人类精子VDAC2基因启动子在小鼠GC-2spd细胞的克隆和报告基因载体构建

目的线粒体电压依赖性阴离子通道蛋白2(Voltage-dependent anion channel 2,VDAC2)是VDAC重要的家族成员,参与机体众多的生理活动和病理疾病的发生发展。本次研究目的主要是确定和验证人VDAC2基因启动子的活性,为进一步探究它的调控机制奠定基础。方法通过从正常人射出的精子中提取基因组DNA。利用软件预测启动子区,我们针对性设计三对引物并正确的扩增出来。将验证正确的启动子序列结合到质粒PDS psiCHECK-2中,转染到小鼠GC-2细胞中去。转染48h后,通过双荧光素酶报告基因系统检测预测片段的启动子活性。结果 VADC2基因上游-2000^+1000bp具有相对较高的活性。结论这是首次对人类精子中VDAC2基因启动子的确定和活性验证,为后续研究VDAC2基因在精子的发生发展以及弱精子症方面提供新的研究思路。