干扰CD326可抑制VCaP细胞雄激素受体表达并降低细胞的增殖、侵袭及迁移能力

目的干涉前列腺癌细胞系VCaP细胞的CD326的表达,观察其对雄激素受体(AR)、前列腺特异性抗原(PSA)的表达以及前列腺癌细胞表型的影响,明确CD326与雄激素抵抗性前列腺癌发生之间的相关性。方法构建CD326短发夹RNA(CD326shRNA)稳定感染的VCaP细胞株。Western blot法检测稳定感染细胞株中AR及PSA的水平变化,ELISA检测VCaP细胞培养上清中的PSA分泌水平。MTT法检测细胞增殖、末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记法(TUNEL)和Alexa Fluor488标记的膜联素Ⅴ/碘化丙锭(annexinⅤ-Alexa Fluor488/PI)双染法检测细胞凋亡、细胞划痕实验检测细胞迁移、TranswellTM实验检测细胞侵袭能力。结果下调VCaP前列腺癌细胞株中CD326表达后,VCaP细胞中AR及PSA的表达水平显著降低,细胞上清中PSA的分泌水平也显著降低,同时伴随细胞增殖、抗凋亡、侵袭以及迁移能力的显著降低。结论下调VCaP细胞CD326水平可降低AR的表达,使前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力降低。

VCAP方案治疗急性淋巴细胞白血病临床观察

目的：观察ＶＣＡＰ方案治疗急性淋巴细胞白血病疗效。方法：回顾性分析了１９９５年４月～１９９８年９月，４５例急性淋巴细胞白血病患者应用ＶＣＡＰ方案诱导化疗的疗效。分析患者的缓解率，生存期及药物的毒副作用。结果：急性淋巴细胞白血病４５例，完全缓解率８７％，总有效率９１％，１年生存率７０％，３年生存率５０％。结论：ＶＣＡＰ方案治疗急性淋巴细胞白血病疗效确定，毒副作用小，值得推广应用。

关于VCAP在酸性条件下发生水解生成乙醛的研究

本文通过采用气相色谱质谱(GCMS)顶空法实验,证明N-乙烯基己内酰胺(VCAP),在酸性条件下很容易发生水解反应,生成乙醛。

槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞增殖的作用

目的:观察槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞自噬的影响及对核纤层蛋白B;(Lamin B;)表达的调控作用,并探讨其在VCaP细胞增殖中发挥的作用。方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测0,2,4,6,8,10 g·L^(-1)槐耳清膏在不同时间下对人前列腺癌VCaP细胞的增殖抑制作用。采用吖啶橙染色法分析槐耳清膏给药对VCaP细胞中自噬溶酶体形成的影响。借助蛋白免疫印迹法(Western blot)检测槐耳清膏给药后细胞中与自噬密切相关的蛋白微管相关蛋白Ⅰ轻链3(LC3),自噬相关蛋白3(Atg3),自噬相关蛋白5(Atg5),自噬相关蛋白7(Atg7)的表达。采用CCK-8法检测槐耳清膏与自噬抑制剂(Bafilomycin A1)联合给药及槐耳清膏单独给药对细胞增殖的作用。通过Western blot检测槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞中Lamin B;表达的影响,并采用RNA干扰技术探究Lamin B;在槐耳抗人前列腺癌VCaP细胞增殖中的作用。结果:与空白组比较,槐耳清膏能抑制人前列腺癌VCaP细胞的增殖(P<0.01),且呈时间与浓度依赖性。槐耳清膏给药后可促进VCaP细胞中自噬溶酶体的生成。与空白组比较,槐耳清膏能上调VCaP细胞中与自噬进程密切相关的蛋白LC3-Ⅱ,Atg3,Atg5,Atg7表达水平(P<0.05),槐耳清膏能够诱导VCaP细胞自噬的发生。进一步研究发现抑制自噬能够降低人前列腺癌VCaP细胞对槐耳清膏的敏感性(P<0.05)。与空白组比较,槐耳清膏给药能够抑制人前列腺癌VCaP细胞中Lamin B;蛋白表达(P<0.01),下调Lamin B;蛋白表达,在一定程度上也能够减弱VCaP细胞对槐耳清膏的敏感性(P<0.01)。结论:自噬活化和Lamin B;表达下调可能参与了槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞的增殖抑制作用,能够为槐耳临床应用提供一定的理论基础。

二甲双胍抑制人前列腺癌细胞上皮间质转化及其作用机制

目的研究二甲双胍对前列腺癌Vcap细胞增殖、侵袭及上皮间质转化（EMT）的影响，初步探讨microRNA（miRNA）相关的作用机制。方法以PBS处理组作为对照，使用不同浓度二甲双胍（1～50mmol／L）处理前列腺癌Vcap细胞，MTS比色法检测细胞的增殖能力；流式细胞术分析二甲双胍对Vcap细胞周期分布的影响；划痕和侵袭小室实验分别检测5mm01／L二甲双胍和miR30a对细胞迁移和侵袭能力的作用；使用RT—PCR和Westernblotting测定5mmol／L二甲双胍对Vcap细胞上皮指标物（E—cadherin、B—catenin）和间质指标物（Vimentin、Snail）mRNA和蛋白表达水平的影响；使用RT—PCR检测miR30a、miRl43、miRl85、miRl96、miR205的表达水平变化。结果二甲双胍抑制前列腺癌Vcap细胞的增殖，且呈浓度和时间依赖性。5mmol／L二甲双胍明显影响Vcap细胞的周期分布并显著抑制Vcap细胞的迁移和侵袭能力。二甲双胍在mRNA和蛋白水平上，显著上调Vcap细胞中E—cadherin和[3-catenin的表达（P均〈0．05），下调Vimentin和N—cadherin的表达（P均〈0．05）。进一步的实验发现，二甲双胍显著上调milL30a的表达水平（P〈0．05），而后者可显著抑制Vcap细胞的增殖和EMT的发生。结论二甲双胍明显抑制前列腺癌Vcap细胞的增殖、侵袭能力和上皮间质转化的过程。该过程可能涉及二甲双胍对miR30a的表达的上调。