PTF-V1)≤-0.04 mm·s和ST段异常比例均降低,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论润肺解毒汤加减辅助常规西医治疗可有效提高冠心病心绞痛气滞血瘀证病人临床疗效,改善胸痛、胸闷、血液流变学及心电图指标,降低血清PAPP-A水平,升高VASP表达水平,起稳定动脉粥样硬化斑块、抑制血小板聚集的作用。

Bcl-3与VASP在乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征的关系

目的:分析Bcl-3与VASP在乳腺癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法:利用BCIP数据库分析Bcl-3与VASP在乳腺癌中的表达情况及相关性;选取85对女性乳腺癌组织及癌旁组织,利用免疫组化技术检测Bcl-3与VASP表达情况,并分析两者表达相关性以及与乳腺癌临床病理学参数的关系。结果:BCIP数据库与免疫组化结果发现,Bcl-3与VASP在乳腺癌中表达异常升高,且呈正相关;Bcl-3表达水平与肿瘤大小(P=0.011)、淋巴结转移(P<0.001)及TNM分期(P<0.001)呈正相关,VASP表达与组织学分级和TNM分期呈正相关(P<0.001);另外,Bcl-3与VASP共阳性的发生与高级别(P=0.036)、有淋巴结转移(P<0.001)的TNM分期偏晚(P=0.003)的乳腺癌密切相关。结论:Bcl-3与VASP均在乳腺癌中异常高表达,且两者之间存在正相关;两者均可作为乳腺癌临床病理学诊断的潜在参考指标。

细胞松弛素D对稳定层流诱导的VASP改变的作用

探讨细胞松弛素D对稳态层流诱导的actin与VASP分布改变的影响.试验采用人脐静脉内皮细胞(HUVECs)暴露于稳定层流.荧光标记VASP和actin,Western blot检测VASP表达及磷酸化水平.结果表明细胞松弛素D预处理细胞暴露于10 dyn/cm2剪切力1 h后,actin不能沿顺流场方向产生重排,VASP表达减弱;VASP总体表达水平不仅无增加,且无磷酸化VASP出现.以上提示VASP通过反复磷酸/脱磷酸化介导剪切力引起的细胞骨架重排,进而细胞形态改变,这种调节作用的发挥有赖于细胞骨架的完整.

VASP基因RNA干扰慢病毒表达载体的构建与鉴定

目的构建靶向血管扩张刺激磷蛋白(VASP)基因RNA干扰慢病毒表达载体。方法将前期构建的pcDNA6.2-miRVASP进行测序鉴定,筛选阳性克隆。通过Gateway技术中的BP反应及LR反应,将携带miRVASP的表达框克隆至慢病毒目的载体pLenti6/V5-DEST,构建靶向VASP基因的RNA干扰慢病毒表达载体pLenti6/V5-miRVASP;接着将其与慢病毒包装混合物共转染293FT细胞,收集病毒颗粒,侵染胃癌BGC-823细胞。结果慢病毒表达载体测序结果表明,构建的载体与预期完全一致。用收集的携带miRVASP表达框的慢病毒颗粒侵染BGC-823细胞,荧光显微镜下可见多量细胞表达强绿色荧光,证明包装产生的慢病毒颗粒能侵染BGC-823细胞。结论成功构建了靶向VASP基因的RNA干扰慢病毒表达载体,并包装产生慢病毒颗粒原液,成功侵染BGC-823细胞,为进一步在体内实验中研究VASP在胃癌侵袭转移中的作用奠定了基础。

UMTS环境下VASP安全计费问题的研究

2G和3G的一个重大区别就是VASP(Value-Added Service Provider,增值服务提供商)的大量出现。该文介绍了一个适用于 UMTS环境、对VASP实现安全计费的模型及其协议。介绍了协议如何实现,以获得灵活、高效和不可抵赖的计费。最后还分析了协议的一些突出特点,列举出协议中的一些问题并给出了可能解决方法。

VASP信号分子与大肠癌的关系

大肠癌发生发展与GCC/PKG/VASP、PKA/VASP等信号通路有关,VASP作为其中的一个重要的信号分子,在大肠癌的凋亡、侵袭转移、血管生成等过程中起到了重要作用.就VASP信号分子及相关的信号通路在大肠癌发生发展中的作用及其潜在临床意义进行综述.