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人血管内皮生长因子基因转染原代成人皮肤成纤维细胞研究
被引量:
5
1
作者
周建大
陈道谨
+8 位作者
陈勇
李萍
李高峰
贺全勇
陈铁夫
朱颉
彭浩
夏昆
罗成群
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第12期1539-1541,共3页
目的 将人血管内皮生长因子 (hVEGF)基因导入原代离体成人皮肤成纤维细胞 ,验证转基因细胞分泌hVEGF情况 ,探讨成人自体细胞基因修饰后移植的可行性。方法 采用酶消化法获取成纤维细胞 ,以杜氏改良培养基 (DMEM )传代培养。以脂质体...
目的 将人血管内皮生长因子 (hVEGF)基因导入原代离体成人皮肤成纤维细胞 ,验证转基因细胞分泌hVEGF情况 ,探讨成人自体细胞基因修饰后移植的可行性。方法 采用酶消化法获取成纤维细胞 ,以杜氏改良培养基 (DMEM )传代培养。以脂质体转染法将pcDNA3 .1(+ ) /hVEGF12 1导入成纤维细胞 ,培养 48h后取细胞作逆转录 多聚酶链式反应 (RT PCR) ,上清行酶联免疫吸附反应 (ELISA)检测、MTT测定和Mile’s实验。结果 转基因细胞经RT PCR扩增出一条约 44 4bp条带 ,ELISA显示转基因细胞培养上清VEGF浓度约 (12 .3 2± 0 .3 9) μg/L ,MTT显示上清明显促内皮细胞增殖 ,Mile’s实验显示上清明显增加毛细血管通透性。结论 质粒 pcDNA3 .1(+ ) /hVEGF12 1成功转染成人皮肤成纤维细胞 ,转基因细胞能表达分泌有生物活性的VEGF12 1蛋白。
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关键词
人血管内皮生长因子
基因转染
原代细胞
成年
皮肤细胞
成纤维细胞
vegf121蛋白
原文传递
题名
人血管内皮生长因子基因转染原代成人皮肤成纤维细胞研究
被引量:
5
1
作者
周建大
陈道谨
陈勇
李萍
李高峰
贺全勇
陈铁夫
朱颉
彭浩
夏昆
罗成群
机构
中南大学湘雅三医院烧伤整形科
中南大学湘雅三医院普外科
中南大学医学遗传学国家重点实验室
出处
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第12期1539-1541,共3页
文摘
目的 将人血管内皮生长因子 (hVEGF)基因导入原代离体成人皮肤成纤维细胞 ,验证转基因细胞分泌hVEGF情况 ,探讨成人自体细胞基因修饰后移植的可行性。方法 采用酶消化法获取成纤维细胞 ,以杜氏改良培养基 (DMEM )传代培养。以脂质体转染法将pcDNA3 .1(+ ) /hVEGF12 1导入成纤维细胞 ,培养 48h后取细胞作逆转录 多聚酶链式反应 (RT PCR) ,上清行酶联免疫吸附反应 (ELISA)检测、MTT测定和Mile’s实验。结果 转基因细胞经RT PCR扩增出一条约 44 4bp条带 ,ELISA显示转基因细胞培养上清VEGF浓度约 (12 .3 2± 0 .3 9) μg/L ,MTT显示上清明显促内皮细胞增殖 ,Mile’s实验显示上清明显增加毛细血管通透性。结论 质粒 pcDNA3 .1(+ ) /hVEGF12 1成功转染成人皮肤成纤维细胞 ,转基因细胞能表达分泌有生物活性的VEGF12 1蛋白。
关键词
人血管内皮生长因子
基因转染
原代细胞
成年
皮肤细胞
成纤维细胞
vegf121蛋白
Keywords
Skin
Fibroblast
vegf
Gene expression
分类号
R641 [医药卫生—外科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人血管内皮生长因子基因转染原代成人皮肤成纤维细胞研究
周建大
陈道谨
陈勇
李萍
李高峰
贺全勇
陈铁夫
朱颉
彭浩
夏昆
罗成群
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004
5
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