Wnt/β-catenin和NF-κB信号通路对肿瘤血管生成中VEGFs/VEGFRs的调控作用

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factors,VEGFs)及其受体(vascular endothelialgrowth factor receptors,VEGFRs)在肿瘤的发生、发展、转移等过程中发挥了重要的作用,尤其是在肿瘤血管生成方面。而对其抑制剂的研究已经成为肿瘤防治的热点和发展方向,Wnt/β-catenin和NF-κB信号通路对肿瘤血管生成中也起着重要作用。本文就这两条信号通路对肿瘤血管生成中VEGF/VEGFRs的调控作用作一综述。

益母草注射液通过其生物碱成分上调Tie-2、VEGFR2和VEGF促进斑马鱼血管新生

目的:研究益母草注射液在斑马鱼血管损伤模型中的促血管生成作用,并阐明潜在的物质基础和分子机制。方法:采用HPLC-PAD和TLC技术检测益母草注射液的主要成分;利用舒尼替尼诱导转基因Tg(flk1:eGFP)斑马鱼血管损伤模型,益母草注射液干预治疗后,测量斑马鱼节间血管(ISVs)长度,QT-PCR检测血管生成相关基因的表达水平。结果:发现益母草注射液的主要成分是水苏碱、胆碱和葫芦巴碱;其中,益母草注射液、葫芦巴碱和胆碱可减轻化学诱导的斑马鱼血管损伤,其作用机制涉及益母草注射液上调Tie-2、VEGF和VEGFR2的表达,其主要成分葫芦巴碱上调Tie-2和VEGF的表达,胆碱上调VEGF和VEGFR2的表达。结论:益母草注射液及其主要生物碱成分可通过上调Tie-2、VEGFR2和VEGF来促进血管生成。

温阳活血解毒复方对人脐静脉内皮细胞VEGFs/VEGFRs通路的影响

目的研究温阳活血解毒复方(WHJF)对血管内皮生长因子(VEGFs/VEGFRs)信号通路的影响,从分子层面探讨其治疗动脉粥样硬化(AS)的机制。方法将SD大鼠随机分为空白对照组(C组)、温阳活血解毒复方低、中、高剂量组(L、M、H组,剂量分别为10.35、31.05、93.15 g·kg^(-1)),于第4天首次灌胃2 h后采血制备含药血清,采用免疫印迹法(Western Blot)及逆转录-聚合酶链式反应(q RT-PCR)法分别观察含药血清对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的VEGFs/VEGFRs信号通路中各信号分子及其基因表达的影响。结果温阳活血解毒复方含药血清对VEGFs/VEGFRs信号通路有抑制作用。在蛋白表达方面,与空白对照组比较,高剂量组中血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)和磷酸化的细胞外调节蛋白激酶(pERK)的表达量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);中剂量组中pERK的表达量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);通路中其他信号分子的表达量无明显减少,差异无统计学意义(P>0.05)。在基因表达方面,与空白对照组比较,温阳活血解毒复方组血管内皮生长因子亚型A、B(VEGFA、VEGFB)及血管内皮生长因子受体1、2(VEGFR-1、VEGFR-2)的mRNA表达量无明显减少,差异无统计学意义(P>0.05)。结论温阳活血解毒复方含药血清可能通过下调VEGFR-2及下游分子pERK的表达,对VEGFs/VEGFRs信号通路发挥抑制作用,从而直接影响细胞DNA合成功能,减少血管新生,起到稳定动脉粥样硬化斑块的作用。

卵巢上皮癌细胞中VEGF和VEGFRs的表达与STATs的活化

目的 研究卵巢上皮癌细胞中血管内皮生长因子 (VEGF)、血管内皮生长因子受体(VEGFRs)的表达与血管内皮细胞内的信号转导和转录活化因子 (STATs)的活化及其相关性 ,并阐明VEGF对卵巢癌细胞的直接作用及机制。方法 选择 4 2例卵巢上皮性癌患者作为研究对象 ,2 9例卵巢良性肿瘤患者和 11例正常卵巢组织作为对照 ,用免疫组织化学LSAB法检测组织中VEGF、VEGFRs、STATs蛋白的表达 ,并进行半定量及相关性分析。结果 (1)VEGF定位于胞浆 ,VEGFRs定位于胞浆和胞膜。VEGF在卵巢癌细胞呈高表达 ,VEGFRs在卵巢癌细胞及间质血管内皮细胞中均呈高表达 ,与良性及正常对照组差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。 (2 )P STATs定位于胞浆和胞核。在卵巢癌细胞及血管内皮细胞中 ,P STAT3和P STAT5高表达 ,与两对照组相比 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1) ;P STAT1、P STAT6低表达 ,各组间差异无统计学意义。 (3)在血管内皮细胞中 ,VEGFR1的表达与P STAT5呈正相关 (r =0 .2 4 3) ,而VEGFR2与P STAT3呈正相关 (r =0 .30 8) ;在卵巢癌细胞中 ,VEGF、VEGFR1、VEGFR2与P STAT3、P STAT5之间均呈正相关 ,而与P STAT1、P STAT6无相关。结论VEGF可直接作用于卵巢上皮癌细胞 ,STATs可能参与了VEGF细胞内的信号传导。

抗VEGF及其受体分子靶向药物治疗肝癌机制的研究进展

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生发展过程与肿瘤血管的形成密切相关。由血管内皮生长因子(VEGF)介导的血管生成是肿瘤产生免疫逃逸反应的主要驱动因素,VEGF与内皮细胞上血管内皮生长因子受体(vascularendothe-lial growth factor receptor2,VEGFR2)结合后,促进内皮细胞增殖和迁移,诱导肝癌发生血管改变,进而促进肝癌细胞生长。抗VEGF及其受体分子靶向药物是目前治疗肝癌的有效新手段。针对VEGF的单克隆抗体和靶向VEGF的小分子酪氨酸激酶抑制剂已显示出阻断其血管生成活性,缓解肿瘤微环境的抑制作用,最终达到消退肿瘤的作用。本文就VEGF/VEGFR抑制剂在肝癌治疗中的研究进展作一综述。

张书永、王烈峰、曾祥福教授等发现晚期卵巢癌双重靶向联合治疗新策略

2024年2月26日,赣南医科大学心脑血管疾病防治教育部重点实验室张书永教授团队联合王烈峰教授、曾祥福教授等多个课题组在国际权威期刊Journal of Experimental&Clinical Cancer Research(IF=11.3)上发表题为《Combined inhibition of HER2 and VEGFR synergistically improves therapeutic efficacy via PI3K-AKT pathway in advanced ovarian cancer》的最新研究成果。

血府逐瘀胶囊联合顺铂对小鼠Lewis肺癌移植瘤血管新生及VEGFA、VEGFR2表达的影响

目的探讨血府逐瘀胶囊联合顺铂对小鼠Lewis肺癌移植瘤血管新生及血管内皮生长因子A(VEGFA)、血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)表达的影响。方法从75只C57BL/6小鼠中随机取15只作为正常组,其余小鼠均进行Lewis肺癌荷瘤造模。将造模成功的60只小鼠随机分为模型组、顺铂组、血府逐瘀胶囊组、血府逐瘀胶囊联合顺铂组,每组15只。血府逐瘀胶囊组给予血府逐瘀胶囊0.36 g/kg灌胃,模型组给予生理盐水灌胃,均2次/d;顺铂组给予2 mg/kg的顺铂腹腔注射,2 d 1次;血府逐瘀胶囊联合顺铂组给予0.36 g/kg血府逐瘀胶囊灌胃(2次/d)和2 mg/kg的顺铂腹腔注射(2 d 1次);正常组不给予任何干预。各组连续干预15 d后,统计存活率,摘取瘤组织并称量瘤重,计算抑瘤率,免疫组化法检测肿瘤组织中微血管数量,ELISA法测定血浆VEGFA、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平,免疫印迹法检测肿瘤组织中VEGFA、VEGFR2蛋白表达情况。结果顺铂组和血府逐瘀胶囊联合顺铂组小鼠存活率明显高于模型组和血府逐瘀胶囊组(P均<0.05);血府逐瘀胶囊联合顺铂组瘤重明显低于其他组(P均<0.05),抑瘤率明显高于顺铂组和血府逐瘀胶囊组(P均<0.05),肿瘤组织中微血管数明显少于模型组和血府逐瘀胶囊组(P均<0.05);顺铂组瘤重明显低于模型组和血府逐瘀胶囊组(P均<0.05),抑瘤率明显高于血府逐瘀胶囊组(P<0.05),肿瘤组织中微血管数明显少于其他组(P均<0.05)。顺铂组血浆VEGFA、bFGF水平和肿瘤组织中VEGFA、VEGFR2蛋白相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05);血府逐瘀胶囊联合顺铂组血浆bFGF水平和肿瘤组织中VEGFR2蛋白相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05)。结论血府逐瘀胶囊联合顺铂对Lewis肺癌荷瘤小鼠具有显著的抑瘤及抑制肿瘤血管新生的作用,其机制可能与VEGFA/VEGFR2信号通路相关。

电针对佐剂性关节炎大鼠膝关节滑膜组织血管内皮生长因子受体2/细胞分裂周期蛋白42信号通路的影响

目的 观察电针对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis, AA)大鼠膝关节滑膜组织内血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2, VEGFR2)/细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42, Cdc42)信号通路的影响,探究电针治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)的可能机制。方法 采用随机数字表法将40只SPF级SD雄性大鼠分成空白组、模型组、西药组和电针组,每组10只。模型组、西药组、电针组大鼠采用尾根部皮下注射不完全弗氏佐剂(0.1 mL/只)制成AA大鼠模型。造模后第2天即开始干预,电针组进行电针干预,每次20 min,每天干预1次,共21次,西药组给予甲氨蝶呤灌胃给药,每周1次,共3次。观察各组体质量、关节红肿等一般情况;每3 d测量1次大鼠后双侧足跖容积,干预结束后,通过大鼠一般情况、体质量、足跖容积分析各组大鼠足跖肿胀程度,HE观察各组大鼠滑膜组织的病理形态学变化,免疫组织化学法检测膝关节滑膜组织内VEGFR2、CD34表达变化,Western blot检测大鼠膝关节滑膜组织VEGFR2、Cdc42蛋白表达量。结果 与空白组相比,模型组大鼠第21天足跖容积均明显增大(P<0.01),膝关节滑膜组织出现了显著性病理改变,CD34表达量明显升高(P<0.01),VEGFR2、Cdc42蛋白表达量显著升高(P<0.01)。与模型组相比,西药组、电针组大鼠足趾容积明显减小(P<0.01),膝关节滑膜组织病理改变明显改善,VEGFR2、Cdc42表达量显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论 电针改善RA的作用机制可能与降低VEGFR2、Cdc42的表达从而抑制血管新生有关。

VEGF/VEGFR2通路在牙髓血运重建术模型大鼠牙髓血管新生中的作用

目的探究血管内皮生长因子(VEGF)/VEGF受体(VEGFR)2在牙髓血运重建术(REPs)中的表达变化,揭示其调控牙髓血管新生的机制。方法取雄性SD大鼠25只,随机分为正常对照组、根尖周炎组、REPs术后7、14、28 d组,每组5只;正常对照组不做任何处理,根尖周炎组于左右两侧下颌第一磨牙处行牙髓摘除术,REPs术后7、14、28 d组在根尖周炎组基础上行REPs。苏木素-伊红(HE)染色观察左侧牙根尖及牙周组织形态变化;免疫组化染色法检测左侧牙根尖及牙周组织VEGF阳性表达情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测右侧牙根尖周组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β水平;以Western印迹检测右侧牙根尖周组织VEGFR2、骨桥蛋白(OPN)、整合素(αv)β3蛋白表达。结果与正常组相比,根尖周炎组可见牙根管壁薄、根尖孔呈开放状态、根管内坏死物质较多、根尖周炎性细胞浸润等病理现象,根尖周组织TNF-α及IL-1β水平、VEGF阳性表达水平、VEGFR2蛋白表达均显著升高,OPN、αvβ3蛋白表达均显著降低(均P<0.05);与根尖周炎组相比,REPs术后7、14、28 d组根管壁逐渐增厚、根尖孔逐渐闭合,根管内矿化基质、致密结缔组织逐渐生成,根尖周围骨细胞沉积逐渐明显,根尖周组织VEGF阳性表达水平、VEGFR2、OPN、αvβ3蛋白表达显著均增高,TNF-α及IL-1β水平显著均降低(均P<0.05)。结论REPs术可通过激活VEGF/VEGFR2通路,上调OPN、αvβ3蛋白表达,促进牙根生长及牙髓再生。

hKDR^(+/+)人源化及Rag1^(-/-)基因缺陷新型双靶点遗传修饰荷瘤小鼠模型的建立

目的通过增强血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)人源化小鼠(hKDR^(+/+))接纳不同来源的小鼠肿瘤细胞系的潜力,建立能支持多种肿瘤细胞系成瘤的、可评价针对VEGFR靶点药物的新型荷瘤小鼠模型。方法首先建立基于hKDR^(+/+)人源化小鼠模型评价针对VEGFR靶点抗体体内活性的方法,同时采用CRISPR/Cas9技术构建重组激活基因1(recombination activating gene 1,Rag1)敲除的C57BL/6N小鼠(命名为Rag1^(-/-)小鼠)。然后将Rag1^(-/-)小鼠与hKDR^(+/+)小鼠交配,筛选获得双基因纯合、双靶点基因修饰的hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)小鼠。最后在hKDR^(+/+)、Rag1^(-/-)、hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)和C57BL/6N小鼠上测试不同小鼠品系来源肿瘤细胞系的体内肿瘤生长差异。结果针对VEGFR靶点设计的抗体在hKDR^(+/+)小鼠体内表现出明显的抗肿瘤活性,与PBS组相比,肿瘤体积明显减小(P<0.01),肿瘤质量明显减轻(P<0.05)。Rag1^(-/-)小鼠、hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)小鼠的外周血B细胞和T细胞数量均明显减少(P<0.05,P<0.001)。C57BL/6小鼠来源的MC38细胞接种7 d后,在hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)、Rag1^(-/-)、C57BL/6N和hKDR^(+/+)四组小鼠体内均可见肿瘤生长。BALB/c小鼠来源的CT26细胞接种10 d后,仅在hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)和Rag1^(-/-)小鼠体内见到肿瘤生长,在C57BL/6N及hKDR^(+/+)小鼠中均未见肿瘤生长;接种后3周,hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)小鼠的成瘤体积明显大于Rag1^(-/-)小鼠(P<0.01)。结论获得了Rag1基因敲除小鼠,并进一步筛选获得新型hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)双靶点基因修饰小鼠模型;Rag1基因缺失时,不同品系小鼠来源的肿瘤细胞系更易成瘤。这提示可以通过降低hKDR^(+/+)人源化小鼠的免疫反应能力,增强或扩大该模型小鼠接纳肿瘤细胞系的范围,构建多种可用于评价VEGFR靶点药物的荷瘤小鼠模型。

基于网络药理学和细胞实验探讨六味顺激方治疗肠易激综合征的作用

目的基于网络药理学和细胞实验探讨六味顺激方治疗肠易激综合征的关键靶点基因和信号通路。方法通过TCMSP数据库检索六味顺激方中药物活性成分和靶点基因,与DisGeNET、Pharm和CTD数据库中获取的肠易激综合征疾病靶点相映射,并基于GEO数据库筛选肠易激综合征与健康人差异基因,采用R语言和Cytoscape软件对关键靶点基因进行蛋白质相互作用网络(PPI)、基因本体(GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。基于脂多糖诱导的NCM460细胞模型,通过流式细胞术、免疫荧光、ELISA、Western blot、RT-qPCR法对关键靶点基因进行验证。结果检索得到六味顺激方活性成分85个,药物靶点274个,肠易激综合征相关靶点416个,药物和疾病交集靶点82个,其中人血管内皮生长因子A(VEGF-A)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)、蛋白激酶(Akt1)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、原癌基因(JUN)、白细胞介素-1β(IL-1β)、细胞趋化因子8(CXCL8)、丝裂原活化蛋白激酶8(MAPK8)、细胞趋化因子2(CCL2)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)是六味顺激方治疗肠易激综合征的关键靶点,细胞对脂多糖的应答和TNF信号通路可能是六味顺激方治疗肠易激综合征的效应机制。细胞实验结果显示,六味顺激方在降低VEGFR表达的同时抑制MAPK信号通路的主要下游靶点蛋白(ERK、JNK和JUN),进而减少炎症因子、趋化因子、血管生成因子和黏附因子的释放,缓解细胞凋亡同时抑制炎症反应恶性循环,从而缓解肠易激综合征。结论六味顺激方能通过多靶点、多通路发挥治疗肠易激综合征的效应,其机制可能是通过靶向抑制VEGFR并抑制MAPK信号通路下游关键蛋白改善血管生成、炎症反应。

LKB1、VEGFR2在非小细胞肺癌组织中表达及临床意义

目的探究LKB1、VEGFR2在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达情况及临床意义。方法收集病理确诊的NSCLC 52例患者,分别取材自病灶癌组织及癌旁正常肺组织,检测其LKB1、VEGFR2的表达水平,分析其表达情况与临床病理特征的相关性。结果在癌组织中LKB1阳性表达率低于正常组织(61.54%VS96.15%),VEGFR2阳性表达率高于正常组织(57.69%VS5.77%);在淋巴转移、有吸烟史、中低分化、鳞癌、肿瘤直径≥3 cm、分期Ⅲ-Ⅳ患者中LKB1阳性率更低,VEGFR2阳性率更高,鳞癌高于腺癌;二者表达率呈负相关(P均<0.05)。结论LKB1、VEGFR2表达与肺癌临床病理特征密切相关,二者参与肺癌的发生发展;LKB1低表达与VEGFR2高表达提示患者淋巴转移以及低分化程度;二者表达呈负相关。

BET溴域抑制通过阻断VEGFR2介导的PAK1和eNOS激活抑制糖尿病大鼠视网膜病变机制

目的探究BET溴域抑制通过阻断血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)介导的p21激活激酶1(PAK1)和内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)激活抑制糖尿病大鼠视网膜病变机制。方法选择36只雄性SD大鼠,随机选取10只大鼠作为对照组,余下大鼠采用单次注射链脲霉素60 mg/kg建立糖尿病模型。将建模成功的20只大鼠随机分为模型组和BET抑制组,每组10只。对照组大鼠不建模。BET抑制组大鼠建模后,腹腔注射80 mg·kg^(-1)·d^(-1)剂量的JQ1。使用ZEISS数码显微镜和免疫组织化学分析大鼠视网膜心血管生成。通过蛋白质印迹法分析视网膜屏障功能相关蛋白的表达。通过FITC-葡聚糖泄漏实验检测大鼠内外视网膜屏障完整性。通过RT-qPCR分析大鼠视网膜炎症因子的表达。通过酶联免疫吸附试验试剂盒检测大鼠房水VEGF浓度。通过蛋白质印迹法分析视网膜VEGFR2/PAK1/eNOS的蛋白表达。结果与对照组相比,模型组和BET抑制组视网膜新血管生成量、CD34表达、albumin蛋白表达、内外视网膜FITC-葡聚糖泄漏量、IL-1β、iNOS和ICAM-1 mRNA表达、VEGF浓度、视网膜P-PAK1、P-VEGFR2和eNOS蛋白表达均升高,ZO-1和occludin蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,BET抑制组视网膜新血管生成量、CD34表达、albumin表达、内外视网膜FITC-葡聚糖泄漏量、IL-1β、iNOS和ICAM-1mRNA表达、VEGF浓度、P-PAK1、P-VEGFR2和eNOS蛋白表达均降低,ZO-1和occludin蛋白表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论BET溴化域通过调节VEGFR2介导的PAK1和eNOS信号通路激活抑制血管生成,降低血管通透性,改善糖尿病大鼠视网膜病变。抑制BET溴化域的策略可能为限制血管生成相关疾病提供一种新的治疗方法。

COUP-TFⅡ在胃癌组织中表达及对胃癌SGC7901细胞中VEGFR3-NRP2轴转录活性的调控

目的:探讨COUP-TFⅡ在胃癌中对淋巴转移相关因子VEGFR3-NRP2轴的调控分子机制。方法:收集2015年3月至2015年8月在滨州医学院附属医院手术切除的60例胃癌组织和相应的癌旁组织及正常胃黏膜活检组织,用免疫组化和qPCR法检测COUP-TFⅡ、VEGFR3和NRP2的表达;培养胃癌细胞SGC7901和BGC823,构建过表达和siRNA-COUP-TFⅡ质粒后转染SGC7901细胞,用WB和qPCR检测转染后SGC7901细胞中COUP-TFⅡ、VEGFR3、NRP2的表达,用免疫共沉淀(CHIP)和双荧光素酶报告基因实验验证COUP-TFⅡ与VEGFR3-NRP2轴的靶向关系。结果:免疫组化检测显示,VEGFR3、NRP2、COUP-TFⅡ在胃癌组织中呈高表达(P<0.01);q PCR结果显示,与癌旁组织和正常组织相比,胃癌组织VEGFR3、NRP2和COUPTFⅡ的mRNA呈高表达(P<0.05或P<0.01);WB和qPCR法结果显示,与对照组相比,过表达COUP-TFⅡ组SGC7901细胞中COUP-TFⅡmRNA和蛋白水平表达均显著升高(均P<0.01);敲减组SGC7901细胞中COUP-TFⅡmRNA和蛋白水平均显著下降(P<0.05或P<0.01),且VEGFR3和NRP2 mRNA水平也均显著下降(均P<0.01);CHIP结果显示,SGC7901和BGC823细胞中COUP-TFⅡ抗体的免疫共沉淀物中含有VEGFR3和NRP2启动子DNA序列;双荧光素酶报告基因实验结果显示,COUP TFⅡ表达水平与VEGFR3和NRP2表达水平呈正相关。结论:COUP-TFⅡ在胃癌组织中高表达且对VEGFR3-NRP2轴存在正性调控作用,且在胃癌中高表达,COUP-TFⅡ可能为胃癌治疗的新靶点。

镇肝熄风汤联合尼莫地平对急性脑梗死患者神经功能及VEGF/VEGFR2信号通路的影响

目的观察镇肝熄风汤联合尼莫地平对急性脑梗死(ACI)患者(阴虚风动证)神经功能及VEGF/VEGFR2信号通路的影响。方法将120例急性脑梗死患者随机分为试验组与对照组各60例。对照组给予西医常规药物及尼莫地平治疗,试验组在对照组基础上加用镇肝熄风汤。比较两组临床疗效及不良反应;对比两组治疗前后中医证候积分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分及Barthel指数(BI);比较两组治疗前后血清血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)表达水平;比较两组治疗前后的血清髓鞘碱性蛋白(MBP)、S100B蛋白(S100B)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达水平。结果试验组总有效率高于对照组,治疗后中医证候积分及NIHSS评分低于对照组,BI评分高于对照组,VEGF及VEGFR2表达水平高于对照组,NSE、MBP、S100B水平低于对照组(P<0.05)。两组间不良反应发生情况差异无统计学意义(P>0.05)。结论镇肝熄风汤联合尼莫地平治疗ACI可进一步提高治疗效果,改善患者神经功能及日常活动能力,促进VEGF及VEGFR2的表达,保护神经元,安全可靠。

后肾间充质细胞作用于VEGFR2/3促进成骨细胞成骨

目的:探讨后肾间充质细胞(MMC)及其上清液和其活性成分VEGF-C所作用受体VEGFR2/3对成骨细胞成骨的影响。方法:将MMC与成骨细胞系MC3T3-E1混合培养,检测成骨标志物碱性磷酸酶(ALP)活性与染色情况;茜素红染色法观察矿化结节形成情况。制备MMC上清液,将成骨细胞分为成骨诱导对照组和MMC上清液组,CCK-8法检测细胞增殖活性;检测ALP活性、染色情况与矿化结节形成情况;蛋白质印记法检测成骨相关蛋白Runx2、OCN、OPN的表达水平。加入VEGFR2和VEGFR3的特异性抑制剂Ki8751和MAZ51后,通过检测上述指标观察其促成骨作用有无减弱。结果:混合培养使成骨细胞ALP活性升高、染色增强,细胞表面矿化结节数量增多、体积增大。加入MMC上清液后,成骨细胞增殖活性升高,ALP活性升高、染色增强,Runx2、OCN、OPN表达升高,矿化结节数量增多、体积增大。抑制VEGFR2/3后,MMC上清液的促成骨作用减弱,ALP活性下降、染色减弱,Runx2、OCN、OPN的表达下降,细胞表面矿化结节数量减少、体积减小。结论:MMC可通过作用于VEGFR2/3促进成骨细胞成骨。

吗啡通过激活VEGF/VEGFR信号通路促进人结肠肿瘤细胞转移

目的:探讨吗啡对结肠肿瘤细胞功能的影响及其机制。方法:蛋白免疫印迹实验检测结肠肿瘤细胞系中VEGF、VEGFR的表达量,10μM、100μM吗啡处理HCT116细胞后VFGF、VEGFR、p-VEGFR的表达量变化。Transwell实验检测吗啡对结肠肿瘤细胞系HT29、HCT116侵袭迁移的影响。结果:蛋白免疫印迹实验结果表明,VEGF和VEGFR的蛋白表达量在HCT116中较低,而吗啡可以促进HCT116细胞VEGF的表达量增加,同时上调VEGFR和p-VEGFR的表达水平。Transwell实验结果表明,吗啡可以促进HT29和HCT116的侵袭迁移。结论:吗啡可能通过激活VEGF/VEGFR信号通路促进人结肠肿瘤细胞侵袭和迁移。

程序性死亡配体1通过激活c-JUN/VEGFR2信号通路调节卵巢癌血管生成和转移

背景与目的细胞程序性死亡配体1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)通过与细胞程序性死亡受体1(programmed cell death-1,PD-1)相互作用,在免疫检查点应答中发挥作用,但是,PD-L1在肿瘤细胞中的作用机制尚未阐明。本研究探讨了PD-L1在卵巢癌进展和转移过程中的分子调控机制。方法对良性卵巢肿瘤组织和卵巢癌组织标本进行免疫组化分析,在PD-L1敲减的卵巢癌细胞中进行迁移、侵袭和血管生成实验。通过免疫沉淀、质谱、染色质免疫沉淀、斑马鱼和小鼠实验,探讨PD-L1在卵巢癌中的具体功能和作用的分子机制。结果体内和体外实验结果表明,PD-L1通过促进血管生成促进卵巢癌的转移和侵袭。在机制上,PD-L1直接与血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR2)相互作用,并激活FAK/AKT通路,进而促进血管生成和肿瘤进展,并与卵巢癌患者预后不良相关。同时,研究发现PD-L1为致癌转录因子c-JUN的下游调控因子,从而使PD-L1在卵巢癌中高表达。此外,实验表明PD-L1抑制剂度伐利尤单抗(durvalumab)和抗血管生成药物阿帕替尼(apatinib)联合使用可以增强抗血管生成作用,抑制卵巢癌细胞转移和侵袭。结论我们的研究结果表明,PD-L1通过激活c-JUN/VEGFR2信号轴促进卵巢癌的血管生成和转移,PD-L1抑制剂和抗血管生成药物联合使用可能是治疗卵巢癌患的潜在方法。

基于计算机辅助药物设计的VEGFR2和PD-L1双靶点抑制剂的筛选

肝细胞癌(HCC)是世界上最具侵袭性的实体恶性肿瘤之一,尽管近几十年来在肝切除术、射频消融和肝移植等方面取得了显著进展,但HCC患者的愈后仍不乐观,主要原因是HCC的高复发率和转移率以及该疾病对化疗和靶向治疗的耐受性。VEGFR2和PD-L1抑制剂联合应用能对小鼠体内的HCC肿瘤进行显著抑制并延长其寿命,因此开发VEGFR2与PD-L1双靶点抑制剂对HCC的治疗具有十分重要的意义。本文基于计算机辅助药物设计(CADD),经过以分子对接为基础的虚拟筛选、MM-GBSA和ADMET评价以及QSAR模型预测,得到了一系列VEGFR2和PD-L1的双靶点活性化合物,有望为后续抑制剂的开发提供思路和方向。

基于虚拟筛选中药当归中抗肿瘤活性成分

运用计算机模拟对当归中具有抗肿瘤活性的化学成分进行虚拟筛选.使用Sybyl软件的Surflex-dock模块对小分子与血管内皮生长因子受体进行分子对接,通过Total Score函数分值判断配体分子结合能力,筛选活性化合物.根据Lipinski五法则,使用Discovery Studio 2019 Client的Filter by Lipinski模块进行类药性预筛选评估.使用Swiss ADME和Discovery Studio 2019 Client软件中ADMET descriptors预测所研究化合物的药动学特性.最后利用分子对接预测化合物与靶点蛋白的相互作用模式.结果显示化合物37(阿魏酸)具有最佳药物样特性,与VEGFR具有较高的结合能力,通过体外Biacore分析得到进一步验证.