VD_(3)对高糖日粮饲养黄鳝存活率及糖代谢能力的影响

为研究VD_(3)对高糖饲料喂养下黄鳝存活率及糖代谢的影响,实验选取健康的黄鳝幼鱼[初始体重(17.13±0.08)g]为实验对象,随机分为3组,每组4个重复,每个重复60尾鱼,分别投喂正常糖水平、高糖水平和高糖水平添加2000 IU/kg维生素D_(3)(分别命名CON组、HC组和HCVD3组)的3种等氮等脂饲料,进行为期8周的养殖实验。结果显示,各实验组生长性能及体成分均无显著影响;HC组存活率(82.22%)显著下降,添加VD_(3)后,存活率(88.89%)显著增提高,且与CON组(90.42%)无显著差异。HCVD3组脏体指数和肥满度较HC组均显著上升。血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)含量在HC组达到最大值;血清甘油三酯(TG)含量在HCVD_(3)组达到最大值。肠道淀粉酶和胰蛋白酶的活性HC组显著低于其他各组,而胰蛋白酶活性显著高于其他各组。HC组黄鳝肝脏中糖原含量(124.45 mg/g)较CON组(99.55 mg/g)显著升高,己糖激酶(HK)和磷酸果糖激酶(PFK)活性也显著升高;HCVD3组肝糖原含量(89.44 mg/g)较HC组显著下降,且PFK活性显著高于HC组。肌肉PFK活性在HCVD3组达到最高值。HC组黄鳝肝脏和肠道过氧化氢酶(CAT)活性均显著低于CON组,添加VD3后,总超氧化物歧化酶(T-SOD)均显著升高,丙二醛(MDA)活性均显著降低。HCVD3组黄鳝肠道促炎细胞因子(IL-1β、MyD88)、抗炎细胞因子(IL-10)和肠道紧密连接蛋白基因(ZO-1、ZO-2、Claudin-12)相对表达量显著优于HC组。研究表明,在本实验条件下,高糖(35%)日粮会显著降低实验鱼的存活率、增加肝糖原积累、降低其抗氧化能力并破坏肠道健康;而高糖饲料中添加2000 IU/kg VD_(3)后,可通过增强鱼体抗氧化能力和免疫力改善肠道屏障功能,进而提高鱼体存活率;此外,高糖饲料中添加VD_(3)会增强鱼体对糖的利用能力。本研究可为黄鳝的糖代谢调控和人工饲料的配制提供基础理论依据和指导。

1,25(OH)_(2)VD_(3)对血管紧张素Ⅱ诱导的足细胞内质网应激的抑制作用

目的探讨1,25(OH)_(2)VD_(3)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的足细胞内质网应激的影响,为临床上应用骨化三醇治疗足细胞损伤产生的蛋白尿提供理论依据。方法体外培养小鼠足细胞系(MPC5),随机分为对照组、AngⅡ组(10^(-6)mol/L的AngⅡ)、1,25(OH)_(2)VD_(3)组[10^(-6)mmol/L的AngⅡ+10^(-8)mol/L的1,25(OH)_(2)VD_(3)]。各组均在给药处理6、12、18、24 h后收集细胞,分别应用实时定量PCR、免疫荧光技术检测不同时间点各组样本中葡萄糖调节蛋白(GRP78)及蛋白激酶样内质网激酶(PERK)的mRNA表达量和蛋白表达情况。结果与对照组比较,AngⅡ组GRP78、PERK mRNA表达量在各个时间点均显著增加(P<0.01)。与AngⅡ组比较,1,25(OH)_(2)VD_(3)组GRP78、PERK mRNA表达量在各个时间点均显著降低(P<0.01或<0.05),相应的GRP78、PERK蛋白表达均较低。AngⅡ组给药处理12 h后GRP78、PERK mRNA表达量较6 h mRNA表达量均显著增加(P<0.01);AngⅡ组给药处理18 h后GRP78、PERK mRNA表达量较12 h mRNA表达量均显著增加(P<0.01,P<0.05)。结论AngⅡ可以诱导足细胞发生内质网应激,其发生强度与药物作用时间有关,而1,25(OH)_(2)VD_(3)能通过抑制AngⅡ诱导的足细胞内质网应激,起到保护足细胞的作用。

rhGH联合VD_(3)滴剂辅助成长体操对矮小症患儿生长发育及25-(OH)D水平的干预作用探究

目的探讨重组人生长激素(rhGH)联合VD_(3)滴剂辅助成长体操对矮小症患儿生长发育及25-(OH)D水平的干预作用。方法选取2018年1月至2020年7月我院矮小症患儿66例,依据随机数表法分为研究组与对照组,每组33例。常规干预及成长体操基础上,对照组采取VD_(3)滴剂治疗,研究组在对照组基础上采取rhGH治疗。统计两组治疗前后生长情况、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、血糖指标、甲状腺功能指标(FT3、FT4、TSH)水平、不良反应发生率。结果治疗6个月、12个月后研究组生长速率、骨龄、身高高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗6个月、12个月后研究组血清IGF-1水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗6个月、12个月后两组FGIR、GLU水平与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05),且治疗后组间比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗6个月、12个月后两组FT3、FT4、TSH水平与治疗前间比较差异无统计学意义(P>0.05),且治疗后组间比较差异无统计学意义(P>0.05);研究组不良反应发生率(15.15%,5/33)与对照组(9.09%,3/33)差异无统计学意义(P>0.05);治疗后研究组25-(OH)D水平高于对照组。结论联合采取VD_(3)滴剂、成长体操及rhGH对矮小症患儿实施干预,可有效促进其生长发育,增加25-(OH)D含量,调节IGF-1水平,且对血糖及甲状腺功能影响小,不会增加不良反应发生风险,安全可靠。

羊复合预混合饲料中VA和VD_(3)的稳定性评价

为评估羊复合预混合饲料中VA和VD_(3)随贮存时间的稳定性,通过高效液相色谱法测定了羊复合预混合饲料不同贮存时间VA和VD_(3)的效价。结果表明,母羊、育肥羊复合预混合饲料在未额外添加维生素预混料的情况下,其本身VD_(3)含量可完全满足其营养标准需要量,分别超出标准7.72万IU/kg和6.46万IU/kg,而VA则不能满足其营养标准需要量,分别少于标准5.31万IU/kg和7.02万IU/kg。母羊复合预混合饲料中VA和VD_(3)含量贮存30 d时与生产日间差异不显著(P>0.05),贮存65 d时,VA和VD_(3)含量极显著低于生产日(P<0.01);育肥羊复合预混合饲料中VA和VD_(3)含量贮存56 d时与生产日间差异不显著(P>0.05),贮存100 d时,VA和VD_(3)含量极显著或显著低于生产日(P<0.01或P<0.05)。说明羊复合预混合饲料中VA和VD_(3)效价随着存贮时间的延长而逐渐衰减,适宜存贮时间母羊复合预混合饲料约30 d、育肥羊复合预混合饲料约56 d。

25-羟基维生素D_(3)对产蛋后期蛋鸡的蛋品质和输卵管炎症的影响

试验旨在比较蛋鸡产蛋后期日粮中添加高水平(125μg/kg)维生素D_(3)(VD_(3))、25-羟基维生素D_(3)(25-OH-D_(3))与普通水平(62.5μg/kg)VD_(3)对蛋品质、血清免疫球蛋白水平、输卵管黏膜形态和炎性细胞因子基因表达量的影响。采用单因素试验设计,将60周龄产蛋后期的罗曼灰蛋鸡1512只随机分为3个日粮处理组,每个处理12个重复,每个重复42只鸡。试验持续12周。对照组为基础日粮中添加普通水平(62.5μg/kg)的VD_(3),试验组分别为在基础日粮中添加高水平(125μg/kg)的VD_(3)或25-OH-D_(3)。结果表明:与对照组相比,第12周时蛋鸡25-OH-D_(3)组鸡蛋的蛋白高度、哈夫单位和粗蛋白含量都显著提高(P<0.05),25-OH-D_(3)组蛋鸡血清免疫球蛋白A、免疫球蛋白M和免疫球蛋白G含量显著提高(P<0.05),25-OH-D_(3)组输卵管黏膜的褶皱宽度、褶皱高度和上皮层厚度显著提高(P<0.05),VD_(3)组和25-OH-D_(3)组输卵管黏膜炎性细胞因子白介素1β、白介素8、肿瘤坏死因子的m RNA表达量显著降低(P<0.05)。综上所述,在日粮中添加125μg/kg 25-OH-D_(3)能提高产蛋后期蛋鸡的蛋品质、机体免疫功能,减缓输卵管炎症。

1,25-二羟维生素D_(3)通过糖酵解途径促进人乳腺癌MCF-7细胞凋亡

目的:探讨1,25-二羟维生素D_(3)(VD_(3))对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:取体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞,随机分为6组:对照组、2-脱氧葡萄糖(2-DG,葡萄糖抑制剂)组、1μmol/L VD_(3)组、10μmol/L VD_(3)组、2-DG+1μmol/L VD_(3)组和2-DG+10μmol/L VD_(3)组。药物干预6组细胞48 h后,以葡萄糖摄取测定试剂盒检测细胞的葡萄糖摄取量、ATP试剂盒检测细胞中ATP含量和乳酸试剂盒检测细胞的乳酸水平,WB法检测MCF-7细胞中细胞色素C(Cyt c)和凋亡相关蛋白(Bcl-2、BAX、PARP1、caspase9和caspase3)的表达水平。结果:与对照组比较,VD_(3)干预后,MCF-7细胞的凋亡率明显增加(P<0.05或P<0.01),同时细胞的葡萄糖摄取量、ATP含量及乳酸水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),Cyt c、BAX、PARP1、caspase9及caspase3蛋白表达量明显升高(均P<0.05),Bcl-2蛋白表达量降低(P<0.05或P<0.01);VD_(3)联合2-DG干预后,各组细胞检测指标的变化更为明显(P<0.05或P<0.01)。结论:VD_(3)可通过抑制人乳腺癌MCF-7细胞的糖酵解过程并以线粒体的Cyt c途径促进细胞凋亡。

1,25(OH)_(2)VD_(3)诱导培养兔骨髓细胞FOS蛋白产生的实验研究

目的 观察 1,2 5二羟维生素D3 [1,2 5 (OH) 2 VD3 ]对培养兔骨髓细胞产生立即早期基因c -fos的蛋白产物 (FOS蛋白 )的诱导作用。方法 在原代培养至第六代的兔骨髓细胞中加入含 5× 10 -5M/L 1,2 5 (OH) 2 VD3的培养液 ,继续培养 3小时后 ,固定标本 ,进行FOS免疫组化反应。结果 大部分细胞形态正常 ,胞核呈棕黄色 ,椭圆形 ,胞浆不着色 ,细胞轮廓清晰 ,表现为FOS免疫组织化学反应阳性。结论 1,2 5 (OH) 2 VD3 能够诱导兔骨髓细胞表达FOS蛋白 。

活性维生素D3通过VDR/mTOR途径调节高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖、纤维化和自噬

目的研究活性维生素D3(VD3)对高糖介导的系膜细胞增殖、纤维化及自噬水平的影响及其相关作用机制。方法体外培养HBZY-1大鼠肾小球系膜细胞,转染小干扰RNA(siRNA)沉默细胞中维生素D受体(VDR),反转录PCR和Western blot实验检测干扰效率;将培养系膜细胞分为正常葡萄糖培养组、高糖组、高糖联合VD3组、敲低VDR后高糖联合VD3组、高糖联合VD3和mTOR激活剂MHY1485组;噻唑蓝(MTT)法和乙炔基脱氧尿苷(EdU)法检测系膜细胞增殖,ELISA检测纤连蛋白(FN)、Ⅰ型胶原蛋白(Col1)和Ⅳ型胶原蛋白(Col4)的分泌水平,透射电镜检测各组系膜细胞自噬体数量变化,免疫荧光细胞化学染色检测系膜细胞中自噬标志分子微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达,Western blot法检测系膜细胞纤维化相关蛋白转化生长因子β1(TGF-β1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和P62蛋白的表达以及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)磷酸化水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值。结果转染si-VDR后HBZY-1细胞中VDR mRNA和蛋白表达水平明显下调;与正常糖组相比,高糖组、高糖联合VD3组、敲低VDR后高糖联合VD3组和高糖联合VD3和mTOR激活剂MHY1485组系膜细胞的增殖能力、细胞因子FN、Col1和Col4的表达水平均显著增加,且细胞中p-mTOR、TGF-β1、α-SMA、P62的蛋白表达水平均显著增加,而LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显降低,自噬体数量显著降低;其中高糖联合VD3组较高糖组、敲低VDR后高糖联合VD3组、高糖联合VD3和mTOR激活剂MHY1485组的上述检测指标的变化趋势明显降低,后三组无明显差异。结论抑制VDR的表达或提高mTOR活化水平能有效抵消活性VD3抑制高糖介导的系膜细胞增殖及纤维化水平增加和自噬水平降低的效应。

护理人员血清25-羟维生素D_(3)影响因素分析

[目的]探讨护理人员的血清25-羟维生素D3[25-(OH)VD3]浓度及影响因素.[方法]选取北京市某三级医院855名在职护理人员作为研究对象.调取护理人员血清25-(OH)VD3浓度体检数据,比较不同年龄、不同工作时间护理人员血清25-(OH)VD3浓度、不足率,探讨护理人员的血清25-(OH)VD3浓度影响因素及定期体检对护理人员血清25-(OH)VD3浓度的影响.[结果]护理人员血清25-(OH)VD3浓度为(16. 43±5. 91)ng/mL,不足率为75. 32%,缺乏率为44. 80%.不同年龄及工作时间护理人员血清25-(OH)VD3浓度差异有统计学意义(年龄:F=5. 031,P<0. 001;工作时间:F=4. 611,P=0. 010),不同年龄护理人员血清25-(OH)VD3浓度不足率差异有统计学意义(χ2=18. 395,P=0. 002).回归分析结果显示:≤27岁护理人员25-(OH)VD3浓度不足发生风险是≥39岁护理人员的1. 919倍,是28~31岁护理人员的1. 855倍.定期体检使护理人员血清25-(OH)VD3浓度不足率和缺乏率分别由82. 5%和69. 4%下降为72. 5%和44. 4%,差异有统计学意义(不足率:χ2=38. 408,P<0. 001;缺乏率:χ2=19. 355,P<0. 001).[结论]护理人员血清25-(OH)VD3浓度略高于同年龄其他人群.≤27岁护理人员血清25-(OH)VD3浓度不足率高于其他年龄护理人员,定期体检在一定程度上可改善护理人员血清25-(OH)VD3浓度不足状况.

不同剂量25羟基维生素D_(3)对断奶前犊牛生长性能、营养物质表观消化率、血浆代谢物及粪便菌群的影响

本试验旨在研究饲粮添加不同剂量25羟基维生素D_(3)[25(OH)VD_(3)]对断奶前犊牛生长性能、营养物质表观消化率、血浆代谢物及粪便菌群的影响。选取18头健康、体重[(40.68±1.20)kg]相近的新生荷斯坦犊牛,随机分为3个组,每组6头牛。对照组饲喂基础饲粮,不添加25(OH)VD_(3);试验组每头犊牛每天分别在基础饲粮中添加6000(低剂量组)和12000 IU(高剂量组)的25(OH)VD_(3)。试验期56 d。结果表明:1)与对照组相比,低剂量组和高剂量组体重和平均日增重显著提高(P<0.05),高剂量组体高显著提高(P<0.05),低剂量组和高剂量组粪便评分显著降低(P<0.05)。2)与对照组相比,低剂量组和高剂量组干物质表观消化率显著提高(P<0.05),高剂量组中性洗涤纤维(P=0.05)和钙表观消化率(P<0.05)显著提高。3)与对照组相比,低剂量组和高剂量组血浆25(OH)VD_(3)和钙含量显著提高(P<0.05),高剂量组血浆磷含量显著提高(P<0.05)。4)与对照组相比,低剂量组和高剂量组血浆白细胞介素-2含量显著降低(P<0.05)。5)与对照组相比,低剂量组和高剂量组粪便中毛螺菌科(Lachnospiraceae)和普雷沃式菌科(Prevotellaceae)相对丰度显著提高(P<0.05),粪便中鼠杆菌科(Muribaculaceae)、克里斯滕森菌科(Christensenellaceae)、螺旋体科(Spirochaetaceae)和未培养_细菌_o_柔膜菌纲_RF39(uncultured_bacterium_o_Mollicutes_RF39)相对丰度显著降低(P<0.05)。由此可见,饲粮添加25(OH)VD_(3)可以提高断奶前犊牛生长性能,促进营养物质消化吸收,降低炎症反应,改善粪便菌群,降低腹泻发生。

高效液相色谱法测定婴幼儿营养米粉中维生素A、D_(3)和E含量的不确定度评定

依据JF1059.1—2012《测量不确定度评定与表示》,建立高效液相色谱法同时测定婴幼儿营养米粉中维生素A、D_(3)和E含量不确定度的数学模型,对测量过程中的各不确定度来源进行逐层分析、量化和合成。当取样量为5.000 g时,样品中维生素A、D_(3)和E扩展不确定度为0.1884,0.0093,0.0067μg/g,测定含量为(9.2500±0.1884),(0.1140±0.0093),(0.1815±0.0067)μg/g。最终结果的不确定度主要是由标准溶液储备液配制、标准工作曲线拟合和回收率引起。

不同剂量25羟基维生素D_(3)对断奶前犊牛血液生化指标、抗氧化能力和免疫功能的影响

为研究不同剂量25羟基维生素D_(3)[25(OH)VD_(3)]对断奶前犊牛血液水平、抗氧化能力和免疫功能的影响,选取18头健康状况良好的新生荷斯坦犊牛,随机分成3组,每组6头进行为期56天的饲养试验。分为对照组[不添加25(OH)VD_(3)]、低剂量组[25(OH)VD_(3)添加量6000 IU/头·天]和高剂量组[25(OH)VD_(3)添加量12000 IU/头·天]。结果表明,与对照组相比,随着25(OH)VD_(3)添加剂量增加,血浆生长激素、胰岛素样生长因子-1、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、总抗氧化能力以及免疫球蛋白G(IgG)含量显著增加(P<0.05),而丙二醛含量随剂量增加而存在降低趋势(P=0.079)。与对照组和低剂量组相比,高剂量组血浆免疫球蛋白A(IgA)含量有增加趋势(P=0.059)。综上所述,断奶前犊牛饲喂高剂量25(OH)VD_(3)有利于促进体内生长激素和胰岛素样生长因子-1分泌,可提高犊牛抗氧化能力,增强免疫功能。

通过维生素D_(3)结合蛋白介导的溶血磷脂对人外周巨噬细胞的激活作用

目的：揭示溶血磷脂（ Ｌｙｓｏ Ｐｃ） 在人外周巨噬细胞激活中的作用。方法：用 Ｌｙｓｏ Ｐｃ 处理外周淋巴细胞（ 粘附细胞和非粘附细胞） 后加入维生素 Ｄ３ 结合蛋白（ Ｄ Ｂ Ｐ） ，在３７ ℃、含体积分数为０ ．０５ 的 Ｃ Ｏ２ 中孵育３ ｈ ，测上清液超氧阴离子（ Ｓ Ｏ Ｐ） 浓度。结果：用 Ｌｙｓｏ Ｐｃ 处理后 Ｓ Ｏ Ｐ 浓度明显增高（ Ｐ＜０ ．０１） ；未用 Ｌｙｓｏ Ｐｃ 处理或不加入 Ｄ Ｂ Ｐ， Ｓ Ｏ Ｐ 产生无明显升高（ Ｐ＞ ０ ．５） 。结论： Ｌｙｓｏ Ｐｃ 能通过 Ｄ Ｂ Ｐ 激活巨噬细胞，因此 Ｄ Ｂ Ｐ 是巨噬细胞激活因子前体。

女性致密性骨炎血清骨转换生化标志物水平变化研究

背景致密性骨炎(OCI)和其他疾病有时难以鉴别,探讨血清骨转换生化标志物可为OCI的鉴别诊断提供依据。目的探索女性OCI患者的血清骨转换生化标志物的水平变化及临床意义。方法回顾性选取2013年6月至2022年2月在北京积水潭医院门诊及住院诊断为OCI的61例女性患者作为观察组,年龄15~50岁,平均(33.8±6.6)岁,病程2周~15年。选择同期61例女性体检健康者作为对照组,年龄15~48岁,平均(35.6±7.6)岁。比较两组一般临床资料和血清骨转换生化标志物水平,并对血清骨转换生化标志物与病情相关指标进行相关性分析。结果观察组血清白蛋白(45.4±2.9)g/L低于对照组(46.5±2.8)g/L(t=2.190,P<0.05)。血清骨转换生化标志物比较结果显示,观察组血清1型胶原羧基末端肽β特殊序列(β-CTX)〔0.28(0.23,0.37)μg/L〕、N-端骨钙素(OC)〔13.1(11.2,16.2)μg/L〕、25-羟维生素D_(3)〔25-(OH)VD_(3)〕〔(14.1±5.1)μg/L〕低于对照组〔0.36(0.29,0.48)μg/L,15.6(13.7,17.3)μg/L,(17.5±6.6)μg/L〕(Z=-2.983、-3.255,t=3.081,P<0.05)。长病程亚组OC水平〔14.6(12.4,18.5)μg/L〕高于短病程亚组〔11.7(10.2,14.0)μg/L〕(Z=-2.407,P<0.05)。多孕亚组β-CTX〔0.25(0.22,0.32)μg/L〕、OC水平〔12.2(10.3,15.0)μg/L〕低于非多孕亚组〔0.33(0.26,0.44)μg/L、13.4(12.0,18.8)μg/L〕(Z=-2.486、-1.897,P<0.05)。相关性分析显示,观察组血清1型前胶原氨基端延长肽(tP1NP)与妊娠次数、生产次数均呈负相关(r_(s)=-0.276、-0.298,P<0.05),OC与体质指数(BMI)、视觉模拟评分法(VAS)评分、妊娠次数均呈负相关(r_(s)=-0.284、-0.374、-0.360,P<0.05),25-(OH)VD_(3)水平与BMI呈正相关(r_(s)=0.275,P<0.05)。结论女性OCI患者血清OC、β-CTX水平明显降低,可为鉴别其他疾病提供依据;血清OC水平可以反映OCI患者的严重程度,同时OC水平与患者妊娠次数相关;tP1NP与妊娠次数、生产次数相关。

维生素D_(3)羟化菌株的筛选及工艺优化

25(OH)VD_(3)和1α,25(OH)_(2)VD_(3)在临床上具有广泛的应用,其合成方法包括化学合成法与生物转化法.生物转化法相比化学合成法具有反应条件温和、反应专一性强、成本低等优点.为获取具有生物羟基化维生素D_(3)功能的微生物,通过唯一碳源平板法从土壤中分离得到一株具有转化维生素D_(3)生成25(OH)VD_(3)和1α,25(OH)_(2)VD_(3)能力的菌株1-18.经16S rDNA测序鉴定,菌株1-18为巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium),命名为巨大芽孢杆菌H-1.通过单因素法优化发酵工艺,确定最佳发酵条件为初始pH值7.5,添加6%(V/V)的甘油助溶底物,发酵6 h时投入底物维生素D_(3),接种量为2%(V/V).优化后25(OH)VD_(3)的浓度在发酵36 h时达到1433.90μg/L,1α,25(OH)_(2)VD_(3)的浓度在发酵60 h时达到811.05μg/L.本研究成功筛选到新的羟基化维生素D_(3)的菌株,并通过优化发酵条件缩短了发酵周期和提高了羟化产物的浓度.