Anti-CD19Fab-(CP)_(3)新型二聚化抗体的构建及靶向性观察

目的构建并表达Anti-CD19Fab-(CP)_(3)二聚化抗体,鉴定其蛋白分子量及相对含量并观察其靶向性。方法通过基因克隆技术构建原核表达载体PAYZ-Anti-CD19Fab-(CP)_(3)及阳性对照质粒PAYZ-Anti-CD19Fab-(CPP)_(3),将质粒转化至大肠杆菌16C9中进行表达。表达产物经过透析及Protein G亲和层析柱纯化,采用SDS-PAGE电泳法及液相串联质谱法(LC-MS)鉴定Anti-CD19Fab-(CP)_(3)二聚化抗体分子量及相对含量;采用流式细胞术检测二聚化抗体与CD19^(+)B系淋巴瘤Raji细胞的结合能力以及二聚化抗体对CD19鼠源亲本全抗的竞争能力。结果成功构建并表达Anti-CD19Fab-(CP)_(3),所得产物纯化后经SDS-PAGE及LC-MS法鉴定其主要成分为二聚化抗体,含量为76.2%;Anti-CD19Fab-(CP)_(3)二聚化比例高于对照Anti-CD19Fab-(CPP)3,差异有统计学意义(P<0.05)。同浓度下,与Anti-CD19Fab-(CPP)_(3)及Anti-CD19Fab相比,Anti-CD19Fab-(CP)_(3)对Raji细胞的结合能力更强,亲和力更好,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论通过在Fab的CH1尾端引入(CP)_(3)的改构方式可有效形成高比例二聚化抗体,显著提高抗体对靶细胞的靶向性,未来可应用于多价抗体及相关药物研发。

曲线的魅力——SONY VAIO VGN-A11C试用报告

SONY VAIO，一个充满活力、个性张扬的品牌，每隔一年便会推出全新的系列，且每次都让人有焕然一新的感觉。日前，SONY再次对VAIO产品线进行了重新定位和调整，推出了包括A、X、S和TR四个系列共十款机型，其中的A系列便是VAIO的新旗舰级产品。经过与SONY的积极联系，我们在第一时间试用和测试了SONY VAIO VGN—A11C国内行货版。

新冠恢复期血浆拟捐献者健康评估及抗体水平分析

目的分析新冠肺炎康复者健康状况和抗体水平,为恢复期血浆采集和治疗选择合适的捐献者。方法收集2020年2月7日~3月8日长沙市新冠肺炎康复者出院时相关体检数据,对有意愿参加恢复期血浆捐献的康复者进行健康状况评估,评估合格者进行抗体检测。采用ELISA方法检测新型冠状病毒IgM、IgG抗体及总抗体,固相红细胞粘附法筛查血小板抗体,凝集法检测红细胞直接抗体及不规则抗体。结果15名拟捐献者平均年龄32岁,平均住院天数16.5 d,样本采集时距出院平均17.9 d。15名拟捐献者新冠核酸检测均呈阴性,有1名HBsAg阳性不符合捐献条件。15名拟捐献者直抗、不规则抗体筛查均阴性,血小板抗体筛查均呈非特异性阳性。20%(3/15)为IgM阴性,53.33%(8/15)IgG抗体滴度大于160,60%(9/15)总抗体滴度大于320,46.67%(7/15)同时满足IgG抗体滴度大于160及总抗体滴度大于320。结论46.67%~60%的拟捐献者可以进行恢复期血浆的捐献。采集前进行新冠肺炎康复者健康评估和抗体水平的检测,对于选择合适的捐献者,保障恢复期血浆治疗效果,具有重要意义。

新型冠状病毒肺炎康复者恢复期血浆抗体效价观察

目的回顾性分析新冠肺炎康复者恢复期血浆IgG抗体效价,尽量减少因抗体水平太低,导致采集到的恢复期血浆不合格而浪费。方法使用化学发光技术重新测定23位重复捐献血浆者的49例血浆标本中IgG抗体效价。结果观察期内11位捐献血浆者的抗体效价不变,10位捐献血浆者抗体效价下降,2位捐献血浆者抗体效价上升。10例血浆抗体效价下降案例发生在14-44 d的检测间隔期中。结论康复者在出院后1个月内所捐献的血浆IgG抗体水平普遍较高,这为有效筛选供体,收集高效价水平的恢复期血浆提供了指导依据,同时也为观察抗体特征提供了有力的经验支持。

藤壶cp19k基因mRNA二级结构对其在大肠杆菌中表达的影响

目的探究藤壶cp19k基因5′端mRNA二级结构对其在大肠杆菌中表达的影响。方法通过对3个藤壶物种的cp19k基因(balcp19k、mrcp19k、bicp19k)序列进行分析,并利用大肠杆菌密码子偏好性对其进行优化,将优化后的3个基因序列利用BioSun软件分析其5′端和3′端的mRNA二级结构和自由能。利用大肠杆菌原核表达系统对3个基因进行表达,并通过SDS-PAGE观察蛋白表达情况。结果3个基因的3′端mRNA二级结构和自由能差异较小;5′端mRNA二级结构相比,balcp19k结构相对简单,自由能较高,mrcp19k和bicp19k二级结构较稳定,自由能较低。SDS-PAGE及Western印迹结果显示,Balcp19k蛋白有表达,而Mrcp19k蛋白和Bicp19k蛋白无表达。结论cp19k基因5′端mRNA二级结构稳定且自由能低不利于蛋白表达。此结果为藤壶cp19k的进一步研究奠定了基础,也为其他外源基因在原核系统中表达提供了借鉴。

SONY VGN-A15 CP 聪明的索尼在用心

SONY全新的笔记本电脑VGN—A15CP．其银色．黑色搭配到笔画纤细的铜质VAIO品牌标识，和浑厚的机身格调．无不透露出一种高品位工艺技术的质感。运行组件包括LCD框架，键盘和DVDRW驱动器都采用漂亮的黑色处理。连同独特的镁金属侧面板．共同构成了整机的坚固气质。非常紧凑的机身面板更是增添了电脑的完美组合与外观效果。

脉络丛在神经发育和精神障碍疾病中作用的研究进展

脉络丛是位于脑室内的一种富含毛细血管的精细结构,内部为中央间质,外被单层立方上皮。脉络丛可分泌脑脊液,形成血脑脊液屏障,不仅促进中枢神经系统代谢废物的排泄,也为脑实质提供了重要的营养来源。脉络丛还在外周向中枢运输免疫细胞、炎症反应、神经发生和发育、昼夜节律和肠脑轴中发挥调节作用。大量研究发现脉络丛参与了多种神经发育和精神障碍疾病的发病。该文总结了脉络丛的结构、发育与生理功能,讨论了脉络丛在精神分裂症、孤独症、脑叶酸缺乏症、寨卡病毒引起的小头畸形、新型冠状病毒感染的神经并发症等神经发育和精神障碍疾病中的作用,提出了脉络丛在神经发育和精神障碍疾病中的诊疗价值,为防治这些疾病提供了新的思路和研究方向。

COVID-19患者恢复期血浆在COVID-19治疗中的应用

2020年新型冠状病毒肺炎(COVID-19)大流行给全球的公共卫生提出巨大挑战,目前暂无特异性抗病毒药物,COVID-19康复者提取的恢复期血浆(convalescent plasma,CP)被认为是治疗重症急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染最为及时有效的特异性生物疗法之一。研究证明,含有高滴度SARS-CoV-2中和抗体的CP安全性良好,可有效阻断病毒复制,改善患者临床症状。本文简要综述了CP在COVID-19治疗中的应用,探讨了其作用机制、相关临床研究以及可能影响临床效果的因素,以期有助于CP在治疗COVID-19中的合理应用。

基于自由测站的基坑水平位移监测方法探讨

本文从城市基坑水平位移监测的实际情况出发,引入了高速铁路基于自由测站的CPⅢ控制网的观测方法来进行基坑水平位移监测。通过理论分析和工程实例验证,基于自由测站的基坑水平位移监测法测站摆放灵活、网形多变,对于形状复杂、施工干扰较大的基坑变形监测能提高作业效率;采用高等级的全站仪进行观测可以满足一级基坑的监测精度要求,可达到为基坑施工快速、准确反馈变形信息的目的。

670份新型冠状病毒肺炎康复者恢复期血浆检测结果分析

目的对670份新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)康复者恢复期血浆(convalescent plasma,CP)检测结果进行分析评价。方法分别从血浆常规检测项目[乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒(HCV)抗体、人类免疫缺陷病毒(HIV-1/HIV-2)抗体、梅毒螺旋体(TP)抗体、丙氨酸氨基转移酶(ALT)]、血型、新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)核酸检测、IgG抗体检测、亚甲蓝残留以及无菌检查等项目展开分析评价。结果670份COVID-19康复者恢复期血浆共检出121份不合格血浆,IgG抗体滴度不合格占比最高,检出率7.91%。血型分布占比为A(32.52%)>B(29.94%)>O(28.886%)>AB(8.66%)。SARSCoV-2核酸检测均为阴性。485份血浆来自武汉,其中>30~35年龄段占比最高(21.95%),男性264人,女性221人;高滴度血浆中IgG抗体≥1∶640占比最高,为77.43%。普通型患者在压床期>10~20 d中IgG抗体≥1∶640的比例最高,在压床期3~10 d中,IgG抗体<1∶160比例最高。IgG抗体(<1∶80)阴性血浆35份,其中9份检出其他病原体。结论IgG抗体不达标是康复者血浆不合格的主要因素。COVID-19康复者恢复期血浆O型血占比低于正常人群分布比例。武汉市献浆人群年龄层占比最高集中在>30~35岁,男性比例高于女性。大多数康复期患者体内针对SARS-CoV-2产生了良好的免疫应答,可有效清除体内病毒。普通型患者在压床期>10~20 d产生较高的抗体滴度,不容易转为重型。推测IgG抗体阴性患者可能存在合并其他病原体感染。

康复期血浆应用于急性病毒性传染病现状及其治疗新型冠状病毒肺炎前景

随着康复期血浆(convalescent plasma,CP)被成功地用于治疗多种急性病毒性传染病,其独到的治疗技术优势越来越受到肯定和认同。新近在中国武汉发现并鉴定一种命名为2019-nCoV(SARS-CoV-2)的新型冠状病毒,目前暂无特异性治疗其感染的有效手段。本文就CP应用于埃博拉、大流行流感、严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)、中东呼吸综合征(Middle East respiratory syndrome,MERS)的现状作一综述,并对其治疗新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)的前景作一展望。