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高产莫能菌素肉桂地链霉菌的透明颤菌vgb基因异源表达
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作者 李欣颖 张善飞 +2 位作者 刘旻炜 黄子瑄 孙付保 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1-9,共9页
肉桂地链霉菌(Streptomyces cinnamonensis)发酵产生的聚醚类抗生素莫能菌素(Monensin)因其环保且高效的特性而被广泛应用在医药、农业等领域,但莫能菌素实际生产中普遍的低氧条件严格限制了肉桂地链霉菌发酵莫能菌素水平。该文在前期... 肉桂地链霉菌(Streptomyces cinnamonensis)发酵产生的聚醚类抗生素莫能菌素(Monensin)因其环保且高效的特性而被广泛应用在医药、农业等领域,但莫能菌素实际生产中普遍的低氧条件严格限制了肉桂地链霉菌发酵莫能菌素水平。该文在前期整合表达莫能菌素生物合成基因簇中途径特异性正向调控基因(monH、monRⅡ)基础上,尝试通过异源整合表达透明颤菌血红蛋白基因vgb,以期通过改善菌株摄取溶氧能力来提高莫能菌素产量。结果显示,在40 mmol/L Ca^(2+)、供受体菌比例100∶1和培养18 h覆盖抗生素条件下,接合转移效率提高3倍;成功将基因vgb与莫能菌素生物合成途径特异性调控基因monH/monRⅡ进行串联整合,得到工程菌2110-monH-vgb和2110-monH-monRⅡ-vgb,其摇瓶生物量在高限氧条件下稍有提高(6%),但发酵效价分别较异源表达前提高18.0%和21.3%;后者在5 L罐水平生物量较异源表达前略有提高,发酵效价高达11.5 kU/mL,较出发菌提高47.3%。通过优化遗传操作系统并用于肉桂地链霉菌发酵产莫能菌素基因工程改造,成功获得有效提高莫能菌素发酵效价的vgb异源串联整合表达菌,为其后续的工业应用奠定基础。 展开更多
关键词 肉桂地链霉菌 莫能菌素 接合转移 异源表达 透明颤菌血红蛋白基因vgb
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在兽疫链球菌中表达vgb基因和HA合成基因提高透明质酸产量 被引量:11
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作者 郝宁 张晋宇 陈国强 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期56-60,共5页
透明质酸(HA)是一种在医药及化妆品领域具有广泛应用的天然粘多糖。兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicus)是工业上生产透明质酸的菌种之一。透明颤菌血红蛋白(VHb)具有增强细胞摄氧的作用。对生产透明质酸的兽疫链球菌进行了基因改... 透明质酸(HA)是一种在医药及化妆品领域具有广泛应用的天然粘多糖。兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicus)是工业上生产透明质酸的菌种之一。透明颤菌血红蛋白(VHb)具有增强细胞摄氧的作用。对生产透明质酸的兽疫链球菌进行了基因改造:将兽疫链球菌HA的合成基因hasABC以及合成透明颤菌血红蛋白的vgb基因(Vitreoscilla hemoglobin gene,vgb)分别或同时插入阳性菌表达质粒pEU308中,通过电转化导入兽疫链球菌中。通过一氧化碳(CO)差光谱检测到了VHb的表达。在摇瓶实验中,同时带有hasABC和vgb基因的重组菌比野生菌的透明质酸产量提高了30%。而在发酵罐中,带有这2个基因的重组菌的透明质酸产量达到了6.9g/L,高于重组菌5.5g/L的产量。实验结果表明,vgb基因的存在促进了细胞的生长,hasABC操纵子的过表达增强了透明质酸的合成。首次将VHb导入兽疫链球菌中,获得了表达,并证明其对菌体生长及透明质酸合成有促进作用。通过研究,VHb将可以在阳性菌中获得更广泛的应用。 展开更多
关键词 兽疫链球菌 vgb基因 HA合成基因 基因转化 透明质酸 发酵 产量
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转vgb基因银腺杂种杨的耐涝性 被引量:5
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作者 李义良 苏晓华 +2 位作者 张冰玉 黄秦军 张香华 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第7期26-31,共6页
对导入透明颤菌血红蛋白(vitreoscilla hemoglobin,VHb)基因vgb银腺杂种杨进行Southern印记杂交和RT-PCR检测,证实vgb基因已整合到杨树基因组中,并在转录水平上得到表达。在温室对4个转基因株系及对照盆栽扦插苗进行模拟持续淹水胁迫试... 对导入透明颤菌血红蛋白(vitreoscilla hemoglobin,VHb)基因vgb银腺杂种杨进行Southern印记杂交和RT-PCR检测,证实vgb基因已整合到杨树基因组中,并在转录水平上得到表达。在温室对4个转基因株系及对照盆栽扦插苗进行模拟持续淹水胁迫试验,研究淹水条件下植株的生长及生理性状。结果表明,随着淹水时间的延长苗木逐渐死亡,对照植株在淹水17天后死亡率达66.67%,而4个转基因株系死亡率均低于50.00%,其中T81最低,只有25.00%;同时4个转基因株系在淹水胁迫时能够保持较高的叶绿素含量,并且膜质过氧化物MDA含量均低于对照植株;涝渍胁迫下转基因株系生长受抑制程度低于对照植株。说明在淹水胁迫下vgb基因的表达增强了银腺杂种杨叶绿素含量的积累,进而促进了转基因植株的生长,提高了转基因株系对淹水的忍受能力。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因(vgb) 耐涝性 银腺杂种杨
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利用根瘤农杆菌LBA4404 Ti质粒介导高效转化产黄青霉及克隆vgb基因 被引量:7
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作者 孙传宝 朱春宝 +1 位作者 朱宝泉 许文思 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期87-91,107,共6页
通过根瘤农杆菌 (Agrobacterium tumefaciens) L BA4 4 0 4中 Ti-质粒的介导将含有透明颤菌血红蛋白 (Vitreoscilla Hemoglobin,VHb)基因 vgb和博来霉素 (bleomycin)抗性基因转移到产黄青霉 (Penicilliumchrysogenum)中 ;利用根瘤农杆... 通过根瘤农杆菌 (Agrobacterium tumefaciens) L BA4 4 0 4中 Ti-质粒的介导将含有透明颤菌血红蛋白 (Vitreoscilla Hemoglobin,VHb)基因 vgb和博来霉素 (bleomycin)抗性基因转移到产黄青霉 (Penicilliumchrysogenum)中 ;利用根瘤农杆菌介导转化产黄青霉孢子时需要有乙酰丁香酮诱导 ;转化菌丝体时乙酰丁香酮不是必要的 ,但一定浓度的乙酰丁香酮可提高转化率 ,与原生质体转化法相比可提高转化率 10倍左右。 展开更多
关键词 根瘤农杆菌 TI质粒 产黄青霉 vgb基因 原生质体转化法
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整合型vgb基因载体的构建和研究 被引量:10
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作者 吴奕 杨胜利 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期276-283,共8页
运用染色体-质粒同源基因重组的方法将外源Vitreoscilla血红蛋白基因(vgb)整合在大肠杆菌JM105染色体的苏氨酸操纵子位置上,构建单拷贝的vgb表达载体VG1。VG1保持了vgb基因的生理功能,可在低氧条件下表达Vitreoscilla血红蛋白使细胞适... 运用染色体-质粒同源基因重组的方法将外源Vitreoscilla血红蛋白基因(vgb)整合在大肠杆菌JM105染色体的苏氨酸操纵子位置上,构建单拷贝的vgb表达载体VG1。VG1保持了vgb基因的生理功能,可在低氧条件下表达Vitreoscilla血红蛋白使细胞适应贫氧环境;同时它克服了以质粒作为表达载体时vgb基因剂量和表达量过高带来的生理负担,因此可作为一种适于高密度培养的基因工程宿主菌。实验结果还显示vgb基因的表达使VG1与普通大肠杆菌相比在低氧条件下仍能维持较高的呼吸强度,说明vgb基因产物参与了细胞处于低氧水平时的代谢过程。 展开更多
关键词 基因载体 vgb基因 整合型
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利用透明颤菌血红蛋白基因vgb改造毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K的研究 被引量:4
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作者 孟志刚 张锐 +1 位作者 陈毓荃 郭三堆 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期166-170,共5页
为了解决酵母发酵时贫氧限制目的蛋白表达量,利用透明颤菌血红蛋白基因vgb设计毕赤酵母分泌 型表达载体pPIC9K-vgb,并以人乳铁蛋白基因为目的基因转入毕赤酵母GS115。研究结果表明,该表达载体具 有转化操作简单、后期工程菌筛选简便、... 为了解决酵母发酵时贫氧限制目的蛋白表达量,利用透明颤菌血红蛋白基因vgb设计毕赤酵母分泌 型表达载体pPIC9K-vgb,并以人乳铁蛋白基因为目的基因转入毕赤酵母GS115。研究结果表明,该表达载体具 有转化操作简单、后期工程菌筛选简便、菌体耐低氧能力强、目的蛋白摇瓶表达量高等优点。该表达载体也可 以通过直接替换目的基因而用于其他蛋白表达系统的开发研究。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因vgb 毕赤酵母 表达载体pPIC9K 人乳铁蛋白
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透明颤菌vgb基因整合型大肠杆菌的培养特性 被引量:1
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作者 陈新爱 徐志南 +1 位作者 王芳 岑沛霖 《浙江大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第1期124-128,共5页
透明颤菌血红蛋白(VHb)是一种氧调节、氧结合蛋白,其基因vgb的表达在转录水平上受氧调控.大肠杆菌E.coliBV是采用基因同源重组方法将vgb基因整合到基因工程常用宿主菌E.coliBL21中构建得到的.研究了不同价态的铁离子对同源重组菌的生长... 透明颤菌血红蛋白(VHb)是一种氧调节、氧结合蛋白,其基因vgb的表达在转录水平上受氧调控.大肠杆菌E.coliBV是采用基因同源重组方法将vgb基因整合到基因工程常用宿主菌E.coliBL21中构建得到的.研究了不同价态的铁离子对同源重组菌的生长特性及VHb合成的影响,研究表明,0.2mmol/L的二价铁离子具有促进VHb表达从而刺激菌体细胞生长的作用.在0.1L/h低通气量条件下,E.coliBV分别进行间歇培养和流加培养,低溶氧刺激VHb在短时间内迅速大量合成,改善了细胞内氧的传递性能,使生长期分别延长到25h和45h,生物量(DCW)分别达到9.6g/L和26g/L. 展开更多
关键词 透明颤菌 vgb基因 基因同源重组 血红蛋白 大肠杆菌 基因表达 基因工程 微生物培养
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产黄青霉vgb转化菌PTH-1嗜盐新特性研究 被引量:2
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作者 孙传宝 朱春宝 +1 位作者 朱宝泉 许文思 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期64-67,共4页
利用 Ca Cl2 /PEG介导的原生质体转化法获得一株有产抗能力的产黄青霉 vgb转化菌 PTH- 1。该转化菌具有嗜盐性 ,必须在含有高浓度 KCl的培养基中才能生长。在该盐条件下转化菌 PTH - 1对博莱霉素抗性稳定 ,具有摄氧率高、易自溶、细胞... 利用 Ca Cl2 /PEG介导的原生质体转化法获得一株有产抗能力的产黄青霉 vgb转化菌 PTH- 1。该转化菌具有嗜盐性 ,必须在含有高浓度 KCl的培养基中才能生长。在该盐条件下转化菌 PTH - 1对博莱霉素抗性稳定 ,具有摄氧率高、易自溶、细胞壁脆弱等特性。在高盐发酵试验中 ,PTH - 1产抗比对照株提高 14%。 展开更多
关键词 产黄青霉 嗜盐性 青霉素Ⅴ PTH-1 vgb转化菌
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透明颤菌vgb基因在枯草芽孢杆菌中的整合表达 被引量:1
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作者 张西锋 李万芬 郭蔼光 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2009年第9期199-203,共5页
【目的】将透明颤菌血红蛋白(VHb)基因(vgb)在枯草芽孢杆菌中进行整合表达,提高β-半乳糖苷酶的产量。【方法】用枯草芽孢杆菌整合载体pA01和启动子P43构建vgb基因的整合表达载体pA-vgb,通过双交叉整合方式,将vgb基因整合到枯草芽孢杆菌... 【目的】将透明颤菌血红蛋白(VHb)基因(vgb)在枯草芽孢杆菌中进行整合表达,提高β-半乳糖苷酶的产量。【方法】用枯草芽孢杆菌整合载体pA01和启动子P43构建vgb基因的整合表达载体pA-vgb,通过双交叉整合方式,将vgb基因整合到枯草芽孢杆菌DB104:bga的染色体上,构建枯草芽孢杆菌DB104:vbga。采用PCR和Southern blot对DB104:vbga进行检测,并通过发酵摇瓶试验研究VHb对β-半乳糖苷酶产量的作用。【结果】PCR与Southern blot检测结果表明,枯草芽孢杆菌DB104:vbga中vgb基因整合位置正确,且表达的VHb蛋白具有生物学活性。摇瓶试验结果表明,在转速250 r/min条件下,枯草芽孢杆菌DB104:vbga与DB104:bga的β-半乳糖苷酶活性无显著差异;在150 r/min的限氧条件下,vgb基因的表达促使DB104:vbga的β-半乳糖苷酶活性较DB104:bga提高了14.9%。【结论】vgb基因可用于提高枯草芽孢杆菌目的蛋白的产量。 展开更多
关键词 透明颤菌 枯草芽孢杆菌 vgb基因 同源重组
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根癌农杆菌介导透明颤茵血红蛋白基因(vgb)在短密青霉菌中的克隆表达 被引量:2
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作者 董玉国 王丽华 +3 位作者 徐瑞 张舰 孙爱友 魏东芝 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第1期133-137,共5页
利用根癌农杆菌LBA4404介导,将编码透明颤菌血红蛋白的结构基因(Vitreoscilla Hemoglobin gene,vgb)导入到短密青霉ATCC16024中,用于改善菌体对氧的摄取能力,提高霉酚酸(Myhophenoilc Acid,MPA)的发酵水平,降低生产成本。通过潮霉素抗... 利用根癌农杆菌LBA4404介导,将编码透明颤菌血红蛋白的结构基因(Vitreoscilla Hemoglobin gene,vgb)导入到短密青霉ATCC16024中,用于改善菌体对氧的摄取能力,提高霉酚酸(Myhophenoilc Acid,MPA)的发酵水平,降低生产成本。通过潮霉素抗性筛选、PCR分子鉴定和MPA发酵验证等结果表明,vgb基因在短密青霉中成功获得了表达;vgb基因的表达提高了短密青霉的菌体密度,转化子MPA产量达到2.18 g·L?1,比原始菌株提高了27.5%。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 短密青霉 vgb 霉酚酸 发酵
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同源重组整合vgb基因提升枯草芽孢杆菌亚麻脱胶能力 被引量:3
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作者 张懿翔 丁若垚 +2 位作者 陈婷 郁崇文 张兴群 《中国麻业科学》 2015年第2期87-94,共8页
【目的】将透明颤菌血红蛋白(VHb)基因(vgb)在枯草芽孢杆菌中进行整合表达,以改善枯草芽孢杆菌的呼吸强度,通过高密度培养提高果胶酶的表达量,最终明显改善脱胶效果。【方法】构建含有vgb基因、amy E基因以及启动子P43的p SK-vgb(+)质粒... 【目的】将透明颤菌血红蛋白(VHb)基因(vgb)在枯草芽孢杆菌中进行整合表达,以改善枯草芽孢杆菌的呼吸强度,通过高密度培养提高果胶酶的表达量,最终明显改善脱胶效果。【方法】构建含有vgb基因、amy E基因以及启动子P43的p SK-vgb(+)质粒,通过同源重组的方法,将vgb基因整合到枯草芽孢杆菌A5的染色体上,得到稳定表达透明颤菌血红蛋白的枯草芽孢杆菌A5-vgb(+)。分别采用PCR和CO差光谱分析法检测vgb基因的整合状态与血红蛋白的稳定表达,并通过发酵摇瓶试验研究VHb对菌株果胶酶产量的影响。将构建好的A5-vgb(+)菌株进行脱胶试验,通过XRD结晶度与电镜扫描分析鉴定脱胶效果。【结果】PCR与CO差光谱检测表明,vgb基因成功整合在A5菌株中,且正确表达的VHb具有生物学活性,在150 rpm,37℃,p H=8.0,16小时发酵的条件下,vgb基因的表达促使A5-vgb(+)菌株的果胶酶产量较不含vgb基因的菌株提升了29.5%。XRD与电镜扫描结果表明,构建的A5-vgb(+)菌株的脱胶效果相较于不含vgb的菌株,在结晶度上提高了0.55%,表面更光滑。【结论】将vgb基因整合至枯草芽孢杆菌A5菌株中,可提高A5菌株的脱胶效果。 展开更多
关键词 生物脱胶 果胶酶 枯草芽孢杆菌 vgb基因 同源重组
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将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)转移到链霉菌染色体整合载体的构建 被引量:4
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作者 张桂敏 周秀芬 +1 位作者 邓子新 庄永红 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期602-605,共4页
链霉菌抗生素的生物合成对培养环境中氧的供应相当敏感 ,为了改善这一溶氧问题 ,本研究通过将透明颤菌血红蛋白基因 (vgb)克隆到含ФC31int,attP基因的诱导型表达载体pIJ86 0 0上 ,构建了可接合转移到链霉菌的整合型表达vgb基因的质粒 p... 链霉菌抗生素的生物合成对培养环境中氧的供应相当敏感 ,为了改善这一溶氧问题 ,本研究通过将透明颤菌血红蛋白基因 (vgb)克隆到含ФC31int,attP基因的诱导型表达载体pIJ86 0 0上 ,构建了可接合转移到链霉菌的整合型表达vgb基因的质粒 pHZ12 76。pHZ12 76通过接合转移导入变铅青链霉菌 (Streptomyceslivi dans) ,所得重组子经Southern杂交验证后 ,进行诱导表达 ,菌体经破碎后所得蛋白粗提物经Western杂交和CO结合试验表明vgb基因在该菌中表达出了有活性的VHb蛋白。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因 变铅青链霉菌 整合型 基因表达
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透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在大肠杆菌中的高效表达 被引量:4
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作者 祁艳霞 杨明明 +3 位作者 高文 祝发明 樊俊华 陈玉林 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2005年第8期7-9,共3页
利用PCR技术将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)克隆到融合表达载体pET28 a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达。重组蛋白在30℃诱导获得可溶表达。利用N i2+亲和层析对重组蛋白进行了纯化,得到重组的透明颤菌血红蛋白,蛋白呈红色。实验现象显示重组蛋... 利用PCR技术将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)克隆到融合表达载体pET28 a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达。重组蛋白在30℃诱导获得可溶表达。利用N i2+亲和层析对重组蛋白进行了纯化,得到重组的透明颤菌血红蛋白,蛋白呈红色。实验现象显示重组蛋白与血红素相结合。紫外光区和可见光区波长扫描分析显示:蛋白粗提物和纯化后的血红蛋白在230 nm和413 nm都有强吸收峰,初步表明,尽管重组蛋白比天然蛋白多36个氨基酸,重组蛋白仍然具有生理活性。诱导后4 h和6 h的培养液氨基乙酰丙酸含量分别达到17 mg/L和21 mg/L,说明重组蛋白的表达明显促进了体内hem e合成途径。 展开更多
关键词 透明颠菌 血红蛋白基因 表达
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vgb在红色糖多孢菌表达及生物活性的研究 被引量:2
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作者 吴益民 王洪军 +4 位作者 孙艳 王立强 张志强 冯立 杨青 《药物生物技术》 CAS CSCD 2007年第2期90-93,共4页
利用基因工程技术对红色糖多孢菌进行改造,提高红霉素产率。用PCR技术克隆vgb,采用电穿孔法与红色糖多孢发酵菌染色体整合,鉴定采用Western blot与Southern blotting分析。VHb活性分析采用一氧化碳(CO)差示光谱法,红霉素效价测定采用管... 利用基因工程技术对红色糖多孢菌进行改造,提高红霉素产率。用PCR技术克隆vgb,采用电穿孔法与红色糖多孢发酵菌染色体整合,鉴定采用Western blot与Southern blotting分析。VHb活性分析采用一氧化碳(CO)差示光谱法,红霉素效价测定采用管碟法。结果克隆了含vgb的红色糖多孢菌表达质粒(pBlueV),筛选了重组红色糖多孢菌株。与原始菌株比较,重组菌株细胞发酵密度分别为1.37与2.82,红霉素效价分别为3.8与5.1,相当于重组菌株提高红霉素体积产率约29%。重组红色糖多孢发酵菌提高了红霉素产率,对解决抗生素工业和基因工程菌高密度发酵有良好的应用前景。 展开更多
关键词 血红蛋白基因 红色糖多孢菌 红霉素 高密度发酵
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透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在阿维链霉菌的整合表达 被引量:4
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作者 张桂敏 周秀芬 邓子新 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期138-142,共5页
pHZ1276是透明颤菌血红蛋白基因(vgb)的诱导型表达载体,携带有硫链丝菌素诱导的强启动子PtipA和ФC31int,attP基因使载体整合在染色体上。本研究利用组成型启动子ermP1P2替代pHZ1276上的诱导型启动子PtipA构建了组成型表达血红蛋白基因... pHZ1276是透明颤菌血红蛋白基因(vgb)的诱导型表达载体,携带有硫链丝菌素诱导的强启动子PtipA和ФC31int,attP基因使载体整合在染色体上。本研究利用组成型启动子ermP1P2替代pHZ1276上的诱导型启动子PtipA构建了组成型表达血红蛋白基因的质粒pHZ1291。将vgb基因去掉后构建了组成型链霉菌表达载体pHZ1294。将pHZ1276,pHZ1291导入阿维链霉菌(Streptomycesavermitilis)NRRL8165,所得重组子经Southern杂交验证后,蛋白粗提物经Western杂交和CO结合实验表明vgb基因在该菌中表达出了有活性的VHb蛋白。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因 阿维链霉菌 整合表达
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Vitreoscilla hemoglobin gene(vgb)improves lutein production in Chlorella vulgaris 被引量:5
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作者 马瑞娟 林祥志 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2014年第2期390-396,共7页
Vitreoscilla hemoglobin is an oxygen-binding protein that promotes oxygen delivery and reduces oxygen consumption under low oxygen conditions to increase the effi ciency of cell respiration and metabolism.In this stud... Vitreoscilla hemoglobin is an oxygen-binding protein that promotes oxygen delivery and reduces oxygen consumption under low oxygen conditions to increase the effi ciency of cell respiration and metabolism.In this study,we introduced a Vitreoscilla hemoglobin gene(vgb)into Chlorella vulgaris by Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation(ATMT).PCR analysis confi rmed that the vgb gene was successfully integrated into the Chlorella vulgaris genome.Analysis of biomass obtained in shake fl asks revealed transformant biomass concentrations as high as 3.28 g/L,which was 38.81% higher than that of the wild-type strain.Lutein content of transformants also increased slightly.Further experiments recovered a maximum lutein yield of 2.91 mg/L from the transformants,which was 36.77% higher than that of the wild-type strain.The above results suggest that integrated expression of the vgb gene may improve cell growth and lutein yield in Chlorella vulgaris,with applications to lutein production from Chlorella during fermentation. 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因 叶黄素含量 小球藻 生产 农杆菌介导转化 vgb基因 PCR分析 耗氧量
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透明颤菌vgb基因的整合对生物法发酵香兰素的影响 被引量:1
17
作者 侯强波 刘昌东 嘉晓勤 《工业微生物》 CAS 2018年第5期8-12,共5页
在以阿魏酸为底物生物法转化香兰素过程中,通过Red重组技术用外源的透明颤菌血红蛋白基因(vgb)取代大肠杆菌基因组icdA基因,使菌株可以适应高密度、低溶氧发酵,为香兰素的发酵生产提供新的尝试。CO差光谱分析显示整合的vgb基因表达产生... 在以阿魏酸为底物生物法转化香兰素过程中,通过Red重组技术用外源的透明颤菌血红蛋白基因(vgb)取代大肠杆菌基因组icdA基因,使菌株可以适应高密度、低溶氧发酵,为香兰素的发酵生产提供新的尝试。CO差光谱分析显示整合的vgb基因表达产生了VHb,且该蛋白具有活性。发酵结果显示表达了vgb基因的新菌株与原重组菌株相比在低氧环境下仍能维持较高的生物量,且香兰素产量由原来的1 668 mg/l上升到2 240 mg/l,提高了约34. 2%。 展开更多
关键词 阿魏酸 香兰素 Red重组技术 vgb基因 CO差光谱
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透明颤菌血红蛋白基因(vgb)表达载体的构建及其诱导表达
18
作者 吴迪 杨明明 +3 位作者 张亚妮 张炜炜 周乍琴 樊俊华 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2005年第6期6-8,共3页
利用PCR技术将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)克隆到融合表达载体pET28a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达。重组蛋白分别在30℃和37℃诱导表达,30℃诱导获得可溶性表达。结果表明:在30℃,1.5mmol/L和2.5mmol/LIPTG诱导下,诱导4~8h透明颤菌血红蛋... 利用PCR技术将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)克隆到融合表达载体pET28a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达。重组蛋白分别在30℃和37℃诱导表达,30℃诱导获得可溶性表达。结果表明:在30℃,1.5mmol/L和2.5mmol/LIPTG诱导下,诱导4~8h透明颤菌血红蛋白可获得高表达透明颤菌血红蛋白的表达量分别占菌体总蛋白的18.7%和27.7%。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因 诱导表达 表达载体 构建 PCR技术 可溶性表达 融合表达 大肠杆菌 重组蛋白 总蛋白 表达量 高表达 克隆
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Waterlogging tolerance and wood properties of transgenic Populus alba×glandulosa expressing Vitreoscilla hemoglobin gene(Vgb)
19
作者 Yiliang Li Weixi Zhang +3 位作者 Wenxu Zhu Bingyu Zhang Qinjun Huang Xiaohua Su 《Journal of Forestry Research》 SCIE CAS CSCD 2021年第2期831-839,共9页
Because overexpression of Vitreoscilla hemoglobin gene(Vgb)gene in plants can enhance tolerance to waterlogging,here Vgb was inserted into Populus alba×glandulosa to investigate its expression and effects on grow... Because overexpression of Vitreoscilla hemoglobin gene(Vgb)gene in plants can enhance tolerance to waterlogging,here Vgb was inserted into Populus alba×glandulosa to investigate its expression and effects on growth and physiological responses to waterlogging stress in the transgenic poplars.Southern blotting and RT-PCR analysis of Vgb-transgenic P.alba×glandulosa showed that the Vgb gene was integrated into the genome of the V13-81 and V13-85 transgenic lines and expressed.In greenhouse waterlogging stress tests,mortality of the transgenic poplar was significant lower than that of nontransgenic plants with increasing treatment time from 2 to 22 days.The transgenic plants had higher chlorophyll content and less chloroplast damage than in the control plants.Additionally,starch accumulation increased,and growth was enhanced in the transgenic plants,suggesting that the Vgb-expressing lines had improved energy reserves.Field trials of the transgenic poplar suggested that Vgb expression promotes growth and influences wood quality.Taken together,our results suggest that the expression of Vgb can increase the accumulation of chlorophyll and starch in the transgenic poplar,improve its ability to endure flooding,and improve growth and wood quality of the transgenic plants. 展开更多
关键词 Populus alba×glandulosa vgb gene Waterlogging stress GROWTH MICROSCOPY
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透明颤菌血红蛋白基因vgb的表达对杨树氮素利用能力的影响
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作者 刘淳洋 褚延广 +4 位作者 丁昌俊 张伟溪 崔树俊 沈应柏 苏晓华 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期164-169,共6页
以转透明颤菌血红蛋白基因(vgb)京2杨为材料,采用qRT-PCR分析方法确认其外源基因在转基因无性系中可以正常表达。盆栽试验结果显示,在正常生长条件下转基因无性系的株高和地径显著提高,同时叶片全氮质量分数上升。进而利用非损伤微测技... 以转透明颤菌血红蛋白基因(vgb)京2杨为材料,采用qRT-PCR分析方法确认其外源基因在转基因无性系中可以正常表达。盆栽试验结果显示,在正常生长条件下转基因无性系的株高和地径显著提高,同时叶片全氮质量分数上升。进而利用非损伤微测技术(Non-invasive Micro-test Technique,NMT)对植株根部NO3-吸收情况的检测发现,在含有0.5mmol/L NO3-测试液中转基因无性系NO3-吸收速率大于非转基因植株。此外,研究还发现,转基因无性系的硝酸还原酶(nitrate reductase,NR)活性显著提高。可见:vgb的表达能提高杨树的氮素利用能力。 展开更多
关键词 京2杨 透明颤菌血红蛋白基因 非损伤微测技术 氮素利用
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