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血管结构异常的先天性心脏病患儿中Vav2基因突变的筛查和功能分析 被引量:1
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作者 陈颖慧 冯奕源 +3 位作者 冯炜琦 吴逸卓 鲁亚南 于昱 《心血管病学进展》 CAS 2023年第8期757-763,共7页
目的通过全外显子组测序筛查血管结构异常类先天性心脏病(CHD)致病候选基因Vav2的新发突变c.701C>T:p.P234L,探究Vav2及其新发罕见突变对内皮细胞功能的影响,探索CHD发生的可能分子机制。方法分析117例血管结构异常类CHD患儿及200例... 目的通过全外显子组测序筛查血管结构异常类先天性心脏病(CHD)致病候选基因Vav2的新发突变c.701C>T:p.P234L,探究Vav2及其新发罕见突变对内皮细胞功能的影响,探索CHD发生的可能分子机制。方法分析117例血管结构异常类CHD患儿及200例正常儿童的外周血全外显子组测序数据筛查Vav2突变。构建Vav2野生型及突变型表达质粒,转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC),通过qRT-PCR和Western blot检测Vav2、下游Rac1 mRNA和蛋白的表达水平;通过CCK-8、划痕试验和成管实验检测Vav2及突变对HUVEC增殖、迁移和成管能力的影响。结果在血管结构异常类CHD患儿中发现的Vav2罕见突变c.701C>T:p.P234L,在对照组中未出现且从未被报道。与野生型对比,P234L突变能降低Vav2蛋白表达,CCK-8、划痕试验和成管实验发现该突变影响Vav2促进HUVEC增殖、迁移和成管等血管生成相关的功能,但该突变不影响下游Rac1本底mRNA和蛋白表达。结论Vav2的错义突变影响Vav2蛋白表达,进而损害Vav2在HUVEC中促进增殖、迁移和成管等血管生成相关的功能,可能是影响下游Rac1激活而非本底表达导致的。Vav2是血管发育过程的关键分子,可能参与调控血管结构异常类CHD发生,P234L突变导致Vav2功能受损,进一步提供了Vav2在血管结构异常类CHD中可能的致病分子机制。 展开更多
关键词 血管发育 血管结构异常 先天性心脏病 vav2 错义突变 人脐静脉内皮细胞
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VAV2基因多态性与原发性开角型青光眼的相关性研究 被引量:1
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作者 王晶 黄璐琳 +1 位作者 林婴 杨正林 《实用医院临床杂志》 2020年第3期1-4,共4页
目的探讨西南地区汉族人群原发性开角型青光眼(primary open-angle glaucoma,POAG)与VAV2基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点rs7852459和rs2156323的关联性。方法采用病例-对照研究,选择中国西南地区的病例组1... 目的探讨西南地区汉族人群原发性开角型青光眼(primary open-angle glaucoma,POAG)与VAV2基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点rs7852459和rs2156323的关联性。方法采用病例-对照研究,选择中国西南地区的病例组1021例和对照组1012例,通过Sequenom MassARRAY方法基因分型VAV2基因关联位点,进一步Meta分析验证其与青光眼易感的关联性。结果VAV2基因的SNP位点rs7852459与POAG显著相关(P<0.05,OR=1.46),另一个SNP位点rs2156323与POAG无相关性(P=0.224,OR=0.93)。结论本次西南地区的病例对照样本中VAV2基因SNP位点rs7852459与POAG显著相关。提示该基因在POAG的发生发展的致病机制值得进一步探索。 展开更多
关键词 vav2基因 原发性开角型青光眼 单核苷酸多态性 rs7852459 rs2156323
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VAV2蛋白DH结构域与CDC42蛋白相互作用的亲和力和热力学参数研究
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作者 何诗雨 串俊兰 杨正林 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1492-1496,共5页
目的:利用等温滴定量热技术研究VAV2蛋白的DH结构域(VAV2-DH)与CDC42的相互作用。方法 :首先分别将VAV2-DH和CDC42蛋白的编码基因克隆至pGEX-6p-1和pET28a载体上,构建VAV2-DH和CDC42蛋白的重组表达载体。再将重组表达载体转入大肠杆菌... 目的:利用等温滴定量热技术研究VAV2蛋白的DH结构域(VAV2-DH)与CDC42的相互作用。方法 :首先分别将VAV2-DH和CDC42蛋白的编码基因克隆至pGEX-6p-1和pET28a载体上,构建VAV2-DH和CDC42蛋白的重组表达载体。再将重组表达载体转入大肠杆菌中诱导表达蛋白,并亲和层析、凝胶过滤层析纯化得到VAV2-DH和CDC42蛋白,最后利用鸟嘌呤核苷酸交换试验来验证VAV2-DH的鸟苷酸交换活性,并采用等温滴定量热技术检测这2种蛋白质相互作用的亲和力和热力学参数。结果:VAV2-DH和CDC42蛋白的平衡解离常数K_(D)=(11.44±2.12)μmol/L,其中摩尔结合焓DH=(-224.33±95.48) kJ/mol、-TDS=(195.97±95.95) kJ/mol、吉布斯自由能DG=(-28.30±0.49) kJ/mol。结论:VAV2-DH和CDC42蛋白属于中等强度的相互作用,是一个焓驱动的结合过程。 展开更多
关键词 vav2 CDC42 鸟嘌呤核苷酸交换因子 蛋白相互作用 等温滴定量热法
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ARAP3-VAV2新结合方式鉴定与功能分析
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作者 徐光生 许文娟 +1 位作者 宋雪燕 王峰松 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第1期27-32,共6页
目的探索腺苷二磷酸糖基化因子6的鸟苷三磷酸酶激活蛋白3(ARAP3)与VAV鸟苷交换因子2(VAV2)新的作用方式及可能的生理功能。方法通过构建VAV2和ARAP3的突变体,在人子宫颈癌细胞(HeLa细胞)中共转VAV2的野生型和APAP3的突变体或者在人胚胎... 目的探索腺苷二磷酸糖基化因子6的鸟苷三磷酸酶激活蛋白3(ARAP3)与VAV鸟苷交换因子2(VAV2)新的作用方式及可能的生理功能。方法通过构建VAV2和ARAP3的突变体,在人子宫颈癌细胞(HeLa细胞)中共转VAV2的野生型和APAP3的突变体或者在人胚胎肾细胞(HEK-293T细胞)中共转ARAP3的野生型和VAV2的突变体,免疫共沉淀揭示二者的相互作用方式;在HeLa细胞中分别过表达VAV2和ARAP3野生型或突变体,荧光标记实验观察它们对纤维状肌动蛋白(F-actin)的调控作用。结果除了肉瘤基因同源2(SH2)结构域以外,VAV2的N端(1-660氨基酸)区域亦能介导其与ARAP3的相互作用,HeLa细胞中过表达VAV2和ARAP3均能影响细胞内F-actin的形成。结论 VAV2多个结构域均能介导其与ARAP3相互作用,两者之间的相互作用可能是促进大鼠肉瘤同源癌基因A(Rho A)活性的动态变化或循环,从而调节细胞内F-actin动态性以及肿瘤细胞的迁移和侵染能力。 展开更多
关键词 ARAP3 vav2 磷酸化 F-ACTIN
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Molecular cloning,expression pattern and phylogenetic analysis of Guanine nucleotide exchange factor Vav2 in lamprey,Lampetra japonica
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作者 HAN Yinglun LI Jun +5 位作者 XU Lei MA Qinghua GOU Meng PANG Yue LIU Xin LI Qingwei 《Acta Oceanologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2017年第12期24-30,共7页
The Guanine nucleotide exchange factor Vav2(Vav2) is a member of the Vav family that serves as an important regulators for the Rho family of Ras-related GTPases. In the current study, an ortholog(Lj-Vav2) of Vav2 ... The Guanine nucleotide exchange factor Vav2(Vav2) is a member of the Vav family that serves as an important regulators for the Rho family of Ras-related GTPases. In the current study, an ortholog(Lj-Vav2) of Vav2 was identified in the lamprey(Lampetra japonica). To elucidate the phylogenetic relationship of Vav2, the metazoan genome databases were analyzed to mine the ortholog of Vav. It was found that Vav2 genes were only existed in vertebrates and Lj-Vav2 was the original one found in agnathans. The evolutionary dynamics of conserved motifs of Vav2 were explored using combined amino acid sequence as markers, and it is revealed that the Calponin homology(CH) domain, Dbl-homologous(DH) domain, Pleckstrin homology(PH) domain, Cysteine-rich(C1)domains, Src homology 3(SH3) domains and Src homology 2(SH2) domain were conserved throughout the Vav2 gene family in vertebrates during gene evolution. Relative quantitative real-time PCR analysis showed that the LjVav2 was distributed in the heart, kidney, supraneural myeloid body, liver, gill and lymphocyte-like cells. The LjVav2 was found to be expressed in these tissues, and the level of which was upregulated in lymphocyte-like cells after the animal was stimulated with LPS. These results indicated that the Lj-Vav2 might be involved in the immune response of lymphocyte-like cells in lamprey. Meanwhile, our findings provided a foundation for further investigation of the function of Lj-Vav2 in the primary vertebrate. 展开更多
关键词 guanine nucleotide exchange factor vav2 Lampetra japonica phylogenetic relationship molecular cloning
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中国汉族人群中Vav2基因和Vav3基因多态性与原发性闭角型青光眼之间关系的研究
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作者 高小劲 李平华 《世界科技研究与发展》 CSCD 2012年第4期688-691,共4页
目的本实验的目的是研究Vav2和Vav3基因多态性与中国汉族人群中原发性闭角型青光眼(Primary angle-closure glaucoma,PACG)的遗传性是否有联系。方法211名原发性闭角型青光眼患者和206名性别和种族匹配的健康对照者纳入到本病例对照研... 目的本实验的目的是研究Vav2和Vav3基因多态性与中国汉族人群中原发性闭角型青光眼(Primary angle-closure glaucoma,PACG)的遗传性是否有联系。方法211名原发性闭角型青光眼患者和206名性别和种族匹配的健康对照者纳入到本病例对照研究中。2个单核苷酸多态(the singk nucleotide polymorphisms,SNPs)rs2156323(Vav2)和rs2801219(Vav3)的基因分型用聚合酶链反应的限制性片段长度多态性分析(polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)。这两个基因位点的多态性与PACG遗传性之间的关系用卡方检验来评价。结果rs2156323(Vav2)和rs2801219(Vav3)的基因频率在所有参与者中均没有偏离哈迪-温伯格平衡(Hardy-Weinberg Equilibrium,HWE,p>0.05)。该两个位点的等位基因频率和基因型频率的分布在PACG患者和正常对照者之间均没有差异。结论本研究的结果显示rs2156323和rs2801219可能不是中国汉族PACC的易感基因位点,Vav2和Vav3基因可能不是中国汉族PACG患者的易感基因。 展开更多
关键词 vav2 Vav3 PACG 基因多态性
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VAV家族在膀胱尿路上皮癌中的表达及其与预后的关系
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作者 黄翔 蔡宏佳 张能 《现代医药卫生》 2024年第1期10-13,19,共5页
目的研究VAV家族(VAV1、VAV2、VAV3)在膀胱尿路上皮癌中的表达情况,分析VAV1、VAV2、VAV3与膀胱尿路上皮癌患者预后的关系。方法通过TCGA数据库下载膀胱尿路上皮癌及正常膀胱尿路上皮组织的数据,使用R语言提取数据后进行分析,获取VAV1、... 目的研究VAV家族(VAV1、VAV2、VAV3)在膀胱尿路上皮癌中的表达情况,分析VAV1、VAV2、VAV3与膀胱尿路上皮癌患者预后的关系。方法通过TCGA数据库下载膀胱尿路上皮癌及正常膀胱尿路上皮组织的数据,使用R语言提取数据后进行分析,获取VAV1、VAV2、VAV3在膀胱尿路上皮癌及正常膀胱尿路上皮组织中的表达情况,以及根据患者结局绘制生存曲线图。进一步对在膀胱尿路上皮癌组织中进行免疫组织化学验证。结果VAV1在膀胱尿路上皮癌组织及正常膀胱尿路上皮组织中表达比较,差异无统计学意义(P>0.05),VAV2、VAV3在膀胱尿路上皮癌组织中表达高于正常膀胱尿路上皮组织,差异有统计学意义(P<0.05),与膀胱的分化程度无明显相关性(P>0.05)。VAV1、VAV2的表达与患者生存时间无明显相关性(P>0.05),VAV3表达越高,患者生存时间越短(P<0.0001)。结论VAV2、VAV3可能参与膀胱尿路上皮癌的变化进展,VAV3可能与患者不良预后有关。 展开更多
关键词 膀胱尿路上皮癌 VAV1 vav2 VAV3 预后
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VAVs基因家族在肝癌中的表达及临床意义
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作者 蔡慧欣 项思博 杨文军 《肝胆胰外科杂志》 CAS 2023年第6期366-373,共8页
目的探究VAVs家族基因在肝细胞癌(HCC)患者中的表达水平及其在预后中的临床价值,并基于阳性作用基因建立肝癌的预后预测模型。方法从肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中下载并提取342例HCC癌组织和50例癌旁组织中VAVs家族基因mRNA测序表达数... 目的探究VAVs家族基因在肝细胞癌(HCC)患者中的表达水平及其在预后中的临床价值,并基于阳性作用基因建立肝癌的预后预测模型。方法从肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中下载并提取342例HCC癌组织和50例癌旁组织中VAVs家族基因mRNA测序表达数据及其临床信息。比较TCGA中VAVs mRNA在HCC癌组织和癌旁组织中的表达差异,并比较温州医科大学附属第一医院20例HCC患者的癌组织及癌旁组织中VAVs蛋白的表达差异。根据VAVs mRNA表达量中位值分为高表达组(n=171)和低表达组(n=171),比较两组的临床病理特征差异,采用Kaplan-Meier法分析比较两组的生存差异。采用单因素和多因素Cox分析筛选HCC患者预后的危险因素。基于VAV2 mRNA构建HCC生存预后列线图模型,采用受试者工作特征(ROC)曲线及校正曲线来评估模型的预测准确性。结果对TCGA数据库分析显示,VAV2 mRNA在HCC癌组织中的表达量高于癌旁组织(P<0.05);本中心免疫组化结果表明,VAV2蛋白在HCC癌组织中的表达量高于癌旁组织(P<0.05)。TCGA数据库分析结果显示,VAV2 mRNA表达水平与HCC患者的性别、肝癌临床分期显著相关(P<0.05),在女性、肝癌临床分期中的Ⅲ期、T分期中的T3期的患者中表达上调(P<0.05)。VAV2 mRNA高表达组的生存时间显著短于VAV2低表达组(P<0.05)。Cox分析显示,VAV2 mRNA表达水平(HR=1.031,95%CI 1.009-1.054,P<0.05)和肝癌临床分期(HR=1.626,95%CI 1.083-2.442,P<0.05)是HCC患者预后的独立危险因素。基于VAV2 mRNA和肝癌临床分期建立的HCC患者生存预后列线图,C指数为0.731。患者1、2、3年ROC曲线下面积(AUC)分别为0.772、0.683、0.650,校准曲线图表明第1年实际观测值与预测值具有较好的一致性。结论VAV2 mRNA的高表达与HCC患者疾病发展及不良预后相关。基于VAV2和肝癌临床分期建立的列线图具有一定的区分度和准确度。 展开更多
关键词 肝癌 VAVs家族基因 肿瘤基因组图谱(TCGA) 预后模型 vav2 临床分期
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基因检测在原发性开角型青光眼早期诊断中的应用
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作者 曾瑾 冯月兰 常德斌 《中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生》 2023年第1期47-49,共3页
评价和分析在早期诊断中应用基因检测技术针对原发性开角型青光眼(primary open angle glaucoma,POAG)。方法 从在我院收治的POAG患者中随机抽取200例纳入本次研究样本,样本开始时间2020年9月,样本结束时间2022年9月,随机划分二组,组别... 评价和分析在早期诊断中应用基因检测技术针对原发性开角型青光眼(primary open angle glaucoma,POAG)。方法 从在我院收治的POAG患者中随机抽取200例纳入本次研究样本,样本开始时间2020年9月,样本结束时间2022年9月,随机划分二组,组别是对照组和观察组,每组均分100例患者。对不同组别的VAV2基因的SNP位点rs7852459基因型分布情况进行对比分析,针对观察组不同病理特征患者的VAV2基因的SNP位点rs7852459基因型分布情况进行比较分析。结果 不同年龄、青光眼家族史情况以及患有合并高血压情况的POAG患者VAV2基因的SNP位点rs7852459基因型分布比较存在差异性P<0.05,因此具有分析统计的价值。依据Hardy-Weinberg遗传平衡检验得知二组的基因型分布都符合,分析结果为P>0.05,其中观察组AA型50例,AG型32例,GG型18例,对照组AA型65例,AG型29例,GG型6例。和对照组向比较得知,观察组VAV2基因的SNP的位置点rs7852459中的GG和AG以及G等基因型频率较高,数据分析结果显示P<0.05。结论 VAV2基因中的SNP的位置点rs7852459的GG和G等位基因和POAG发病密切相关,可增加POAG发病风险。 展开更多
关键词 基因检测 原发性开角型青光眼 早期诊断 vav2基因
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