哇巴因抑制钠泵β1亚单位和VE-cadherin减弱血管内皮细胞连接功能

目的探讨钠泵抑制剂哇巴因对血管内皮细胞连接的影响及机制。方法以人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为靶细胞,Hoechst33342/PI双荧光染色法观察哇巴因作用后细胞凋亡或坏死特征,透射电镜和光镜观察细胞形态结构变化。应用半定量聚合酶链反应检测钠泵α1亚单位、β1亚单位、VE-cadherin和SnailmRNA的表达。结果0.1μmol.L-1哇巴因作用HUVECs24～48h,细胞死亡以凋亡为主,10μmol·L-1哇巴因作用24h,引起细胞坏死;对照组细胞间的细胞连接数量多,结构清晰,而经哇巴因作用后,细胞连接丧失,细胞脱落。哇巴因作用HUVECs后,钠泵α1亚单位和Snail表达上调,β1亚单位和VE-cadherin表达下降,其改变均呈剂量和时间依赖性。结论哇巴因通过下调血管内皮细胞钠泵β1亚单位和VE-cadherin的表达使细胞连接功能减弱。

人参皂苷Rb3通过Neuregulin-1/ErbB信号通路对心肌梗死大鼠VE-cadherin,NRG-1,ErbB2,ErbB4表达的影响

目的观察人参皂苷Rb3通过Neuregulin-1/ErbB信号通路对心肌梗死大鼠VE-cadherin,NRG-1,Erb B2,Erb B4表达的影响。方法 60只大鼠随机分为Sham组、Model组、G-Rb3-L组(10 mg/kg)、G-Rb3-M组(20 mg/kg)、G-Rb3-H组(40 mg/kg)及阳性药物组(地尔硫卓20 mg/kg),每组各10只。造模后,G-Rb3-L组、G-Rb3-M组、G-Rb3-H组及阳性药物组给予相对的药物,Model组和Sham组大鼠给予等体积的生理盐水。HE、Masson染色分别观察心肌组织的病理变化与心肌纤维化程度;ELISA法检测血浆中的VE-cadherin的水平;Western blotting法检测心肌组织NRG-1、ErbB2和ErbB4蛋白的表达。结果与Sham组比较,Model组大鼠的心肌细胞炎症浸润及心肌纤维化程度严重,心肌梗死面积、VE-cadherin水平上升(P<0.05),NRG-1,Erb B2和Erb B4蛋白表达减少(P<0.05);与Model组比较,人参皂苷Rb3干预的大鼠的心肌细胞炎症浸润及心肌纤维化程度减轻,心肌梗死面积、VE-cadherin表达水平降低(P<0.05),NRG-1,Erb B2和Erb B4蛋白表达增加(P<0.05)。结论人参皂苷Rb3可通过调控Neuregulin-1/ErbB信号通路降低心肌梗死大鼠的心肌细胞的炎症及心肌纤维化程度,减少心肌梗死面积,减轻心肌损伤。

MCP-1、VE-cadherin与急性前循环脑梗死及其颈动脉粥样硬化关系的研究

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、血管内皮细胞钙粘蛋白(VE-cadherin)与急性前循环脑梗死及其颈动脉粥样硬化的关系。方法选取112例急性前循环脑梗死患者,根据颈动脉超声结果分内膜正常组、增厚组及斑块组,并按其颈部斑块性质分为强回声组、混合回声组及低回声组,49例健康体检者为对照组,比较脑梗死组与对照组、脑梗死各亚组间血清MCP-1、VE-cadherin的水平。结果脑梗死组血清MCP-1、VE-cadherin水平高于对照组;脑梗死颈动脉斑块组血清MCP-1、VE-cadherin水平较内膜正常组及内膜增厚组高;且以低回声斑块组升高明显。结论急性前循环脑梗死患者血清MCP-1、VE-cadherin水平升高;颈动脉粥样硬化斑块低回声组血清MCP-1、VE-cadherin水平升高明显。

血清ANGPTL4、VE-cadherin水平与急性脑梗死患者颈动脉易损斑块的关系

目的 分析血清人血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)、血管内皮细胞钙黏连蛋白(VE-cadherin)水平与急性脑梗死患者颈动脉斑块的关系。方法 选取120例急性脑梗死患者作为观察组,另选择120例行体检的健康志愿者作为对照组,比较两组以及不同斑块稳定性患者的ANGPTL4、VE-cadherin水平,分析血清ANGPTL4、VE-cadherin水平与急性脑梗死患者颈动脉易损斑块的关系。结果 观察组的ANGPTL4水平低于对照组,VE-cadherin水平高于对照组(P<0.05);斑块不稳定组的ANGPTL4水平低于斑块稳定组,VE-cadherin水平高于斑块稳定组(P<0.05);斑块不稳定组的内膜厚度、斑块面积高于斑块稳定组(P<0.05);相关性分析发现,ANGPTL4与内膜厚度以及斑块面积呈负相关,VE-cadherin与内膜厚度以及斑块面积呈正相关(P<0.05)。结论 血清ANGPTL4、VE-cadherin水平与急性脑梗死患者颈动脉易损斑块呈显著相关,可作为临床治疗的重要靶点。

清热利湿方及虎杖苷对SD大鼠肛旁创面肉芽组织血管通透性及Src、VE-cadherin细胞因子表达的动态影响

目的研究清热利湿外洗方(虎杖、蒲公英、苦参、黄柏)及虎杖苷对SD大鼠肛旁创面肉芽组织血管通透性及Src、VE-cadherin细胞因子表达的动态影响。方法以SD大鼠肛旁创面模型为研究对象,肉眼及电镜观察创面渗出、炎症及愈合情况;在术后第3、7、11天通过伊文氏蓝染色法观察创面毛细血管通透性情况;同时通过Elisa法检测创面肉芽组织Src、VE-cadherin含量。结果肉眼观察发现与生理盐水相比,清热利湿外洗方与虎杖苷均能更有效控制创面炎性渗出,促进创面愈合。造模后第3天清热利湿方组与虎杖苷组伊文氏蓝渗出情况比较差异无统计学意义(P>0.05),但二者渗出均少于生理盐水组(P<0.05);第7,11天3组伊文氏蓝渗出比较差异无统计学意义(P>0.05)。Elisa结果显示术后各阶段生理盐水组创面肉芽组织Src含量均最高(P<0.05);第3、7天清热利湿方组与虎杖苷组比较差异无统计学意义(P>0.05),术后第11天清热利湿方组Src含量高于虎杖苷组(P<0.05)。术后第3、7天各组肉芽组织中VE-cadherin浓度比较差异无统计学意义(P>0.05);术后第11天,生理盐水组VE-cadherin浓度低于其他2组(P<0.05),虎杖苷组VE-cadherin浓度低于清热利湿组(P<0.05)。结轮清热利湿方与虎杖苷可能通过抑制Src表达,调控Src/VEcadherin信号通路,进而降低血管通透性,控制创面炎性渗出,促进创面愈合。

Src/VE-cadherin信号通路在创面愈合中的研究进展

创面愈合包括连续而又相互重叠的3个阶段，即炎症期、肉芽组织形成期和瘢痕形成期。早期炎症期主要由单核、巨噬细胞和中性粒细胞等向伤处迁移并释放多种细胞因子。中期由成纤维细胞和新生毛细血管等形成肉芽组织，填补组织缺损，并由表皮细胞增殖、迁移重建上皮屏障。后期则主要由成纤维细胞分泌并沉积基质。目前研究认为[1]，生长因子参与调控创面愈合的全过程。生长因子通过与细胞膜上特定的高亲和性受体结合而启动其活性，然后通过信号通路而发挥作用。信号通路是创伤愈合修复研究中探索外界因素与内在因素联系的关键[2]。

小动脉硬化脑血管病危险因素分析及sTM、CD62P、VE-cadherin对其预后的预测

目的 分析小动脉硬化脑血管病的危险因素,及可溶性血栓调节蛋白(sTM)、P选择素(CD62P)、钙黏蛋白(VE-cadherin)对其预后的预测价值。方法 选择小动脉硬化脑血管病患者180例为观察组,根据预后分为预后不良组和预后良好组,另设50例健康者为对照组。检测各组血清sTM、VE-cadherin、CD62P血小板水平,分析其与预后的相关性,以及三者联合检测对预后的评估价值,分析小动脉硬化脑血管病的危险因素。结果 sTM、VE-cadherin、CD62P血小板水平观察组高于对照组,预后不良组高于预后良好组(P<0.05)。sTM、VE-cadherin、CD62P血小板水平与预后呈正相关(P<0.05);三者联合检测对预后的诊断效能高于单独检测(P<0.05)。sTM、VE-cadherin、CD62P血小板水平是小动脉硬化脑血管病的危险因素(P<0.05)。结论 sTM、VE-cadherin、CD62P是小动脉硬化脑血管病的危险因素,三者联合应用对其预后的预测价值较高。

VE-cadherin在烧伤早期创面加深中的表达

目的探讨VE-cadherin在烧伤早期创面加深中的表达。方法选择健康SD大鼠36只作为研究对象,随机抽取其中12只作为正常对照组,其余24只采用铜梳状烫伤大鼠模型,给予SD大鼠40 mg/kg的1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,于大鼠背部中线两侧0-5cm处皮肤,不施加压力,制成深Ⅱ°烫伤创面动物模型。伤后给予单层油纱布覆盖创面,观察伤后3 h创面情况大体瘀滞区面积,观察有无出血点、瘀斑形成等,有则视为坏死即为创面加深组(Ⅲ°),无则视为创面非加深组(Ⅱ°)。在6、12、24与48 h时间段各组创面相同部位取材进行HE染色;免疫组化分析VE-cadherin蛋白表达差异;WB检测创面下血管壁组织样本中的VE-cadherin蛋白的表达变化。结果共11只(加深组)大鼠出现创面加深,13只(非加深组)未加深,HE染色结果显示对照组各时间点皮肤组织排列整齐,非加深组烫伤伤创面有大量炎性细胞浸润、浆液及纤维素渗出,皮肤成纤维细胞数量的增加随着时间的延长开始修复。加深组创面见烫伤皮肤组织大量细胞变性、坏死,炎症细胞浸润,随着时间增加肉瘤组织变多,纤维束断裂,纤维化增生。免疫组化结果显示非加深组和加深组烫伤创面组皮肤组织VE-cadherin蛋白表达较对照组增加。WB检测显示在时间点6h、12h、24h、48h与对照组比较非加深烫伤组和加深烫伤组皮肤组织VE-cadherin蛋白表达显著增加,其中加深Ⅲ°烫伤组皮肤组织VE-cadherin蛋白表达高于非加深Ⅱ°烫伤组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 VE-cadherin的表达与烧伤早期创面加深存在一定关系,其可能成为判断烧伤早期创面加深的参考指标,具有一定的意义。

胸部撞击伤对声门紧闭和开放状态大鼠肺微血管VE-cadherin表达的影响

目的观察撞伤Wistar大鼠肺微血管内皮细胞间连接成分血管内皮-钙粘附蛋白(VE-cadherin)的表达,了解撞击伤后肺微血管通透性的改变。方法利用荧光素钠法检测撞击伤后声门紧闭和开放状态Wistar大鼠肺组织的微血管通透性,动态观察撞击伤对细胞间连接的特有成分VE-cadherin表达的影响。结果撞击侧(右肺)肺微血管通透性均较伤前显著增高,各组在伤后同一时相点的值与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),声门紧闭组荧光素钠的含量高于声门开放组,差异有统计学意义(P<0.01)。胸部撞击伤后大鼠肺微血管内皮细胞VE-cadherin的表达降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论声门紧闭状态下撞击伤后肺微血管通透性高于声门开放状态,VE-cadherin在撞击伤后肺微血管内皮细胞中的表达下调,使得内皮细胞之间的连接疏松,通透性增加。

持续小剂量化疗对A549肺癌生长及VE-Cadherin的影响

目的检测不同剂量环磷酰胺化疗后,荷A549肺腺癌裸鼠皮下肿瘤生长情况及肿瘤组织中VE-Cadherin的表达。方法右季肋部皮下注射A549细胞悬液,建立荷A549肺腺癌裸鼠模型,分为三组,分别给予持续小剂量(Low-Dose Metronomic,LDM)CTX(环磷酰胺)、最大耐受剂量(MaximumTolerable Dose,MTD)CTX和0.9%氯化钠溶液化疗,每周测量肿瘤体积,21天治疗结束取皮下肿瘤组织,以免疫组织化学SP法检测三组裸鼠皮下肿瘤组织中VE-Cadherin的表达,以RT-PCR法检测癌组织中VE-Cadherin基因含量。结果持续小剂量组肿瘤生长明显慢于大剂量组和对照组,VE-Cadherin表达及基因含量显著低于大剂量组和对照组(P<0.05)。结论持续小剂量化疗可以使癌组织中VE-Cadherin表达下调,抑制肿瘤血管生成,从而持续抑制肿瘤生长。

VE-cadherin在不同侵袭性能非小细胞肺癌细胞株的表达及沉默VE-cadherin对非小细胞肺癌细胞株侵袭、迁移的影响

目的:探讨VE-cadherin在不同侵袭性能非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞株的表达及沉默VEcadherin对NSCLC细胞株侵袭、迁移的影响。方法:通过定量PCR及Western blot检测VE-cadherin在高侵袭性能的NSCLC细胞株PG、中度侵袭性能的NSCLC细胞株H1299及低侵袭性能的NSCLC细胞株PA中mRNA及蛋白的表达;并通过RNA干扰沉默VE-cadherin的表达来探讨其对NSCLC细胞株PG侵袭、迁移能力的影响。结果:VE-cadherin在3种NSCLC细胞株中都有表达,且其mRNA及蛋白在3种细胞株中的表达强度依次为PG、H1299、PA,PG与H1299相比较,差异有统计学意义(P=0.000),PA与PG、H1299相比较,差异均具有统计学意义(P=0.000);Transwell小室基质侵袭实验结果显示,干扰组与对照组的侵袭细胞数分别为(34.33±3.06)个和(86.00±7.93)个,组间比较差异有统计学意义(P=0.000);划痕损伤实验结果显示,对照组与干扰转染组的细胞迁移距离相比,24 h内没有明显差异(P=0.825),而48、72 h内对照组明显高于干扰转染组,差异具有统计学意义(P=0.000)。结论:VE-cadherin可能参与NSCLC的侵袭和迁移,并在此过程中起重要作用;VE-cadherin可能会成为治疗NSCLC侵袭、血管生成和转移的又一新靶点。

Twist1、VE-cadherin和血管生成拟态在子宫内膜样腺癌侵袭转移中的作用及意义

目的探讨子宫内膜样腺癌中Twist1、VE-cadherin和血管生成拟态(VM)的表达以及与肿瘤侵袭转移的关系。方法采用免疫组化方法,结合组织芯片技术,检测124例子宫内膜样腺癌、28例不典型增生内膜、35例正常内膜组织中Twist1、VE-cadherin和VM的表达水平,分析三者与临床病理因素的关系及相关性。结果子宫内膜样腺癌组织中Twist1、VE-cadherin和VM的表达率分别为56.5%、48.4%、16.9%,与正常内膜和不典型增生内膜相比,差异均显著(P<0.01)。Twist1表达与病理分级、肌层浸润深度和淋巴结转移有关(P<0.05)。VE-cadherin和VM与肿瘤肌层浸润和淋巴结转移显著相关(P<0.01)。子宫内膜样腺癌中VE-cadherin表达分别与Twist1和VM呈正相关趋势(r=0.232,P=0.010;r=0.251,P=0.005)。结论 Twist1、VE-cadherin和VM参与子宫内膜样腺癌的发生、发展过程,三者联合检测可能对肿瘤的进展及预后判断有重要意义。

雷珠单抗对糖尿病视网膜病变患者手术前后血清VE-cadherin和bFGF的影响

目的:探究雷珠单抗对糖尿病视网膜病变患者手术前后血清中血管内皮钙粘蛋白(VE-cadherin)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的影响。方法:选取本院2018年3月至2019年5月收治的糖尿病视网膜病变患者85例作为研究对象,随机分为两组,研究组43例,对照组42例。其中对照组给予玻璃体切除术,研究组在对照组基础上配合玻璃体腔注射雷珠单抗治疗。观察两组手术情况、术后视力改善情况及血清中血管内皮生长因子(VEGF)、bFGF和VE-cadherin水平变化情况,并评估术后并发症发生率。结果:研究组患者手术时间与术中出血量均显著少于对照组(P<0.05),术后黄斑中心凹视网膜厚度明显小于对照组(P<0.05),视力改善率明显高于对照组(83.72%VS 57.14%,P<0.05);治疗后,两组患者血清VEGF、bFGF和VE-cadherin水平均较治疗前降低(P<0.05),且研究组患者血清VEGF、bFGF和VE-cadherin水平均明显低于对照组(P<0.05);此外,研究组治疗后术后并发症发生率为6.98%,明显低于对照组23.81%(P<0.05)。结论:切除术前玻璃体腔内注射雷珠单抗可优化手术环境,降低手术风险,有效改善视力,减少术后并发症,临床疗效显著,值得推广。

HIF-1α induces VE-cadherin expression and modulates vasculogenic mimicry in esophageal carcinoma cells

AIM: To investigate whether hypoxia inducible factor (HIF)-1&#x003b1; modulates vasculogenic mimicry (VM) by upregulating VE-cadherin expression in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC).

L-NAME对人脐静脉内皮细胞VE-cadherin表达的影响

目的探讨一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的eNOS、VE-cadherin蛋白表达的影响。方法 HUVEC传代培养并用CD31特异性抗体进行鉴定,实验分为对照组、0.1 mmol/L L-NAME组、1.0 mmol/L L-NAME组,运用MTT比色法检测L-NAME对HUVEC细胞活性的影响,并采用免疫荧光细胞化学法或Western blot检测实验各组HUVEC细胞的eNOS、VE-cadherin等蛋白的表达,以观察L-NAME对HUVEC的eNOS蛋白、VE-cadherin蛋白的影响。结果 95%以上传代后的细胞为CD31免疫阳性细胞。MTT比色法结果显示,随着L-NAME的浓度增加,HUVEC的细胞活力值逐渐减弱。免疫荧光细胞化学或Western blot结果显示,与对照组比较,0.1 mmol/L L-NAME组和1.0 mmol/L L-NAME组HUVEC中eNOS的表达减弱(P<0.01),并呈剂量依赖性降低;与对照组比较,0.1 mmol/L L-NAME组和1.0 mmol/L L-NAME组HUVEC中VE-cadherin的表达增强(P<0.01),呈剂量依赖性增加。结论 L-NAME能抑制HUVEC的eNOS表达和细胞活性,并影响细胞粘附连接的主要蛋白—VE-cadherin的表达。

携带人VE-cadherin基因的慢病毒载体的构建及其在Sup-B15白血病细胞株的表达

本研究旨在构建携带人血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)基因的重组慢病毒载体及探讨VE-cadherin蛋白在Sup-B15细胞中的表达。采用RT-PCR扩增人VE-cadherin基因并克隆至pCR-Blunt载体。将VE-cadherinDNA片段连入慢病毒转移质粒pLB,生成重组慢病毒质粒pLB-VEC。用三质粒共转染法包装慢病毒,重组慢病毒感染Sup-B15细胞,在光学显微镜下观察细胞状态,用流式细胞术及Western blot法鉴定VE-cadherin蛋白表达。结果表明,成功扩增出人VE-cadherinDNA片段并克隆至pCR-Blunt载体;亚克隆构建慢病毒载体pLB-VEC。经三质粒包装系统包装后获得高滴度慢病毒颗粒,体外可有效感染Sup-B15细胞。感染后细胞发生明显的形态改变,流式细胞术及Western blot检测到VE-cadherin蛋白表达。结论 :成功构建携带人VE-cadherin基因的慢病毒载体pLB-VEC,并可在Sup-B15白血病细胞株获得有效的表达。

冠心病病人血清VE-cadherin与hs-CRP浓度变化及意义

目的探讨冠心病(CHD)病人血清血管内皮细胞钙黏蛋白(VE-cadherin)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)的变化及其意义。方法采用酶联免疫吸附法,测定20例急性心肌梗死(AMI)病人、20例不稳定型心绞痛(UAP)病人、20例稳定型心绞痛(SAP)病人血清VE-cadherin、hs-CRP浓度的变化,并与20例健康体检者进行比较。结果 CHD病人血清VE-cadherin、hs-CRP浓度明显升高,与对照组比较差异有显著性(t=6.02、6.27,P<0.01)。SAP组、UAP组和AMI组VE-cadherin和hs-CRP浓度依次升高,3组间比较,差异有显著性(F=35.66、36.12,q=4.56～9.83,P<0.01)。CHD病人血清VE-cadherin与hs-CRP浓度呈正相关(r=0.507,P<0.01)。AMI病人血清VE-cadherin、hs-CRP的ROC曲线下面积(AUCROC)分别为0.975、0.988,对AMI诊断的灵敏度和特异度分别为0.95、0.90和0.95、0.95;UAP病人的AUCROC分别为0.915和0.956,灵敏度和特异度分别为0.90、0.85和0.90、0.95;SAP病人的AUCROC分别为0.801、0.813。血清VE-cadherin、hs-CRP对于AMI、UAP病人有较高的诊断价值,且差异无统计学意义(u=0.357、0.195,P>0.05)。结论血清VE-cadherin和hs-CRP浓度的升高可能与冠状动脉病变程度相关,对CHD病变程度有较高的诊断价值。

VE-cadherin在肾脏疾病中的研究进展

最新统计数据显示全球肾脏病患者呈逐年上升趋势,保守估计约8%-16%的人口患有慢性肾脏病,现已成为不可忽视的公共卫生和社会问题,所以及时筛查、诊断、评估进展对延缓慢性肾脏病进展至终末期肾脏病具有重要的临床意义。血管内皮钙黏附蛋白（vascular endothelial catherin,VE-cadherin）是内皮细胞间黏附连接的重要组成部分,通过促进血管内皮细胞间的粘附作用及表达水平调节血管内皮屏障的通透性及白细胞的溢出。

盐酸戊乙奎醚调控血管生成素2/血管内皮钙黏蛋白(Ang2/VE-cadherin)通路减轻脂多糖诱导的大鼠肺损伤

目的 探究盐酸戊乙奎醚(PHCD)对脓毒症大鼠血管内皮损伤的影响及作用机制。方法 雄性SD大鼠50只随机分为对照组、脂多糖(LPS)诱导大鼠脓毒症组,低、中、高剂量PHCD(0.3、 1.0、 3.0)mg/kg组,每组各10只。对照组尾静脉注射生理盐水,其余各组大鼠尾静脉注射10 mg/kg脂多糖(LPS)制备脓毒症大鼠模型,模型成功后大鼠尾静脉注射(0.3、 1.0、 3.0)mg/kg PHCD。测定各组大鼠肺组织湿/干质量比(W/D)、 ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、 IL-6含量和大鼠血浆血管生成素2(Ang2)含量;HE染色观察肺组织病变情况;免疫组织化学染色观察右肺组织Ang2的表达,Western blot法检测肺组织Ang2、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)蛋白水平。结果 与对照组相比,模型组大鼠肺组织W/D以及BALF中IL-1β、 IL-6和TNF-α含量均显著增加,肺组织出现明显损伤,Ang2表达上调,VE-cadherin表达下调;与模型组相比,低、中、高剂量PHCD组大鼠肺组织W/D以及BALF中IL-1β、 IL-6和TNF-α含量均显著降低;肺组织损伤明显减轻,Ang2表达下调、 VE-cadherin表达上调。结论 PHCD可以通过调控Ang2/VE-cadherin通路,降低LPS诱导大鼠脓毒症肺部炎症,从而改善血管内皮损伤。