人反义VEGF_(121) cDNA表达质粒的构建及其对膀胱癌细胞增殖的影响

目的 构建人反义VEGF121 cDNA真核表达质粒,研究反义基因治疗对膀胱癌细胞增殖的影响。方法将VEGF121反向克隆入真核表达载体pcDNA3中,酶切鉴定。用此真核表达重组质粒转染人膀胱癌细胞株T24,G418筛选获得阳性克隆,RT-PCR法测定转染前后T24细胞中VEGF mRNA表达,ELISA法检测转染前后T24细胞中VEGF蛋白表达。利用MTT法、软琼脂克隆形成试验、流式细胞仪和电镜等检测转染前后T24细胞的生物学性状。结果 获得反义VEGF121 cDNA质粒表达重组质粒。VEGF121反义RNA部分阻断了T24细胞中VEGF表达,转染后肿瘤细胞VEGF mRNA和VEGF蛋白表达都明显减少;转染后单个细胞的克隆形成能力明显减弱;形态学超微结构显示细胞器扩张和肿胀,核染色质边集,凝集成块,可见明显的凋亡改变。结论成功构建了反义VEGF121 cDNA真核表达质粒,转染该质粒可明显抑制膀胱癌细胞增殖,为膀胱癌的基因治疗提供了一定的实验依据。

血管内皮细胞生长因子_(121)(VEGF_(121))在胃癌中的表达及其临床意义

目的 探讨VEGF12 1血管生成因子在胃癌中的表达与胃癌微血管密度及胃癌临床病理特征的关系。方法 采用免疫组织化学方法对 5 9例胃癌、2 5例胃慢性良性病变、15例癌旁正常胃黏膜组织检测VEGF12 1阳性表达及微血管密度 (CD34标记 )。结果 (1)胃癌中VEGF12 1阳性表达率为 79 6 6 % (4 7/5 9) ,高于胃慢性良性病变和癌旁正常组织 (P <0 0 5 ) ;胃癌微血管密度 (MVD)高于胃慢性良性病变和癌旁正常组织 (P <0 0 5 )。 (2 )胃癌中VEGF12 1阳性表达率在不同浸润深度组和有无远处转移组有显著性差异 (P <0 0 5 )。胃癌中微血管数量增加 ,形态结构异常 (P <0 0 5 )。结论 VEGF12 1在胃癌中高表达 ,并与胃癌的浸润转移一致。检测VEGF12 1在胃癌中的表达对判断胃癌的恶性程度有价值。

乳腺癌组织中雌激素受体亚型βmRNA和血管内皮细胞生长因子mRNA的表达及其意义

目的探讨雌激素受体亚型β(ERβ)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)在乳腺癌组织中的表达及其表达的关系。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测35例乳腺癌、12例癌旁乳腺组织和10例乳腺纤维腺瘤组织中ERβmRNA和VEGFmRNA表达,分析其表达之间的关系。结果ERβmRNA在乳腺癌中的表达水平(0.274±0.124)明显低于癌旁乳腺组织(0.538±0.124)和乳腺纤维腺瘤组织(0.459±0.13)(t=6.37、4.09,P均<0.01)。VEGF121、165mRNA在乳腺癌中的表达水平(0.530±0.142、0.336±0.114)明显高于癌旁乳腺组织(0.184±0.098、0.137±0.059)和乳腺纤维腺瘤组织(0.280±0.078、0.187±0.090)的表达(t=6.87和4.69、5.73和3.89,P均<0.01)。VEGF121、165mRNA在有淋巴结转移的乳腺癌组织中表达水平明显高于无淋巴结转移者(P<0.05)。ERβmRNA表达水平与VEGF121、165mRNA的表达水平呈正相关(r=0.785和0.641,P均<0.01)。结论乳腺癌组织中ERβmRNA表达下调,而VEGFmRNA表达上调。VEGFmRNA的表达水平高者可能有利于淋巴结转移。乳腺肿瘤血管生成可能受ERβ的影响。