益母草注射液通过其生物碱成分上调Tie-2、VEGFR2和VEGF促进斑马鱼血管新生

目的:研究益母草注射液在斑马鱼血管损伤模型中的促血管生成作用,并阐明潜在的物质基础和分子机制。方法:采用HPLC-PAD和TLC技术检测益母草注射液的主要成分;利用舒尼替尼诱导转基因Tg(flk1:eGFP)斑马鱼血管损伤模型,益母草注射液干预治疗后,测量斑马鱼节间血管(ISVs)长度,QT-PCR检测血管生成相关基因的表达水平。结果:发现益母草注射液的主要成分是水苏碱、胆碱和葫芦巴碱;其中,益母草注射液、葫芦巴碱和胆碱可减轻化学诱导的斑马鱼血管损伤,其作用机制涉及益母草注射液上调Tie-2、VEGF和VEGFR2的表达,其主要成分葫芦巴碱上调Tie-2和VEGF的表达,胆碱上调VEGF和VEGFR2的表达。结论:益母草注射液及其主要生物碱成分可通过上调Tie-2、VEGFR2和VEGF来促进血管生成。

基于VEGF-VEGFR信号通路探讨补肺消结汤对肺癌大鼠的机制研究

目的:探讨补肺消结汤基于血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)或VEGF受体-2(Vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2)信号通路对肺癌大鼠的具体作用机制。方法:本研究通过建立A549肺癌大鼠移植瘤模型90例进行实验,随机分为对照组(n=30)、补肺消结汤低剂量组(n=30)及高剂量组(n=30),补肺消结汤低剂量组、高剂量组分别予以10mL/kg及20mL/kg剂量灌胃,对照组给予等量生理盐水灌胃,每组1次/天,连续持续14天。对肺组织进行病理组织学观察。同时,采用实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测肺癌组织中p53 mRNA表达情况,并用免疫印记方法(Western blot)检测大鼠肺组织中VEGF、VEGFR-2表达。结果:与对照组相比,低、高剂量组p53 mRNA水平表达显著升高(P<0.05)。与对照组相比,低、高剂量组VEGF、VEGFR-2表达显著降低(P<0.05)。结论:补肺消结汤可通过调控VEGF-VEGFR信号通路的基因表达,提高p53 mRNA表达水平,抑制大鼠的肺癌生长。

血府逐瘀胶囊联合顺铂对小鼠Lewis肺癌移植瘤血管新生及VEGFA、VEGFR2表达的影响

目的探讨血府逐瘀胶囊联合顺铂对小鼠Lewis肺癌移植瘤血管新生及血管内皮生长因子A(VEGFA)、血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)表达的影响。方法从75只C57BL/6小鼠中随机取15只作为正常组,其余小鼠均进行Lewis肺癌荷瘤造模。将造模成功的60只小鼠随机分为模型组、顺铂组、血府逐瘀胶囊组、血府逐瘀胶囊联合顺铂组,每组15只。血府逐瘀胶囊组给予血府逐瘀胶囊0.36 g/kg灌胃,模型组给予生理盐水灌胃,均2次/d;顺铂组给予2 mg/kg的顺铂腹腔注射,2 d 1次;血府逐瘀胶囊联合顺铂组给予0.36 g/kg血府逐瘀胶囊灌胃(2次/d)和2 mg/kg的顺铂腹腔注射(2 d 1次);正常组不给予任何干预。各组连续干预15 d后,统计存活率,摘取瘤组织并称量瘤重,计算抑瘤率,免疫组化法检测肿瘤组织中微血管数量,ELISA法测定血浆VEGFA、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平,免疫印迹法检测肿瘤组织中VEGFA、VEGFR2蛋白表达情况。结果顺铂组和血府逐瘀胶囊联合顺铂组小鼠存活率明显高于模型组和血府逐瘀胶囊组(P均<0.05);血府逐瘀胶囊联合顺铂组瘤重明显低于其他组(P均<0.05),抑瘤率明显高于顺铂组和血府逐瘀胶囊组(P均<0.05),肿瘤组织中微血管数明显少于模型组和血府逐瘀胶囊组(P均<0.05);顺铂组瘤重明显低于模型组和血府逐瘀胶囊组(P均<0.05),抑瘤率明显高于血府逐瘀胶囊组(P<0.05),肿瘤组织中微血管数明显少于其他组(P均<0.05)。顺铂组血浆VEGFA、bFGF水平和肿瘤组织中VEGFA、VEGFR2蛋白相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05);血府逐瘀胶囊联合顺铂组血浆bFGF水平和肿瘤组织中VEGFR2蛋白相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05)。结论血府逐瘀胶囊联合顺铂对Lewis肺癌荷瘤小鼠具有显著的抑瘤及抑制肿瘤血管新生的作用,其机制可能与VEGFA/VEGFR2信号通路相关。

VEGF/VEGFR2通路在牙髓血运重建术模型大鼠牙髓血管新生中的作用

目的探究血管内皮生长因子(VEGF)/VEGF受体(VEGFR)2在牙髓血运重建术(REPs)中的表达变化,揭示其调控牙髓血管新生的机制。方法取雄性SD大鼠25只,随机分为正常对照组、根尖周炎组、REPs术后7、14、28 d组,每组5只;正常对照组不做任何处理,根尖周炎组于左右两侧下颌第一磨牙处行牙髓摘除术,REPs术后7、14、28 d组在根尖周炎组基础上行REPs。苏木素-伊红(HE)染色观察左侧牙根尖及牙周组织形态变化;免疫组化染色法检测左侧牙根尖及牙周组织VEGF阳性表达情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测右侧牙根尖周组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β水平;以Western印迹检测右侧牙根尖周组织VEGFR2、骨桥蛋白(OPN)、整合素(αv)β3蛋白表达。结果与正常组相比,根尖周炎组可见牙根管壁薄、根尖孔呈开放状态、根管内坏死物质较多、根尖周炎性细胞浸润等病理现象,根尖周组织TNF-α及IL-1β水平、VEGF阳性表达水平、VEGFR2蛋白表达均显著升高,OPN、αvβ3蛋白表达均显著降低(均P<0.05);与根尖周炎组相比,REPs术后7、14、28 d组根管壁逐渐增厚、根尖孔逐渐闭合,根管内矿化基质、致密结缔组织逐渐生成,根尖周围骨细胞沉积逐渐明显,根尖周组织VEGF阳性表达水平、VEGFR2、OPN、αvβ3蛋白表达显著均增高,TNF-α及IL-1β水平显著均降低(均P<0.05)。结论REPs术可通过激活VEGF/VEGFR2通路,上调OPN、αvβ3蛋白表达,促进牙根生长及牙髓再生。

阿帕替尼靶向抑制VEGFR-2/STAT3信号通路干预恶性梗阻性黄疸模型大鼠的效果观察

目的:分析靶向抑制血管内皮细胞生长因子受体-2(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2)/信号转导及转录激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号通路对恶性梗阻性黄疸(malignant obstructive jaundice,MOJ)模型大鼠的干预效果。方法:选取8周龄SPF级SD大鼠随机将其分为5组:假手术组(A组)、模型组(B组)、阿帕替尼低剂量组(42.5 mg/kg,C组)、阿帕替尼中剂量组(85.0 mg/kg,D组)和阿帕替尼高剂量组(170.0 mg/kg,E组),每组10只。A组:行假手术;B、C、D、E组均将Walker-256肝癌株培养出的瘤块植入大鼠距肝门5 mm处的肝中叶、肝右叶的交界部位,以造成胆道癌性狭窄,依次缝合、关腹,制备MOJ模型。从术后起,C、D、E组大鼠每日阿帕替尼溶液灌胃,A、B组大鼠灌胃等体积生理盐水。治疗5周后观察大鼠一般情况,检测肝功能指标、血清肝酶指标,采用Western blot蛋白印迹法检测大鼠移植瘤中p-VEGFR-2、VEGFR-2、p-STAT3、STAT3、Bax和Bcl-2蛋白表达。结果:与A组比,B组总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、间接胆红素(indirect bilirubin,IBIL)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)水平明显升高;与B组比,C组、D组、E组TBIL、DBIL、IBIL、ALP、AST、ALT及肿瘤生长率明显降低,且E组降低水平最显著(P<0.05)。与A组比,B组p-VEGFR-2、p-STAT3、Bax表达水平明显升高,Bcl-2表达水平明显降低(P<0.05);与B组比,C、D、E组p-VEGFR-2、p-STAT3、 Bax表达水平明显降低,Bcl-2表达水平明显升高,且E组降低/升高水平最显著(P<0.05);各组的VEGFR-2和STAT3表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:阿帕替尼治疗MOJ的可能机制在于促进癌细胞凋亡,与靶向抑制VEGFR-2/STAT3信号通路活性相关,进而有效缓解MOJ的肝脏微胆管阻塞、减轻肝细胞及肝损伤,上述作用呈剂量依赖性关系,170.0 mg/kg的阿帕替尼效果最佳。

LKB1、VEGFR2在非小细胞肺癌组织中表达及临床意义

目的探究LKB1、VEGFR2在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达情况及临床意义。方法收集病理确诊的NSCLC 52例患者,分别取材自病灶癌组织及癌旁正常肺组织,检测其LKB1、VEGFR2的表达水平,分析其表达情况与临床病理特征的相关性。结果在癌组织中LKB1阳性表达率低于正常组织(61.54%VS96.15%),VEGFR2阳性表达率高于正常组织(57.69%VS5.77%);在淋巴转移、有吸烟史、中低分化、鳞癌、肿瘤直径≥3 cm、分期Ⅲ-Ⅳ患者中LKB1阳性率更低,VEGFR2阳性率更高,鳞癌高于腺癌;二者表达率呈负相关(P均<0.05)。结论LKB1、VEGFR2表达与肺癌临床病理特征密切相关,二者参与肺癌的发生发展;LKB1低表达与VEGFR2高表达提示患者淋巴转移以及低分化程度;二者表达呈负相关。

BET溴域抑制通过阻断VEGFR2介导的PAK1和eNOS激活抑制糖尿病大鼠视网膜病变机制

目的探究BET溴域抑制通过阻断血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)介导的p21激活激酶1(PAK1)和内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)激活抑制糖尿病大鼠视网膜病变机制。方法选择36只雄性SD大鼠,随机选取10只大鼠作为对照组,余下大鼠采用单次注射链脲霉素60 mg/kg建立糖尿病模型。将建模成功的20只大鼠随机分为模型组和BET抑制组,每组10只。对照组大鼠不建模。BET抑制组大鼠建模后,腹腔注射80 mg·kg^(-1)·d^(-1)剂量的JQ1。使用ZEISS数码显微镜和免疫组织化学分析大鼠视网膜心血管生成。通过蛋白质印迹法分析视网膜屏障功能相关蛋白的表达。通过FITC-葡聚糖泄漏实验检测大鼠内外视网膜屏障完整性。通过RT-qPCR分析大鼠视网膜炎症因子的表达。通过酶联免疫吸附试验试剂盒检测大鼠房水VEGF浓度。通过蛋白质印迹法分析视网膜VEGFR2/PAK1/eNOS的蛋白表达。结果与对照组相比,模型组和BET抑制组视网膜新血管生成量、CD34表达、albumin蛋白表达、内外视网膜FITC-葡聚糖泄漏量、IL-1β、iNOS和ICAM-1 mRNA表达、VEGF浓度、视网膜P-PAK1、P-VEGFR2和eNOS蛋白表达均升高,ZO-1和occludin蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,BET抑制组视网膜新血管生成量、CD34表达、albumin表达、内外视网膜FITC-葡聚糖泄漏量、IL-1β、iNOS和ICAM-1mRNA表达、VEGF浓度、P-PAK1、P-VEGFR2和eNOS蛋白表达均降低,ZO-1和occludin蛋白表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论BET溴化域通过调节VEGFR2介导的PAK1和eNOS信号通路激活抑制血管生成,降低血管通透性,改善糖尿病大鼠视网膜病变。抑制BET溴化域的策略可能为限制血管生成相关疾病提供一种新的治疗方法。

COUP-TFⅡ在胃癌组织中表达及对胃癌SGC7901细胞中VEGFR3-NRP2轴转录活性的调控

目的:探讨COUP-TFⅡ在胃癌中对淋巴转移相关因子VEGFR3-NRP2轴的调控分子机制。方法:收集2015年3月至2015年8月在滨州医学院附属医院手术切除的60例胃癌组织和相应的癌旁组织及正常胃黏膜活检组织,用免疫组化和qPCR法检测COUP-TFⅡ、VEGFR3和NRP2的表达;培养胃癌细胞SGC7901和BGC823,构建过表达和siRNA-COUP-TFⅡ质粒后转染SGC7901细胞,用WB和qPCR检测转染后SGC7901细胞中COUP-TFⅡ、VEGFR3、NRP2的表达,用免疫共沉淀(CHIP)和双荧光素酶报告基因实验验证COUP-TFⅡ与VEGFR3-NRP2轴的靶向关系。结果:免疫组化检测显示,VEGFR3、NRP2、COUP-TFⅡ在胃癌组织中呈高表达(P<0.01);q PCR结果显示,与癌旁组织和正常组织相比,胃癌组织VEGFR3、NRP2和COUPTFⅡ的mRNA呈高表达(P<0.05或P<0.01);WB和qPCR法结果显示,与对照组相比,过表达COUP-TFⅡ组SGC7901细胞中COUP-TFⅡmRNA和蛋白水平表达均显著升高(均P<0.01);敲减组SGC7901细胞中COUP-TFⅡmRNA和蛋白水平均显著下降(P<0.05或P<0.01),且VEGFR3和NRP2 mRNA水平也均显著下降(均P<0.01);CHIP结果显示,SGC7901和BGC823细胞中COUP-TFⅡ抗体的免疫共沉淀物中含有VEGFR3和NRP2启动子DNA序列;双荧光素酶报告基因实验结果显示,COUP TFⅡ表达水平与VEGFR3和NRP2表达水平呈正相关。结论:COUP-TFⅡ在胃癌组织中高表达且对VEGFR3-NRP2轴存在正性调控作用,且在胃癌中高表达,COUP-TFⅡ可能为胃癌治疗的新靶点。

吗啡通过激活VEGF/VEGFR信号通路促进人结肠肿瘤细胞转移

目的:探讨吗啡对结肠肿瘤细胞功能的影响及其机制。方法:蛋白免疫印迹实验检测结肠肿瘤细胞系中VEGF、VEGFR的表达量,10μM、100μM吗啡处理HCT116细胞后VFGF、VEGFR、p-VEGFR的表达量变化。Transwell实验检测吗啡对结肠肿瘤细胞系HT29、HCT116侵袭迁移的影响。结果:蛋白免疫印迹实验结果表明,VEGF和VEGFR的蛋白表达量在HCT116中较低,而吗啡可以促进HCT116细胞VEGF的表达量增加,同时上调VEGFR和p-VEGFR的表达水平。Transwell实验结果表明,吗啡可以促进HT29和HCT116的侵袭迁移。结论:吗啡可能通过激活VEGF/VEGFR信号通路促进人结肠肿瘤细胞侵袭和迁移。

镇肝熄风汤联合尼莫地平对急性脑梗死患者神经功能及VEGF/VEGFR2信号通路的影响

目的观察镇肝熄风汤联合尼莫地平对急性脑梗死(ACI)患者(阴虚风动证)神经功能及VEGF/VEGFR2信号通路的影响。方法将120例急性脑梗死患者随机分为试验组与对照组各60例。对照组给予西医常规药物及尼莫地平治疗,试验组在对照组基础上加用镇肝熄风汤。比较两组临床疗效及不良反应;对比两组治疗前后中医证候积分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分及Barthel指数(BI);比较两组治疗前后血清血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)表达水平;比较两组治疗前后的血清髓鞘碱性蛋白(MBP)、S100B蛋白(S100B)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达水平。结果试验组总有效率高于对照组,治疗后中医证候积分及NIHSS评分低于对照组,BI评分高于对照组,VEGF及VEGFR2表达水平高于对照组,NSE、MBP、S100B水平低于对照组(P<0.05)。两组间不良反应发生情况差异无统计学意义(P>0.05)。结论镇肝熄风汤联合尼莫地平治疗ACI可进一步提高治疗效果,改善患者神经功能及日常活动能力,促进VEGF及VEGFR2的表达,保护神经元,安全可靠。

后肾间充质细胞作用于VEGFR2/3促进成骨细胞成骨

目的:探讨后肾间充质细胞(MMC)及其上清液和其活性成分VEGF-C所作用受体VEGFR2/3对成骨细胞成骨的影响。方法:将MMC与成骨细胞系MC3T3-E1混合培养,检测成骨标志物碱性磷酸酶(ALP)活性与染色情况;茜素红染色法观察矿化结节形成情况。制备MMC上清液,将成骨细胞分为成骨诱导对照组和MMC上清液组,CCK-8法检测细胞增殖活性;检测ALP活性、染色情况与矿化结节形成情况;蛋白质印记法检测成骨相关蛋白Runx2、OCN、OPN的表达水平。加入VEGFR2和VEGFR3的特异性抑制剂Ki8751和MAZ51后,通过检测上述指标观察其促成骨作用有无减弱。结果:混合培养使成骨细胞ALP活性升高、染色增强,细胞表面矿化结节数量增多、体积增大。加入MMC上清液后,成骨细胞增殖活性升高,ALP活性升高、染色增强,Runx2、OCN、OPN表达升高,矿化结节数量增多、体积增大。抑制VEGFR2/3后,MMC上清液的促成骨作用减弱,ALP活性下降、染色减弱,Runx2、OCN、OPN的表达下降,细胞表面矿化结节数量减少、体积减小。结论:MMC可通过作用于VEGFR2/3促进成骨细胞成骨。

程序性死亡配体1通过激活c-JUN/VEGFR2信号通路调节卵巢癌血管生成和转移

背景与目的细胞程序性死亡配体1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)通过与细胞程序性死亡受体1(programmed cell death-1,PD-1)相互作用,在免疫检查点应答中发挥作用,但是,PD-L1在肿瘤细胞中的作用机制尚未阐明。本研究探讨了PD-L1在卵巢癌进展和转移过程中的分子调控机制。方法对良性卵巢肿瘤组织和卵巢癌组织标本进行免疫组化分析,在PD-L1敲减的卵巢癌细胞中进行迁移、侵袭和血管生成实验。通过免疫沉淀、质谱、染色质免疫沉淀、斑马鱼和小鼠实验,探讨PD-L1在卵巢癌中的具体功能和作用的分子机制。结果体内和体外实验结果表明,PD-L1通过促进血管生成促进卵巢癌的转移和侵袭。在机制上,PD-L1直接与血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR2)相互作用,并激活FAK/AKT通路,进而促进血管生成和肿瘤进展,并与卵巢癌患者预后不良相关。同时,研究发现PD-L1为致癌转录因子c-JUN的下游调控因子,从而使PD-L1在卵巢癌中高表达。此外,实验表明PD-L1抑制剂度伐利尤单抗(durvalumab)和抗血管生成药物阿帕替尼(apatinib)联合使用可以增强抗血管生成作用,抑制卵巢癌细胞转移和侵袭。结论我们的研究结果表明,PD-L1通过激活c-JUN/VEGFR2信号轴促进卵巢癌的血管生成和转移,PD-L1抑制剂和抗血管生成药物联合使用可能是治疗卵巢癌患的潜在方法。

健脾补肾法对人结直肠癌裸鼠VEGF-C、VEGFR-3、E-cadherin、Vimentin表达的影响

目的:探讨健脾补肾法对人结直肠癌裸鼠血管内皮生长因子C(VEGF-C)、血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)、E黏钙蛋白(E-cadherin)、波形纤维蛋白(Vimentin)的影响。方法:16只裸鼠接种人结直肠癌细胞株HCT116构建结直肠癌移植瘤模型,随机分为对照组和实验组,对照组给予生理盐水灌胃,实验组给予健脾补肾中药复方灌胃,两组均隔天给药1次,持续14 d。给药结束后,脱颈处死后剥离瘤体,免疫组化检测肿瘤组织中VEGF-C、VEGFR-3、E-cadherin、Vimentin的表达。结果:16只结直肠癌移植瘤模型裸鼠均构建成功,免疫组化结果显示:与对照组比较,实验组移植瘤组织中VEGFC、VEGFR-3、Vimentin的表达均明显下调(P<0.05),E-cadherin的表达明显上调(P<0.05)。结论:健脾补肾法能下调人结直肠癌裸鼠中促进肿瘤淋巴管生成和转移的VEGF-C、VEGFR-3表达及上皮-间质转化标志物Vimentin表达,同时上调E-cadherin表达,有抑制肿瘤细胞转移的作用。

基于计算机辅助药物设计的VEGFR2和PD-L1双靶点抑制剂的筛选

肝细胞癌(HCC)是世界上最具侵袭性的实体恶性肿瘤之一,尽管近几十年来在肝切除术、射频消融和肝移植等方面取得了显著进展,但HCC患者的愈后仍不乐观,主要原因是HCC的高复发率和转移率以及该疾病对化疗和靶向治疗的耐受性。VEGFR2和PD-L1抑制剂联合应用能对小鼠体内的HCC肿瘤进行显著抑制并延长其寿命,因此开发VEGFR2与PD-L1双靶点抑制剂对HCC的治疗具有十分重要的意义。本文基于计算机辅助药物设计(CADD),经过以分子对接为基础的虚拟筛选、MM-GBSA和ADMET评价以及QSAR模型预测,得到了一系列VEGFR2和PD-L1的双靶点活性化合物,有望为后续抑制剂的开发提供思路和方向。

五皮饮对淋巴水肿小鼠Prox-1、VEGFR-3和LYVE-1表达的影响

目的:研究五皮饮对淋巴水肿小鼠的影响,并初步探讨其作用机制。方法:选择48只C57BL/6J雄性小鼠,依据随机数字表随机分成空白组,模型对照组,五皮饮高、中、低剂量组和呋塞米组,连续灌胃14 d,观察并记录小鼠尾部的水肿变化情况。灌胃结束后,处死小鼠并取出小鼠远端尾部组织进行检测。苏木精-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色法染色观察小鼠尾部横截面的病理学变化;免疫组织化学染色法检测小鼠尾部横截面中同源盒基因转录因子1(prospero homeobox protein 1,Prox-1)的表达水平;免疫组织荧光染色法检测小鼠尾部横截面中血管内皮生长因子受体3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)和淋巴内皮透明质酸受体-1(lymphatic vessel hyaluronan receptor-1,LYVE-1)的表达水平;Western blot法检测小鼠尾部组织中Prox-1、VEGFR-3和LYVE-1的蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型对照组小鼠尾部直径显著增加,皮肤厚度明显增加,水肿区范围增多,毛细血管扩张明显;尾组织横截面切片Prox-1、LYVE-1和VEGFR-3的表达明显降低。与模型对照组比较,五皮饮高、中、低剂量组和呋塞米组小鼠尾部直径减少,水肿区范围变小,Prox-1、VEGFR-3和LYVE-1的表达降低,尤其是五皮饮高剂量组表现最为明显(P<0.05)。结论:五皮饮可以上调Prox-1、VEGFR-3和LYVE-1的表达,通过促进淋巴管新生,从而缓解淋巴水肿。

隔药饼灸对动脉粥样硬化兔胸主动脉VEGF-A、VEGFR-2及DLL4表达的影响

目的观察隔药饼灸对动脉粥样硬化兔胸主动脉血管内皮生长因子(VEGF)-A、血管内皮生长因子受体(VEGFR)-2、DLL4表达的影响,探讨其促进受损血管内皮修复的机制。方法将45只兔按随机数字表法分为正常组、模型组、隔药饼灸组、直接灸组和药饼敷贴组,每组9只。正常组采用普通饲料喂养,其余各组采用高脂饲料喂养8周制备动脉粥样硬化兔模型,造模成功后,各治疗组于“巨阙”和双侧“天枢”“丰隆”,或双侧“心俞”“肝俞”“脾俞”予相应处理,30 min/次,每日1次,连续8周。HE染色观察胸主动脉血管壁形态,Western blot检测胸主动脉组织VEGF-A、VEGFR-2、DLL4蛋白表达,ELISA检测血清VEGF含量。结果与正常组比较,模型组兔胸主动脉壁结构受损明显,胸主动脉组织VEGF-A、VEGFR-2、DLL4蛋白表达明显升高(P<0.01),血清VEGF含量明显增加(P<0.01);与模型组比较,隔药饼灸组兔胸主动脉内皮损伤好转,直接灸组和药饼敷贴组兔胸主动脉内皮病理变化有所减轻,隔药饼灸组、直接灸组和药饼敷贴组兔胸主动脉组织VEGFR-2蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),直接灸组和药饼敷贴组兔胸主动脉组织DLL4蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),隔药饼灸组和药饼敷贴组兔血清VEGF含量明显减少(P<0.01)。结论隔药饼灸可能通过下调动脉粥样硬化兔胸主动脉VEGF-A、VEGFR-2、DLL4表达,降低血清VEGF含量,促进受损血管内皮修复,从而减轻动脉粥样硬化病变。

阿帕替尼联合参一胶囊抑制VEGFR-2高表达胃腺癌细胞SGC-7901增殖机制研究

目的探讨阿帕替尼联合参一胶囊对VEGFR-2高表达的胃癌细胞增殖的影响。方法选择不同人胃腺癌细胞SGC-7901、BGS-823、AGS、MKN-45、MGC-83以及人脐静脉内皮细胞HUVEC(空白对照组)进行培养。RT-PCR筛选出VEGFR-2 mRNA水平高表达的细胞;western blotting检测VEGFR-2高表达胃腺癌细胞中相关蛋白表达量;实验药物分为空白对照组、阿帕替尼组、参一胶囊组、阿帕替尼联合参一胶囊组,除空白对照组外,每组设立7个浓度梯度;MTT法检测不同浓度下阿帕替尼、参一胶囊、阿帕替尼联合参一胶囊组对细胞增殖抑制率;利用中效原理绘制Fa-CI曲线,评价两药联合作用机制;流式细胞术检测空白对照组、阿帕替尼组、参一胶囊组、阿帕替尼+参一胶囊组中细胞凋亡率;免疫组化法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、及死亡受体Fas蛋白的分布量。结果RT-PCR、western blotting结果显示胃腺癌细胞SGC-7901在VEGFR-2 mRNA、蛋白水平上均为高表达,为后期实验所选用。MTT结果显示两药效抑制细胞增殖,浓度为阿帕替尼:16μg/mL、参一胶囊:64μg/mL;根据药物中效原理,该浓度下药物联合指数CI<1,两药联合作用为协同。流式细胞术结果示阿帕替尼+参一胶囊组vs.空白对照组、阿帕替尼组、参一胶囊组其细胞凋亡率明显增高(P<0.0001),有显著统计学差异。免疫组化法检测发现阿帕替尼联合参一胶囊组vs.对照组和单药组,其凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、及死亡受体Fas分布量显著增加。结论阿帕替尼联合参一胶囊具有协同增效增强细胞的作用,其机制可能通过联合用药组调控细胞中抑凋亡基因Bcl-2、促凋亡基因Bax及死亡受体Fas蛋白表达,并激活线粒体途径和死亡受体Fas途径诱导细胞凋亡。

血清CGRP、Cystatin C、VEGFR水平与烟雾病患者血管重建术后认知功能的相关性分析

目的:探究烟雾病患者行血管重建术后血清降钙素基因相关肽(CGRP)、血清胱抑素C(Cystatin C)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)与认知功能的相关性。方法:选择2020年7月-2021年7月在我院行血管重建术的113例烟雾病患者为研究对象,根据术后3个月认知功能情况,分为认知正常组(n=92例)、认知障碍组(n=21例),比较两组临床资料、蒙特利尔认知量表(MoCA)评分、CGRP、Cystatin C、VEGFR水平,分析CGRP、Cystatin C、VEGFR与MoCA评分的相关性。结果:两组Suzuki分期、MMSE评分比较,差异有统计学意义(P<0.05);认知障碍组血清CGRP水平低于认知正常组,Cystatin C、VEGFR水平均高于认知正常组(P<0.05);Pearson分析显示,CGRP水平与MoCA评分呈正相关(r=0.427,P<0.05),Cystatin C、VEGFR水平与MoCA评分呈负相关(r=-0.512、-0.458,P<0.05);多因素分析发现,血清CGRP、Cystatin C、VEGFR水平与MoCA评分显著相关(P<0.05)。结论:烟雾病患者血管重建术后血清CGRP水平明显降低,Cystatin C、VEGFR水平明显增高,且与认知功能、预后密切相关。

VEGFR2、p53在非小细胞肺癌中的表达及其与临床特征和化疗疗效的相关性

目的观察血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)和p53在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,并分析其与临床特征和化疗疗效的相关性。方法应用免疫组化染色法检测158例NSCLC组织中VEGFR2和p53的表达情况。收集患者的性别、年龄、吸烟史、病理类型、肿瘤大小、区域淋巴结转移、远处转移、临床分期、肿瘤标志物和近期疗效等临床资料,分析其与VEGFR2和p53的相关性。结果VEGFR2和p53在NSCLC中的高表达率分别为38.6%、23.4%,两者在不同病理类型NSCLC中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。VEGFR2在Ⅱ-Ⅵ期患者中的高表达率显著高于Ⅰ期患者(P=0.007);p53在有淋巴结转移、Ⅱ-Ⅵ期患者中的高表达率显著高于无淋巴结转移及Ⅰ期患者(P=0.005,0.002)。VEGFR2高表达患者中p53高表达率明显升高(P=0.000),表明VEGFR2与p53的表达显著相关。接受2周期化疗后,疗效评估为疾病进展的患者VEGFR2高表达率显著高于部分缓解的患者(P=0.040)。结论VEGFR2和p53的高表达与NSCLC的恶性程及化疗敏感性有关,VEGFR2、p53联合检测可能有助于NSCLC患者的个体化治疗。

初治淋巴瘤患者血浆中VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-2及VEGFR-3的表达水平及临床意义

本研究检测初治淋巴瘤患者血浆中血管生成相关因子VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-2、VEGFR-3的表达水平,探讨其与淋巴瘤临床特点及预后的相关性,寻找指导淋巴瘤抗血管靶向治疗及判断预后的有价值的指标和因素。应用酶联免疫吸附测定的方法检测86例初治淋巴瘤患者血浆中VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-2、VEGFR-3的表达水平。结果表明,多因素分析结果显示,VEGF-C在非霍奇金淋巴瘤患者中呈低表达水平,而在霍奇金淋巴瘤患者中表达水平较高;VEGFR-2在年龄>60岁淋巴瘤患者中表达较高;VEGF-D在IPI>2分的患者组中表达较低。单因素分析显示,VEGF-D在IPI>2分患者组中呈低水平表达;VEGF-D、VEGF-C在无B症状组高水平表达。因子间的关联性分析表明,VEGF-D与VEGFR-2、VEGFR-3的表达水平呈正相关。结论:VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-2、VEGFR-3在淋巴瘤的发病中具有重要作用,可作为细化指导淋巴瘤抗血管靶向治疗、了解病情、判断预后的指标。