葛根素注射液对心肌梗塞后大鼠缺血心肌血管新生及VEGFmRNA表达的影响研究

目的观察葛根素注射液对大鼠缺血心肌血管新生和缺血心肌血管内皮生长因子mRNA(VEGFmRNA)表达的影响。方法结扎大鼠左冠状动脉后,随机分为葛根素注射液组、麝香保心丸组(阳性对照)、模型组(阴性对照),并设假手术组。6周后检测各组大鼠缺血心肌中微血管数(MVC)、微血管密度(MVD)及VEGFmRNA的表达及其灰度值。结果模型组、麝香保心丸组及葛根素注射液组大鼠心肌梗塞边缘区MVC和MVD较假手术组明显增多(P<0.05);葛根素注射液组明显高于模型组(P<0.05),与麝香保心丸组相似(P>0.05)。模型组VEGFmRNA表达及其灰度值明显高于假手术组(P<0.05);葛根素注射液组明显高于模型组(P<0.05),低于麝香保心丸组(P<0.05)。结论葛根素注射液可促进大鼠缺血心肌血管新生,其机制可能与促进VEGFFmRNA的表达有关。

重离子辐照对人舌鳞癌Tca8113细胞细胞周期及VEGFmRNA的影响

目的:观察重离子对人舌鳞癌Tca8113细胞细胞周期及VEGFmRNA表达的影响。方法:分别用0、1、4Gy的重离子及X线辐照体外培养的人舌鳞癌Tca8ll3细胞,流式细胞技术观察细胞周期的变化;原位杂交法检测VEGFmRNA表达。结果:流式细胞术结果,OGy组未出现阻滞,重离子照射组剂量1Gy时,12h出现G2/M期阻滞,4Gy时在36、48h出现G2/M期明显阻滞,X线照射组在1Gy时未出现阻滞,4Gy时,24、36h出现G2/M期阻滞,与0Gy组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。原位杂交结果,与0Gy组相比,1Gy时经重离子及X线辐照后Tca8113细胞VEGFmRNA表达降低,4Gy时,重离子组VEGFmRNA表达明显降低,X线组4Gy辐照后VEGFmRNA阳性表达率与重离子组1Gy差异无统计学意义。结论:重离子较X线对舌鳞癌细胞细胞周期及VEGFmRNA影响更明显,有更可靠的抑癌效果。

健胃愈疡颗粒对消化性溃疡患者胃黏膜VEGFmRNA表达的影响

目的探讨健胃愈疡颗粒(JWYY)对胃溃疡(GU)患者胃黏膜VEGFmRNA表达的影响,揭示其抗溃疡复发的分子机制。方法将60例胃镜下确诊的GU(中医辨证为肝郁脾虚证)患者,随机分为JWYY治疗组和西药对照组,每组30例;另设胃镜下无胃黏膜病变的患者10例为正常组。两组GU患者第1个疗程结束前后均于胃镜下取溃疡边缘组织活检标本用RT-PCR方法检测VEGFmRNA。结果JWYY能提高人胃黏膜VEGFmRNA表达,两组经统计学处理无显著性差异。结论JWYY能增强人胃黏膜VEGFmRNA的上增性表达,从而提高溃疡愈合质量,是JWYY抗胃溃疡复发作用的部分机制。

原位种植肝癌新生血管的检测及血管内皮细胞生长因子mRMA的表达

目的:观察大鼠原位种植肝癌模型中的新生血管的生长情况,研究肿瘤血管生长因子基因的表达和肝癌新生血管之间的关系。 方法:采用Walker256癌肉瘤接种40只Wistar大鼠制作原位种植肝癌模型,用微血管计数以及免疫组织化学染色法检测平滑肌激动蛋白(α-SMA)的表达来标志肿瘤新生血管。血管肉皮细胞生长因子基因的检测采用原位杂交法进行。 结果:Walker256癌肉瘤接种后1、2、3 wk肿瘤微血管密度分别为(15±4.3)/HP、(17±3.6)/HP、(45±7.8)/Hp。大血管及正常微血管(毛细血管除外)周围α-SMA呈强阳性染色。在肝癌组织中可见到一些形态不规则的微血管呈弱阳性或阴性染色是肿瘤诱导的新生血管,肝癌组织有大量新生血管形成,新生血管的数量与微血管密度呈正相关,Walker256癌肉瘤接种后3 wk较前2wk有显著性增加。正常肝脏组织仅有少量VEGF mRNA表达,肝癌组织接种后1wk即有多种细胞表达VEGF。新生血管较密集的肿瘤组织VEGF的表达较多。VEGF的表达与微血管密度和肿瘤组织中新生血管的数量呈正相关。 结论:原位接种肝癌中有大量新生血管形成,平滑肌激动蛋白(α-SMA)的表达可以用来标记肿瘤新生血管。肝癌组织中血管内皮细胞生长因子的表达增加可能和肿瘤新生血管的形成有一定的关系。

芪贞固本方对Lewis肺癌小鼠转移的抑制作用及机制研究

目的:研究芪贞固本方对Lewis肺癌小鼠的转移抑制作用及作用机制。方法:建立Lewis肺癌小鼠模型,按实验分组干预,计算比较各组抑瘤率、肺转移抑制率,免疫组化法检测E-钙黏素表达,RT-PCR法检测VEGFmRNA表达。结果:芪贞固本方有一定的抑瘤及肺转移抑制作用,抑瘤率及肺转移抑制率分别为:13.97%、19.13%;与对照组相比,芪贞固本方可明显下调VEGFmRNA的表达,促进E-钙黏素的表达(P<0.05),与顺铂合用时作用增强。结论:芪贞固本方可抑制Lewis肺癌小鼠转移,其机制可能是促进E-钙黏素的表达,下调VEGFmRNA的表达。

血管内皮生长因子在子宫内膜异位症中的作用

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在子宫内膜异位症(EM)中的作用。方法:应用RT-PCR方法检测33例子宫内膜异位症患者的33份卵巢子宫内膜异位囊肿及32份在位子宫内膜组织中VEGFmRNA的表达情况,并进行阳性率及半定量的比较。以26例非子宫内膜异位症患者的26份子宫内膜组织作为对照。结果:EM组卵巢子宫内膜异位囊肿VEGFmRNA表达与在位子宫内膜比较,水平较低(P<0.05),但高于对照组(P<0.05);在位子宫内膜与对照组比较VEGFmRNA表达水平较高(P<0.01);在不同月经周期中,在位内膜组和对照组分泌期VEGFmRNA表达水平均高于增生期(P<0.01),在位内膜组分泌期和增生期的VEGFmRNA表达水平均分别高于对照组(P<0.01)。结论:EM患者的异位子宫内膜中VEGFmRNA的表达,可能与其血管化程度有关;VEGF对EM的发生发展具有重要意义。

大鼠局灶性脑缺血再灌注后VEGF及VEGF mRNA的表达

目的:探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织内血管内皮细胞生长因子(VEGF)及VEGFmRNA的表达及意义。方法:制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,动物分为缺血2h再灌注6h、12h、2 4h、4 8h、72h及假手术对照组。应用免疫组化法检测VEGF蛋白的表达;RT -PCR法检测VEGFmRNA的动态变化。结果:大鼠缺血再灌注6h ,缺血侧脑组织梗死灶周边VEGF免疫阳性反应已出现,2 4h明显增多,4 8h达高峰;VEGFmRNA在6h开始上升,12h达高峰,2 4h开始下降,4 8～72h接近正常水平。结论:脑缺血再灌注损伤可以诱导VEGF表达增强。

消渴通痹颗粒对糖尿病大鼠下肢缺血肌组织HIF-1α和VEGF表达的影响

目的观察消渴通痹颗粒对糖尿病大鼠下肢缺血肌组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的影响。方法取SD大鼠60只,随机取10只作为空白组,其余大鼠采用高脂饮食复合链脲佐菌素、股动脉结扎法建立糖尿病大鼠下肢缺血模型。将造模成功大鼠随机分为模型组,消渴通痹颗粒大、中、小剂量组及西医药组,空白组及模型组给予生理盐水10 m L/(kg·d)灌胃,消渴通痹颗粒大、中、小剂量组分别给予消渴通痹颗粒1.875 g/(kg·d)、1.35 g/(kg·d)、0.625 g/(kg·d)灌胃,西药组给予西洛他唑45 mg/(kg·d)灌胃,连续灌胃6周。观察大鼠一般情况及体质量、血糖变化,取缺血侧肌肉采用实时定量PCR法检测HIF-1αmRNA和VEGFmRNA表达情况。结果消渴通痹颗粒大、中、小剂量组灌胃6周后大鼠体质量均明显高于模型组(P均<0.05),且消渴通痹颗粒中剂量组大鼠体质量明显高于消渴通痹颗粒大、小剂量组(P均<0.05);消渴通痹颗粒中剂量组血糖水平明显低于模型组及其他给药组(P均<0.05)。模型组HIF-1αmRNA和VEGFmRNA表达量均明显高于空白组(P均<0.05),各给药组HIF-1αmRNA和VEGFmRNA表达量均明显低于模型组(P均<0.05),且消渴通痹颗粒中剂量组HIF-1αmRNA和VEGFmRNA表达量均明显低于消渴通痹颗粒大剂量组(P均<0.05)。结论消渴通痹颗粒可通过增加缺血部位肌肉组织中HIF-1αmRNA和VEGFmRNA表达而促进缺血组织新生血管形成,改善糖尿病肢体缺血状态。

辐射损伤对小鼠不同组织VEGF表达的影响

目的探讨小鼠肺、胸腺、小肠、脾不同组织受到辐射损伤后血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA的表达及意义。方法使用不同剂量(0、4、8 Gy)的X射线照射小鼠,然后取其肺、胸腺、小肠、脾组织。用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法研究照射后24h不同组织中的VEGF mRNA表达水平。结果经4、8 Gy射线照射后24h,肠、肺组织VEGF mRNA表达水平与正常对照组相比,无显著差异(p>0.05)。脾、胸腺组织VEGF mRNA表达水平与正常对照组相比,均升高。4 Gy射线照射后VEGF mRNA表达水平与其它剂量射线照射组相比显著升高(P<0.01)。结论不同剂量辐射损伤后脾、胸腺组织VEGF mRNA表达增强,肠、肺组织VEGF mRNA表达变化差异不大,VEGF可能对免疫系统比对其他组织的辐射防护作用大,这为放射性损伤的治疗提供了理论依据。

血管内皮生长因子在子宫颈癌组织中的表达及意义

目的 探讨血管内皮生长因子 (VEGF ,VEGFmRNA)在子宫颈癌组织中的表达及意义。方法 采用免疫组织化学技术SP法及原位杂交方法检测 33例宫颈癌 ,其中鳞癌 2 0例 ,腺癌 13例及 10例正常宫颈组织中VEGF及VEGFmRNA的表达情况。结果 宫颈癌组织切片中VEGF及VEGFmRNA皆有活跃表达。正常宫颈组织中VEGFmRNA呈阴性表达 ,VEGF蛋白可见弱阳性表达 ,两组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;宫颈癌组织切片中的VEGFmRNA的表达与宫颈癌病理类型比较差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;而与宫颈癌临床分期及病理分化程度比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 VEGF及VEGFmRNA的阳性表达在子宫颈癌的发生 ,发展中可能有着重要的意义。VEGF的检测对判断宫颈癌的病理类型有一定的临床价值。

骨蚀灵胶囊对兔早期激素性股骨头坏死骨组织VEGF mRNA表达的影响

目的:观察骨蚀灵胶囊对兔早期激素性股骨头坏死(SANFH)骨组织中VEGFmRNA表达的影响,探讨中药防治早期激素性股骨头坏死的可行性及其机理。方法:选用成年日本大耳白兔,随机分为3组:正常对照组、模型组和中药组。采用马血清和甲强龙联合应用的方法复制SANFH模型,中药组于激素注射完毕后第二天进行骨蚀灵胶囊灌胃治疗,4、8周分批处死动物,应用RT-PCR技术检测股骨头骨组织中VEGFmRNA表达的变化。结果:与正常组比较,模型组股骨头骨组织中VEGFmRNA表达明显降低,8周时较4周时降低明显,差异有统计学意义(P<0.05);中药组VEGFmRNA表达较模型组明显升高,但仍未达到正常水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:增强股骨头骨组织VEGFmRNA表达是骨蚀灵胶囊有效治疗激素性股骨头坏死的作用机制之一。

健胃愈疡颗粒对胃溃疡复发大鼠胃组织VEGF mRNA表达的影响

目的以IL-1β所致胃溃疡复发大鼠为模型,探讨健胃愈疡颗粒抗复发机制。方法以Okeba改良法复制大鼠实验性胃溃疡,腹腔注射IL-1β制作复发模型。采用RT-PCR法观察该药对胃溃疡组织血管内皮生长因子(Vascularendothelialgrowthfactor,VEGFmRNA)表达的影响。结果健胃愈疡组VEGFmR-NA的表达较模型组及对照组显著增高。结论健胃愈疡颗粒可增高VEGFmRNA的上增性表达,这可能是其促进溃疡愈合,减少溃疡复发的机制之一。

膀胱癌VEGF mRNA表达与浸润转移的关系

目的 探讨血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)mRNA在膀胱癌组织中的表达状况。方法 用逆转录聚合酶链反应法 (RT PCR)检测 2 7例膀胱癌及其癌周组织VEGFmRNA的表达情况。结果 病理活检证实的 2 7例膀胱癌组织中 ,VEGFmRNA阳性表达 13例 ,阴性 14例 ;癌旁组织均无表达 ,癌组织表达率明显高于癌周组织 (P <0 .0 1) ;18例表浅癌VEGFmRNA阳性表达 6例 ;9例浸润癌中VEGFmRNA阳性表达 7例 ,浸润性膀胱癌VEGFmRNA表达率明显高于表浅癌 (P <0 .0 5 )。结论 VEGFmRNA的表达增高与膀胱癌的局部发展和转移可能有关 ,可作为判断膀胱癌生物学行为的指标之一。

新生儿脐血受辐射损伤后VEGF及VEGF mRNA的表达

目的探讨新生儿脐血受到辐射损伤后细胞中血管内皮细胞生长因子(VEGF)和VEGF mRNA的表达及意义。方法使用不同剂量(0、2、4、8、16Gy)的射线照射脐血,用实时定量PCR法及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测照射后脐血体外培养24h后细胞中的VEGF蛋白及VEGF mRNA表达水平。结果经2、4、8、16Gy射线照射后24h,脐血细胞中的VEGF蛋白及VEGF mRNA表达水平较正常对照组均显著升高。其中4Gy照射后24h脐血VEGF蛋白及VEGF mRNA表达水平升高最显著。结论不同剂量辐射后脐血细胞中VEGF蛋白及VEGF mRNA表达增强,可能起到某种调控作用。

麝香保心丸对体外培养的人结肠癌细胞LoVo增殖和原血管生成因子表达的影响

目的:探讨麝香保心丸对体外培养的肿瘤细胞增殖以及原血管生成因子表达的影响. 方法:在体外用麝香保心丸含药血清处理LoVo细胞,MTT比色实验法检测对肿瘤细胞生长的作用,流式细胞仪检测麝香保心丸对LoVo细胞周期及凋亡指数的影响;RT-PCR观察麝香保心丸对LoVo细胞VEGFmRNA和bFGFmRNA表达的影响.

高表达α1-AT基因抑制肺腺癌细胞VEGFm RNA表达

目的:观察高表达α1-AT基因对肺腺癌细胞生长曲线以及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达水平的影响,探讨高表达α1-AT基因在肺腺癌血管生成中的作用。方法:以脂质体为载体将重组质粒pcDNA3.1(+)-α1-AT转染至人腺癌细胞株A549,利用G418筛选获得阳性克隆;采用细胞计数法绘制转染前后细胞生长曲线;RT-PCR法半定量分析转染前后细胞中VEGF的表达水平的变化。结果:转染α1-AT基因后,A549细胞生长受到抑制,VEGFmRNA表达水平下降,较未转染α1-AT的细胞有显著性下降。结论:高表达α1-AT基因能够抑制肺腺癌细胞VEGFmRNA表达,抑制肿瘤血管的形成。

电针联合扶正理气合剂对大鼠肝癌生长及转移的影响及相关机制

目的观察电针联合扶正理气合剂对大鼠肝癌生长及转移的影响并探讨其作用机制。方法雄性Wistar大鼠200只,随机分为5组。以二乙基亚硝胺(DEN)灌胃诱导大鼠肝癌模型,电针组造模同时给予电针足三里、关元、内关、三阴交、肝俞穴治疗,扶正理气合剂组给予扶正理气合剂灌胃,针药联合组则予上述电针和扶正理气合剂治疗,共16周。造模16周后处死大鼠取肝脏组织标本,肉眼及光镜下观察肿瘤生长和转移情况;免疫组化法测定肝组织NF-κB活性及微血管密度(MVD),RT-PCR法检测肝组织中转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达,放射免疫法测定肝组织活性氧(ROS)、抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性、脂质过氧化产物(LPO)含量。结果与正常对照组比较,模型组大鼠的肿瘤生长和转移参数、ROS、LPO含量、NF-κB活性、TGF-β1 mRNA、VEGF mRNA、MVD表达显著增加(P<0.01),而T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT活性明显下降(P<0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠的肿瘤生长和转移参数、ROS、LPO含量、NF-κB活性、TGF-β1mRNA、VEGF mRNA及MVD表达显著下降,而T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT活性明显上升(P<0.01),联合治疗组上述指标优于其他治疗组(P<0.05)。NF-κB活性与TGF-β1mRNA及VEGF mRNA呈正相关关系(r1=0.554,P<0.05;r2=0.572,P<0.05)。结论电针和扶正理气合剂均能显著降低实验性肝癌大鼠的NF-κB活性、TGF-β1mRNA及VEGF mRNA及MVD表达,从而降低肿瘤生长和转移参数,这与其清除自由基有密切关系。